实验五索氏提取法测定花生仁中粗脂肪的含量.docx
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实验五索氏提取法测定花生仁中粗脂肪的含量
植物资源与分类学实验安排
A班：
ENG08148、ESE08001～ESE08053
B班：
ESE08054～ESE08081
第7周：
10月18日（周一13：
00～16：
00）：
A班实验一
10月20日（周三19：
00～22：
00）：
B班实验一
第9周：
11月1日（周一13：
00～16：
00）：
B班实验二
11月3日（周三19：
00～22：
00）：
A班实验二
第11周：
11月15日（周一13：
00～16：
00）：
A班实验三
11月17日（周三19：
00～22：
00）：
B班实验三
第13周：
11月29日（周一13：
00～16：
00）：
B班实验四
12月1日（周三19：
00～22：
00）：
A班实验四
第15周：
12月13日（周一13：
00～16：
00）：
B班实验五
12月15日（周三19：
00～22：
00）：
A班实验五
实验一花生仁中粗脂肪的提取研究
一、实验目的
1掌握油脂植物常用的提取法－溶剂浸取法的原理和操作流程；
2了解超声波对油脂提取的影响。
二、原理
溶剂浸取法是油脂植物中最常用的提取方法之一。
它的具体工艺如下：
样品用丙酮或其他溶剂抽提后，蒸去溶剂所得的物质称为粗脂肪。
因为除脂肪处还含有色素及挥发油、蜡、树脂等物，这种抽提法所得的脂肪为粗脂肪。
超声波具有空化作用，在溶剂浸出的过程中，如果加上超声波的辅助作用，将能够促进油脂的浸出，本实验考察超声波对油脂浸出的影响。
三、仪器和试剂
电炉抽虑装置烘干箱超声仪器200mL小烧杯
花生仁丙酮
四、实验步骤
1花生仁去皮，研碎（越细越好）；
2分别称取10g花生于200mL烧杯中；
3在电炉上加热4-5分钟，用玻璃棒不断搅拌，防止烧焦；
4稍微冷却后加入30mL丙酮（注意安全，防止液体溅出伤到人）；
5用超声波超洗30分钟。
6抽滤，得到含有丙酮的花生油。
7在100度的烘箱中烘烤15分钟，除去丙酮得到花生油。
8称重，计算粗脂肪含量。
W1
粗脂肪%=×100
W
W1测得的粗脂肪的质量g
W花生仁的质量g
五、思考题
1油脂植物常用的提取方法有哪些？
2简述超声波对油脂浸出的影响和作用机理。
3结合实验室实际如何提高粗脂肪的产率？
实验二酸碱处理方式提取红薯淀粉
一、实验目的
1掌握淀粉植物常用的提取方法；
2了解酸碱处理方式提取淀粉的原理和操作流程。
二、原理
多糖是自然界分布最广的糖类，由多个单糖分子通过糖苷键缩合而成的。
淀粉主要作为植物营养的存储形式。
本实验以甘薯为原料，利用多糖和水生成胶体溶液的原理，采用酸碱处理，过滤和沉降等方法提取淀粉，具体流程如下：
红薯→除杂→清洗→切块→浸泡→研磨→清洗→碱洗→清洗→抽滤→干燥。
三、仪器和试剂
研钵抽虑装置250mL烧杯碘溶液
红薯pH＝5的柠檬酸溶液、饱和石灰水、pH计。
四、实验步骤
1将红薯除杂清洗、切碎（越碎越好），分别称取碎红薯20g于250mL烧杯中。
2加入pH＝5的柠檬酸溶液50mL浸泡2小时。
3将浸泡后的溶液转移到研钵中研磨成浆。
用蒸馏水清洗研钵，将浆液转移到250mL烧杯中。
4静置10分钟后倾倒掉上层清夜，加入20mL饱和石灰水，用玻棒搅拌3分钟，静置20分钟。
5倾倒掉上层清夜，用蒸馏水清洗三次。
再加入柠檬酸溶液，用玻棒搅拌3分钟，静置20分钟。
6倾倒掉上层清夜，用蒸馏水清洗三次。
进行抽滤，得到淀粉粗产品。
7将淀粉粗产品转移到培养皿中，在105度的烘箱中烘烤4h，得到淀粉产品。
8取1g制得的淀粉加入蒸馏水配成溶液，加入少许碘单质，观察是否变色。
五、思考题
1淀粉植物常用的提取方法有哪些？
2结合实验室实际如何提高淀粉的产率？
实验三水蒸气蒸馏法提取桔皮油研究
一、实验目的
1掌握香料植物常用的提取法－水蒸气蒸馏法的原理；
2了解水蒸气蒸馏法的原理和操作流程。
二、原理
利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，油水混合物又重新分出油层和水层。
主要有水中蒸馏法,直接蒸馏法,水汽蒸馏法，本实验采用水中蒸馏法提取桔皮中的桔皮油。
水中蒸馏一般是将原料先放入蒸锅，然后加入清水或上一锅的馏出水，水高度刚满过料层进行蒸馏，具体的工艺如下：
三、仪器和试剂
COD回流装置抽虑装置过滤装置磨口三角烧瓶
桔皮无水硫酸钠
四、实验步骤
1将桔皮清洗、剪碎（越碎越好），称取碎桔皮10g于磨口烧瓶中。
2加入20mL的蒸馏水，在COD回流装置中加热回流30分钟。
3冷却后，抽滤除掉桔皮，得到油水混合物。
4往油水混合物中加入5g无水硫酸钠，充分搅拌除水。
5过滤，除去不溶物，过滤液会结晶析出硫酸钠结晶水合物，
再次过滤后即可得到桔皮油。
五、思考题
1香料植物常用的提取方法有哪些？
2除了用无水硫酸钠进行除水外，还有哪些物质能用于除水？
3结合实验室实际如何提高桔皮油的产率？
实验四玫瑰茄色素的提取和测量研究
一、实验目的
1掌握色素植物常用的提取方法；
2了解乙醇萃取方法提取色素的原理和操作流程。
二、原理
玫瑰茄不但有以上药用价值和保健作用,而且是一种色、香、味俱佳的食品。
目前,在我国玫瑰茄仅仅作为干花供人们当茶饮用,进一步深加工还很有限,在许多的研究中将其制成纯天然的保健食品,具有风味独特、清醇可口的特点。
同时玫瑰茄也是新兴的食品和食品工业原料,它的花萼可制成多种食品。
花萼的玫瑰茄色素,是食品中的天然着色剂。
本实验利用酒精萃取方法提取玫瑰茄色素，而玫瑰茄色素溶液在542nm处有最大的吸收峰，可以利用其吸光度的大小初步判定色素浓度的大小。
本实验研究不同的提取剂浓度、浸提时间对色素提取的影响。
为更好地开发利用玫瑰茄色素提供参考。
三、仪器和试剂
研钵、50mL比色管、电热恒温水浴锅、紫外可见分光光度计、
玫瑰茄、50、60、70、80、90％酒精溶液。
四、实验步骤
1将玫瑰茄研碎，过50目，依次称取2.0克玫瑰茄粉末于5个50mL比色管，再依次加入25mL50％、60％、70％、80％和90％酒精溶液。
。
2将上述比色管浸入50℃水浴锅中，间隔5mins振荡1次,浸提20mins。
浸提液冷却到室温后转移离心管，离心分离10mins，用分光光度计测量吸光度。
表1不同提取剂浓度对玫瑰茄酒精溶液吸光度的影响
提取剂浓度
50％
60％
70％
80％
90％
吸光度A
3依次称取2.0个玫瑰茄粉末于5个50mL比色管，各加入20mL70％酒精溶液，浸入50℃水浴锅中，分别在5mins、10mins、15mins、20mins、30mins、40mins，取出，离心测量吸光度。
表2不同提取时间玫瑰茄酒精溶液吸光度
提取时间
5mins
10mins
15mins
20mins
30mins
40mins
吸光度A
五、思考题
1香料植物常用的提取方法有哪些？
2影响玫瑰茄提取因素除了提取剂浓度、提取时间外，还有哪些因素？
怎么进行实验设计。
3如何从提取得到的玫瑰茄色素酒精溶液得到玫瑰茄色素?
实验五小叶榕叶子总黄酮的提取与测量研究
一、实验目的
1掌握小叶榕总黄酮的提取方法；
2掌握标准曲线的制作和总黄酮的测量。
二、原理
小叶榕为桑科植物榕树的叶,异名落地金线。
全世界榕树有800多种,主要分布在热带亚热带地区。
我国主要分布在、、广西、、和等地,为当地的主要植物品种之一。
有研究表明,小叶榕叶中主要含黄酮、三萜类、齐墩果酸、脂肪族化合物和甾体化合物等。
其中黄酮类和酯类等有效成分对治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病和消除自由基、抗炎、抑菌、抗癌等方面有显著效果,无毒副作用,据此开发出多种药品和保健食品。
近年来,超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道,表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。
很多研究表明,利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等,可加速植物材料中的有效成分进入溶剂,从而增加有效成分的提取率,缩短提取时间,并且还可避免高温对提取成分的影响。
本实验用超声波提取小叶榕总黄酮。
而总黄酮和铝离子试剂，在适宜pH条件下，形成铝盐形成络合物，该络合物于510nm波长处有最大吸收，可选用此波长测量总黄酮的含量。
三、仪器和试剂
超声装置、小烧杯、100mL容量瓶、小叶榕叶子、芦丁、70%乙醇溶液、
5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠。
四、实验步骤
4.1对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品适量，加无水乙醇制成每毫升中含芦丁0.2308mg的溶液，即得。
4.2标准曲线的制备
精密吸取芦丁对照液（0.2308mg/ml）0.50，1.00，1.50，2.00，2.50，3.00，3.50ml于10ml试管中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加10%硝酸铝溶液0.30ml，摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠溶液4.00ml，
用70%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12min，以试剂作空白，于510nm处测吸光度，测定其吸光度。
表1紫外光分光光度计测定芦丁对照液吸光度
体积（ml）
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
C/（mg/ml）
吸光度A
4.3总黄酮成分提取
取新鲜小叶榕，洗净后在50℃烘干至恒重，研碎，过50目筛。
分别取两份小叶榕粉末约0.2g，精密测定，置100ml容量瓶中，加70%乙醇90ml，超声处理45min,放冷，用70%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，得供试品溶液。
4.4提取物含量的测定
精密吸取样品液2ml，置10ml刻度试管中，按标准曲线的制备方法测定吸光度，计算小叶榕总黄酮含量。
表2紫外光分光光度计测定小叶榕总黄酮吸光度
体积（ml）
1
2
质量
吸光度A
总黄酮含量
五、思考题
影响小叶榕总黄酮的因素有哪些？
如何提高总黄酮的提取率？
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