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实验五索氏提取法测定花生仁中粗脂肪的含量.docx

1、实验五索氏提取法测定花生仁中粗脂肪的含量植物资源与分类学实验安排A班:ENG08148、ESE08001ESE08053B班:ESE08054ESE08081第7周:10月18日(周一13:0016:00):A班 实验一 10月20日(周三 19:0022:00):B班 实验一第9周:11月1日(周一13:0016:00):B班 实验二 11月3日(周三 19:0022:00):A班 实验二第11周:11月15日(周一13:0016:00):A班 实验三 11月17日(周三 19:0022:00):B班 实验三第13周:11月29日(周一13:0016:00):B班 实验四 12月1日(周三

2、19:0022:00):A班 实验四第15周:12月13日(周一13:0016:00):B班 实验五 12月15日(周三 19:0022:00):A班 实验五实验一 花生仁中粗脂肪的提取研究一、实验目的1 掌握油脂植物常用的提取法溶剂浸取法的原理和操作流程; 2 了解超声波对油脂提取的影响。二、原理溶剂浸取法是油脂植物中最常用的提取方法之一。它的具体工艺如下:样品用丙酮或其他溶剂抽提后,蒸去溶剂所得的物质称为粗脂肪。因为除脂肪处还含有色素及挥发油、蜡、树脂等物,这种抽提法所得的脂肪为粗脂肪。超声波具有空化作用,在溶剂浸出的过程中,如果加上超声波的辅助作用,将能够促进油脂的浸出,本实验考察超声波

3、对油脂浸出的影响。三、仪器和试剂 电炉 抽虑装置 烘干箱 超声仪器 200mL小烧杯花生仁 丙酮 四、实验步骤1 花生仁去皮,研碎(越细越好);2 分别称取10g花生于200mL烧杯中;3 在电炉上加热4-5分钟,用玻璃棒不断搅拌,防止烧焦;4 稍微冷却后加入30mL丙酮(注意安全,防止液体溅出伤到人);5 用超声波超洗30分钟。6 抽滤,得到含有丙酮的花生油。7 在100度的烘箱中烘烤15分钟,除去丙酮得到花生油。8 称重,计算粗脂肪含量。 W1粗脂肪% = 100 WW1 测得的粗脂肪的质量 gW 花生仁的质量 g五、思考题1 油脂植物常用的提取方法有哪些? 2 简述超声波对油脂浸出的影响

4、和作用机理。 3 结合实验室实际如何提高粗脂肪的产率?实验二 酸碱处理方式提取红薯淀粉一、实验目的1 掌握淀粉植物常用的提取方法; 2 了解酸碱处理方式提取淀粉的原理和操作流程。二、原理多糖是自然界分布最广的糖类,由多个单糖分子通过糖苷键缩合而成的。淀粉主要作为植物营养的存储形式。本实验以甘薯为原料,利用多糖和水生成胶体溶液的原理,采用酸碱处理,过滤和沉降等方法提取淀粉,具体流程如下:红薯除杂清洗切块浸泡研磨清洗碱洗清洗抽滤干燥。三、仪器和试剂 研钵 抽虑装置 250mL烧杯 碘溶液红薯 pH5的柠檬酸溶液、饱和石灰水、pH计。 四、实验步骤1 将红薯除杂清洗、切碎(越碎越好),分别称取碎红薯

5、20g于250mL烧杯中。2 加入pH5的柠檬酸溶液50mL浸泡2小时。3 将浸泡后的溶液转移到研钵中研磨成浆。用蒸馏水清洗研钵,将浆液转移到250mL烧杯中。4 静置10分钟后倾倒掉上层清夜,加入20mL饱和石灰水,用玻棒搅拌3分钟,静置20分钟。5 倾倒掉上层清夜,用蒸馏水清洗三次。再加入柠檬酸溶液,用玻棒搅拌3分钟,静置20分钟。6倾倒掉上层清夜,用蒸馏水清洗三次。进行抽滤,得到淀粉粗产品。7 将淀粉粗产品转移到培养皿中,在105度的烘箱中烘烤4h,得到淀粉产品。 8 取1g制得的淀粉加入蒸馏水配成溶液,加入少许碘单质,观察是否变色。五、思考题1 淀粉植物常用的提取方法有哪些?2 结合实

6、验室实际如何提高淀粉的产率?实验三 水蒸气蒸馏法提取桔皮油研究一、实验目的1 掌握香料植物常用的提取法水蒸气蒸馏法的原理; 2 了解水蒸气蒸馏法的原理和操作流程。二、原理利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来,形成油水混合物,冷却后,油水混合物又重新分出油层和水层。主要有水中蒸馏法,直接蒸馏法,水汽蒸馏法,本实验采用水中蒸馏法提取桔皮中的桔皮油。 水中蒸馏一般是将原料先放入蒸锅,然后加入清水或上一锅的馏出水,水高度刚满过料层进行蒸馏,具体的工艺如下:三、仪器和试剂 COD回流装置 抽虑装置 过滤装置 磨口三角烧瓶桔皮 无水硫酸钠 四、实验步骤1 将桔皮清洗、剪碎(越碎越好),称取碎桔皮10

7、g于磨口烧瓶中。2 加入20mL的蒸馏水,在COD回流装置中加热回流30分钟。3 冷却后,抽滤除掉桔皮,得到油水混合物。4 往油水混合物中加入5g无水硫酸钠,充分搅拌除水。5 过滤,除去不溶物,过滤液会结晶析出硫酸钠结晶水合物, 再次过滤后即可得到桔皮油。五、思考题1 香料植物常用的提取方法有哪些? 2 除了用无水硫酸钠进行除水外,还有哪些物质能用于除水?3 结合实验室实际如何提高桔皮油的产率?实验四 玫瑰茄色素的提取和测量研究一、实验目的1 掌握色素植物常用的提取方法; 2 了解乙醇萃取方法提取色素的原理和操作流程。二、原理玫瑰茄不但有以上药用价值和保健作用,而且是一种色、香、味俱佳的食品。

8、 目前,在我国玫瑰茄仅仅作为干花供人们当茶饮用,进一步深加工还很有限,在许多的研究中将其制成纯天然的保健食品,具有风味独特、清醇可口的特点。 同时玫瑰茄也是新兴的食品和食品工业原料,它的花萼可制成多种食品。 花萼的玫瑰茄色素,是食品中的天然着色剂。 本实验利用酒精萃取方法提取玫瑰茄色素,而玫瑰茄色素溶液在542nm处有最大的吸收峰,可以利用其吸光度的大小初步判定色素浓度的大小。本实验研究不同的提取剂浓度、浸提时间对色素提取的影响。为更好地开发利用玫瑰茄色素提供参考。三、仪器和试剂 研钵、50mL比色管、电热恒温水浴锅、紫外可见分光光度计、 玫瑰茄、50、60、70、80、90酒精溶液。 四、实

9、验步骤1 将玫瑰茄研碎,过50目,依次称取2.0克玫瑰茄粉末于5个50mL比色管,再依次加入25mL50、60、70、80和90酒精溶液。2将上述比色管浸入50 水浴锅中,间隔5mins振荡1次,浸提20mins。浸提液冷却到室温后转移离心管,离心分离10mins,用分光光度计测量吸光度。表1 不同提取剂浓度对玫瑰茄酒精溶液吸光度的影响提取剂浓度50 60708090吸光度A3 依次称取2.0个玫瑰茄粉末于5个50mL比色管,各加入20mL70酒精溶液,浸入50 水浴锅中,分别在5mins、10mins、15mins、20mins、30mins、40mins,取出,离心测量吸光度。表2 不同提

10、取时间玫瑰茄酒精溶液吸光度提取时间5mins10mins15mins20mins30mins40mins吸光度A五、思考题1 香料植物常用的提取方法有哪些?2 影响玫瑰茄提取因素除了提取剂浓度、提取时间外,还有哪些因素?怎么进行实验设计。3 如何从提取得到的玫瑰茄色素酒精溶液得到玫瑰茄色素?实验五 小叶榕叶子总黄酮的提取与测量研究一、实验目的1 掌握小叶榕总黄酮的提取方法; 2 掌握标准曲线的制作和总黄酮的测量。二、原理 小叶榕为桑科植物榕树的叶,异名落地金线。全世界榕树有800 多种,主要分布在热带亚热带地区。我国主要分布在、广西、和等地,为当地的主要植物品种之一。有研究表明,小叶榕叶中主要

11、含黄酮、三萜类、齐墩果酸、脂肪族化合物和甾体化合物等。其中黄酮类和酯类等有效成分对治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病和消除自由基、抗炎、抑菌、抗癌等方面有显著效果,无毒副作用,据此开发出多种药品和保健食品。近年来,超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道 ,表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明,利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等,可加速植物材料中的有效成分进入溶剂,从而增加有效成分的提取率,缩短提取时间,并且还可避免高温对提取成分的影响。本实验用超声波提取小叶榕总黄酮。而总黄酮和铝离子试

12、剂,在适宜pH条件下,形成铝盐形成络合物,该络合物于510nm波长处有最大吸收,可选用此波长测量总黄酮的含量。三、仪器和试剂 超声装置、小烧杯、100mL容量瓶、小叶榕叶子、芦丁、70%乙醇溶液、5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠。 四、实验步骤4.1 对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品适量,加无水乙醇制成每毫升中含芦丁0.2308mg的溶液,即得。4.2 标准曲线的制备精密吸取芦丁对照液(0.2308mg/ml) 0.50,1.00,1.50,2.00,2.50,3.00,3.50 ml 于10ml试管中,分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30ml,摇匀,静置6min;再加10%硝酸铝溶液0

13、.30ml,摇匀,静置6min;再加4%氢氧化钠溶液4.00ml,用70%乙醇稀释至刻度,摇匀,静置12min,以试剂作空白,于510nm处测吸光度,测定其吸光度。表1 紫外光分光光度计测定芦丁对照液吸光度体积(ml)0.511.522.533.5C/(mg/ml)吸光度A4.3总黄酮成分提取取新鲜小叶榕,洗净后在50烘干至恒重,研碎,过50目筛。分别取两份小叶榕粉末约0.2g,精密测定,置100ml容量瓶中,加70%乙醇90ml,超声处理45min,放冷,用70%乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,得供试品溶液。4.4 提取物含量的测定精密吸取样品液2ml,置10ml刻度试管中,按标准曲线的制备方法测定吸光度,计算小叶榕总黄酮含量。表2 紫外光分光光度计测定小叶榕总黄酮吸光度体积(ml) 1 2质量吸光度A总黄酮含量五、思考题 影响小叶榕总黄酮的因素有哪些?如何提高总黄酮的提取率?

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