考研中国农业大学806生物化学试题.docx
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考研中国农业大学806生物化学试题
2013年考研中国农业大学806生物化学试题(回忆版)
填空(35分,每空1分)
各反应抑制剂的选择(类似于SDS这种)
电子呼吸链
3、核酸变性温度、不饱和脂肪酸等的英文符号填写
4、原核生物DNA复制过程中所用的酶的填写
5、尿素循环过程填写
6、乙醛酸循环过程填写
选择(45分,每题1分)
关于20种氨基酸的题
关于20种氨基酸的题
蛋白质变性机理
贝塔折叠
5、二硫键断裂试剂
6、抗体
7、蛋白测序
8、糖代谢相关
9、DNA碱基
10、EB
11、米氏方程
核酶是什么?
13、别构剂14、非离子去污剂应用的蛋白
G-蛋白
16、解偶联
17、脱氨基
18、大肠杆菌DNA复制中酶功能
切除修复
20、核糖核苷酸变成脱氧核糖核苷酸的酶
21、非激酶催化反应
22、下列是糖酵解中间产物的是23、丙酮酸脱氢复合酶
TCA循环中底物水平磷酸化反应中所用的酶
25、TCA循环相关26、磷酸戊糖途径
糖异生和糖酵解中共同中间产物
真核生物NADH穿梭
29、6-磷酸葡萄糖
30、PPP途径
31、砷化合物
乙酰CoA连接的途径
将葡萄糖C1标记,经糖酵解后,标记的C在丙酮酸什么位置
34、卵磷脂
35、贝塔氧化的辅因子
启动子
37、原核生物和真核生物RNA
38、原核RNA聚合物σ因子
39、泛素过程E3
40、葡萄糖-丙氨酸循环41、嘌呤核苷酸循环
42、氨基酸降解
43、dCTP合成过程
44、嘌呤从头合成,嘧啶从头合成共同氨基酸
45、芳香族氨基酸合成前体
大题(70分,7题,每题10分)
根据图分析不同PH值,不同浓度NaCL对蛋白质溶解度的影响
根据功能对脂类进行化分
分离纯化酶时要测酶活的原因„„
根据下列英文缩写,写出它们的名称,并说明它们的应用(在代谢过程中)。
(可是下面没给任何东西!
!
!
直接下一题了)
5转动20种氨基酸的tRNA至少需要32种,解释原因(有两个图,一个是64个密码子的那个,还有一个不知道怎么说,反正应该是考的简并性、变偶性那里)
血液中胰高血糖素增加,下列酶活降低的是,并解释。
腺苷酸环化酶、蛋白激酶A、磷酸果糖基酶Ⅰ、磷酸果糖基酶Ⅱ、果糖1,6-二磷酸酶
真核细胞(14:
0)的脂肪酸在经贝塔氧化和TCA循环后生物的NADH和FADH2个数,写出计算步骤。
2013年中国农业大学806生物化学考研真题
一.填空题(35分)(记得很不全,应该是1分一个的吧)
1. 下列()是解偶联试剂 ()是电子抑制剂 ()是蛋白变性剂 ()是乙酰什么酶的什么
选项有:
寡霉素 抗霉素A SDS 抗生素 PITC DNPB
2. 脂肪酸的缩写()
3. 关于DNA复制的 ()催化冈崎片段生成,()催化引物的合成,()催化引物切除,()冈崎片段的连接
4. 乙醛酸循环发生在() 在()和()的催化下生成乙醛酸,()和柠檬酸
二.选择题(45分)
有几题农学联考上的原题-,太多记不得了,不难,但是也有几个没见过的东西
三.问答题(70分)
1. 在不同PH条件下不同NaCl浓度下蛋白质的溶解度如下图,解释图并说出原理
2. 脂类按功能分类,并举例
3. 用生物化学方法提取酶要进行酶活力跟踪,说说你对这个研究方法的看法,
4. 根据下列英文缩写,写出中文名称(并写出参与的循环过程)(题目中未给出缩写)
5. 根据下图(20种氨基酸对应的密码子的图和第三个密子对应的反码子的图),为什么20种氨基酸需要至少32种tRNA
6. 在胰高血糖素的作用下,下列哪些酶的活性降低 蛋白激酶A 磷酸果糖激酶1 磷酸果糖激酶2 果糖1,6-二磷酸酶
7. 脂肪酸(14:
0)经过 氧化和三羧酸循环生成多少FADH2 和多少NADH
中国农业大学2011年806生物化学真题及其答案
填空(30分)
1 丙酮酸脱氢酶包括(3)种酶和(6)种辅酶。
一轮尿素循环共消耗 4 个高能磷酸键,柠檬酸和ATP抑制(抑制)酶活性。
重度饥饿时(酮体)给脑组织供能(50-70)%。
2 18C(8)次β氧化和产生(118)个ATP。
脂肪组织不能利用甘油是由于缺乏(甘油激)酶甘油不能转变为3-磷酸甘油,由(磷酸甘油脱氢酶作用磷酸二羟丙酮)转变为3-磷酸甘油。
脂肪合成中的甘油由糖酵解中的磷酸二羟丙酮转化而来,柠檬酸和ATP抑制磷酸果糖激酶 而抑制糖酵解
3 x-射线衍射鉴定蛋白质(构象),质谱用来(蛋白质的测序)
4 胶原蛋白结构
角蛋白每股右手螺旋,三股左手螺旋
胶原蛋白 每股左手螺旋,右手三螺旋
5 真核生物DNA聚合酶δ的作用 合成DNA链及校正功能。
6 识别原核生物DNA复制起始的蛋白是(DnaA蛋白)
7 RNA经碱水解后的产物是(2’核苷酸和3’ 核苷酸)
8 造成A-DNA和B-DNA差别的原因()环境条件影响空间构象的不同,如高湿度易形成B型。
9 吖啶染料造成(移码)突变
10 O6-鸟嘌呤甲基转移酶将O6-甲基转移到酶分子的(Cys)残基上。
选择(1*30分)
1-3 肌红蛋白和血红蛋白血红素正误判断
4-5 蛋白质(或酶)变性剂、抑制剂
6.免疫测定法
7 tRNA和5SrRNA是(RNA聚合酶Ⅲ)合成的
8 RNA聚合酶 (δ因子)起始位置点的识别
9 琼脂糖凝胶
用琼脂糖凝胶作支持物的电泳法。
借助琼脂糖凝胶的分子筛作用,核酸片段因其分子量或分子形状不同,电泳移动速度有差异而分离。
是基因操作中常用的重要方法。
10 TCA循环
(2)次脱羧,(4)次脱氢,
(1)次底物水平磷酸化
11 EMP中脱氢过程 3-磷酸甘油醛→1,3二磷酸甘油酸
12.mRNA转录后加工
原核不需要加工;真核
(1)5’-末端加帽;
(2)3’-末端加尾;(3)剪切内含子,连接外显子;(4)3’- 5’-端非编码区碱基的修饰
ρ因子功能 终止子
14 原核生物RNA聚合酶抑制剂 α-鹅膏蕈碱 聚合酶Ⅰ不敏感 Ⅱ敏感 Ⅲ中等敏感14.mRNA 翻译的模板
15.抑制原核生物RNA聚合酶的是 利福平
16 酶分离、纯化的在(低温)条件下进行
识别原核生物大肠杆菌转录起始点的是 σ因子 启动子 -35-10序列
嘌呤霉素抑制蛋白质合成原因嘌呤霉素是(氨酰tRNA)类似物
19.tRNA转运氨基酸的部位 CCA-OH
20.位点特异性重组
位点特异性重组是遗传重组的一类。
这类重组依赖于小范围同源序列的联会,重组也只发生在同源的短序列的范围之内,需要位点特异性的蛋白质分子参与催化,重组的蛋白不是rec 系统而是int 等,如噬菌体l 的定点插入。
21.糖原分解关键酶 糖原磷酸化酶
22.糖酵解唯一脱氢的步骤 3-磷酸甘油醛→1,3二磷酸甘油酸
23.2分子丙酮酸合成1分子葡萄糖消耗ATP数目 6ATP(其中丙酮酸到磷酸烯醇式丙酮酸2ATP+2GTP , 3二磷酸甘油酸→1,3二磷酸甘油酸需消耗2ATP)
脂肪酸合酶复合体包括包括六种酶和一种酰基载体蛋白(ACP)
HDL运输的是
CM(乳糜微粒)是运输外源性甘油三酯及胆固醇的主要形式 VLDL(极低密度脂蛋白)是运输内源性甘油三酯的主要形式 LDL(低密度脂蛋白)是转运肝合成的内源性胆固醇的主要形式 HDL(高密度脂蛋白)的主要功能是参与胆固醇的逆向转运
糖代谢三个交汇点6-磷酸葡萄糖、3-磷酸甘油醛、丙酮酸
苯丙氨酸、酪氨酸脱氨后产物 延胡索酸进入TCA
28.嘌呤核苷酸合成中5-磷酸核糖转变为 (PRPP) 6 mRNA的结构
真核:
①5´末端帽子结构:
②3´末端有多聚腺苷酸尾巴结构(polyA) ③单顺反子(一条mRNA链上有一个编码区) 30.酮体分解产物
丙酮、乙酰乙酸、β-羟基丁酸称为酮体
β-羟基丁酸→乙酰乙酸→乙酰乙酰CoA→乙酰CoA
三、简答题 (90分)
1 简述脱氧核糖核苷酸的生成过程(10分)
(一) 核糖核苷酸的还原:
脱氧核糖核苷酸主要是由二磷酸核苷还原所生成。
哺乳动物中已分离出核糖核苷酸还原酶系,该酶系包括二磷酸核苷还原酶,硫氧还蛋白(具有氧化型和还原型)和硫氧还蛋白还原酶。
谷蛋白还蛋白、谷氧还蛋白还原酶、谷胱甘肽还原酶还可取代硫氧还蛋白和硫氧还蛋白还原酶。
a. 在二磷酸核苷还原酶催化下,将二磷酸核苷还原为二磷酸脱氧核苷,而硫氧还蛋白提供两个氢原子后由还原型转变为氧化型。
氧化型硫氧还蛋白在硫氧还蛋白还原酶的催化下转变为还原型硫氧还蛋白。
此反应的氢是由NADPH提供。
b. 二磷酸核苷还原酶特异性不高可催化四种二磷酸核苷(NDP)转变为四种脱氧二磷酸核苷(dNDP)。
XDP+ YTP→ XTP+ YDP(X,Y代表几种核糖核甘和脱氧核糖核甘)
c. dNDP可以生成dNTP和dNMP。
(二)利用已有碱基和戊糖合成
碱基与脱氧核糖-1-磷酸经核苷磷酸化酶催化合成脱氧核糖核苷;碱基间互换合成新的脱氧核苷 ,四种脱氧核糖核苷可经特异脱氧核糖核苷激酶和ATP作用被磷酸化而形成脱氧核糖核苷酸。
(三)胸腺嘧啶核苷酸的生成:
尿嘧啶核糖核苷酸还原成尿嘧啶脱氧核苷酸(dUMP),甲基化生成dTMP,dTMP可以生成dTDP和dTTP。
2 简述动物肝脏在进食、两餐间和轻度饥饿时的代谢特点(10分)
㈠进食后:
血液中葡萄糖浓度升高,造成肝脏形成葡糖6-磷酸的速度加快。
然后葡糖6-磷酸的命运主要受胰高血糖素和胰岛素控制,二者作用相反。
血糖水平高时,糖原迅速合成。
激素对于糖原合成和贮存的影响,又由于葡萄糖本身的直接作用而得到加强。
同时,磷酸化酶a被转变为不能降解糖原的磷酸化酶b。
从而使它能激活糖原合成酶。
因此,葡萄糖通过变构作用使糖原系统从降解型转变为合成型。
㈡进餐后经过数小时两餐间,血糖水平开始降低,胰岛素的分泌量减少,而胰高血糖素的分泌量增多。
这时上述的作用逆转。
结果,肝脏动员糖原和释放葡萄糖,脂肪组织释放脂肪酸以及肌肉和肝脏所使用的燃料从葡萄糖改变为脂肪酸。
㈢糖类的贮备仅在一天之内即已耗竭。
在代谢方面首先要考虑的问题,是为脑和其它组织(如红血细胞)提供足够量的葡萄糖。
但是,葡萄糖的前体并非十分丰富。
大部分的能量都贮存在三酰基甘油的脂肪酰基部分。
占主导地位的代谢过程是脂肪组织中三酰基甘油的动员和肝的葡糖异生作用。
肝把脂肪组织所释放的脂肪酸氧化,从而获得它本身所需要的能量。
丙酮酸、乳酸和丙氨酸被输出到肝,以供转变成葡萄糖。
三酰基甘油分解所产生的甘油是肝脏合成葡萄糖的另一原料。
3 简述氨基酸脱氨后余下的碳架的命运(10分) ⒈ 合成新氨基酸 ⒉ 转变成糖及脂肪酸
氨基酸碳架的去向是形成主要代谢中间产物,最后这些中间代谢产物转变为葡萄糖。
分属各组的20种氨基酸的碳架集中成7种分子。
丙酮酸、乙酰CoA、乙酰乙酰CoA、α-酮戊二酸、琥珀酰CoA、延胡索酸和草酰乙酸。
如下图。
生酮氨基酸:
苯丙氨酸,酪氨酸,亮氨酸,色氨酸,赖氨酸,在分解过程中转变为乙酰乙酸-CoA,并在动物肝脏中可转变为乙酰乙酸和β-羟丁酸,这些氨基酸称为生酮氨基酸。
生酮和生糖氨基酸:
苯丙氨酸和酪氨酸,既可生成酮体又可生成糖。
其余均为生糖氨基酸
⒊ 直接氧化成水和二氧化碳。
4 解释酶的Km和Kcat,讨论二者在酶学研究中的应用(10分)
Kcat称为催化常数,又叫做转换数(TN值),它的单位为s-1
kcat值越大,表示酶的催化速率越高。
一分子的酶在一定时间催化底物全部转化产物分子的数量或者一分子酶催化一分子底物完全反应所需要的时间。
Km是米氏常数,指的是反应速度达到最大速度一半时底物浓度。
V=Vmax[S]/(Km+[S])
对于一个多步酶催化过程,通常令Vmax=Kcat[E]t ,Kcat将反应所有限速步骤的影响,由于Km能反应参与反应的有效底物浓度,欲达到某一定反应速度,高Km的酶比低Km的酶需要更高的底物浓度,因此通常用kcat/km值的大小,比较不同酶或同一种酶催化不同底物的催化效率。
5 谈论酶活性中心的特征,并指出2种常用于研究酶活性中心的方法(8分)
酶活性中心就是酶分子上结合底物和进行催化反应的一定区域
通常有两个功能部位:
结合部位(决定专一性)催化部位(决定催化能力) 酶活性中心特征:
1.在酶分子中只占很小一部分; 2.酶活性中心是一个三维实体; 3.活性中心位于酶分子表面裂缝中; 4.酶活性中心具有柔性。
研究酶活性中心的方法:
1.X-射线晶体结构分析法 2.定点突变 3.酶分子侧链基团的化学修饰法
6 分析线粒体FoF1-ATP合酶的分子结构特点,结合最新进展讨论其旋转催化机制(12分)
(一)F0F1-ATP合酶的分子结构 突出两个功能单位:
F1具有ATP的合成位点,负责ATP合成。
为水溶性外周膜蛋白复合体,由5种亚基组成。
a3b3gde,其中a3b3亚基相间排列围成一圈,g亚基位于中央,类似于一个中轴。
F1(橘子瓣型为F1)通过F0与膜相连。
F0为水不溶性跨膜蛋白复合体,由ab2c9~12亚基组成,作为质子转运的通道。
F0F1复合体在离体状态下与F1一样,只水解ATP,不能合成ATP。
(二)ATP合成机理
跨膜质子电化学梯度为ATP合成提供能量。
最近关于F0F1-ATP合酶有新进展。
1998年Noji首次获得直接证据。
F1-ATP酶为旋转马达,旋转步幅为120度,每旋转120度大约做功80 pN nm。
7 请陈述乳糖操纵子的正负调控方式(10分)
乳糖操纵子由调节基因、启动子、操纵子和三个结构基因组成。
三个结构基因:
分别编码和乳糖分解和吸收等功能有关的酶蛋白或蛋白质的基因。
操纵基因:
转录的开关,可打开或关闭结构基因的转录。
启动子:
专管转录起始,上面有RNA聚合酶的结合位点。
调节基因:
为阻遏蛋白编码。
当有葡萄糖时,细菌的乳糖操纵子的启动子和操纵子处于被遏制状态,结构基因不被转录,细菌不能利用乳糖,遏制物是由调节基因编码的;当葡糖耗尽后,乳糖与遏制蛋白形成复合物,离开启动子和操纵子区域,解除了对RNA聚合酶的阻碍,三个结构基因转录,最终能够产生利用乳糖的三种酶:
半乳糖苷酶,半乳糖通透酶和半乳糖苷转乙酰基酶。
8 请描述原核生物大肠杆菌DNA的复制过程(11分) ㈠ 复制的起始
⒈ 复制起始过程
A. 辨认起点(DnaA 蛋白)
B. 解开双链(DnaB 蛋白--解螺旋酶) C. 生成引物(DnaG 蛋白—引物酶)
(1)约20-40个DnaA蛋白各带1个ATP结合到4个9bp重复序列上,DNA缠绕在上面,形成起始复合物。
(2)HU类组蛋白,与DNA结合,促使双链DNA弯曲,影响附近三个连续的13bp的共有序列,使此区域DNA双链解开称为开链复合物,形成复制眼。
(3)DnaB六聚体(解链酶)在DnaC的帮助结合到解链区,利用水解ATP产生的能量进行解螺旋,同时SSB结合到单链DNA上,拓扑异构酶消除解链产生的扭曲张力,形成前引发复合体,再与引物酶组装成引发体,才能起引发作用。
⑷ 引物合成酶结合其上合成RNA引物,DNA聚合酶开始聚合反应复制开始 ㈡ 复制的延伸
1.前导链的合成
复制起点解开后形成2个复制叉,进行双向复制,前导链延伸的方向与复制叉前进的方向一致,能连续合成,前导链和后随链的合成都需要RNA引物,前导链先由引发酶在起点处合成一段RNA引物,随后DNA pol III即在引物上加脱氧核苷酸。
前导链的合成与复制叉的移动保持同步。
2.滞后链的合成
滞后链延伸的方向与复制叉前进的方向相反,通过半不连续复制,需要不断合成冈崎片段的RNA引物,然后由DNA聚合酶III加入脱氧核苷酸。
由于DNA的两条互补链方向相反,为使后随链能与前导链被同一个DNA聚合酶 III不对称二聚体所合成,后随链必须绕成一个环状。
⑴水解引物:
冈崎片段合成后,由聚合酶Ⅰ( 5′→ 3′外切酶活性)水解去除RNA引物,并由其将所出现的缺口(gap)按模板要求把缺口填满。
⑵ 连接切口:
连接酶连接冈崎片段形成完整双链DNA分子; ㈢ 复制的终止
细菌环状DNA两个复制叉不断前移,最后在终止区相遇并停止复制.终止区含有多个终止点 ter能与特定蛋白Tus结合形成复合物,阻止对侧复制叉超越.最后,两个复制叉停止复制,形成连锁环,由拓扑异构酶Ⅳ参与将连锁环解开再连接。
9 请叙述参与原核生物大肠杆菌蛋白质生物合成的蛋白质因子的功能(9分)
(1)起始因子:
① IF1:
促使携带氨酰起动tRNAi
fMet
与小亚基结合。
② IF2 :
同上,并有GTP酶活性 ③ IF3:
促进70S核糖体亚基的解离,阻碍30S和50S亚基的结合;促进小亚基与mRNA特异性结合。
(2)延伸因子:
① EF-Tu(热不稳定性延伸因子)和EF-Ts(热稳定性延伸因子)协助氨酰-tRNA进入A位, 结合GTP有GTP酶活性。
② EFG:
转位因子, 协助mRNA 前移,由A位进至P位;释放tRNA (3)终止(释放)因子:
识别终止密码子,进入核糖体受位 ① RF-1识别UAA 和UAG;
② RF-2识别UAA和UGA;
③ RF-3(GTP-结合蛋白)不识别终止密码,但可刺激另外两个RF活性。
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C.葡萄糖通过PPP途径生成的NADPH能够参与胆固醇的合成。
D.6-核酸葡萄糖核酸脱氧酶是PPP途径调节的最重要的酶。
28.对于TCA循环,从乙酰CoA开始,反应顺序是_________ (从下列反应中选择)。
①丙酮酸→草酰乙酸;②苹果酸→草酰乙酸;③α-酮戊二酸→琥珀酰CoA;④柠檬酸→异柠檬酸;⑤琥珀酸→延胡索酸 A.①、②、③、④、⑤ B.④、③、⑤、② C.⑤、④、①、② D.③、④、①、⑤、②
29.下列哪种脂蛋白可以转运内源性胆固醇回肝脏 _______. A.乳糜微粒 B. 极低密度脂蛋白 C.低密度脂蛋白 D. 高密度脂蛋白 30.下列关于乙醛酸循环的论述,错误的是________,
A.乙醛酸循环的主要生理功能是从乙酰-CoA合成三羧酸循环的中间产物 B.对以乙酸为唯一碳源的微生物是必要的 C.存在于油料种子萌发时的乙醛酸体重 D.哺乳动物体内也存在乙醛酸循环
31.脂肪酸分解产生的乙酰辅酶A的去路有______. A.合成脂肪酸 B. 氧化供能 C. 合成酮体 D. 以上都是
31①β-氧化中脂肪酸的活化;②甘油活化;③葡萄糖合成糖原时的活化;④氨基酸活化。
上述四个活化过程各需要消耗高能磷酸键的个数为_______. A.2,1,1,2 B. 1,2,1,2 C.2,1,2,1 D. 1,2,2,1
33.糖代谢和氨基酸代谢有紧密联系,20种常见氨基酸中有三种可以直接由糖代谢的中间常务通过转氨基左右而产生,这三种氨基酸是_______.
A. Glu、Asn、Gln B.Glu、Asp、Ala C.Asp、Asn、Ala D.Asp、Glu、Leu
34.在蛋白质的多泛素化降解过程中,两个泛素之间通过_____相连。
A.氢键 B.二硫键 C.肽键 D.异肽键 35.丝氨酸合成的前体碳骨架来自___________。
A.TCA循环 B. 糖酵解 C. 磷酸戊糖途径 D.脂肪酸代谢 36.如果某人的食物富含丙酮酸但缺乏天冬氨酸,该人将显示出_______. A.正常 B缺乏天冬氨酸的疾病 C.缺乏谷氨酸的疾病 D.白化病
37.蛇毒磷酸二脂酶水解核酸,正确的是____________.
A.从3′端开始水解 B. 水解产生3′核苷酸 C.只能水解RNA,不能水解DNA D. 核酸内切酶 38.下列核苷酸中,在体内代谢产生β-丙氨酸的是________. A.AMP B. GMP C. CMP D. A和B
39. 大肠杆菌DNA聚合酶I经特异性酶处理得到两个片段,大片段不具有活性的是________。
A.5′-3′聚合酶 B. 5′-3′外切酶 C.3′-5′外切酶 D.都不正确
40.已知一个蛋白质是友几个亚基通过非共价作用缔合的,测定它的一级结构时,需要拆分多肽链,可选用的试剂有____________。
A.过甲酸 B.巯基乙醇 C.尿素 D.酸 41.DNA拓扑异构酶的作用是___________。
A.解开DNA双螺旋,便于复制 B.催化DNA链的断裂、旋转和重新连接 C.协助引发酶合成RNA引物 D.辨认复制起始点
42.DNA按半保留方式复制。
如果一个完全放射标记的双链DNA分子,放在无放射标记物的溶液中,进行两轮复制,所产生的四个DNA分子中_____。
A.半数分子的两条链均有放射性 B.半数分子没有放射性 C.所有分子都有放射性
D.只有一个分子的两条链均有放射性 43.DNA与RNA生物合成相同之处是 A.新链生成的方向是5---3 B.都形成2 3磷酸二酯键
C.都需要两条模板链同时指导合成其互补链 D.都需要RNA引物 51.关于转录,下列说法正确的是
A.转录是以半保留的方式获得两条相同的DNA链的过程 B.RNA链增长的方向是3---5
C.新生RNA链与DNA模板通过碱基配对形成临时的一段短的双螺旋 D.因子指导真核生物的hnRNA到mRNA的转录后修饰 52.原核生物基因上游的pribnow盒一般处于 A--10 B--25 C--35 D--75
53.原核生物RNA聚合酶中催化磷酸二酯键生成的亚基是 A.α--因子 B.α亚基 C.β亚基 D.β亚基 54.下列关于α--因子的描述正确的是 A.识别启动子,促进