内脏敏感增高型功能性消化不良脾虚证动物模型的建立刘艳阳李重点.docx

内脏敏感增高型功能性消化不良脾虚证动物模型的建立刘艳阳李重点.docx

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内脏敏感增高型功能性消化不良脾虚证动物模型的建立刘艳阳李重点

使心输出量增加;另一方面,cAMP还能扩张外周血管,降低心脏前后负荷,降低射血阻抗,使心排出量增加,改善心功能。

有关研究发现,细胞内cAMP含量降低与心血管疾病的发生密切相关,补充外源性抗血小板聚集物质或环磷酸腺苷能够提高细胞内cAMP含量,从而减少血小板聚集,减轻心脏负荷。

外源性cAMP进入体内后能够间接地激活蛋白激酶增加磷酸化酶作用,可在缺氧条件下促使糖原分解以供能,使呼吸链氧化酶活性增强,使心肌缺氧得以改善[9－10]。

本实验通过冠状动脉结扎联合左旋硝基精氨酸灌服建立大鼠冠心病心气虚证病证结合模型,并采用盐酸地尔硫卓和益气活血方低、中、高剂量灌服进行干预治疗。

结果显示益气活血方能够降低模型大鼠血浆cAMP含量,作用比盐酸地尔硫卓明显,尤其中药高剂量组最为显著。

说明益气活血方能够一定程度上降低模型大鼠血浆cAMP值,其改善模型大鼠心功能的作

收稿日期:

2015－04－30

基金项目:

国家重点基础研究发展计划（973计划资助项目（2013CB531703

作者简介:

刘艳阳（1988－,男,湖北利川人,硕士研究生,研究方向:

中医病证结合规律研究。

通讯作者:

李峰（1966－,男,山西大同人,教授,博士研究生导师,博士,研究方向:

中医病证结合规律的研究。

用可能在于其在一定程度上降低CHD心气虚证大鼠血浆cAMP浓度,减轻或避免了蛋白激酶的过度激活,减轻磷酸化酶的作用,维持心肌兴奋收缩耦联的正常,降低心肌细胞耗氧量,改善心功能。

参考文献

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699－701．

DOIʒ10．13192/j．issn．1000-1719．2015．11．065

内脏敏感增高型功能性消化不良脾虚证动物模型的建立

刘艳阳,李峰,刘晶,马捷,吴凤芝,杨茜,刘燕

（北京中医药大学,北京100029

摘要:

目的:

探讨内脏敏感增高型功能性消化不良脾虚证动物模型的建立方法并进行模型的评价。

方法:

运用2%蔗糖溶液灌胃并复合小平台站立法制作内脏敏感增高型功能性消化不良脾虚证动物模型,通过观察大鼠的一般情况,运用ELISA试剂盒检测血清乳酸脱氢酶、血清D－木糖排泄率、血清胃动素的含量,对此模型进行评价。

结果:

与正常组相比,模型组大鼠的食少、纳呆、腹胀、毛发疏松不泽、神疲乏力等脾虚症状都较其他组重,且持久。

在行为学上,碘乙酰胺复合小平台组大鼠的糖水消耗均低于对照组。

在指标检测上,模型组大鼠血清D－木糖排泄率、胃动素含量均低于对照组,而乳酸值明显高于对照组（P＜0.05或P＜0.01。

结论:

通过对模型组大鼠的一般情况和生物学指标的辨证分析,认为内脏敏感增高型功能性消化不良脾虚证动物模型制作成功,此模型达到了“病证结合”的要求。

关键词:

内脏敏感增高型;功能性消化不良;脾虚证;动物模型;建立

中图分类号:

Ｒ－332文献标志码:

A文章编号:

1000-1719（201511-2218-03

目前功能性消化不良的诊断标准主要是依据罗马Ⅲ标准,其病起源于胃及十二指肠的区域,一般认为功能性消化不良（functionaldyspepsia,FD系指除外器质性疾病而见有持续性或反复发作性上腹部疼痛、食后饱胀、腹部胀气、嗳气、早饱、厌食、恶心等上腹部不适症状的一组临床证候群[1],且慢性的期限在3个月以上（也有将病程定为1个月以上,经胃镜、上胃肠钡餐造影、腹部B超检查无异常者称为功能性消化不良。

脾虚证是指脾气不足,失其健运所表现的证候。

其临床表现主要是纳少、脘腹胀满、食后尤甚,大便溏薄,神倦乏力,少气懒言,舌淡苔白,脉缓弱。

中医学认为,“脾主运化”是脾最重要的生理功能。

“脾主运化”（脾气的正常是“脾运”及“脾化”正常生理功能的保证。

脾气虚损（脾虚证是导致脾“不运”与“不化”的病理根本,功能性消化不良是与以脾虚证的“脾不运”相对应的。

可分为上腹不适综合征和上腹痛综合征两个亚型。

在中医学理论体系中,功能性消化不良疾病没有明确的病名,一般依据本病的临床表现可把其归

·

8122

·辽宁中医杂志2015年第42卷第11期

类于“痞满”“吐酸”“嘈杂”。

从文献资料来看,中医对功能性消化不良的研究更多集中在临床,以方药研究及治疗方法为多,实验研究较少,特别是与中医脾虚证相结合的实验研究。

功能性消化不良中医证型有脾虚证、脾肾气虚证、肝郁脾虚证、脾虚湿困证、寒热错杂证、脾阳虚证。

其中以脾虚证最多,功能性消化不良所涉及的脏腑则以脾为主,肾、肝次之。

根据“炎症致内脏敏感性增高”及“劳倦伤脾”的理论,本实验采取碘乙酰胺蔗糖溶液灌胃[2]复合小平台站立法[3]制作内脏敏感增高功能性消化不良脾虚证动物模型,为功能性消化不良脾虚证动物模型的基础研究及新药开发提供动物模型。

1材料

1.1动物健康雄性Wistar大鼠180只,清洁级,出生6d大鼠,由斯贝福（北京实验动物科技有限公司提供,许可证号:

SCXK（京2013－0005。

1.2饲料基础配方饲料成分为酪蛋白18%、淀粉58.8%、蔗糖10%、玉米油5%、纤维素3%、维生素1%、无机盐4%、DL蛋氨酸0.2%。

由北京科澳协力饲料有限公司提供。

1.3试剂乳酸脱氢酶试剂盒、D－木糖试剂盒、胃动素试剂盒,购于南京建成生物工程研究所,生产批号分别为20140611、20140601、20140512。

1.4器材自制小平台站立箱:

在一方形水槽中（112cmˑ62cmˑ41cm设置了15个小平台（平台直径8cm,高10cm,平台周边注满水,水深1.5cm,水温维持在（22ʃ2ħ。

高速冷冻离心机,电子天平,酶标仪。

2实验方案

2.1适应性饲养出生6d大鼠。

每笼10只,带1只母鼠,适应性饲养4d。

2.2造模出生10d大鼠,对照组90只,2%蔗糖溶液灌胃,0.2mL/只。

模型组90只,0.1%碘乙酰胺蔗糖溶液灌胃,0.2mL/只。

每至大鼠3周龄时断奶,分笼,34只大鼠/笼天一次,连续造模6d。

正常饲养。

2.3随机分组对照组随机分组分为:

正常组（n=45、小平台组（n=45;模型组随机分组:

碘乙酰胺组（n=45、碘乙酰胺复合小平台组（n=45;大鼠68周龄,模型复合,同时观察大鼠的一般指标,体重,进食量及饮水量;小平台组及碘乙酰胺复合小平台组大鼠每天7:

00－17:

00进行小平台站立,连续造模14d。

3观察指标及统计方法

3.1运用量表动态观察大鼠的一般情况进食量、饮水量、体重、活动状态、背毛颜色光泽度、粪便情况等,在造模期间进行糖水实验及抓握力时间测定,造模结束后,腹主动脉取血,高速离心取血清,运用ELISA试剂盒进行血清乳酸脱氢酶、血清胃动素、血清D－木糖排泄率的测定。

3.2统计学方法数据采用SPSS17.0软件进行统计学处理,正态分布的资料釆用单因素方差分析,定量数据以均数ʃ标准差（珋

xʃs表示,组间比较采用t检验,P＜0.05为差异有统计学意义。

4结果

4.1一般状态观察造模期间,正常组大鼠背毛光泽、活泼好动、体重增长较快,而模型组大鼠则出现神疲乏力、嗜睡懒动、毛发不泽、便软等一系列脾虚证的相关症状。

模型组大鼠的体重明显低于正常组,与正常组比较P＜0.05或P＜0.01,体重变化图见表1。

表1大鼠小平台站立期间体重增长情况（g,珋xʃs

组别n0周第1周第2周碘乙酰胺组45183.80ʃ5.41236.40ʃ4.33▲284.00ʃ5.45▲碘乙酰胺复合

小平台组

45176.23ʃ6.62198.96ʃ3.22▲▲221.45ʃ3.64▲▲小平台组45208.33ʃ3.21213.45ʃ4.50▲247.60ʃ4.43正常组45202.64ʃ3.23250.74ʃ4.34295.34ʃ6.44注:

与正常组比较▲P＜0.05,▲▲P＜0.01。

4.2行为学测定试验中模型组大鼠较正常组大鼠糖水消耗量低,碘乙酰胺复合小平台组差异显著,糖水实验结果图见表2。

试验中模型组大鼠的抓握力时间明显低于正常组,碘乙酰胺复合小平台组差异显著,结果见图1

。

注:

与正常组比较,★P＜0.05,★★P＜0.01

图1行为学测定结果

表2大鼠小平台站立期间抓握力时间