动物组织学与胚胎学陈兵绪论.docx
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动物组织学与胚胎学陈兵绪论
动物组织学与胚胎学（陈兵）绪论
动动物组织学与胚胎学陈陈兵扬州大学比较医学中心2007．9绪绪论一、组织学与胚胎学的研究内容组织学与胚胎学包括组织学和胚胎学两门学科，所研究的动物以家畜和家禽为主，兼顾宠物、经济动物和部分实验动物。
（一）、组织学（Histology）：
是研究正常机体微细结构及功能关系的科学。
与解剖学相比，两者均属于形态学范畴，但比解剖学研究得更仔细、深入。
解剖学研究手段主要通过肉眼，而组织学必须借助一定的工具显微镜（光镜、电镜）。
随着研究的深入已超出形态学范畴，并形成机能组织学。
（解剖学主要用刀、剪等解剖的方法来观察研究各器官的大体形态结构。
在此基础上，组织胚胎学则以显微镜为工具，研究器官的微细结构及其发生发育过程。
通过学习，将使我们对形态结构的认识更加精细，更加深刻。
因此，可以认为组织胚胎学是解剖学的延续和深化。
）研究内容包括细胞学、基本组织学和器官系统组织学三大部分。
细胞:
是机体形态结构的基本单位，是新陈代谢、生长发育和增殖分化的结构基础。
组织:
是由许多在结构和功能上密切相关的细胞，借细胞间质结合在一起所构成的细胞群体。
四大基本组织（上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织）器官:
是由几种不同的组织按一定的规律结合而成，每一器官各有一定的形态结构和特定的生理机能。
系统:
由许多功能相关的器官联合在一起构成,能完成连续的生理功能。
（二）、胚胎学（Embryology）：
是研究机体发生及发育规律的科学。
胚胎学是研究胚胎发育过程，包括胚胎的形态变化发生原理以及影响胚胎发育的因素，从而认识胚胎发生规律的一门科学。
简言之，胚胎学是研究个体发生过程和规律的科学。
即受精卵到形成个体的全过程，包括胚胎发育前期和胚胎发育期。
（三）、组织学与胚胎学之间的关系：
组织学与胚胎学是两门密切关联的学科，它们都以细胞学为基础，都以用显微镜观察细胞、组织和器官为主要研究方法。
组织学与胚胎学发展历程中，两者研究内容相互交叉，相互推进，在胚胎学研究中用到组织学的知识，对胚胎学的研究又促进了组织学的发展。
不少学者兼有组织学与胚胎学的研究成果，在我国将组织学与胚胎学列为一门课程。
二、组织学发展简史）
（一）、细胞的发现在1665年（17世纪），英国学者虎克（RobertHooke）用自制的显微镜（放大倍数40－140），观察软木（栎树皮）薄片，观察到许多小室，他称之为细胞（cellar拉丁文）。
（但实际上观察到的只是植物细胞的细胞壁）。
不久荷兰学者列文虎克（A.V.LeeuwenHoek）用设计较好的显微镜，观察了许多植物的活细胞与原生动物。
）
（二）、细胞学说的提出到19世纪30年代，德国植物学家施莱登与动物学家施旺共同提出了一切动植物都是由细胞组成的，细胞是一切动植物的基本单位的细胞学说，与焦耳用实验确立的能量守恒定律（热力学第一定律）、达尔文的进化论并恩格斯列为19世纪的三大发明。
（三）、组织学创立初期以后随着光学仪器、机械工业、染色化学的发展，出现的发大倍数较高的显微镜、能把切片切的很薄的切片机以及多种染料。
（四）、现代组织学发展20世纪40年代，电子显微镜问世，经过不断的改进，如今可将标本放大几十万倍到上百万倍。
近30年来，新的技术和方法不断涌现并应用于组织学，如组织培养术、细胞融合术、免疫组织化学和免疫细胞化学术、放射自显影术、荧光和激光术、原位杂交术、图像分析和立体计量术等。
这些技术的运用，使研究内容不断充实，研究领域不断扩大，因而出现了各学科间基本理论互相渗透，基本技术互相引用、促进，关系日益密切。
三、组织胚胎学研究方法常用计量单位：
1mm=1000um1um=1000nm问问题解决方法观察对象太小放大显微镜观察对象不透光制成薄片观察对象无色，无反差染色（HE染色）
（一）、一般光学显微镜术（lightmicroscope,LM）光镜技术是组织学研究中最为常用的技术，在光镜下看到的结构称为显微结构（光镜结构），光学显微镜的分辨率为0.2um，最大放大倍数1000－1500倍（有效放大倍数，如果继续通过光学手段放大也不会得到有意义的信息，因此称为空放大），实验用400倍。
分辨率为一定范围内完全区分清楚两点的最短距离。
在组织切片制作中，最为常用的技术为石蜡切片技术，基本包括以下几个主要步骤：
取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、脱蜡、染色、封片等。
1、、取材：
从人体或动物身上取出所需要的器官材料。
材料要求新鲜。
材料大小一般在33-35mm。
2、、固定：
将取出的材料立即投入固定液内，使组织中的蛋白质迅速凝固，目的是防止组织腐败和自溶，使它保持原有的结构。
常用的固定液有10%福尔马林。
固定时间需24小时左右。
3、石蜡包埋：
（1）．脱水：
从低浓度酒精逐渐递升到高浓度酒精，即由50%、70%、80%、95%酒精各置12~24小时，因100%酒精有脆化组织作用，故放置时间不宜太长，放2~3小时即可。
然后放入二甲苯加酒精内半小时。
（2）透明：
放入二甲苯，直至标本透明为止，时间约半小时。
（3）浸蜡：
将材料移置石蜡内，放入60℃温箱内，时间约30分钟，然后移入石蜡Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，使石蜡逐渐透入组织。
每级时间约1小时内。
（4）包埋：
将溶解的石蜡倒入金属框或纸盒内，然后将浸蜡组织埋于金属框中央，待冷却后即成坚硬的蜡块。
4、切片：
（1）将标本蜡块装在切片机上，切成5~7微米的薄片，然后把切片放在温水皿中展开。
（2）将展开的组织切片移在载玻片上，放在40℃温箱中24小时，烘干。
5、染色：
增加细胞和组织中各种结构间的色彩对比度，便于镜下观察。
（1）．脱蜡：
将切片放入二甲苯内5~10分钟。
（2）．脱二甲苯：
依次置100%、95%、80%、70%酒精内，各级5分钟，然后移入蒸馏水。
（3）．染苏木精：
用Harris氏苏木精液染细胞核10分钟，再用0.5%盐酸酒精分色，约30秒钟，流水冲洗1小时以上。
（4）．染伊红：
先把切片用50%、70%80%酒精各脱水5分钟，再用0.5%饱和酒精伊红溶液1分钟，染细胞质。
（5）．透明：
95%、100%酒精，每级置10分钟。
6、封片：
切片上滴以中性树胶，然后覆上盖玻片，标本即可长期保存。
染色方法：
没有通用的染料，最常用的苏木精（hematoxylin，H）和伊红（eosin，E），简称HE染色。
苏木精：
为碱性染液，使细胞核内的染色质和细胞质内的核糖体等物质染成蓝紫色，该物质称为具有嗜碱性（basophilia）。
伊红：
为酸性染液，可使细胞质内的普通蛋白和胶原纤维等物质染成粉红色，该物质称为具有嗜酸性（acidophilia）。
中性neutrophilia）：
若与两种染料的亲合力均不强的。
硝酸银染色（银染）亲银性（argentaffin）：
银染法中有些组织结构可直接使硝酸银还原而显示，称此为亲银性。
嗜银性（argyrophilia）：
有些结构无直接还原作用，需加入还原剂方能显色，称此为嗜银性。
异染性：
细胞和组织用某些碱性染料染色时，其染色结果与染料的原有颜色不同。
如甲苯胺蓝（蓝色染料）染肥大细胞，肥大细胞颗粒呈紫红色。
其他制片技术：
其他制片技术：
冰冻切片技术：
新鲜组织块立即投到液氮内，然后在冷冻切片机上制片。
优点：
制片迅速，细胞内酶的活性保存较好，可以用于组织化学染色的研究。
涂片：
血细胞、分离细胞或脱落细胞可直接涂在玻片上。
铺片：
疏松结缔组织可撕成薄片铺在玻片上。
磨片：
牙和骨等坚硬组织可磨成薄片。
（二）电子显微镜（electronmicroscope,EM）技术电镜以电子束代替了光镜、分辨率可达0.2nm,可放大几万倍至几十万倍,镜下结构称超微结构。
根据分辨率、放大倍数及功能等不同可分为两种，透射电子技术与扫描电镜技术1、透射电镜（transmissionelectronmicroscope，TEM）技术用于观察组织、细胞内部超微结构，分辨率0.2nm。
标本制备：
固定（戊二醛等）－－包埋（环氧树脂）－－切片（50-80nm）－－染色（醋酸铀和柠檬酸铅等重金属盐）电子密度高：
被重金属深染呈黑色的部位，称电子密度高。
电子密度低：
被重金属浅染的部分称电子密度低。
2、扫描电镜（scanningelectronmicroscope，SEM）技术特点：
用于观察组织表面的立体结构，分辨率5-7nm（低），但立体感强。
（三）其它技术组织化学术，放射自显影术，图像分析术，细胞培养和组织培养技术四、组织学与胚胎学的地位及学习方法
（一）组织学与胚胎学在畜牧兽医中的地位组织学与胚胎学是动物科学与动物医学专业专业中一门专业基础课，是建立在动物学、解剖学等学科基础之上，是学习病理、产科、繁殖学等后续课程的基础。
（二）组织学与胚胎学的学习方法1.理论和实习密切联系2.结构与功能的关系每种细胞、组织和器官均有一定的形态结构特点，并与其功能有着密切关系。
如粗面内质网与高尔基体发达细胞，可与蛋白合成与分泌联系。
3.断面和立体的关系（不能以点代面、以面代全）在显微镜下观察的组织切片都是结构断面的形态。
由于所切的部位不同，在一个细胞某断面可见细胞核，在某断面见不到细胞核。
又如身体内许多管状的器官，由于所切方位不同，往往呈完全不同的形态。
因此在观察切片上的形态结构时，要考虑断面和立体的关系。
4.从静态结构了解动态结构的变化5.分析比较。
纵横联系，融会贯通五、教学内容1、细胞学基础2、组织3、器官与系统4、胚胎学
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