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微生物基础知识

微生物基础知识

1、微生物概述

（1）定义：

生物界中存在的一群形体微小的生物。

它的大小通常以微米来表示。

（2）范围：

细菌、霉菌、酵母菌、放线菌、支原体、病毒等。

（3）特点：

①形体微小、结构简单、生长繁殖快、对物质有强烈的转化作用；

②种类繁多；

③易引起变异；

④数量大、分布广、环境适应性强；

（4）与人类的生活密切相关。

2、微生物的分类

微生物可分为八大类：

真菌：

蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌

细菌：

肺炎球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌

放线菌：

支原体：

肺炎支原体

衣原体：

沙眼

立克次体：

斑疹伤寒

螺旋体：

梅毒

病毒：

甲、乙肝病毒，麻疹病毒，狂犬病毒，流感病毒。

（1）按其结构、化学组成可分为：

①原核类：

仅有原始核质，无核仁和核膜，细胞器很不完善。

如细菌、放线菌、支原体、立克次氏体；

②真核类：

细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完整。

如真菌（酵母菌和霉菌），原生动物，藻类：

③非细胞类：

体积微小，能通过除尘过滤器。

如病毒和朊病毒。

（2）按其致病性可分为：

①病原性微生物：

有致病性；

②非病原性微生物：

无致病性；

3、微生物的五大共性

（1）体积小，面积大

（2）吸收多，转化快

（3）生长旺，繁殖快

（4）适应强，易变异

（5）分布广，种类多

4、影响微生物生长的因素

（1）温度：

在各种影响微生物生长繁殖的因素中，温度起着最重要的作用，每种微生物都一个最适宜的生长温度，在这种温度下，增代时间最短。

一般来讲，高温能杀死微生物，低温可抑制微生物生长；

（2）PH值：

酸碱环境对微生物的影响；

（3）氧气：

真空环境可抑制需氧菌的生长；

（4）光线；

（5）盐类；

（6）水分活性。

5、常见污染药物制剂的微生物

（1）葡萄球菌：

可引起局部感染

（2）大肠杆菌：

胆道和尿道感染

（3）绿脓杆菌：

化脓性感染、中耳炎、肺炎

（4）枯草杆菌：

结膜炎

（5）酵母菌：

使糖分解，药液产生有机酸

（6）霉菌：

是制剂霉坏，酸败变质

6、洁净车间内微生物在哪里？

（1）空气

（2）水

（3）人员

（4）器具

灰尘-----“微生物的飞行器”

微生物不是凭空存在的，99%的微生物都附在颗粒上。

控制空气中的微粒数，就是控制了微生物数量。

灰尘、微粒具有沉降和粘附的趋势，所以同一区域内，地面是微粒相对集中的地方，也是微生物相对较多的地方，墙壁也容易粘附灰尘。

洁净室中最大的微生物污染源-----人

①人在代谢过程中会释放和分泌污染物

②人体表面、衣服能沾染、携带污染物

③人在洁净室内的各种动作也会产生微粒和微生物。

人体内外微生物的分布：

①皮肤：

表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、八叠球菌、类白喉杆菌、金黄色葡萄球菌等；

②口腔：

唾液链球菌、溶血链球菌、乳酸杆菌、流感杆菌、类白喉杆菌等;

③上呼吸道：

包括喉、鼻道和鼻咽。

甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、变形杆菌等；

④下呼吸道：

包括气管、支气管和肺。

健康人的下呼吸道是无菌的；

⑤胃肠道：

大肠埃希菌、产气杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌、粪链球菌等；

⑥泌尿生殖道：

嗜乳酸杆菌、类白喉杆菌、葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌。

7、如何阻断人体污染源？

（1）«药品生产质量管理规范»中明确规定：

进入洁净区的人员不得化妆和佩戴饰物，不得裸手直接接触药品；

（2）«药品生产质量管理规范»中明确规定：

无菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物。

8、洁净区缓冲间的作用

①控制空气对流，减少外界脏空气中的微粒、灰尘进入车间；

②必须保持缓冲间门的关闭，不得同时开启。

9、空气自净和微粒的沉降与粘附

（1）空气自净的死角

①顶送顶回（洁净走廊），地面

②顶送侧回（清洗间、操作间），对面的墙角、顶棚。

（2）微粒的沉降与粘附

①不能用脚踏在垫板和料桶上

②不得跑跳、大声喧哗

③不靠着物体上

10、微生物污染及消毒灭菌

（1）药品微生物污染：

①药品微生物污染：

微生物的产生、附着而给药品带来不良影响。

药品微生物污染也称染菌。

②污染药品的细菌：

常见污染药品的细菌是一些生命力较强的细菌，如：

葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、枯草杆菌及一些霉菌，抵抗力弱的细菌一般不易造成污染。

③药品的微生物污染源：

空气、水、厂房与设备、药品生产用原辅料、包装材料、昆虫、生产操作人员等。

（2）消毒与灭菌：

①消毒：

杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死细菌的芽胞。

消毒所用的试剂称为消毒剂。

②灭菌：

杀灭物体上所有微生物的方法。

灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。

（3）消毒的作用：

①杀灭物体上病原微生物；

②并不一定杀死含芽胞的细菌和非病原微生物；

③一般消毒剂在常用浓度下只对细菌的繁殖体有效，对其芽胞则需提高消毒剂的浓度和延长作用时间；

④细菌和其它微生物会对消毒剂产生耐药性，因此消毒剂必须交替使用。

11、常用的消毒灭菌法：

（1）物理灭菌方法

A:

热力灭菌法

B:

辐射杀菌法

C:

滤过除菌法

D:

超声波杀菌法

E:

干燥与低温抑菌法

①热力灭菌法：

使蛋白质、酶及核酸永久性破坏，细胞膜溶解，导致细胞发生不可逆转的死亡。

a:

干热灭菌法：

采用灼烧或干热空气灭菌。

常用方式是把待灭菌的物品均匀的放入烘箱，升温至160℃，恒温1h。

此方法适合玻璃皿，金属用具的灭菌。

b：

湿热灭菌法：

利用热蒸汽杀死微生物。

相同条件下，湿热灭菌效果比干热灭菌效果好。

这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性，另一方面高温水蒸气对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性、死亡。

高压蒸汽灭菌：

是湿热灭菌法的一种。

高压蒸汽灭菌是最可靠、最实用、最广泛的灭菌方法。

②辐射灭菌法：

是采用辐射进行灭菌消毒。

包括可见光、红外线、紫外线、X射线等。

a:

紫外线：

波长200～300nm的紫外线具有杀菌作用，265～266nm波段杀菌能力最强。

紫外线穿透物质的能力差，一般用于空气及物体表面消毒。

b：

电离辐射：

高速电子、X射线、适用与不耐热物品的灭菌，常用于药品和医疗用品的灭菌。

C：

微波：

1nm～1um

③滤过除菌法：

a:

用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去，以达到除菌目的。

b：

滤菌器含有微细小孔≤0.22微米，只允许液体和气体通过，而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。

C：

适用范围：

血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。

（2）化学消毒法：

一般化学药剂无法杀死所有的微生物，而只能杀死其中的病原微生物，所以是消毒的作用，而不是灭菌的作用。

①消毒剂：

能迅速杀灭病原微生物的药物。

②防腐剂：

能抑制或阻止微生物生长繁殖的药物。

③消毒剂、防腐剂没有选择性，对一切活细胞都有毒性，不仅能杀死或抑制病原微生物，而且对人体组织也有损伤作用，所以常用于器械、体表、环境的消毒。

④常用的化学消毒剂：

来苏、碘酒、酒精等。

（3）化学灭菌法常用消毒剂种类和用途：

类别

作用机制

常用种类

用途

酚类

蛋白变性，

细胞膜损伤

石碳酸

地面、器具表面、皮肤消毒

醇类

蛋白变性

75%酒精

皮肤消毒

氧化剂

氧化、蛋白沉淀

二氧化氯

过氧乙酸、碘酒

地面、皮肤消毒

器材、皮肤消毒

重金属盐

氧化、蛋白酶变性

红汞

硫柳汞

皮肤、粘膜、小创伤消毒

表面活性剂

蛋白变性细胞膜损伤

0.1%新洁而灭

地面、器具表面、皮肤消毒

12、洁净区微生物的控制：

微生物在自然界中分布很广，药物制剂在生产、运输和储存过程中很容易受到微生物的污染，在合适的条件下，这些微生物可生长繁殖，从而导致药物变质、霉败，这不但影响药物的质量，降低和丧失药物的疗效，而且还可能对病人造成不良反应，药源性感染、过敏反应、毒性物质中毒或继发性感染，甚至危及病人的生命，因此，我们要十分重视微生物引起的药物变质问题。

对于口服液，不必要求达到无菌状态，允许有一定限量的微生物存在，但不得有规定的控制菌存在，应保证药物的卫生质量。

口服药物染菌限度可分为两个方面：

①染菌数量的限制

②染菌种类的限制

两者密切相关，因为染菌数量越多，则污染致病菌的可能性越大，根据药品的种类、给药途径和医疗目的不同，所规定的药品染菌数量和种类也有所差异，口服药物的微生物限度检查是指在单位重量或体积内，微生物的数量和种类必须在规定允许的数量和种类范围内。

为了提高药物生产的稳定性和质量，防止微生物污染药物，应实现严格的科学技术管理，采取各种必要的防护措施，使药物生产能够符合标准，一应加强药物生产的技术管理，二应加强卫生管理。

从事对药品生产的人员应进行药品卫生质量教育，提高对药品卫生质量的重要性认识，在生产过程中，应注意人员卫生和环境卫生，避免人为因素造成药品的污染。

（1）洁净区的主要污染源：

空气、制药用水、操作人员、设备、原辅料等，其中操作人员是主要的污染源。

«药品生产质量管理规范»中明确规定：

洁净区内的人员应严格控制，其工作人员应定期进行卫生和微生物学基础知识、洁净区作业等方面的培训和考核，对进入洁净区的临时外来人员进行指导和监督。

（2）防止微生物污染的措施：

①了解污染源，杜绝污染途径

②洁净区洁净技术的应用和卫生管理

③制药用水的质量控制

④进行微生物限度检查，控制药品质量

（3）洁净区的污染源：

尘埃及细菌污染

①来自人的尘粒污染占洁净室污染的80%

②生产工具和设备引起的污染占15%

③洁净区本身和过滤器的缺陷引起的污染占5%

13、洁净区洁净技术的应用：

（1）洁净室的设计：

①表面应光滑平整、易于清洁消毒、无死角、无裂缝、不易藏灰尘；

②不同洁净度级别的房间应有足够的压差；

③天花板应密封，穿墙的管道与墙体之间应密封;

④100级洁净区内应无地漏、其它区域地漏应液封；

⑤设置更衣室、缓冲间，并安装过滤器，门设计成连锁；

⑥空气流动一般为杂流，上送风下排风，100级为层流；

⑦更衣室的洁净级别应与高级别的房间相同。

（2）洁净区污染的控制：

①保持房间正压：

a:

洁净级别不同的相邻房间之间的静压差>5Pa

b：

洁净区对外界的静压差>10Pa

C：

空气总是由洁净级别高的房间向低的房间流动

②对洁净区空气进行净化：

a:

保持空调系统的设计符合洁净区洁净度要求

b：

保持空调系统的净化功能符合要求

C：

按规定对洁净区进行消毒、灭菌。

14、洁净区操作注意事项：

（1）洁净区人流管理：

存放个人物品→换鞋→穿上洁净拖鞋→脱去外衣→洗手→穿上洁净服→戴上口罩→整衣→手消毒→戴上洁净手套→进入洁净区

（2）洁净区工作要求：

个人卫生要求：

①不得化妆

②不得在洁净区内吃饭、喝水

③不得在洁净区抽烟

④不得有可见伤口

⑤不得留长指甲，戴首饰

⑥传染病患者不得进去洁净区

⑦平时生产工作中，如患有腹泻、感冒、咳嗽、不明原因发热或体表有伤口等轻微疾病，不得进入洁净区。

（3）正确的行为和操作：

①保持在洁净区内工作，不随意出入洁净区

②不要通过传递窗说话，使用电话

③始终保持洁净区的清洁和整齐

④良好的行为很关键，请记住：

穿着正确、移动正确、行动正确、工作正确，防止不正确的行为和操作

⑤防止不戴手套接触物料，引起交叉污染

⑥防止在洁净区内吃、喝、抽烟或读报等

⑦防止在洁净区内戴首饰、手表

⑧防止靠着工作台，产品和其它物料上

（4）洁净区物流管理：

①使用前先检查传递窗连锁装置是否正常

②检查传递窗内、外是否清洁，应无粉尘，否则，应立即用干净的抹布擦干净才能使用

③同一时间，传递窗只能用于一种物料的传递，在清洁后才能用于另一种物料的传递

④由非洁净区进入洁净区的物料及物品，通过传递窗，须开启紫外灯照射15分钟。

15、洁净区的清洁和消毒：

（1）消毒剂的选择：

①地面和工作台面的消毒---新洁尔灭

②不锈钢表面消毒---75%的乙醇

③手消毒---75%乙醇

消毒剂应交替使用，避免产生耐药性。

（2）正确配制、使用消毒剂：

①用纯化水配制消毒液

②按要求浓度配制消毒液

③不要将剩下的消毒液倒入新配制的消毒液中

④不要混合不同种类的消毒液

（3）洁净区的清洁：

①生产完成后应进行清场，对地面、门窗、用具、设备表面、水池、地漏进行清洁

②定期对洁净区墙面、地面、天花、排风及其它辅助装置进行全面擦拭和消毒

③定期对洁净区空气进行消毒

（4）洁净区微生物的监控：

①洁净区尘埃粒子、沉降菌、浮游菌、控制菌的监控

②产品及纯化水微生物限度的监控

附录：

国家标准医药工业洁净室悬浮粒子的测定方法