第五章常用饲料原料的掺假识别.docx

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第五章常用饲料原料的掺假识别

第五章常用饲料原料的掺假识别

植物性原料的掺假识别

一、豆粕的掺假识别

豆粕主要掺假有：

玉米粉、玉米胚芽粕、豆饼。

识别方法如下：

（一）掺玉米粉的检查

取碘0.3g、碘化钾1g溶于100ml水中，然后用吸管滴1滴水在载玻片上，用玻璃棒头沾取过20号筛的豆粕，放在载玻片上的水中展开，然后滴入1滴碘-碘化钾溶液，再显微镜下观察。

纯豆粕的标准样品，可清楚的看到大小不同的棕色颗粒，含玉米粉的载玻片上，含有似棉花状的蓝色颗粒，随玉米粉含量的增加，蓝色颗粒增加，棕色颗粒减小。

标准样品的制备：

取通过20号筛的纯豆粕0.95g、0.96g、0.97g、0.98g、0.99g，依次通过20号筛的玉米面0.05g、0.04g、0.03g、0.02g、0.01g各自混匀，五种标准品分别含5%、4%、3%、2%、1%玉米的豆粕，按照上述步骤制成五个标准样片，以便半定量比较观察用。

（二）掺玉米胚芽粕的检查

豆粕中掺玉米胚芽粕可借助于显微镜进行检查。

镜下观察豆粕可见豆粕皮，且豆粕皮外表面光滑，有光泽，并可见明显凹痕和针状小孔，内表面为白色多孔海绵状组织，并可观察到种脐，豆粕颗粒形状不规则，一般硬而脆，不透明，奶油色或黄褐色而玉米胚芽粕镜下观察具油腻感，黄棕色，同时可见玉米皮特征，玉米皮镜下薄并且半透明。

所以，二者在镜下很容易区别。

（三）掺豆饼碎的检查

豆粕中掺豆饼碎也可以借助于显微镜进行镜检。

因豆粕与豆饼碎加工工艺不同，镜下状态不规则，一般硬而脆，子叶颗粒无光泽，不透明，奶油色或黄褐色，豆粕碎子叶因挤压成团，这种颗粒状团快质地粗糙，颜色外深内浅。

二者感官也可以大致区分，豆粕一般为碎片状，而豆粕碎成团快，颜色比豆粕深/

二、豆粕碎的掺假识别

豆粕碎掺假，目前仅限于玉米粉，具体检查方法可以见豆粕中掺玉米粉的检查。

三、菜子粕的掺假识别

菜子粕掺假主要掺杂一些低廉的原料，而且较重，如泥土、沙石等，具体检查方法如下：

（一）感官检查

正常的菜子粕为黄色或浅褐色，具有浓厚的油香味，这种幽香味较特殊，其他原料不具备。

同时菜子粕有一定的油光性，用手抓时，有蔬讼感觉。

而搀假菜子粕油香味淡，颜色也暗淡，无油光性，用手抓时，感觉较沉。

（二）盐酸检查

正常的菜籽粕加入适量的10%盐酸，没有气泡产生，面掺假的菜籽粕加入10%的盐酸，则有大量气泡产生。

（三）粗蛋白质的检查

正常的菜籽粕其蛋白含量一般都在33%以上，而掺假的菜籽粕其粗蛋白含量较低。

（四）四氯化碳检查

四氯化碳的比重为1.59，菜籽粕的比重比四氯化碳小，所以菜籽粕可以飘浮在四氯化碳表面。

其方法是：

取一梨形分液漏斗或小烧杯，加入5-10g菜籽粕，加入100ml四氯化碳，用玻璃棒搅拌一下，静置10-20分钟，菜籽粕应飘浮在四氯化碳表面，而矿砂、泥土等由于比重大，故下沉底部。

将下沉的沉淀物分离开，放入已知重量的称量瓶中，然后将称量瓶连同下层物放入110℃烘箱中烘15分钟，取出置于干燥器中冷却、称重，算出粗略的土砂含量。

正常的菜籽粕其土砂含量在1%以下，而掺假的菜籽粕其土砂含量高达5-15%以上。

（五）灰分检查

正常的菜籽粕的粗灰分含量应≤14%，而掺假的菜籽粕其灰分含量高达20%以上。

四、麦麸的掺假识别

麦麸主要掺杂一些石粉、贝粉、砂土、花生皮及稻糠等，识别方法如下：

（一）显微镜法

将待检样品均匀放在玻片上，在15倍的实体显微镜一观察，如果视野里看小麦麸两面发白发亮，动多个视野都可看到，则认为掺有石粉。

若视野中看到有长而硬没有白面的皮，有井字条纹，则认为有稻壳究掺入。

掺入贝粉、沙土、花生皮均可通过显微镜观察，可依据前述这几种原料的显微特征。

（二）水浸法

此法对掺有贝粉、砂土、花年壳者较明显。

方法是：

取5-10g麸皮于小烧杯中，加入10ml的水搅拌，静置10分钟，将烧杯倾斜，若掺假则看到底面有贝粉、砂土，上面浮有花生壳。

（三）盐酸法

取试样少量于小烧杯中，加入10%的盐酸，若出现发泡，则说明掺有贝粉、石粉。

（四）成分分析法

麦麸粗蛋白一般在13%~17%之间，粗灰分在6%以下，粗纤维低于10%，可依据此标准进行验证。

五、玉米蛋白粉的搀假识别

（一）玉米蛋白粉搀假主要是尿素，掺尿素的检验方法如下：

称取10g样品于烧杯中，加入100ml蒸馏水，搅拌、过滤，取滤液1ml于点滴板上，加入2~3滴尿素酶溶液，约经5分钟，如点滴板上呈深红色，则说明样品中掺有尿素。

尿素溶液的配制称取0.2g尿素酶溶解于100ml95%乙醇中。

甲基红指示剂的配制称取甲基红0.1g，溶解于100ml乙醇溶液中。

（二）在无尿素酶药品时，则可采用下列方法检测。

取两份1.5g样品于两只试管中，其中一只加入少许黄豆粉、两管加蒸馏水5ml，振荡，置60~70℃恒温水浴箱水浴3分钟，滴6~7滴甲基红指示剂，若加黄豆粉的试管中出现较深紫红色，则说明玉米蛋白粉掺有尿素。

六、酵母粉的搀假识别

酵母粉掺假主要有非发酵产物、羽毛粉、血粉、皮革粉、无机氮、尿素等。

识别方法如下：

（一）非发酵产物的检查

取1g样品溶于99ml蒸馏水中，多次振荡，以血球记数板在显微镜下记数检验，结果与标准相符为纯发酵产物，否则为非发酵产物。

（二）掺羽毛粉、血粉、皮革粉的检查

1.掺羽毛粉用肉眼观察产品中有闪光亮点，在显微镜下观察可见羽毛管和羽毛轴，并且可见像松香样的半透明颗粒，如果掺入未水解完全的羽毛粉，可见外廓羽毛的羽轴大多有锯齿边。

2.掺血粉的检查

掺入血粉颜色偏黑，镜下进一步观察可见有黑色似沥青状的颗粒，边缘锐利，或者可见血红色晶亮的小珠，这二者均为掺入血粉，只是血粉的加工方法不同，镜下特征不一样。

3.掺皮革粉的检查

掺入皮革粉显微镜下观察，可见绿色（含铬）、深褐色及专红色块状物或丝状物，像锯末似的，不像水解羽毛粉那样透明。

此外掺羽毛粉、血粉、皮革粉还可用物理法和化学法进行检查，请参照本章第二节动物原料中鱼粉掺假检查部分。

（三）掺无机氮及尿素的检查

掺无机氮[（NH4）2SO4、NH4CL]及尿素，目的在于补充产品中的氮量，以提高蛋白质含量。

检验方法如下：

1．掺无机氮检查

取样品5-10g,溶于50ml蒸馏水中，滴加AgNO3溶液数滴，如有白色沉淀生成则产品中有氯离子存在，可能掺有NH4CL。

如滴加BaCL2溶液，有白色沉淀生成，则产品中有硫酸根存在，可能掺有（NH4）2SO4。

2．掺尿素的检查

可参见本章节中玉米蛋白粉掺尿素的检查。

（四）柠檬黄染色

一般固体发酵生产的产品中，因残留大量的培养基，所以原料的选用不仅影响产品质量，同时也决定产品的颜色。

随着豆粕、鱼粉等蛋白原料的短缺，为了降低成本，许多厂家选用了棉籽粕、菜籽粕等到原料，但又要掩盖其较深（偏黑）的颜色，于是采取了两种方法，一是微粉碎；二是高剂量柠檬黄染色（在原料灭菌时加入），以使产品呈金黄色。

检查方法：

取样品10g左右，溶于50ml水中，多次振荡，1小时后观察上清液颜色，如颜色深则加染色剂。

七、啤酒酵母的掺假识别

啤酒酵母一般掺有豆粕、麦根、淀粉等，识别方法如下：

（一）水溶法

无掺假之啤酒酵母可溶于水，取一个100ml烧杯，称取样品约5g，注入50ml蒸馏水，如果皆溶于水中，可判定为无掺假，否则为掺假。

（二）掺淀粉检查

用碘---碘化钾法检查。

方法是：

取样品2-3g置于烧杯中，加入2-3倍水后加热1分钟，冷却后滴加碘—碘化钾溶液（取碘化钾5g,溶于100ml水中，再加碘2g），若样品中掺有淀粉，则颜色变蓝，随掺入淀粉的增加，颜色由蓝变紫。

（三）掺豆粕的检查

可用显微镜法，检查有无豆粕的掺入。

如果镜下可见豆粕皮和豆粕颗粒特征，证明掺有豆粕。

豆粕皮下外表光渭，有光泽，并可见明显凹陷和针状小孔，内表面为白色多孔海绵状组织，并可观察到种脐。

豆粕颗粒形状不规则，一般硬而脆，不透明，奶油色或黄褐色。

（四）掺有麦根的检查

可用显微镜检查法，如有麦根，可在镜下发现有大麦皮，大麦皮下为黄褐色，并有凸起的脉。

动物性原料的掺假识别

一、鱼粉的掺假识别

鱼粉中常掺有菜籽粕、棉籽粕、羽毛粉、血粉、皮革粉、花生粕、芝麻粕、大豆粕、虾粉、蟹壳粉、贝壳粉、肉骨粉、尿素等，具体检查方法如下：

（一）感官检查法

1.视觉

优质鱼粉颜色一致，呈红棕色、黄褐色或黄棕色等。

细度均匀。

劣质鱼粉为浅黄色、青白色或黑褐色，细度和均匀度较差。

掺假鱼粉为黄白色或红黄色，细度和均匀度差。

掺入风化土鱼粉色泽偏黄。

2.嗅觉

优质鱼粉是咸腥味；劣质鱼粉为腥臭或腐臭味；掺假鱼粉有淡腥味、油脂味或氨味等异味。

掺有棉籽粕和菜籽粕的鱼粉，有棉籽粕和菜籽粕味，掺有尿素的鱼粉，略具氨味，掺入油渣的鱼粉有油脂味。

3.触觉

优质鱼粉手捻质地柔软呈鱼松状，无砂粒感；劣质鱼粉和掺假鱼粉捻有砂粒感，手感较硬，质地粗糙磨手。

如结快发粘，说明已酸败，强捻散后呈灰白色说明已发霉。

（二）显微镜检查

鱼粉为黄褐色或黄棕色等轻质物，按鱼肉、鱼骨和鱼鳞的特征可以鉴别。

鱼肉镜下表面粗糙，具有纤维结构，类似肉粉，只是颜色浅。

鱼骨为半透明至不透明的银色体，一些鱼骨块呈琥珀色，其空隙呈深色的流线型波状线段，似鞭状葡萄枝，从根部沿着整个边缘向外伸出。

鱼鳞为平坦或弯曲的透明物，有同心圆，以深色和浅色交替排布。

鱼鳞表面有轻微的十字架。

鱼鳞表面碎裂，形成乳白色的玻璃珠。

烧焦鱼粉鱼粉长期堆放，通过空气而自行燃烧，呈褐色。

从镜下看不到油星，且颗粒碎小。

鱼骨由半透明的银色体变为褐黄色的半透明体。

鱼肉粗糙，纤维结构看不清楚或根本看不到。

鱼粉掺假的显微镜检查：

1．掺菜籽粕

鱼粉中掺菜籽粕镜下可见菜籽粕的种皮特征，种皮为深棕色并且薄，外表面有蜂窝状网孔，表面有汹涌内表面有柔软的半透明白色薄片附着。

菜籽粕的种皮和籽仁碎片不连在一起，籽仁呈淡黄色，形状不规则，无光泽，质脆。

2．掺棉籽饼粕

鱼粉中掺棉籽饼粕镜下可见棉絮纤维附着在外壳上及饼粕颗粒上，棉絮纤维为白色丝状物，中空、扁平、卷曲、半透明、有光泽，棉籽壳碎片为棕色或红棕色，厚且硬，沿其边沿方面有淡褐色和深褐色的不同色层，并带有阶梯似的表面。

棉籽仁碎片为黄色或黄褐色，含有许多圆形扁平的黑色或红褐色油腺体或棉酚色腺体。

棉籽壳和棉籽仁是连在一起的。

3．掺稻壳粉

鱼粉中参稻壳粉镜下可见具有光泽的表面，有井字条纹，并可见到茸毛。

4．掺花生饼粕

鱼粉中掺花生饼粕镜下可见花生种皮、外壳存在，种皮为红色、粉红色、浅紫色或棕黄色。

外壳破碎呈极不规则的片状，分层，内层呈白色海绵状，有长条短纤维交织，外壳表面有突筋呈网状，外壳皮厚不均，有韧性。

5．掺芝麻饼粕

鱼粉中掺芝麻饼粕镜下可见芝麻特征，芝麻种皮带有微小圆形突起，芝麻皮薄，黑色、褐色或黄褐色，因品种而异。

6．掺大豆粉

鱼粉中掺大豆粉镜下可见豆皮、黄色或典褐色块状物。

豆皮有凹形斑点，稍有卷曲，并可见种脐。

白色海绵淀粉像水珠浮在块状物表面。

7．掺麦麸

鱼粉中掺麦麸镜下可见淡黄色或棕色片状麸皮。

麸皮外表面有细皱纹，内表面粘附有许多不透明的白色淀粉粒。

8．掺皮革粉

鱼粉中掺皮革粉镜下可见绿色、深褐色及砖红色的块状物或丝状物，像锯末似的，没有水解羽毛粉那样透明。

9．水解羽毛粉

鱼粉中掺水解羽毛粉镜下可见半透明像松香一样的碎颗粒，有些反光。

同时可见羽毛管和羽毛轴，似空心面。

也可看见生羽毛。

10．掺虾肉粉

鱼粉中掺有虾肉粉镜下可见虾须、虾眼、虾壳和虾肉等。

虾壳类似卷曲云母薄片形状，半透明。

少量的虾肉与虾壳连在一起。

虾眼为黑色球形颗粒，较硬，为虾肉粉中较易辨认的特征。

虾须在镜下观察为以断片存在，长圆管状，带有螺旋形平行线。

虾腿为断片宽管状，半透明，带毛或不带毛。

11．掺蟹壳粉

鱼粉中掺蟹壳粉镜下可见蟹壳的特征。

蟹壳为小的不规则的几丁质壳的形状，壳外层多为橘红色，多孔，并有蜂窝状的圆形凹斑或小盖状物。

12．掺贝壳粉

鱼粉中掺有贝壳粉镜下可见贝壳粉的特征。

贝壳粉颗粒很硬，表面两面光滑，颜色依贝壳种类不同而有较大的差异，有的为白色或灰色，也有的为粉红色。

有些颗粒外表面具有同心的或平行的线纹或者带暗淡交错的线束，有些碎片边缘呈现锯齿状。

13、掺海带粉

鱼粉中掺海带粉镜下可见其海带粉的特征，海带粉镜下呈浅灰色并杂有淡黄色，与国产鱼粉的颜色相近，颗粒不等，粒度大的呈片状，形状极不规则。

14、掺血粉

鱼粉中掺血粉，镜下可见血粉的特征。

血粉在镜下颗粒形状各异，有的边缘锐利，有的边缘粗糙不整齐。

颜色有紫黑色似沥青状，或者颜色为血红色晶亮的小球。

15、掺肉骨粉

鱼粉中掺肉骨粉，镜下可见肉骨粉的特征。

肉骨粉镜下为浅黄色至深褐色，含脂肪高的色泽深，颗粒有油腻感，表面粗糙，并可见肌肉纤维。

肌纤维较细，担相互联接。

骨质为较硬的白色、灰色或宗黄色的快状颗粒，不透明或半透明，带斑点，边缘圆钝。

次外还可见毛发、蹄角等附着物，经常可见混有血粉的特征。

（三）物理检验

1、鱼粉中掺有黻皮、花生皮、稻壳粉的检验

取3g鱼粉样品，置于100ml玻璃烧瓶中，加入5倍水，充分搅拌后，静置10~15分钟，麸皮、花生壳粉、稻壳粉因此比重轻，浮在水面上。

2、鱼粉中掺沙子的检验

取3g鱼粉样品，置于100ml的玻璃烧瓶中，加5倍水，充分搅拌后，静置10~15分钟，鱼粉、砂子均沉于底部，再轻轻搅拌，鱼粉即浮动起来，随水流；转动而旋转，而砂子比重大，稍旋转即沉于杯底，此刻可观察到砂子的存在。

3、鱼粉中植物性蛋白质的检验

取适量鱼粉用火燃烧，如发出与纯毛发燃烧后相同的气味，则为鱼粉，而具有炒谷物的香味，则说明其中混杂了植物蛋白质。

4、鱼粉中掺羽毛粉的检验

将10g样品放入四氯化碳与石油醚的混合液（100

：

41.5，d=1.326g/cm3）中搅拌静置，上浮物多为羽毛粉（或海蜇废弃物）。

5、测容量法

粒度为1.5mm的纯鱼粉，容量约为550-600g/l,如果重量偏大或偏小，均不是纯鱼粉。

（四）化学检验

1、鱼粉中掺杂锯末（木质素）的检验

方法1将少量鱼粉置于培养皿中，加入浓度为95%的乙醇浸泡样品，再滴入几滴浓盐酸，若出现深红色，加水后深红色物质浮在水面，则说明鱼粉中掺有锯末物质。

方法2称取鱼粉1~2g，置于试管中，再加入10%的间苯三酚10ml，再滴入数滴浓盐酸，观察样品的样品的颜色变化，如其中有红色颗粒产生，则为木质素，即说明鱼粉中掺有锯末类物质。

2、鱼粉中掺有淀粉类物质的检验

可用碘蓝反应来鉴定。

其方法是：

取试样2~3g置于烧杯中，加入2~3倍水后，加热1分钟，冷却后滴加碘—碘化钾溶液（取碘化钾5g，溶于100ml水中，再加碘2g），若鱼粉中掺有淀粉类物质，则颜色变蓝，随掺入淀粉的增加，颜色由蓝色变紫。

3、鱼粉中掺入碳酸钙、石粉、贝壳、蛋壳粉的检验

可以用盐酸对碳酸钙的反应产生二氧化碳气体来判断。

其方法是：

取试样10g，放在烧瓶中，加入2ml盐酸，立即产生大量气泡，即为掺入了上述物质。

4、鱼粉中掺入纤维类物质的检验

如果怀疑鱼粉中掺入纤维类物质，可采用下述检方法：

取试样2~5g，分别用1.25%硫酸和1.25%氢氧化钠溶液煮沸过滤，干燥后称重。

纯鱼粉含纤维量极少，通常不超过1.0%。

5、鱼粉中皮革粉的检验

方法1取少许鱼粉样品于培养皿中，加入几滴钼酸铵溶液（以溶液浸没鱼粉为宜），静置5~10分钟，如不发生颜色变化则为皮革粉，如呈现绿色则为鱼粉。

钼酸铵溶液的配制称取5g钼酸铵，溶解于100ml蒸馏水中，再加入35ml的浓硝酸即可。

方法2取2g鱼粉样品，置于坩埚中，经高温灰化，冷却后用水浸润，加入2N硫酸10ml，使之呈酸性。

滴加数滴二苯基卡巴腙溶液，如有紫色红色物质产生，则有多铬存在，即说明鱼粉中有皮革粉。

2N硫酸的配制量取55ml浓硫酸，倾入有200ml左右的蒸馏水的烧杯中，再转入1000ml容量瓶中，稀释定容即可。

二苯基卡巴腙溶液的酸制称取0.2g二苯基卡巴腙，溶解于100ml90%的乙醇中。

本测定方法的原理基于皮鞣制过程中，采用铬制剂，通过灰化后，有一部分转变为六价铬，在强酸溶液中，六价铬与三苯基卡巴腙反应，生成紫色的水溶性二硫代卡巴腙化合物。

6、鱼粉掺有羽毛粉的检验

称取约1g试样于2个500ml三角烧杯中，一个加入1.25%硫酸溶液100ml，另一个加入5%氢氧化钠溶液100ml，煮沸30分钟后静置，吸取上清夜，将掺渣放在50~100倍显微镜下观察。

如果试样中有羽毛粉，用1.25%硫酸处理掺渣在显微镜下呈现一种特殊的形状，而5%倾氧化钠溶液处理后的残渣则没有种特殊形状。

7、鱼粉中掺入血粉的检验

被检鱼粉1~2g于试管中，加入5ml蒸馏水，搅拌，静置数分钟

后。

另取一支试管，先加连苯胺粉末少许，然后加入2ml冰醋酸，震荡溶解，再加入1~2ml过氧化氢溶液，将被检鱼粉的滤液徐徐注入其中，如两液接触面出现绿色或蓝色的环或点，表明鱼粉中含有血粉，反之，鱼粉中不含血粉。

本方法如不用滤纸，而用被检鱼粉直接徐徐注入溶液面上，在液面上及液面以下可见绿色或蓝色的柱或环，表明有血粉掺入，否则没有血粉掺入。

所需试剂冰醋酸、连苯胺粉末、3%过氧化氢溶液（现用现配）。

本方法原理鱼粉中铁质有类似过氧化酶的作用，可分解过氧化氢，放出新生态氧，使连苯胺氧化为连苯胺蓝，而呈绿色或蓝色。

8、鱼粉中掺尿素的检验

方法1称取10克样品于烧杯中，加入100ml蒸馏水中，搅拌，过滤，取滤液1ml于点滴板上，加2~3滴甲基红指示剂，再滴加2~3滴尿素酶溶液，经约5分钟，如点滴板上呈深红色，则说明样品中掺有尿素。

尿素酶溶液的配制称取0.2g尿素酶，溶解于100ml95%的乙醇中。

甲基红指示剂的配制称取甲基红0.1g，溶解与95%的乙醇中。

方法2无尿素酶药品时，则可用此方法检验。

取两份1.5g鱼粉于两支试管中，其中一支加入少许黄豆粉，两管各加入蒸馏水5ml振荡，置60-70℃恒温水浴中3分钟，滴6-7滴甲基红指示剂，若加黄豆粉的试管中出现较深紫红色，则说明鱼粉中有尿素。

方法3称取10g鱼粉样品，置于150ml三角瓶中，加入50ml的蒸馏水，加塞用力振荡2-3分钟，静置，过滤，取滤液5ml，于20ml的试管中，将试管放酒精灯上加热灼烧，当溶液蒸干时，可嗅到强烈的氨臭味。

同时把湿润的PH试纸放在管口处，试纸立即变成红色，此时pH值高达近14。

如有纯鱼粉则无强烈的氨嗅味，置于管口处的pH试纸稍有碱性反应，显微蓝色，离开管口处则慢慢退去。

9、鱼粉中掺入双缩脲的检验

称取鱼粉试样2g，加20ml蒸馏水，充分搅拌，静置10分钟，干燥滤纸过滤，取滤液4ml于试管中，加6mol/l氢氧化钠溶液1ml,再加入1.5%CaSO4溶液1ml,摇匀，立即观察，溶液呈蓝色者鱼粉为没有掺入双缩脲，若呈紫红色，则鱼粉中掺有双缩脲，红色越深，掺入双缩脲的比例越大。

10、依据常规检验结果鉴别鱼粉掺假

通过测定粗蛋白、纯蛋白、粗纤维、粗脂肪、粗灰分及淀粉等项指标，可以准确识别鱼粉成分的真伪。

掺有尿素的鱼粉，因为含有大量的非蛋白氮，所以测定粗蛋白值很高，而真蛋白值却很低，掺入植物蛋白原料后，真蛋白虽然很高，但脂肪和淀粉含量相对增加；掺入植物秸秆粉后，纤维含量增高；掺入风化土，灰分境增加。

11、纯/粗蛋白比值鉴别鱼粉掺假

甲醛—尿素聚合物是常见的非蛋白氮掺入物，由于尿素以聚合物的形式存在，故用测定游离尿素的方法无法检出。

目前多根据纯/粗蛋白比值来推断是否掺有这类高氮化合物。

一般认为用纯/粗蛋白的比值80%即没有掺入高氮聚合物。

纯/粗蛋白的测定方法

（1）纯蛋白的测定原理

蛋白质与重金属盐类在碱性条件下，由于盐析作用而沉淀下来，而非蛋白氮则易溶于水，故可用热水将水溶性含氮化合物洗去，用凯氏定氮法测定沉淀物，即可得出纯蛋白的含量。

若得出的纯/粗蛋白的比率小于80%，则可判断为鱼粉中掺这类非蛋氮化合物。

（试剂）

6%硫酸铜溶液称取30.0gCuSO4，加水溶解，并稀释至500ml。

1.25%氢氧化钠溶液称取6.25g氢氧化钠，加水溶解，并稀释至500ml。

0.05mol/L盐酸标准溶液。

（3）仪器

半微量定氮仪

（4）测定步骤

精确称取鱼粉样品1g左右，置于250ml烧杯，加入100ml水（指去离子水，下同），于电炉上加热煮沸，加入25ml6%CuSO4溶液，再在搅拌下，缓缓加入25ml1.25%NaOH溶液，摇匀。

从电炉上取下，室温放置2小时，用11cm中速定性滤纸倾注法过滤。

并用少量水多次洗涤烧杯和沉淀物，直至洗出液无SO42-离子。

于80℃干燥箱烘至略潮，小心卷起滤纸成棒状，连沉淀物一起移入250ml凯氏烧瓶中，加入浓硫酸20ml，3.5gK2SO4和0.5gCUSO4，摇匀。

置电炉上小心消化至澄清透明，继续加热半小时，取下冷却，小心加入50ml水，放冷，移入100ml容量瓶中，用少量水多次洗涤烧瓶，洗液并入容量瓶，再补水至刻度。

蒸馏、滴定同粗蛋白。

（4）粗蛋白测定同国标法。

（5）计算

纯/粗蛋白%=

×100%

付一鱼粉中掺尿素的定量测定

方法一

1.试剂

对二甲氨基苯甲醛（PMAB）溶液称取3.2g，PMAB，用200ml乙醇溶解，再加入20ml盐酸，该溶液在1个月内稳定。

醋酸锌溶液称取22.0g醋酸锌溶于水，加3ml醋酸，再用水稀释至100ml。

亚铁氰化钾溶液称取0.6g亚铁氰化钾溶于水并稀释至100ml。

活性炭。

磷酸盐缓冲液（pH7.0）称取3.403g无水磷酸二氢钾和4.355g无水磷酸氢二钾分别溶于约100ml水中，合并两面三刀溶液并稀稀释至1000ml，作为储备液。

分别吸取1ml、2ml、4ml、6ml、8ml、10ml、12ml、储备液于50ml容量瓶中，用磷酸缓冲液定容，则尿素工作液浓度分别为20ug/ml、40ug/ml、80ug/ml、120ug/ml、160ug/ml、200ug/ml、240ug/ml。

2．仪器分析天平；振荡机；分光光度计；恒温水浴；具塞试管；三角瓶。

3.测定步骤

（1）工作曲线的绘制吸取各浓度尿素工作液5ml置于试管中（空白管为5ml磷酸缓冲液），各加入对二甲氨基苯甲醛溶液5ml，轻轻摇匀后置于25℃水浴中10分钟，在420nm处读取各溶液吸光值。

以尿素浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制工作曲线或作回归方程。

（2）样品的测定

称取2g试样（精确至1mg）置于300ml三角瓶中，加2g活性炭，190ml水，50ml醋酸锌溶液和5ml亚铁氰化钾溶液，震荡提取30分钟，待完全沉淀后过滤。

取5ml滤液于试管中，加入5ml二甲氨基苯甲醛溶液，充分振荡后置于25℃水浴中10分钟，此时于420nm波长下读取吸光度值。

对照液为5ml磷酸缓冲液，加入5ml对二甲氨基苯甲醛溶液，充分振摇后置于25℃水浴中10分钟，此时于420nm波长下读取吸光度值。

对照液为5ml磷酸缓冲液，加5ml对二甲基甲醛溶液，按照试样溶液的同样方法操作。

4．计算

D×0.2

尿素（%）=——×100%。

W

式中：

D——从工作曲线上计算出待测溶液浓度（µg/ml）；

W——试样重量，g。

方法二

1．原理

尿素在酸性条件下与二乙酰—肟和硫代氨基脲共煮，二乙酰—肟分解成二乙酰与尿素形成二嗪衍生物的复合物。

该复合物颜色的深浅与尿素的含量成正比，在540nm波长处测定其吸光度，与标准比较定量。

2．试剂

酸性试剂吸取44ml浓硫酸，66ml浓磷酸加于盛有600m