世纪金榜版高考生物一轮总复习练习选修12 课时提升作业doc.docx

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课时提升作业三十九

微生物的培养与应用

(40分钟 100分)

1.(10分)(2011·全国卷节选)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。

某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。

回答问题:

(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以______为唯一碳源的固体培养基上。

从功能上讲,该培养基属于________培养基。

(2)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力________。

(3)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、__________和__________。

无菌技术要求实验操作应在酒精灯__________附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。

【解析】

(1)欲筛选出能高效降解原油的菌株,培养基中应只含有原油而无其他碳源,这样不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存,这类培养基属于选择培养基。

(2)降解原油能力越强的菌株,在菌落周围形成的分解圈越大。

(3)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)和高压蒸汽灭菌(如培养基)等。

无菌技术要求整个实验过程都在酒精灯火焰附近进行,以避免周围微生物的污染。

答案:

(1)原油 选择 

(2)强

(3)干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰

2.(12分)(2016·济南模拟)下表是某微生物培养基的配方。

请分析回答下列问题:

编号

成分

(NH4)2SO4

KH2PO4

FeSO4

CaCl2

H2O

含量

0.4g

4.0g

0.5g

0.5g

100mL

(1)从培养基的营养成分看,此培养基可用来培养的微生物同化作用类型是__________。

利用该培养基培养微生物时,微生物所需要的碳源来自_______。

(2)此表中含有的微生物的营养成分包括______________________________。

(3)若除去该培养基中的①后再加入不含氮元素的有机物,则此培养基可培养的微生物种类是________________________。

(4)培养基若加入氨基酸,则它可充当的营养成分是_______________________

__________________________。

(5)若要观察微生物的菌落的特点,培养基中还应添加的成分是_____________

___________。

【解题指南】

(1)隐含信息:

①表格中的成分均为无机物。

②表格中的成分中不含凝固剂。

(2)必备知识:

①不含有机物的培养基只能培养自养型微生物。

②无氮培养基可以培养自生固氮微生物。

③观察菌落的特点需用固体平板培养基。

【解析】

(1)从培养基的成分看,该培养基无有机物,因此可以培养自养型微生物,微生物所需的碳源只能由空气中的CO2提供。

(2)培养基中的成分包括微生物需要的氮源、无机盐和水。

(3)培养基中的①是该培养基中唯一的氮源,去掉后则成为无氮培养基,可用于培养自生固氮微生物,因为自生固氮微生物可以利用大气中的N2作为氮源。

但是自生固氮微生物是异养型生物,因此自生固氮微生物的培养基除不含氮源外,还应含有有机物。

(4)在培养基中加入氨基酸,可以为微生物提供碳源、氮源和特殊营养物质。

(5)微生物的菌落需要在固体培养基的表面生长,因此培养基中需要添加凝固剂(琼脂),使液体培养基凝固成固体培养基。

答案:

(1)自养型 空气中的CO2

(2)水、无机盐、氮源

(3)自生固氮微生物

(4)碳源、氮源和特殊营养物质

(5)凝固剂(琼脂)

【延伸探究】

(1)本题(3)中所涉及的微生物和自养型微生物相同吗?

为什么?

提示:

不同。

自养型微生物可以利用空气中的二氧化碳作为碳源,培养基中则可以不含碳源;自生固氮微生物则可以利用空气中的氮气作为氮源,培养基中可以不含氮源。

(2)添加到培养基中的一种化合物只能作为培养基的一种营养成分吗?

举例说明。

提示:

不一定,如本题中的(NH4)2SO4既可以作为氮源,又可以作为无机盐。

3.(12分)(2016·太原模拟)水质的细菌检查是应用微生物学的任务之一。

其实验步骤如下:

(一)采样

①自来水:

打开水龙头,放水3~5min,关闭水龙头用酒精棉球灼烧水龙头。

再开水龙头1~2min后,用无菌瓶取水样。

②湖水(取样操作略)

(二)水中细菌总数测定

①自来水:

吸取1mL水样→注入无菌培养皿→加入45~50℃的牛肉膏蛋白胨培养基→旋转混匀→静置凝固→放置培养→观察计数。

②湖水:

稀释水样(其他操作同①)。

请回答下列问题:

(1)本实验使用的培养基含有水、碳源、____________、__________和________等成分。

(2)取样时用酒精棉球灼烧水龙头的作用是防止________进入样品,影响实验结果。

(3)将培养基加入培养皿时应在酒精灯火焰附近进行操作;在向培养皿加入培养基前,要使装有培养基的容器瓶口迅速通过__________。

(4)在放置培养操作时,应将平板(培养皿)__________放置;对湖水样品的稀释范围以达到培养后每个平板中菌落数在________最为适合。

【解析】

(1)微生物的培养基中必须含有水、无机盐、氮源和碳源四类营养物质,本实验为固体平板培养基,因此培养基中还应加入琼脂作为凝固剂。

(2)水龙头口有大量的杂菌,因此取样时用酒精棉球灼烧水龙头的作用是防止水龙头口的细菌(杂菌)进入样品,影响实验结果。

(3)培养基的制作、接种均应严格无菌操作,即在酒精灯的火焰附近进行。

在向培养皿加入培养基前,要使装有培养基的容器瓶口迅速通过酒精灯的火焰。

(4)微生物的培养应将平板倒置,目的是防止培养皿盖上的水珠污染培养皿;对湖水样品的稀释范围以达到培养后每个平板中菌落数在30~300最为适合。

答案:

(1)氮源 无机盐 琼脂(凝固剂)

(2)水龙头口的细菌(杂菌)

(3)酒精灯火焰 (4)倒置 30~300

【加固训练】

下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验,完成下列问题:

实验原理:

农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。

将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。

在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。

用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离。

材料用具:

农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛有9mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛有90mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。

(1)方法步骤:

①倒平板:

分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板。

②制备土壤稀释液:

取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。

用无菌吸管吸取上清液1mL,转至盛有9mL的无菌水的试管中,依次稀释到107稀释度。

③涂布:

按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布______个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布______个。

④培养:

放入恒温箱内,在28~30℃下培养3~4d。

⑤细菌的计数:

如果测定的平均值为50,则每克样品中的菌株数是__________。

(稀释度是105)

(2)预期结果:

相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数________(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。

原因是_________________________

__________________。

【解题指南】

(1)题干关键词:

“分离自生固氮菌”“计数”。

(2)隐含信息:

无氮培养基为选择培养基;牛肉膏蛋白胨培养基无选择功能。

(3)必备知识:

①为增强实验说服力,要设置重复和对照。

②稀释涂布平板法计数微生物的计算公式。

【解析】

(1)为了保证结果准确,一般设置3~5个平板,选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取平均值,则每克样品中的菌株数为(50÷0.1)×105=5.0×107。

(2)牛肉膏蛋白胨培养基作为对照,以消除无关变量对实验结果的影响,该培养基适合土壤中几乎所有细菌生存,所以,它比无氮培养基上的菌落数目多。

答案:

(1)③3 1 ⑤5.0×107

(2)多于 无氮培养基上只有土壤中的自生固氮菌能生长繁殖,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存

【延伸探究】用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目,其结果与实际值相比如何?

并说明原因。

提示:

比实际值低。

培养基上的一个菌落也可能是相连的两个或多个细菌繁殖形成的,而统计结果一般用菌落数来表示,因此统计的菌落数要少于样品中活菌的实际值。

4.(10分)(2016·襄阳模拟)人和哺乳动物的尿中含有尿素,大量尿素的存在会对环境造成污染。

土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源。

现对土壤中的这类细菌进行分离实验,回答下列问题:

(1)将样液进行一系列的浓度梯度稀释,然后接种培养。

在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在无菌环境中操作。

接种后的培养皿________于37℃的________中培养。

(2)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,从功能上划分该培养基属于__________培养基。

若培养基中存在分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的__________使pH升高,酚红指示剂产生的颜色变化,从而证明这一菌株可以把尿素分解为氮源。

变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力____________。

(3)与全营养培养基中的菌落相比,以尿素为氮源的培养基中菌落数________(填“多”“少”或“相等”)。

【解析】

(1)在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在酒精灯火焰附近进行操作,以防止杂菌污染。

接种后的培养皿需倒置于37℃的恒温培养箱中培养,培养皿倒置既可避免培养基中的水分过快地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染;恒温为微生物的快速生长提供了适宜的温度条件。

(2)含有酚红指示剂的培养基从功能上划分属于鉴别培养基。

尿素被分解后产生的氨使pH升高,酚红指示剂变红;变红区域越大,表明该菌株利用尿素的能力越强。

(3)全营养培养基中营养全面,菌落数多而杂;在以尿素为氮源的培养基中只有能分解尿素的微生物才能生长,其他微生物则不能生长,因此以尿素为氮源的培养基中菌落数少。

答案:

(1)倒置 恒温培养箱

(2)鉴别 氨 越强 (3)少

【加固训练】

赤霉病是由雪腐镰刀菌等真菌感染引起的,广泛发生在小麦等粮食作物上。

雪腐镰刀菌代谢产生的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON,分子式为C15H20O6)严重影响禽畜生产和人体健康。

请分析回答下列问题:

(1)下列微生物与雪腐镰刀菌的细胞结构类似的是________(选填选项前的符号)。

A.酵母菌  B.醋酸菌  C.毛霉D.乳酸菌E.大肠杆菌

(2)某同学为筛选专一降解DON的菌,配制了下列培养基,在适宜条件下培养:

实验步骤

取样

培养基

培养结果

土壤

样品

葡萄糖,(NH4)2SO4,

K2HPO4·3H2O,

KH2PO4,NaCl,CaCl2,

MgSO4·7H2O,加水定容

培养液a

1mL培

养液a

同上

菌落

挑取

单菌落

真菌培养基

培养液b

①为实现筛选目的,步骤Ⅰ所使用的培养基配方中,应去除________并加入______。

该培养的目的是_____________________________________________。

②为实现目的菌的分离和计数,步骤Ⅱ所使用的培养基中还应加入________制成平板。

③步骤Ⅲ的目的是_________________________________________________。

【解题指南】

(1)题干关键信息:

①雪腐镰刀菌为真菌;②DON只含有C、H、O三种元素。

(2)必备知识:

①筛选专一降解DON的菌,培养基应以DON为唯一碳源。

②目的菌的分离和计数应用固体平板培养基。

【解析】

(1)雪腐镰刀菌是真菌,选项中酵母菌和毛霉均为真菌,其细胞为真核细胞。

而醋酸菌、乳酸菌和大肠杆菌均为细菌,其细胞为原核细胞。

(2)①为筛选专一降解DON的菌,因DON只含有C、H、O三种元素,可以作为微生物的碳源,因此利用以DON为唯一碳源的选择培养基进行选择培养,故培养基中应去掉葡萄糖并添加DON。

步骤Ⅰ用液体培养基,主要目的是增加专一降解DON的微生物的浓度。

②步骤Ⅱ培养的结果为菌落,因此要在固体培养基上进行培养,因此培养基中应加入凝固剂——琼脂。

③步骤Ⅲ用液体培养基,接种的是纯化的专一降解DON的真菌,目的是快速增加目的菌的种群数量(扩大培养)。

答案:

(1)A、C

(2)①葡萄糖 DON 增加专一降解DON的微生物的浓度

②琼脂

③快速增加目的菌的种群数量(扩大培养)

5.(12分)(2016·南昌模拟)金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。

金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。

下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。

(1)按细胞结构分类,金黄色葡萄球菌属于________生物,从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行________呼吸。

(2)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括__________________

_____________,用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______________。

(3)接种操作前后需要对接种工具进行________灭菌。

(4)经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现________的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完善,完善的方案是____________________________。

【解题指南】

(1)隐含信息:

①图中培养瓶没有密封。

②振荡培养可以增加培养基中的溶解氧。

③图中接种工具是接种环。

(2)关键方法:

用含有高浓度的NaCl的培养基可以筛选金黄色葡萄球菌。

【解析】

(1)如何判断细菌:

带“菌”字的生物中,“菌”字前有“杆”“球”“弧”“螺旋”等表示形态的字的都是细菌,如大肠杆菌、肺炎双球菌、葡萄球菌、霍乱弧菌等都是细菌。

因此金黄色葡萄球菌属于细菌,为原核生物;在培养的过程中由于没有密闭且进行振荡培养,由此可以判断金黄色葡萄球菌属于好氧细菌,可进行有氧呼吸。

(2)7.5%NaCl肉汤培养基中含有蛋白质,所以可以提供氮源和碳源,又含有水分和NaCl,所以提供的营养物质为碳源、氮源、水和无机盐;高浓度的盐溶液可以抑制其他微生物的生长,而金黄色葡萄球菌可以耐受高浓度的盐溶液,从而起到选择培养的作用。

(3)接种环的灭菌方法是灼烧灭菌法。

(4)根据题意,“金黄色葡萄球菌在血平板上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色”,所以如果经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现周围存在透明圈的菌落,可以初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。

为了增强实验说服力,应设置空白对照实验,即设置不接种鲜牛奶(或接种无菌水)的对照实验,若对照组不出现周围存在透明圈的菌落,则说明金黄色葡萄球菌一定来自鲜牛奶。

答案:

(1)原核 有氧 

(2)碳源、氮源、水和无机盐 增加金黄色葡萄球菌的数量

(3)灼烧 (4)周围存在透明圈 设置不加鲜牛奶(接种无菌水)、其他操作均相同的对照组

6.(10分)我国利用秸秆生产车用燃料乙醇已进入工业化生产阶段,秸秆的主要成分是纤维素,其中每4吨玉米秸秆可生产1吨燃料乙醇。

请回答:

(1)利用玉米秸秆生产乙醇时,首先选用______酶处理秸秆,使之转化为发酵所需的________等物质,然后进行发酵,获得乙醇。

(2)进行平板划线时,在划线结束后仍然要灼烧接种环,原因是_____________

__________________________________________。

(3)在酒精发酵过程中,在不同时间内对发酵液样品进行检测,发现发酵液的pH一直下降,原因是___________________________________________________

__________________________。

【解析】

(1)玉米秸秆的主要成分是纤维素,应用纤维素酶处理秸秆,使之转化为发酵所需的葡萄糖等物质,然后进行发酵,获得乙醇。

(2)划线结束后灼烧接种环的目的是及时杀死接种环上残留的菌种,以防止微生物感染操作者或造成环境污染。

(3)在酒精发酵过程中,酵母菌细胞呼吸产生的CO2会使发酵液pH下降。

答案:

(1)纤维素 葡萄糖

(2)及时杀死接种环上残留的菌种

(3)酵母菌在进行发酵过程中产生CO2溶于发酵液中,使pH下降

7.(12分)急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的,因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施。

请回答下列与检验饮用水有关的问题:

(1)在下图所示的四种菌落分布图中,不可能是用稀释涂布平板法得到的是________。

(2)图中用该方法得到的菌落分布图中,最符合计数要求的是图中的________。

(3)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组?

___________。

为什么?

________________________________________________________________。

(4)分别取0.1mL、已稀释103倍的水样分别涂布到3个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到大肠杆菌的菌落平均数为50。

则每升原水样中大肠杆菌数为__________________________。

【解析】

(1)据图可知,D图所示的菌落分布为平板划线法接种获得的。

(2)利用稀释涂布平板法进行微生物计数时,需要得到30~300个菌落的平板进行计数。

(3)为了增强实验的说服力,通常要设置对照实验,本实验可设置空白对照排除培养基污染产生的影响。

(4)根据公式计算每升原水样中大肠杆菌数为50×103÷0.1×1000=5.0×108。

答案:

(1)D 

(2)C

(3)需要 培养基制备不合格会导致菌落数增加

(4)5.0×108

8.(10分)(2016·青岛模拟)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病,炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状,对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。

①细菌培养:

采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。

②细菌鉴定:

实验流程如图所示。

(1)挑选可疑菌落制片后,用____________观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。

(2)实验所用液体培养基的碳源为________(填“无机碳”或“有机碳”)。

(3)接种可疑菌落后,35℃培养24h,液体培养基变浑浊,原因是________________,对照组试管中应加入______________,与实验组同时培养6h后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组________________(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。

(4)对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。

与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有________________和________________。

【解题指南】

(1)图示关键信息:

噬菌体液用生理盐水配制。

(2)题干关键信息:

由“炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病”可知,炭疽杆菌营寄生生活,为异养型生物。

【解析】

(1)炭疽杆菌是原核生物,为单细胞生物,观察它的结构应借助显微镜。

(2)实验所用培养基的碳源应为有机碳,因为炭疽杆菌为异养型微生物。

(3)35℃培养24h,细菌大量繁殖会导致液体培养基变浑浊,对照组不能含有细菌,根据等量原则故应该加入等量的生理盐水,实验组加入噬菌体液后,由于噬菌体能够使炭疽杆菌死亡,故实验组液体培养基的浑浊度比对照组低。

(4)抗体是由体液免疫过程产生,参与体液免疫的细胞有T细胞、B细胞、吞噬细胞、浆细胞等。

答案:

(1)显微镜 

(2)有机碳

(3)细菌大量繁殖 等量生理盐水 低

(4)吞噬细胞 浆细胞

9.(12分)(能力挑战题)解磷微生物能分解有机磷,可降低水体富营养化程度。

下图是从湖泊污泥中筛选解磷微生物的过程示意图,下表是分离纯化的结果。

请回答下列问题:

记录项目:

透明圈直径/菌落直径

菌落编号

1

2

3

48小时

1.6

2.8

3.0

72小时

2.2

1.2

5.0

96小时

2.3

1.2

4.2

(1)培养基的成分主要有牛肉膏、蛋白胨、NaCl及无菌卵黄液,其中________主要提供有机磷。

从土壤中富集解磷微生物时,应选用________(填“固体”或“液体”)培养基。

(2)在倒平板前,应对玻璃器皿和培养基灭菌,灭菌方法是________。

配制成10-1浓度稀释液时,用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL,移入盛有________mL无菌水的试管中,并依次配制10-2~10-10的梯度稀释液。

(3)分析菌种的分离纯化结果,应选择________号菌落进行扩大生产,原因是______________。

【解题指南】解答本题的关键:

(1)图中关键信息:

过程①为梯度稀释操作、过程②得到的平板上菌落分布均匀,过程③得到的平板上的菌落分布不均匀。

(2)表中关键信息:

3号菌落透明圈直径/菌落直径最大。

(3)透明圈直径/菌落直径与微生物的解磷能力呈正相关。

【解析】

(1)卵黄液中含有磷脂较多,因此主要提供有机磷的物质是无菌卵黄液。

微生物的富集培养最好用液体培养基,这有利于微生物与培养基的接触,充分利用培养基中的营养物质。

(2)玻璃器皿和培养基的灭菌通常用高压蒸汽灭菌,玻璃器皿也可以单独用干热灭菌法灭菌。

进行梯度稀释时,配制成10-1浓度稀释液时,用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL,移入盛有9mL无菌水的试管中。

(3)由表可知,3号菌落透明圈直径/菌落直径最大,由于透明圈直径/菌落直径与微生物的解磷能力呈正相关,说明3号菌落的微生物解磷能力最强,可以进行扩大生产。

答案:

(1)无菌卵黄液 液体

(2)高压蒸汽灭菌 9

(3)3 3号菌落透明圈直径/菌落直径最大,解磷能力强(3号菌落具有相对较大的透明圈,解磷能力强)

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