注射液HPLC分析方法确认方案.docx

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######有限公司 文件编号VP—03--39 第9页共20页

XX注射HPLC

分析方法确认报告

######制药有限公司

确认方案审批表

确认方案名称：

XX注射液HPLC分析方法确认方案

确认方案编号：

审批

程序

部门

签名

日期

起草

检验室

审核

QC主任

质量保证部

批准人

质量负责人

目录

1概述

2确认目的

3确认范围

4确认小组成员与职责

5确认方案的审核与批准

6进度计划

7确认内容

8变更与偏差

9确认结果与评价报告

1概述

XX注射液收载于国家药品标准，含量及有关物质的检验均使用高效液相色谱仪进行检验，两个项目检验参数等条件完全相同，且我公司未对《中国药典》2010年版二部中的方法进行过任何改变，因此按照2010新版GMF要求，需要进行分析方法确认。

本确认方案使用LC600-梯度型高效液相色谱仪对XX注射液采用《中国药典》2010年版二部“含量”、“有关物质”的检验方法进行确认，证明此方法在本公司实验室的适用性。

含量、有关物质需确认项目如下:

确认项目

准确度

精密度

专属性

定量限

含量

有关物质

“是”代表该项内容需确认，“否”代表该项内容不需要确认

2确认目的

通过对XX注射液含量及有关物质的检验方法的确认，证明此方法在本公司实验室的适用性。

3确认范围

本确认方案适用于XX注射液含量、有关物质的检验方法进行确认。

4确认小组成员与职责

部门及职务

确认工作中职责

检验员

确认执行人：

负责起草确认方案，执行确认方案，负责验证过程中相关的检验操作，收集整理数据，起草确认报告。

质量保证部

负责确认方案及确认报告的审核；审核确认过程中发生偏差的解决方案，以及采取纠正措施。

Q（主任

确认组长：

负责确认方案的审核并组织实施，审核确认报告。

质量负责人

确认总负责人：

负责确认方案、报告的批准

5确认方案的起草与审批

5.1确认方案的起草与审批：

确认方案由检验室起草，确认小组会审，质量负责人批准实施。

5.2确认方案的培训：

确认方案经批准后及实施前，由 Q（主任对本次确认方案实施的

检验人员和相关人员进行培训。

5.3确认方案的修改：

确认方案如需修改，由质量负责人批准实施，在确认报告中体现。

6进度计划

整个确认活动实施时间：

确认时间：

从 年_月—日至 年—月—日；

7确认内容

7.1确认前仪器及材料检查

7.1.1确认前，对下列试验用仪器和材料进行检查

7.1.1.1LC600—梯度高效液相色谱仪

7.1.1.2.BS21S型分析天平

7.1.1.3色谱柱：

7.1.1.4对照品和试剂

7.1.1.5其他一些辅助的玻璃仪器（如容量瓶、移液管等）

7.1.2可接受标准：

仪器和用具经校验且在效期内；对照品、试液、试剂与试药符合验证要求且在效期内；色谱柱、色谱仪使用状态正常。

7.1.3结果记录：

将结果记录在附件1《确认前仪器及材料检查表》 中。

7.2确认及文件检查

7.2.1确认前，对与此次确认相关的文件进行检查

7.2.1.1XX注射液检验操作规程（QC-SOP-04-002

7.2.1.2LC600-梯度型高效液相色谱系统标准操作及维护保养规（QC-SOP-A-12

7.2.1.3LC600—梯度型高效液相色谱系统维护保养及清洁操作规（QC-SOP-A-12

7.2.1.BS21S型分析天平标准操作规程（QC-SOP-A-02

7.2.1.BS21S型分析天平维护保养及清洁标准操作规程（QC-SOP-A-02

7.2.1.6高效液相色谱法标准操作规程 （ ）

7.2.1.7XX注射液HPLC分析方法的验证方案（ ）

7.2.1.9检验方法验证（确认）管理规程（QM--QC-027

7.2.2可接受标准：

所有文件都应为现行版本，且经过批准。

7.2.3结果记录：

将结果记录在附件2《确认前文件检查表》中。

7.3人员培训确认

7.3.1检查并确认所有参与执行确认的人员是否已得到培训，并在培训记录上签字。

7.3.2可接受标准：

验证小组成员均已经过培训，并在培训记录上签字。

7.3.3确认结果：

将确认结果填入附件3《人员培训、参与情况确认记录》中。

7.4确认项目

7.4.1“含量”项确认

741.1重复性/准确度

741.1.1空白的制备：

以磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾10.54g，加水溶解稀释成775ml，用80%磷酸调节pH值2.5）-乙腈（775：

:

225）流动相作为空白液。

7.4.1.1.2对照液制备：

取XX对照品约4.8mg，精密称定，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照液；对照液平行制备 2份，标识为S-1、S-2。

7.4.1.1.3样品制备：

取XX约4.8mg,精密称定，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为样品液。

同方法：

平行制备浓度梯度为标示量80%100%120%勺样品各3份，标识为A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9。

7.4.1.1.4方法描述：

色谱条件与系统适用性试验：

用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾10.54g加水775ml使溶解，用85%磷酸溶液调节pH值至2.5）—乙腈（775:

225）为流动相;检测波长为210nm。

理论塔板数按XX峰计算，应不低于 1500。

XX与相邻峰的分离度应符合规定。

测定法：

精密量取本品1.0ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，再精密量取2.0ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为供试品溶液，取 10卩注入液

相色谱仪，记录色谱图；取XX对照品约 120mg精密称定，置25ml量瓶

中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

同法测定，按外标法计算。

741.1.5测定：

1）取S-1精密量取10卩，注入液相色谱仪记录色谱图，该溶液连续进样 2针。

2）取S-2精密量取10卩，注入液相色谱仪，记录色谱图，该溶液连续进样 2针。

3） 分别精密量取A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9溶液各10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图。

4）计算S-1和S-2的F值，相对标准偏差应W2.0%，按外标法以峰面积计算。

计算A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9溶液的含量。

结果计算

含量（ex）=CF^

ex 为供试品的浓度；

CR 为对照品的浓度；

Ax 为供试品的峰面积；

AR 为对照品的峰面积。

741.1.6可接受标准：

A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9，各浓度样品含量的RSD值应w2.0%。

7.4.1.1.7确认记录和数据

确认数据和结果记录于附件4《含量精密度/准确度确认数据和结果》中。

7.4.1.2专属性

7.4.1.2.1测试方法：

7.4.1.2.1.1取空白液进样1针，记录色谱图。

7.4.1.2.1.2精密量取本品1.0ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，再

精密量取2.0ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为供试品溶液，取 10卩注

入液相色谱仪，进样1针，记录色谱图，获得主成分主峰的保留时间。

7.4.1.2.1.3取XX对照品约120mg精密称定，置25ml量瓶中，加流动

相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

精密量取 20卩，注入液相色谱仪，进样1

针，记录色谱图，获得主成分主峰的保留时间。

7.4.1.2.1.4可接受标准：

溶剂空白相应的峰对样品测定有无明显的干扰； 供试品图谱

中主成分主峰保留时间与对照品图谱中主成分主峰保留时间一致。

74121.5 确认记录和数据

确认数据和结果记录于附件5《专属性确认数据和结果》中。

7.4.2“有关物质”项确认

7.4.2.1专属性

7.4.2.1.1精密量取本品2.0ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，制成每1ml中含3mg的溶液，作为供试品溶液。

7.4.2.1.2对照溶液；精密量取上述供试品溶液1.0ml，置100ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，制成每1ml中含0.03mg的溶液，作为对照溶液。

7.4.2.1.3照含量测定相下的方法试验，取对照溶液10卩1注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为记录仪满量程的10%-25%再取供试品溶液和对照溶液各10ul注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍，

7.4.2.1.4可接受标准：

供试品溶液如显杂质峰，与对照溶液主峰面积比较，单杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的 4.0倍（4.0%）;各杂质峰面积的总和不得大于对照

溶液主峰面积的6.0倍（6.0%）。

忽略不计小于对照溶液主峰面积 10.0%的色谱峰。

7.4.2.1.5确认记录和数据

确认数据和结果记录于附件5《专属性确认数据和结果》中。

7.4.2.2精密度

7.4.2.2.1测试程序

7.4.2.2.1.1

取XX约120mg精密称定，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液D-2。

7.4.2.2.1.2精密量取本品1.0ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，制成每1ml中含0.48mg的溶液，同法配制6份平行样品作为供试品溶液分别为B-1、B-2、B-3、B-4、B-5、B-6。

7.4.2.2.1.3D-1进样2针，D-2进样2针，然后B-1、B-2、B-3、B-4、B-5、B-6分别进1针，记录色谱图。

7.4.2.2.1.4各相邻峰之间的分离度应》1.5

7.4.2.2.1.5以外标法计算B-1、B-2、B-3、B-4、B-5、B-6溶液含量。

计算：

74221.2可接受标准：

6个样品B-1、B-2、B-3、B-4、B-5、B-6溶液主峰的面积。

RSD值应w2.0%。

7.4.2.2.1.3确认记录和数据

确认数据和结果记录于附件6《有关物质及精密度确认数据和结果》中。

7.4.2.3定量限

7.4.2.3.1在上述色谱条件下取XX对照品约 120mg精密称定，置25ml

量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取 1.0ml，置50ml量瓶中，加流

动相稀释至刻度，制成每1ml中含0.03mg的溶液，作为对照溶液。

再逐步稀释置适当的浓度，进样，直至当待测组分的信噪比约为 10倍时（即主成分主峰高为噪音峰高约

10倍时），对应的浓度为该组分的最小定量浓度（Cm），重复进样3次，记录色谱图。

742.3.2计算公式

信噪比=牛严

式中：

hi:

测试溶液中主成分的峰高；

hb：

基线噪声的峰高；

h°:

空白溶液的色谱图中基线的峰高。

742.3.3可接受标准：

上述杂质的定量限应小于产品中各类杂质限度标准的 10%

742.3.4确认记录和数据

确认数据和结果记录于附件7《定量限确认数据和结果》中。

8变更与偏差

若确认方案需要变更，须按方案制定时的审批程序进行批准；若系统发生重大变更，应重新制定确认方案。

确认过程中应严格按照本确认方案执行，出现个别项目不符合标准结果时，应按

######有限公司 文件编号VP—03--39 第11页共20页

偏差管理规程进行处理，有异常事项未解决时，不得进行下一步的工作。

所有偏差、异常情况处