全国艾滋病检测技术规范15960.docx

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全国艾滋病检测技术规范15960

全国艾滋病检测技术规范

NationalGuidelineforDetectionofHIV/AIDS

（2004年版）

中国疾病预防控制中心

二○○四年八月

前言

为贯彻和落实《中国预防与控制艾滋病中长期规划（1898—2010年）》和《中国遏制与防治艾滋病行动计划（2001—2005年）》，加强全国艾滋病检测工作的规范化管理和质量控制，确保检测的准确性和可靠性，保证艾滋病检测实验室安全，及时有效地发现艾滋病病毒（HIV）感染者和上报疫情，在对1997年卫生部颁发的“全国艾滋病检测工作规范”修订的基础上，经卫生部同意于2003年5月由中国疾病预防控制中心颁发了《全国艾滋病检测技术规范（试行）》（下称《规范（试行）》）。

在《规范（试行）》使用期间，卫生部和财政部共同制定了《艾滋病免费自愿咨询检测管理办法（试行）》、《艾滋病及常见机会性感染免、减费药物治疗管理办法（试行）》，卫生部与中医药管理局共同制定了《关于艾滋病抗病毒治疗管理工作的意见》，另外国家还颁布了《实验室生物安全通用要求（GB18489-2004）》和《医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则（试行）》等重要政策法规。

根据我国艾滋病流行形势以及防治工作对实验室检测技术和策略的需求，一年来，在广泛听取各有关管理部门和使用单位意见的同时，中国疾病预防控制中心多次组织全国艾滋病检测实验室审评和技术指导专家组、顾问组及艾滋病专家咨询委员会检测组成员，对《规范（试行）》内容多次进行修改、补充和审定，于2004年8月完成了《全国艾滋病检测技术规范》（下称《规范》）正式版本的最终审定。

为了有效配合艾滋病自愿咨询检测（VCT）和抗病毒治疗工作，本次对《规范（试行）》进行了重要修改和增补，包括：

（1）对原有章节（样品的采集和处理，HIV抗体、抗原检测,HIV核酸定性检测，艾滋病检测实验室安全防护，实验室质量管理与考评，诊断试剂临床质量评估）的修改，使其更加符合目前艾滋病防治工作的需求，更加具有可操作性；

（2）新增有关内容，包括艾滋病的VCT策略，婴幼儿HIV感染诊断和CD4+/CD8+T淋巴细胞检测，HIVRNA定量测定（病毒载量测定），并根据新颁布的文件、法规进一步明确了实验室的生物安全和职业暴露预防。

修订后的《规范》共10章，包括：

样品的采集和处理、HIV抗体检测、HIV核酸定性检测、HIVRNA定量测定（病毒载量测定）、CD4+和CD8+T淋巴细胞检测、HIV抗原检测、艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防、艾滋病实验室质量管理、艾滋病实验室质量考评办法和HIV诊断试剂临床质量评估方案。

本《规范》上报卫生部，经获准由中国疾病预防控制中心发至全国艾滋病实验室及有关单位。

本《规范》将为国家、卫生部与财政部等部委下发的关于艾滋病防治工作的各项政策法规的有效实施提供强有力的技术支持。

感谢对《规范》修订工作做出重要贡献的全国艾滋病检测实验室审评和技术指导专家组和顾问组的专家，感谢对《规范》修订提出重要参考建议的卫生部艾滋病专家咨询委员会检测组专家，感谢全国艾滋病实验室网络的有关管理和技术人员对《规范》提出了许多具有可操作性的建议。

本《规范》自发布之日起实施，同时中止《全国艾滋病检测技术规范（试行）》。

本《规范》适用于全国所有的艾滋病检测实验室。

本《规范》解释权属中国疾病预防控制中心。

目录

第一章样品的采集和处理……………………………………………………………………1

1范围………………………………………………………………………………………1

2规范性引用文件…………………………………………………………………………1

3操作步骤…………………………………………………………………………………1

3.1样品的采集和处理…………………………………………………………………1

3.2样品的保存…………………………………………………………………………1

3.3样品的运送…………………………………………………………………………2

3.4样品的接收…………………………………………………………………………2

第二章HIV抗体检测………………………………………………………………………………3

1范围………………………………………………………………………………………3

2规范性引用文件…………………………………………………………………………3

3HIV抗体检测实验室………………………………………………………………………3

4HIV抗体检测的目的和要点…………………………………………………………3

4.1HIV抗体检测的目的…………………………………………………………………3

4.2HIV抗体检测的要点…………………………………………………………………3

5常规HIV抗体检测的方法和程序…………………………………………………………4

5.1HIV抗体检测筛查试验………………………………………………………………4

5.2HIV抗体确认试验……………………………………………………………………6

6HIV抗体检测的替代策略…………………………………………………………………8

6.1替代策略Ⅰ…………………………………………………………………………9

6.2替代策略Ⅱ…………………………………………………………………………10

6.3替代策略Ⅲ…………………………………………………………………………11

7HIV抗体检测情况季报的时间和程序……………………………………………………12

第三章HIV核酸定性检测…………………………………………………………………………13

1范围………………………………………………………………………………………13

2规范性引用文件…………………………………………………………………………13

3实验室条件………………………………………………………………………………13

3.1实验室功能分区……………………………………………………………………13

3.2人员………………………………………………………………………………14

3.3设施和设备………………………………………………………………………14

4方法和试剂………………………………………………………………………………14

4.1方法………………………………………………………………………………14

4.2试剂………………………………………………………………………………14

5扩增目的基因片段………………………………………………………………………15

5.1样品的采集和处理…………………………………………………………………15

5.2核酸提取……………………………………………………………………………15

5.3逆转录………………………………………………………………………………15

5.4PCR扩增……………………………………………………………………………15

6扩增产物分析及结果报告………………………………………………………………15

6.1常用的扩增产物分析………………………………………………………………15

6.2结果判定和报告……………………………………………………………………15

7实验室管理…………………………………………………………………………………15

7.1生物安全……………………………………………………………………………16

7.2严格执行分区制度…………………………………………………………………16

7.3仪器和材料的专用制度……………………………………………………………16

7.4单向流向制度……………………………………………………………………16

7.5废弃物处理制度……………………………………………………………………16

第四章HIVRNA定量测定（病毒载量测定）………………………………………………17

1范围…………………………………………………………………………………………17

2规范性引用文件……………………………………………………………………………17

3实验室条件…………………………………………………………………………………17

3.1实验室功能分区……………………………………………………………………17

3.2人员…………………………………………………………………………………18

3.3设施和设备…………………………………………………………………………18

4方法和试剂…………………………………………………………………………………18

4.1方法…………………………………………………………………………………18

4.2试剂…………………………………………………………………………………19

5实验室管理…………………………………………………………………………………19

5.1生物安全……………………………………………………………………………19

5.2严格执行分区制度…………………………………………………………………19

5.3仪器和材料的专用制度……………………………………………………………19

5.4单向流向制度………………………………………………………………………19

5.5废弃物处理制度……………………………………………………………………20

5.6质量控制和评价……………………………………………………………………20

6HIV核酸定量检测的意义……………………………………………………………20

6.1辅助诊断…………………………………………………………………………20

6.2早期诊断…………………………………………………………………………20

6.3病程监控…………………………………………………………………………20

6.4指导治疗方案及疗效判定………………………………………………………21

6.5预测疾病进程……………………………………………………………………21

第五章CD4+和CD8+T淋巴细胞检测……………………………………………………………22

1范围………………………………………………………………………………………22

2规范性引用文件………………………………………………………………………22

3实验室条件……………………………………………………………………………22

3.1人员…………………………………………………………………………………22

3.2设施和设备…………………………………………………………………………22

3.3功能分区………………………………………………………………………22

4样品采集、运输和接收…………………………………………………………………22

4.1样品的采集…………………………………………………………………………22

4.2样品运输……………………………………………………………………………23

4.3样品接收……………………………………………………………………………23

5方法………………………………………………………………………………………23

6实验资料的记录…………………………………………………………………………23

7结果报告…………………………………………………………………………………24

8质量控制和评价………………………………………………………………………25

9检测CD4+、CD8+T淋巴细胞的意义…………………………………………………25

第六章HIV抗原检测……………………………………………………………………………26

1范围………………………………………………………………………………………26

2规范性引用文件…………………………………………………………………………26

3实验条件…………………………………………………………………………………26

3.1人员…………………………………………………………………………………26

3.2设施和设备…………………………………………………………………………26

3.3防护用具……………………………………………………………………………26

3.4实验材料……………………………………………………………………………26

4抗原检测………………………………………………………………………………26

4.1适用范围……………………………………………………………………………26

4.2试剂…………………………………………………………………………………26

5HIVP24抗原检测方法……………………………………………………………………27

5.1试验准备……………………………………………………………………………27

5.2试验操作……………………………………………………………………………27

5.3试验结果……………………………………………………………………………27

5.4结果报告和解释……………………………………………………………………27

第七章艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防……………………………………………29

1范围………………………………………………………………………………………29

2规范性引用文件…………………………………………………………………………29

3实验室生物安全级别……………………………………………………………………29

3.1艾滋病血清学检测…………………………………………………………………29

3.2HIV分离、研究……………………………………………………………………29

4实验室安全防护…………………………………………………………………………29

4.1个人防护及保健……………………………………………………………………29

4.2实验室管理要求……………………………………………………………………30

4.3实验室的安全操作…………………………………………………………………31

4.4避免利器的使用……………………………………………………………………32

4.5样品的采集…………………………………………………………………………32

4.6带入和带出实验室的物品…………………………………………………………32

5废弃物处置和消毒………………………………………………………………………33

5.1废弃物处置…………………………………………………………………………33

5.2HIV常用的消毒方法………………………………………………………………33

6实验室意外和事故处理…………………………………………………………………33

6.1意外和事故…………………………………………………………………………33

6.2意外和事故的紧急处理措施………………………………………………………33

6.3意外和事故登记、报告和检测……………………………………………………34

7艾滋病的职业暴露后预防………………………………………………………………34

7.1职业暴露……………………………………………………………………………34

7.2HIV/AIDS的职业暴露后预防………………………………………………………34

8安全药品储备点的建立及管理机制……………………………………………37

第八章艾滋病实验室质量管理……………………………………………………………………39

1范围………………………………………………………………………………………39

2规范性引用文件…………………………………………………………………………39

3质量保证（QA）…………………………………………………………………………39

3.1行政支持……………………………………………………………………………39

3.2实验室规范化建设…………………………………………………………………39

3.3人员培训及其评价…………………………………………………………………39

3.4标本采集、运送和处理……………………………………………………………39

3.5检测方法和试剂的选择……………………………………………………………39

3.6设备维护与校准……………………………………………………………………39

3.7文件和文件管理……………………………………………………………………40

4质量控制（QC）…………………………………………………………………………41

4.1质控血清的制备和保存……………………………………………………………41

4.2质控图的建立及应用………………………………………………………………42

4.3“即刻法”质控……………………………………………………………………44

5质量评价（EQA）…………………………………………………………………………45

5.1评价体系……………………………………………………………………………45

5.2实验室室间质量评价及质量考评…………………………………………………45

第九章艾滋病实验室质量考评办法…………………………………………………………46

1范围………………………………………………………………………………………46

2规范性引用文件…………………………………………………………………………46

3考评目的…………………………………………………………………………………46

4考评对象及组织单位……………………………………………………………………46

5考评内容和方式…………………………………………………………………………46

6考评工作程序……………………………………………………………………………47

7考评结果的判定…………………………………………………………………………48

7.1判分原则……………………………………………………………………………48

7.2常规评分标准………………………………………………………………………48

7.3考评结果的判定……………………………………………………………………48

8考评结果的处理…………………………………………………………………………49

8.1对考评合格实验室的资格认证和鼓励……………………………………………49

8.2对考评成绩较差实验室的整顿措施…………………………………………………49

8.3各参评实验室考评资料汇总及存档…………………………………………………49

第十章HIV诊断试剂临床质量评估方案………………………………………………………50

1范围………………………………………………………………………………………50

2规范性引用文件…………………………………………………………………………50

3评估目的…………………………………………………………………………………50

4评估组织及参加单位……………………………………………………………………50

4.1国家级评估…………………………………………………………………………50

4.2省级评估……………………………………………………………………………50

5评估程序…………………………………………………………………………………50

5.1国家级评估…………………………………………………………………………50

5.2省级评估……………………………………………………………………………51

6评估结果的分析及统计处理……………………………………………………………51

7评估结果的收集、分析、上报和反馈…………………………………………………52

附表1HIV抗体筛查报告…………………………………………………………………53

附表2HIV抗体复检化验单………………………………………………………………54

附表3HIV抗体确认检测报告单…………………………………………………………55

附表4HIV感染流行病学监测疫情报告单………………………………………………56

附表5HIV抗体替代策略检测报告单…………………………………………………57

附表6HIV抗体检测数季报表…………………………………………………………58

附表7艾滋病职业暴露个案登记表………………………………………………………59

附表8艾滋病防治工作人员职业暴露事故汇总表………………………………………62