山东大学生化.docx
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山东大学生化
3.葡萄糖酵解过程的第一步是葡萄糖磷酸化形成6—磷酸葡萄糖，催化这一步反应有两种酶，已糖激酶和葡萄糖激酶。
己糖激酶对葡萄糖的Km值远低于平时细胞内葡萄糖浓度，而葡萄糖激酶的Km值比较接近平时细胞内葡萄糖浓度。
此外，己糖激酶受6—磷酸葡萄糖强烈抑制，而葡萄糖激酶不受6—磷酸葡萄糖的抑制。
上述描述，请你说明两种酶在调节上的特点是什么？
答：
同一种底物的同一种反应，有两种酶存在，但两种酶的活性调节能力不同：
已糖激酶对6-碳糖不加选择，肌肉中的已糖激酶为别构酶，特别受其产物6-磷酸葡萄糖的强烈负反馈抵制；葡萄糖激酶则对D-葡萄糖有专一性，为诱导酶，活性不被6-磷酸葡萄糖抑制，在进食后血糖升高时，可以促使葡萄糖转变成糖原储存起来。
4.真核生物mRNA的3' 末端有一段poly（A），5' 末端有一个"帽子"，"帽子"的结构特点是什么？
答：
真核生物mRNA的5'端有一个帽子结构。
这一结构的最大特点是7-甲基鸟嘌呤核苷和mRNA的5'端通过5'-5'三磷酸酯键相连，另外靠近这一帽子结构的第一和第二核苷酸的2'羟基甲基化；真核mRNA的3'末端有一个多聚A尾，这些结构都是转录后加上去的。
5．试列出tRNA分子上与多肽合成有关的位点。
答：
有4个关键的位点
（1）反密码子
（2）携带氨基酸的3’末端的氨基酸臂
（3）和核糖体上的蛋白质相互作用的二氢鸟嘧啶环和TΨC环
（4）氨酰t-RNA合成酶的结合位点
7．虽然脂肪酸氧化的功能是为ATP的生成提供还原力，但是，肝脏却不能氧化脂肪酸，除非有ATP存在。
为什么？
解答：
脂肪酸要想进入到β－氧化途径。
它们首先必须被活化转变成脂酰辅酶A。
这个过程需要输入ATP。
9．为什么增加草酰乙酸的浓度，会使脂肪酸合成速度加快？
（5分）
答：
草酰乙酸可与乙酰CoA合成柠檬酸，可以作为载体将乙酰CoA从线粒体转运到胞质中，乙酰CoA是合成脂肪酸的原料。
柠檬酸又是乙酰CoA羧化酶的变构激活剂，合成脂肪酸合成所必需的直接原料丙二酸单酰CoA。
10．氨基酰tRNA合成酶的专一性表现在哪里？
该酶至少有几个识别位点？
答：
氨基酰tRNA合成酶的专一性表现在对氨基酸的绝对专一性和对t-RNA的相对专一性。
该酶至少有3个识别位点，即氨基酸的结合位点，AMP的结合位点和t-RNA的结合位点。
12．已知在生鸡蛋清中含有抑制生物素活性的蛋白质，据此，试解释为什么鸡蛋白不宜长期生吃？
答：
长期食用生鸡蛋可影响生物素的活性，生物素是羧化酶的辅基，因此可影响体内的羧化反应。
糖代谢中羧化反应有：
丙酮酸草酰乙酸（羧化），
脂代谢中羧化反应有：
乙酰CoA丙二酰CoA（羧化），
结果可使代谢产生障碍造成疾病。
13.根据报道已研究出了一种安全有效的减肥方法，即采用某种方法将异柠檬酸裂解酶和苹果酸合成酶的基因转移到培养人的肝细胞中，然后再移植给肥胖症患者。
处理后病人可以完全停食，而不会影响健康，并达到预期的减肥效果，简述这样处理的原因是什么？
答：
这是将乙醛酸循环的两种特色的酶引入细胞致使在人体中产生乙醛酸循环，当病人停食时可以通过脂肪分解产生乙酰CoA，再通过乙醛酸循环产生四碳物可使TCA正常为机体功能，结果就是消耗了脂肪，产生减肥效果。
15.细胞分解代谢为合成代谢提供的三类产物是什么？
分别指出EMP，TCA，HMP途径的起始物和终产物分别是什么？
以上途径为细胞合成代谢提供的主要产物是什么？
答：
细胞分解代谢为合成代谢提供代谢中间产物，能源ATP和还原能NADPH+H+.
EMP:
反应物：
葡萄糖；产物：
丙酮酸，ATP，NADPH+H+
TCA：
反应物：
乙酰CoA；产物：
ATP，CO2
HMP：
反应物：
6—磷酸葡萄糖；产物：
NADPH+H+，CO2
EMP为合成代谢提供能量和代谢中间产物
TCA为合成代谢提供能量及代谢中间产物
HMP为合成代谢提供还原力及代谢中间产物
16.动物体内的乙酰CoA不能净转变成糖，而乙酰CoA分子中被标记的碳则可能在糖种出现，原因是什么？
答：
乙酰CoA进入TCA循环后第一轮所释放的CO2来自草酰乙酸，而乙酰CoA的碳掺入在草酰乙酸的分子中，后者通过糖异生可掺入到糖分子中。
20.嘌呤霉素如何影响蛋白质合成的？
答：
嘌呤霉素对合成的抑制作用发生在太监的生成过程中。
由于嘌呤霉素的结构与氨酰—t-RNA3'末端的残基结构相似，肽酰转移酶也促使氨基酸与嘌呤霉素结合，生成肽酰嘌呤霉素复合物，很容易从核糖体上修饰，形成糖蛋白，从而使蛋白质合成过程中断。
22.试解释为什么糖的摄入不足及由于胰岛素分泌不足的糖尿病，均可造成由于体内乙酰CoA的积累而引起的酮症？
答：
糖的摄入量不足会是由糖分解产生的四碳物不足，结果使乙酰CoA不能顺利进入三羧酸循环，造成乙酰CoA积累引起酮症；而糖尿病患者由于糖代谢受影响，而使糖不能正常分解为细胞提供四碳物，同样使乙酰CoA不能顺利进入三羧酸循环，造成二碳物积累，引起酮症。
所不同的是前者是生理性的，后者是病理性的。
23.一种有争议的快速减肥膳食认为敞开吃高蛋白改制类（几乎完全缺糖）既可达到减肥的目的。
但使用这种膳食的人，经常自述呼吸不佳，从代谢的角度给于一个较为合理的解释，说明这种膳食是否对减肥有效？
答：
因为没有糖的摄入，所以三羧酸循环中间产物几乎完全需要从外源蛋白质食物中的生糖氨基酸中产生，但仅靠这一来源的四碳物不足以提供有机体生物合成和维持至正常三羧酸循环的进行，结果产生酮症，呼吸产生异味，丙酮味。
由于膳食中的脂类和体内的脂类构成了人的主要的能源，由于患酮症时脂酸的氧化是不充分的，因此从理论上说，患者必须迅速的消耗体脂以供机体的能量需要。
但实际上是不可能达到的，因为增加脂类和蛋白质的摄入量又意味着为供能必须降解的体脂减少，因此是不可能达到减肥的目的。
25.为什么糖摄入不足的爱斯基摩人，从营养的角度看，食用含奇数碳原子的脂肪酸的脂肪比食用偶数碳原子的脂肪酸的脂肪好？
答：
糖的摄入量不足可引起四碳物不足，食用奇数碳的脂肪酸，经氧化可产生丙酰CoA，后者可合成琥珀酰CoA为细胞提供四碳物，这也就是说它一方面可以为三羧酸循环提供四碳物的来源，另一方面可以由四碳物经酵解逆反应和成糖，为机体提供糖的来源。
26.烟酰胺核苷酸参与氧化性和还原性代谢反应，试问下列细胞内浓度比率应该＝1，<1或>1，并解释理由。
①[NAD+]/[NADH]；②[NADP+]/[NADPH]。
由于NAD+和NADP+在吸引电子的倾向上基本相同的，讨论这两个浓度比率在细胞内如何维持如此不同的比值。
答：
①>1；②<1。
因为NAD+依赖的酶则一般使底物脱氢；而[NAD+]/[NADH]>1倾向于驱动脱氢反应。
与此相同，[NADP+]/[NADPH]<1则倾向于驱动反应向底物还原方向进行。
一、名词解释（20）
1、磷酸己糖支路：
戊糖磷酸途径（pentosephosphareparhway）：
又称为磷酸已糖支路。
是一个葡萄糖-6-磷酸经代谢产生NADPH和核糖-5-磷酸的途径。
该途径包括氧化和非氧化两个阶段，在氧化阶段，葡萄糖-6-磷酸转化为核酮糖-5-磷酸和CO2，并生成两分子NADPH；在非氧化阶段，核酮糖-5-磷酸异构化生成核糖-5-磷酸或转化为酵解的两用人才个中间代谢物果糖-6-磷酸和甘油醛-3-磷酸。
2、糖异生作用：
糖异生作用（gluconenogenesis）：
由简单的非糖前体转变为糖的过程。
糖异生不是糖酵解的简单逆转。
虽然由丙酮酸开始的糖异生利用了糖酵解中的七步进似平衡反应的逆反应，但还必需利用另外四步酵解中不曾出现的酶促反应，绕过酵解过程中不可逆的三个反应。
3、底物水平磷酸化：
4、氧化电子传递链：
由一系列可作为电子载体的酶复合体和辅助因子构成，可将来自还原型辅酶或底物的电子传递给有氧代谢的最终的电子受体分子氧（Ｏ２）。
5、DNA半不连续复制：
DNA复制的一种方式。
每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA，每个分子都是由一条亲代链和一条新合成的链组成。
6、尿素循环：
尿素循环（ureacycle）：
是一个由4步酶促反应组成的，可以将来自氨和天冬氨酸的氮转化为尿素的循环。
循环是发生在脊椎动物的肝脏中的一个代谢循环。
7、冈崎片断：
冈崎片段（Okazakifragment）：
相对比较短的DNA链（大约1000核苷酸残基），是在DNA的滞后链的不连续合成期间生成的片段，这是ReijiOkazaki在DNA合成实验中添加放射性的脱氧核苷酸前体观察到的。
8、错配修复：
错配修复（mismatchrepair）：
在含有错配碱基的DNA分子中，使正常核苷酸序列恢复的修复方式。
这种修复方式的过程是：
识别出下正确地链，切除掉不正确链的部分，然后通过DNA聚合酶和DNA连接酶的作用，合成正确配对的双链DNA。
9、SD序列：
细菌的mRNA通常含有一段富含嘌呤碱基的序列，它们通常在起始AUG序列上游10个碱基左右的位置，能与细菌16S核糖体RNA3‘端的7个嘧啶碱基进行进行碱基性互补性的识别，以帮助从起始AUG处开始翻译，是由Shine和Dalgarno在70年代发现，称为SD序列。
10、魔斑：
任何一种氨基酸缺乏，或突变导致任何一种氨基酰-tRNA合成酶的失活都将引起严谨控制生长代谢的反应。
此时细胞内出现两种不同寻常的核苷酸，电泳时出现2个特殊的斑点，称之为魔点，为ppGpp,pppGpp.
二、填空（20）
1.脂肪酸生成的直接原料是丙二酸单酰COA。
2.生物体内能量的通用载体是ATP，哺乳动物中能量的贮存物资是磷酸肌酸。
3.一碳单位的载体主要是四氢叶酸，在脂肪酸生物合成中,酰基的载体为ACP。
4.呼吸链电子传递速度受_ADP浓度控制的现象称为呼吸控制。
5.糖酵解的末端产物是乳酸，HMP途径的氧化阶段的终产物是5-Pi-核酮糖。
6.生物体ATP的生成方式有底物水平和氧化磷酸化两种水平。
7.生物合成过程需要的还原能（力）通常是指NADPH+H+，在生物氧化中产生的还原型载体主要是NADH+H+。
8.脂肪酸beta-氧化中活性脂肪酸的形式是脂酰-COA；在蛋白质生物合成中，活化氨基酸的形式是氨酰-tRNA。
9.光合作用主要包括光反应和暗反应两个反应过程。
10.设一密码子为5’abc3’，其相应反密码子为5’xyz3’，两者识别时的配对方式是________。
11.Beta-氧化生成的beta-羟脂酰CoA的立体异构是D型，而脂肪酸合成过程中生成的b-羟脂酰ACP的立体异构是L型。
12.提出三羧酸循环的生化学家是Krebs，它还提出了尿素循环。
13．Cori循环是指乳酸氧化为丙酮酸参加糖异生为葡萄糖,进入血液运输至肌肉中。
14.酮体是指乙酰乙酸，丙酮酸和beta-羟丁酸。
15．嘧啶核苷酸的合成是从安家开始氨甲酰磷酸，首先合成出具有嘧啶环结构的化合物是乳清酸。
16．三羧酸循环中调控酶有柠檬酸合成酶，异柠檬酸脱氢酶，alpha-酮戊二酸脱氢酶。
17．核苷三磷酸在代谢中起着重要的作用。
ATP是能量和磷酸基团转移的重要物质，_UTP参与单糖的转变和多糖合成,CTP参与卵磷脂的合成，GTP供给肽链合成时所需要的能量。
18．操纵子是指是由一个或多个相关基因以及调控他们转录的操纵因子启动子序列组成的基因表达单位。
19．内含子是指在转录后的加工中，从最初的转录产物除去的内部的核苷酸序列。
术语内含子也指编码相应RNA外显子的DNA中的区域。
20.在灵长类动物中,嘌呤分解代谢的最终产物是尿酸。
三、选择（15）
1、一个tRNA的反密码子是IGC，它可识别的密码是：
C
A．CCG，B.UCGC.GCAD.GCG
2、鸟氨酸循环中，合成尿素的第二分子氨来源于：
B
A．游离氨，B.天门冬氨酸C.谷氨酰胺D.氨甲酰磷酸
3、有关氨基酰-tRNA合成酶的说明，其中错误的是：
C
A．每种氨基酸至少有一种相应的合成酶，B.反应过程中由ATP提供两个高能键C.该酶对氨基酸和tRNA一样具有绝对专一性，D.催化氨基酸的羧基与相应的tRNA的3’-末端腺苷酸3’-OH之间形成酯键。
4、当将氨基喋呤加入到正在生长的细胞培养基时，下列哪一种生物合成过程将首先被抑制：
A．糖的合成，B.脂类的合成C.DNA的合成D.RNA的合成
5、由肝脏脂肪酸合成酶复合物纯制剂和乙酰CoA及标记的COOHCH2*CO~SCoA和NADPH+H+一起保温后，分离软脂酸预测其软脂酸中*C14的分布情况是：
A．所有的奇数碳原子被标记，B.除C15外的所有的奇数碳原子被标记，C.除C16外的所有的偶数碳原子被标记，D.没有一个碳原子被标记
6、尿素循环的限速步骤是氨甲酰磷酸合成酶催化的反应，该酶的变构激活剂是：
B
A．鸟氨酸，B.N-乙酰谷氨酸C.AspD.谷氨酰胺
7、下列物质在体内氧化产生ATP最多的是：
C.
A．甘油，B.丙酮酸C.谷氨酸D.乳酸
8、在呼吸链氧化磷酸化过程中，在寡霉素存在下，加入二硝基酚将：
B
A．阻断电子传递，B.允许电子传递C.阻断氧化磷酸化D.允许氧化磷酸化
9、dTMP合成的直接前体是：
A
A．dUMP，B.TMPC.TDPD.dUDP
10、关于DNA复制的叙述，其中错误的是：
B
A．有DNA指导的RNA聚酶参加，B.有RNA指导的DNA聚合酶参加，C.为半保留复制D.有DNA指导的DNA聚合酶参加
11、砷酸盐对于糖酵解的影响主要表现在：
D
A．抑制醛缩酶，B.抑制丙酮酸激酶C.使糖酵解终止D.使糖酵解过程无净ATP生成
12、下列各组物质含相同的碳原子数，当彻底被氧化时生成ATP数最多的是：
C
A．3个葡萄糖，B.6个丙酮酸C.1个硬脂酸D.3个柠檬酸
13、关于糖原合成有错误的是：
D
A．糖原合成有焦磷酸生成，B.从1-p-G合成糖原要消耗高能磷酸键C.葡萄糖的活性供体是UDP-GD.1，6-葡糖苷酶催化形成分支
14、丙酮酸羧化酶的活性所依赖的变构激活剂是：
D
A．异柠檬酸，B.柠檬酸C.ATPD.乙酰CoA
生物化学试题答案
（2）
一、名词解释（20）
1、乙醛酸循环（2分）
是某些植物，细菌和酵母中柠檬酸循环的修改形式，通过该循环可以收乙乙酰CoA经草酰乙酸净生成葡萄糖。
乙醛酸循环绕过了柠檬酸循环中生成两个CO2的步骤。
2、无效循环（futilecycle）（2分）
也称为底物循环。
一对酶催化的循环反应，该循环通过ATP的水解导致热能的释放。
Eg葡萄糖+ATP=葡萄糖6-磷酸+ADP与葡萄糖6-磷酸+H2O=葡萄糖+Pi反应组成的循环反应，其净反应实际上是ＡＴＰ＋Ｈ２Ｏ＝ＡＤＰ＋Ｐi。
3、糖异生作用（2分）
由简单的非糖前体转变为糖的过程。
糖异生不是糖酵解的简单逆转。
虽然由丙酮酸开始的糖异生利用了糖酵解中的七步进似平衡反应的逆反应，但还必需利用另外四步酵解中不曾出现的酶促反应，绕过酵解过程中不可逆的三个反应
4、生糖生酮氨基酸：
既可以转变成糖或酯的氨基酸。
5、启动子：
DNA分子中RNA聚合酶能够结合并导致转录起始的序列。
6、错配修复（mismatchrepair）（2分）
在含有错配碱基的DNA分子中，使正常核苷酸序列恢复的修复方式。
这种修复方式的过程是：
识别出下正确地链，切除掉不正确链的部分，然后通过DNA聚合酶和DNA连接酶的作用，合成正确配对的双链DNA。
7、外显子（exon）（2分）
既存在于最初的转录产物中，也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。
术语外显子也指编码相应RNA内含子的DNA中的区域。
8、（密码子）摆动（wobble）（2分）
处于密码子3ˊ端的碱基与之互补的反密码子5ˊ端的碱基（也称为摆动位置），例如I可以与密码子上3ˊ端的U，C和A配对。
由于存在摆动现象，所以使得一个tRNA反密码子可以和一个以上的mRAN密码子结合。
9、魔点：
（2分）
任何一种氨基酸缺乏，或突变导致任何一种氨基酰-tRNA合成酶的失活都将引起严谨控制生长代谢的反应。
此时细胞内出现两种不同寻常的核苷酸，电泳时出现2个特殊的斑点，称之为魔点。
为ppGpp,pppGpp.
10、Q循环：
（2分）
在电子传递链中，2个氢醌（QH2）分别将一个电子传递给2个细胞色素C，经过细胞色素Bl,Bh等参与的循环反应，生成一个氢醌和醌的循环。
二、填空题（20分）
1．蛋白激酶对糖代谢的调节在于调节糖原磷酸化酶与糖原合成酶。
（1分）
2.由半乳糖合成糖原时，半乳糖-1-磷酸先与UTP反应，生成UDP-Gal，然后在差向异构酶的催化下转变成UDPG再参与糖原合成。
（2分）
3.糖原的分解是从非还原末端开始，由糖原磷酸化酶催化生成1-磷酸-葡萄糖。
4．酮体是指乙酰乙酸，b-羟基丁酸，丙酮。
（2分）
5．核苷三磷酸在代谢中起着重要的作用。
ATP是能量和磷酸基团转移的重要物质，UTP参与单糖的转变和多糖的合成CTP参与卵磷脂的合成，GTP供给肽链合成时所需要的能量（1分）
6．在糖异生作用中由丙酮酸生成磷酸烯醇式丙酮酸，在线粒体内丙酮酸生成草酰乙酸是丙酮酸羧化酶催化的，同时要消耗1个ATP；然后在细胞质内经磷酸烯醇丙酮酸羧化酶催化，生成磷酸烯醇丙酮酸，同时消耗1个GTP。
（2分）
7．提出三羧酸循环的生化学家是Krebs，它还提出了尿素循环。
（1分）
8．三羧酸循环中调控酶有柠檬酸合成酶，异柠檬酸脱氢酶，a-酮戊二酸脱氢酶.（1分）
9．氨基酸转氨酸的辅酶是磷酸吡多醛，体内一碳单位的载体是四氢叶酸（1分）
10．动物细胞中TCA循环的中间物不能从乙酰CoA来净合成，但这些中间物可以通过丙酮酸与二氧化碳化合成生成，此反应需要生物素辅基参与。
（1分）
11．原核生物基因调控的操纵子模型，其学说的最根本的前提是基因有两种类型，即调节和结构基因（1分）
12．以DNA为模板的转录是不对称转录，即一个特殊结构基因只能从一条链转录生成mRNA。
（1分）
13．大肠杆菌RNA聚合酶全酶是由α2ββ'σ亚基组成，其中核心酶是指α2ββ。
（1分）
14．Beta-氧化生成的beta-羟脂酰CoA的立体异构是L型，而脂肪酸合成过程中生成的b-羟脂酰ACP的立体异构是D型。
（1分）
15．嘧啶核苷酸的合成是从氨甲酰磷酸开始，首先合成出具有嘧啶环结构的化合物是乳清酸。
（1分）
16．葡萄糖进入EMP和HMP的趋势主要取决于细胞对NADPH和ATP两者相对需要量。
（1分）
17．在细胞质中脂肪酸合成酶系作用产生的最终产物是软脂酸，直接提供给该酶系的碳源物质是丙二酰CoA。
（1分）
三、判断题（20）
1．三羧酸循环酶系全都位于线粒体基质。
（1分）
2．三羧酸循环是糖、脂肪和氨基酸氧化生能的最终共同通路。
（1分）
3．氨基酸的分解代谢总是先脱去氨基，非氧化脱氨基作用普遍存在于动植物中。
（1分）
4．苯丙酮尿症是先天性氨基酸代谢缺陷病，患者缺乏苯丙氨酸羟化酶或二氢喋定还原酶，造成血或尿中苯丙氨酸和苯丙酮酸增多。
（1分）
5．哺乳动物无氧下不能存活，因为葡萄糖酵酶不能合成ATP。
（1分）
6．氨基酸的碳骨架进行氧化分解时，先要形成能够进入三羧酸循环的化合物。
（1分）
7．向线粒体悬浮液中加入琥珀酸，磷酸，DNP（二硝基苯酚）一起保温，若向悬液液中加入ADP，则耗氧量明显增加。
（1分）
8．在大肠杆菌中，DNA连接酶催化的反应需要NAD+作为电子供体。
（1分）
9．丙酮酸羧化酶的激活，意味着TCA循环中的一种或多种代谢物离开循环用于合成，或循环代谢能力增强。
（1分）
10．脂肪酸合成所需的碳源完全来自乙酰CoA,它可以通过酰基载体蛋白穿过线粒体内膜而进入胞浆。
（1分）
11．在一厌氧细菌的培养物中若添加F-，将导致细菌细胞中P~烯醇式丙酮酸/2-P-甘油酸的比率很快降低。
（1分）
12．代谢物降解物基因活化蛋白（CAP）的作用是与cAMP形成复合物后，再与启动基因结合，促进转录过程。
（1分）
13．在所有已知的DNA聚合酶中，只有RNA肿瘤病毒中依赖RNA的DNA聚合酶不需要引物。
（1分）
14．SSB（单链结合蛋白）能降低DNA的Tm值。
（1分）
15．寡霉素抑制ATP的合成，同时意味着氧的利用被停止。
（1分）
16．在大多数生物中，氨基酸的a-氨基转变成NH3是一个氧化过程，通常需要FAD或NAD+作为氧化剂。
（1分）
17．磷酸戊糖途径以降解葡萄糖作为代价，为机体提供ATP与还原能力。
（1分）
18．嘌呤霉素与氨酰-tRNA结构相似，通过以共价方式掺入到肽链的N-末端，从而抑制蛋白质的合成。
（1分）
19．已糖激酶和葡萄糖激酶两者都可催化葡萄糖生成6-P-G，但两者相比，前者对葡萄糖的专一性较差，Km较小。
（1分）
20．乙醛酸循环是生物体中普遍存在的一条循环途径，它是TCA循环的辅助途径之一。
（1分）
1+，2+，3-，4+，5-，6+，7-，8-，9+，10-,11+,12+,13-，14+，15+，16+，17-，18-，19+，20-
6、1968年岗崎利用了脉冲标记实验和脉冲追踪实验证明了冈崎片段的存在。
脉冲标记实验:
3HdT加入E.coli培养基中，30SEC杀死E.coli，提取DNA进行碱基分析。
脉冲追踪实验是将E.coli放于3Hdt中30SEC后，它即转移到无放射性dt中数分钟，提取DNA进行碱基分析。
实验结果表明:
脉冲标记的片段大小为1000-2000个核苷酸.按半保留合成模式只应有一半新合成的DNA有岗奇片断。
结果测得远大于这一半的量，似乎全是不连续的，也就是说，无法确两条链是否一条链连续复制，而另一条链不连续的。
产生的原因是什么？
以后的那些试验证明了DNA的复制是半保留复制的？
（5分）
答案：
原因是细胞内有低浓度的dUTP，DNA聚合酶对其分辨率不高，产生的脲嘧啶碱基会迅速的被脲嘧啶-N-糖苷酶切除，接着进行核苷酸切除修复，这是暂时导致在DNA上产生一个断裂。
在DNA聚合酶I和DNAligase完成修复之前分离到的DNA片段是一段一段的。
在尿嘧啶N-糖基化酶缺陷的大肠杆菌突变体中只有约一半的新合成的DNA是一段一段的原因是其缺失这种校正功能。
以下试验证明了DNA的复制是半保留复制的：
密度梯度离心、放射自显影等试验。
8．从什么意义上说可以将砷酸盐称为底物水平磷酸化作用的解偶联剂？
（5分）
因为砷酸中间体自发水解时，失去砷酸而没有把能量转移到ATP中，其结果是3-P-甘油醛不断氧化生成3-甘油酸而没有ATP生成，这就是一种解偶联效应。
9．已知在生鸡蛋清中含有抑制生物素活性的蛋白质，据此，试解释为什么鸡蛋白不宜长期生吃？
（5分）
长期食用生鸡蛋可影响生物素的活性，生物素是羧化酶的辅基，因此可影响体内的羧化反应。
糖代谢中羧化反应有：
丙酮酸草酰乙酸（羧化），脂代谢中羧化反应有：
乙酰CoA丙二酰CoA（羧化），结果可使代谢产生障碍造成疾病。
10．简要说明化学渗透偶联学说的要点及存在的主要问题（5分）
化学渗透偶联学说的要点基于以下两个基本事实
（1）线粒体内膜的完整，
（2）H+对线粒体内膜的不通透性。
于是提出了当电子传递的结果将H+从线粒体内膜基质“泵”到膜外液体中，于是形成了一个跨膜的H+梯度（浓度和电位），这一梯度中所含的渗透能，正是促使ATP生成所需要的能量。
主要的问题是复合物IV氧化还原过程中，H的泵出问题。
11．列出生物化学下册中学过的需要穿过线粒体膜的生化代谢反应：
NADH、丙酮酸、乙酰CoA、脂酰CoA、ADP/ATP，这些物质是如何穿过线粒体膜的？
NADH
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