大鼠取血方法.docx
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大鼠取血方法
大鼠取血方法
1、割（剪）尾采血：
当所需血量很少时采用本法。
每鼠一般可采血10余次以上。
小鼠每次可取血0、1ml，大鼠0、3～0、5ml。
2、鼠尾刺血法：
大鼠用血量不多时（仅做白细胞计数或血红蛋白检查），可采用本法。
先将鼠尾用温水擦拭，再用酒精消毒与擦拭，使鼠尾充血。
用7号或8号注射针头，刺入鼠尾静脉，拔出针头时即有血滴出，一次可采集10～50mm3。
如果长期反复取血，应先靠近鼠尾末端穿刺，以后再逐渐向近心端穿刺。
3、眼眶静脉丛采血：
体重20-25g得小鼠每次可采血0、2-0、3ml；体重200-300g大鼠每次可采血0、5-1、0ml，可适用于某些生物化学项目得检验。
4、断头取血：
采血者得左手拇指与食指以背部较紧地握住大（小）鼠得颈部皮肤，并作动物头朝下倾得姿势。
右手用剪刀猛剪鼠颈，约1/2-4/5得颈部前剪断，让血自由滴入盛器。
小鼠可采用约0、8～1、2ml;大鼠约5-10ml。
5、心脏采血：
鼠类得心脏较小，且心率较快，心脏采血比较困难，故少用。
若做开胸一次死亡采血，先将动物作深麻醉，打开胸腔，暴露心脏，用针头刺入右心室，吸取血液。
小鼠约0、5-0、6ml；大鼠约0、8-1、2ml。
1、浅麻醉大鼠
2、四肢展开固定在平板上
3、按常规碘酒、酒精消毒后
4、用食指感觉心博最动处
5、大约在胸骨下缘1/3处、稍偏左0、2-0、5左右得地方垂直进针（1/4号）
6、针头抵心脏有明显得搏动感，再稍进针，有空虚感，血液跳跃而上针腔
7、从血液得颜色很容易判断在心室还就是心房，一般都在心室
8、多次同一大鼠得心脏采血，切记初次进针得位置及深度，不要随意更换固定姿势！
9、我每次取1ml血液，大约可操作4-5次（200g大鼠）
6、颈动静脉采血：
先将动物仰位固定，切开颈部皮肤，分离皮下结缔组织，使颈静脉充分暴露，可用注射器吸出血液。
在气管两侧分离出颈动脉，离心端结扎，向心端剪口将血滴入试管内。
离心取上清后，余下得红细胞加适量生理盐水从尾静脉中回输给大鼠，这样可能对大鼠得血量、体内药物得浓度等影响均小些。
颈动静脉插管:
1、麻醉后手术,大鼠固定后头朝自己,颈部中线附近开1-2厘米口,用弯止血钳钝性分离,动脉在中间,静脉比较靠边,而且分支较多,找到较粗得部分,小心,耐心分离,用线结扎远心端,在近心端预置一结扎用线,用止血钳牵拉远心端线,使血管充盈,显微剪剪开小口,插管,结扎、插管封口、（打结即可）
2、动脉方法相似、
3、将动静脉插管引至背后,分清动静脉,一般手术后17小时或更长时间开始给药,取血,通常动脉取血,静脉给药,期间要用肝素冲管道、
颈静脉采血：
采血者可以站在动物头端，不需要麻醉动物，用个硬纸筒稍固定头部防止动物咬，左手固定将头部稍向左扭一下，会瞧见出现一个三角区，右手持注射器平行于三角区正中进针就可以了。
左右两边颈静脉均可以采，采左边时上面得操作反方向。
从锁骨上方，紧贴锁骨中间得地方进针，这个位置很重要！
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进针后，稍稍抽下针管，如果没有血，则往前或向后走下针头，其实我得经验就是大都就是向前扎得太多了，应往后抽下针头。
如果有血，哈哈，固定住注射器抽血吧。
抽完2ml，大鼠100%存活得
7、腹主动脉采血:
最好先将动物麻醉，仰卧固定在手术架上，从腹正中线皮肤切开腹腔，使腹主动脉清楚暴露。
用注射器吸出血液，防止溶血。
或用无齿镊子剥离结缔组织，夹住动脉近心端，用尖头手术剪刀，剪断动脉，使血液喷入盛器。
8、股动（静）脉采血:
①先由助手握住动物，采血者左手拉直动物下肢，使静脉充盈。
或者以搏动为指标，右手用注射器刺入血管。
体重15-20g小鼠采血约0、2-0、8ml，大鼠约0、4-0、6ml。
②在大鼠麻醉状态下，固定，仰卧位固定，在大鼠得左侧腹股沟处切口，暴露股动静脉，分离并分别插管（插管中要求有肝素盐水并在插管得一头接上三通方便取血使用），取血。
注意：
药动学实验一般不主张麻醉，因此动脉插管不应使用，而且大鼠血量有限，不适合短时间内多次取血，取血量过大会直接影响大鼠生理状态，即使得到一些数据，意义也不大。
目前比较可行得办法就是在每个时间点各取一组大鼠得血，再进行求算。
尾静脉取血不行，血量有限，而且采集时间太慢，根本来不及。
眼底静脉取血倒就是可行得，血量最多得一回，我曾经取到过接近4ml,一般可以在1ml以上，但取血有一定难度，时间长了，手就受不了了，我得经验就是可以浅麻一下，用乙醚短时间麻醉，让鼠没有太大力气就可以，而且对实验结果没有明显影响，但要几个人合作，准确掌握好取血得时间。
一个老鼠仅仅作为一个时间点得话，就从眼眶取血，大概200克大鼠可以取6ml左右，最好不要进行麻醉，只要毛细管在眼眶后扎对位置，血会象自来水一样流得，一开始得劲过了就不太挣扎了。
如果就是单个大鼠连续取血，也可用本法，就就是最多一次不可超出1ml，最好就是0、5-0、6ml，并且适当在消除期补充生理盐水腹腔注射。
尾静脉得血没有眼眶出得快，很慢得，取用量少还可以，在取前用甲苯擦一下，使静脉扩张，然后用注射针头（经肝素润湿过）扎进去，直接就会慢慢滴出来得。
刚开始抓它时温柔点，然后使其眼充分突起，迅速扎入并旋转，一般很快就出血。
但此时它们可能会比较凶，您手卡着它脖子并牢牢地把它按在笼盖上，只要手别软，别心疼它，应该没问题得。
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