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待产妇与不同疾病患者血清蛋白电泳图谱的鉴别分析

待产妇与不同疾病患者血清蛋白电泳图谱的鉴别分析①

钟兰林瑜蔡玉玲齐亚灵②徐立③方艳秋②谭岩

海南省人民医院检验科570311

中国图书分类号R466文献标识码A文章编号1001-4411(2007)34-4927-04

【摘要】目的:

了解待产妇和肾病型、慢性肝损伤型及异常浆细胞克隆增殖型患者血清蛋白电泳图谱特征。

方法:

采用国产全自动琼脂糖电泳系统对待产妇女和肾病、肝病、多发性骨髓瘤等患者新鲜血清标本进行血清蛋白电泳分析。

结果:

待产妇血清白蛋白的相对值、γ球蛋白的相对值降低,而α2β球蛋白相对增加,不同生理条件或不同疾病下其血清蛋白组分变化均不同。

结论:

新鲜血清蛋白质经电泳后,可精确地显示并定量不同生理及病理条件下血清蛋白成分的变化。

【关键词】待产妇患者电泳图谱鉴别分析

Identificationofserumelectrophoretogransbetweenexpectantmotherandotherpataients

ZHONGLan,lINYu,CAlYu—Ling,eta1.ClinicalLaboratory,HainanProvincePeopleHospital,Haikou570311,Hainan.China

[Abstract]Objective:

Tounderstandthedifferencebetweenexpectantmothersandotherpatientsinserumelectrophoretogram.Methods:

Toanalysisserumelectrophoretogramsofexpectantmothersandotherpatientswithnephronia,hepatopathy.mutiplemyelomaerebyagaroseelectrophoresis.Results:

Inexpectantmothers,therelativemagnitudesofalbuminandγ一globulinweredecreased.buttheseofa2一globulinandβ一globulinwereincreased.Theconstituentsofserumproteinweredifferentinpatientphysiologi-calcondition.Conclusion:

TheserumproteinschangetopeopleindifferentphysiologicalconditionCanbeshowedandquantitatedthroughserumelectrophoretogram.

[Keywords]Expectantmother;Patient;Electrophoretogram;Identification

血清蛋白质是一类种类繁多、组成复杂、功能广泛的化合物,在病理和生理情况下,各种血清蛋白的浓度和组分间的比例可发生改变。

血清蛋白电泳就是根据血清中各组分蛋白质分子量的不同,将各组分蛋白质分离开,分子大的泳动慢、分子小的泳动快,依次分为白蛋白、α1-球蛋白、a2一球蛋白、β一球蛋白和γ一球蛋白5个带区[1],每个区带都含有一种或多种蛋白成分,各区带的变化与疾病间有密切关系。

新鲜血清经电泳可精确地显示并定量妊娠生理及病理条件下血清蛋白成分的特定变化。

我们使用国产SH一2020全自动琼脂糖电泳系统对待产妇和患者血清蛋白电泳特征图谱进行比较分析和鉴别,以供临床医师和检验同行参考。

1资料与方法

1.1标本来源均为待产妇及我院住院病人,育龄未孕96例,年龄21—35岁,平均年龄26.3岁;待产妇72例,年龄23~33岁,平均年龄27.8岁;肾病48例,年龄11~74岁,平均年龄43.1岁,男女比例数27:

21;肝病48例,年龄15~78岁,平均年龄49.2岁,男女比例37:

11;多发性骨髓瘤48例,年龄32—82岁,平均年龄54.2岁,男女比例27:

21。

1.2仪器和试剂北京金桑特医用仪器有限公司生产的SH一2020全自动琼脂糖电泳系统,STSMScan操作系统。

EPSON4870扫描仪,SH一2021血清蛋白电泳凝胶板,固定液、染色液和脱色液按厂家说明配制。

1.3检测方法按照试验条件分别设定参数后,加标本血清。

当血样槽、点样器、凝胶板等准备就绪后按确认键电泳开始。

采样、点样、电泳、固定、烘干、染色、脱色、清洗、吹干等工序将自动完成。

染色结束,将凝胶板取出,进行扫描定量。

2结果

2.1健康非孕育龄妇女血清蛋白电泳分析健康非孕育龄妇女血清蛋白电泳(serumproteinelectrophoresis)后可以很快地分为白蛋白、a1一球蛋白、α2一球蛋白、β一球蛋白、γ一球蛋白5个区带(参见图1);利用血清蛋白电泳谱带光密度测定各区带浓度的百分比(%)。

也可将各区带百分浓度与血清总蛋白浓度相乘以绝对浓度(g/L)表示。

见表1。

表l健康非孕育龄妇女血清蛋白电泳结果

(血清总蛋白浓度:

76g/L)

血清蛋白质

区带名称

蛋白组分(%)

参考范围(%)

白蛋白

a1一球蛋白

α2一球蛋白

β一球蛋白

γ一球蛋白

Albumin

Alpha1

Alpha2

Beta

Gamma

63.93

4.02

6.89

9.37

13.79

52.3~66.0

3.7~7.0

6.3~11.7

7.8~14.3

11.1~20.0

2.2待产妇血清蛋白电泳图谱待产妇血清蛋白电泳图谱以白蛋白、γ一球蛋白及A/G比值降低,α2、β一球蛋白升高为主要特征,这是由于妊娠晚期待产妇血中氨基酸大多输给胎儿、胎盘、子宫等组织供生长发育使用,待产妇血容量逐渐增加,血液稀释;肾小球滤过率增加,使白蛋白、微球蛋白等小分子物质排出增加[2]。

同时图2、图3、表2显示α2、β球蛋白增加而γ球蛋白降低。

表2待产妇血清蛋白电泳结果

血清蛋白质

区带名称

蛋白组分(%)

参考范围(%)

图2

图3

白蛋白

a1一球蛋白

α2一球蛋白

β一球蛋白

γ一球蛋白

Albumin

Alpha1

Alpha2

Beta

Gamma

52.09

5.14.200817.8

16.96

8.01

60.46

2.82

12.55

14.44

9.73

52.3~66.0

3.7~7.0

6.3~11.7

7.8~14.3

11.1~20.0

1血清总蛋白浓度62.3g/L;②血清总蛋白浓度60.Og/L

2.3肾病型患者血清蛋白电泳分析肾病综合征患者血清蛋白电泳图型主要特征是Alb明显降低,α1-球蛋白可轻度增加,α2-球蛋白明显增加。

由于白蛋白等小分子蛋白选择性的漏出,α2-球蛋白及IgM脂蛋白等大分子残留在血中致使白蛋白比例减少,α2-球蛋白明显增加,β及γ-球蛋白亦可下降。

慢性肾炎急性期α2-球蛋白可增高,有时合并γ-球蛋白轻度增高,白蛋白/球蛋白(A/G)明显下降,可出现严重倒置[3]。

肾病型与待产妇蛋白组分的相同点是低蛋白血症,α2升高;主要区别点是待产妇血清蛋白组分β-球蛋白升高,γ-球蛋白降低,肾病型血清蛋白组分β-球蛋白和γ-球蛋白未见典型改变。

见图4、图5及表3。

表3肾病综合征患者血清虽自电泳结果

血清蛋白质

区带名称

蛋白组分(%)

参考范围(%)

图4

图5

白蛋白

a1一球蛋白

α2一球蛋白

β一球蛋白

γ一球蛋白

Albumin

Alpha1

Alpha2

Beta

Gamma

28.43

3.18

38.66

14.97

14.76

50.9

9.42

15.8

6.39

17.49

52.3~66.0

3.7~7.0

6.3~11.7

7.8~14.3

11.1~20.0

①血清总蛋白浓度55g/L;②血清总蛋白浓度50g/L

2.4慢性肝损害型患者血清电泳分析慢性肝炎转化为肝硬化后白蛋白显著下降,γ一球蛋白显著上升,表现为肝硬化所特有的慢性肝损害型蛋白电泳图谱。

随着肝病的发展,血清中白蛋白的含量逐渐下降,γ一球蛋白的含量逐渐上升[4]。

肝硬化患者由于lgA的增加,γ一球蛋白明显增加并出现快γ球蛋白,使得β和γ球蛋白连接在一起不易分开,可见β~γ桥,这是肝硬化血清蛋白电泳图谱的特征。

待产妇与慢性肝损伤型血清蛋白组分变化的共同点是白蛋白降低,主要区别点是待产妇血清蛋白组分γ一球蛋白未见升高反而出现γ一球蛋白降低。

见图6、图7及表4。

2.5多发性骨髓瘤(单克隆免疫球蛋白血症)患者血清蛋白电泳分析发生浆细胞病时,异常浆细胞克隆增殖,产生大量单克隆免疫球蛋白或其轻链和重链片段,病人血清或尿液中可出现结构单一的M蛋白在蛋白电泳时呈现出一个色泽深染的窄区带,此区带较多出现在γ区或β区,偶见于α区[5]。

M带是浆细胞克隆增殖的区带,这是与其他生理或病理性蛋白组分改变的鉴别特征。

见图8、图9及表5。

表4慢性肝炎患者血清强白电泳结果

血清蛋白质

区带名称

蛋白组分(%)

参考范围(%)

图6

图7

白蛋白

a1一球蛋白

α2一球蛋白

β一球蛋白

γ一球蛋白

Albumin

Alpha1

Alpha2

Beta

Gamma

47.4

1.22

3.91

5.01

42.46

39.3

6.97

8.71

11.27

33.12

52.3~66.0

3.7~7.0

6.3~11.7

7.8~14.3

11.1~20.0

血清总蛋白浓度77g/L:

②血清总蛋白浓度50.2g/I

表5多发性骨髓瘤lgG型患者血清蛋白电泳结果

血清蛋白质

区带名称

蛋白组分(%)

参考范围(%)

图8

图9

白蛋白

a1一球蛋白

α2一球蛋白

β一球蛋白

γ一球蛋白

Albumin

Alpha1

Alpha2

Beta

Gamma

34.92

1.39

8.65

7.4

47.64

50.61

2.24

2.8

44.21

0.14

52.3~66.0

3.7~7.0

6.3~11.7

7.8~14.3

11.1~20.0

血清总蛋白浓度100.3g/L;②血清总蛋白浓度88.8g/L

3讨论

血清蛋白区带电泳是临床实验室中的常用技术之一,可定性或半定量检测正常或异常蛋白区带。

传统的电泳方法,如醋酸纤维薄膜电泳,它是用醋酸纤维薄膜作为分离介质,电泳后进行血清蛋白成分的定量。

有文献报道[6、7],琼脂糖作为蛋白电泳的分离相比醋酸纤维薄膜在检测血清蛋白质方面有更好的分辨率,全自动琼脂糖电泳系统不仅可以很好地分离蛋白区带。

通过扫描确定各区带蛋白的百分含量,同时结合血清总蛋白值,则可对其进行定量[8,9]。

不同疾病在不同病程及不同生理条件下其血清蛋白成分变化均不同。

琼脂糖凝胶电泳(AGE)在临床化学实验室得到日益广泛的应用,已成为多发性骨髓,巨球蛋白血症,各种肾脏疾病的首选试验[10]。

因此,检测血清蛋白谱对于疾病的诊断、疗效观察、临床生理研究等有重要的参考价值。

正常妊娠时,为满足胎儿的发育与生长,母体发生一系列的适应性变化,并且在高水平的雌、孕激素的影响下,血清蛋白组分发生明显变化。

待产妇血清蛋白电泳各组分增高或减低的程度对于预测胎儿在体内发育状况有重要的指导意义。

综上资料分析说明。

待产妇血清蛋白组分在一定范围内是生理的变化,应与肾病型、肝损伤型及浆细胞克隆增殖型的血清蛋白异常组分区别开来。

总之,当以蛋白电泳指标诊断疾病时,应注意妊娠因素对结果的影响。

4参考文献

1ChenFA,LiuC.HsiehYetal.Capillaryelectrophoresisanewclinicaltool.ClinChen,1991,37

(1):

14

2陈静,林寿榕.90例待产妇血清蛋白电泳图谱分析.国外医学临床生物化学分册,2005.26(9);579

3孙静.申新莉.血清蛋白电泳在肾病综合征中的应用.检验医学与临床,2005.2(3):

119

4廖群,潘娟.5种疾病的血清蛋白电泳潜特点.国际检验医学杂志,2006,27(8):

681

5粱淑新,王淑仙,刘希华.血清蛋白电泳的临床应用.河北职工医学院学报,2005,22

(2);28

6AguxxiF,JayakarSD,MerliniGetal,Electrophoresis:

celluloseace-tatevsagarosegel.visualinspectionvsdensitometry.ClinChen,1981,27(11):

1944

7BossuytX,BogaertsA,SchisettekatteGetal,Serumproteinelectro-phoresisandimmunofixationbyaseniautomaedelectrophoresissya-tem.ClinChem,1998,44(5):

944

8BienvenuJ,GrazianiMS,ArpinFetal,MulticenterevaluationoftheparagonCZETM2000capillaryzoneelectrophoresissystemforserumpro-teinelectrophoresisandmonoclonalcomponenttypingClinChem,1998.44(3):

599.

9JenkinsMA,GuerinMD.Quantificationofserumproteinsusingcapil-laryelectrophoresis.AnnClinBiochem,1995,32(5):

493

10RobertA,KyleMD.Sequenceoftestingformonoclonalgammopothiesserumandurineassays.ArchPatholLabMed。

1999,123

(2):

114

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