纤维素酶产生菌的分离及其酶活力测定_精品文档.pdf

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安徽农业科学。

JournalofAnhuiA卵Sci200937C35）：

173231732517357责任编辑王森责任校对卢瑶纤维素酶产生菌的分离及其酶活力测定巫小琴1,2徐强1，李羰1，陶诗1，黎勇h（1内江师范学院四川省高校特色农业资源研究与利用重点实验室，四川内江641112；2四川省德阳市绵竹市玉泉学校，四川绵竹618219）摘要目的从自然界中分离纯化纤维素酶高产菌株并测定各茵株的最适发酵时问。

【方法利用刚果红变色圈法从花台土、湿地、菜地土、草坪土中分离产纤维素酶活力较高的茵样，通过茵落形态、茵体形态镜栓及革兰氏染色反应鉴定为3个不同种类的4株放线茵，分剐命名为Al、A2、A3。

用DNS分光光度法对其所产纤维素酶活力分剐进行神l定，并与枯草芽孢杆茵（Bacillussubtilis）、青霉（Penicilli-啪）所产的纤维素酶活力进行比较。

结果菜地土中和草坪土中产纤维素酶茵酶活力分别比枯草芽孢杆菌酶活力高出1814、4050，而比青霉酶活力高出3996、6645；花台土中和湿地中的纤维素酶产生茵酶活力则分别比枯草芽袍杆茵酶活力低1297、1318，而比青霉酶活力高出311、286。

此外，各菌株所产纤维素酶活力均与发酵时间密切相关，表现出明显的阶段性：

初始阶段纤维素酶活力呈上升的趋势，各菌株分别在不同发酵时间达到酶活力最大值之后开始逐渐下降，回归于初始水平结论在从自然界中分离纤维素酶高产菌株的时候一定要把握好取样地点；培养时间的不同对不同茵株产酶的影响很大；选育纤维素酶高产茵株可以提高纤维素酶的工业生产效率。

关键词纤维素酶产生茵：

分离；酶活力；分析中图分类号s182文献标识码A文章编号05176611（2009）351732303IsolationofCellilla辨producingBacteriaandDetermination仰ThdrEnzymeActivitiesWUXiao-qinetal（NeijiangNormalUniversity，KeyLaI，【）ratoryforResearchandUtilizationonRegionalSpecialA鲥cult吼lResourcesofCollegesandUniversitiesinSiehuanProvince，Neijiang，Sichuan“l112）Abstract0biective1Theaimwastoisolateandpurifyefficienteellulaseproducingbacteriafromnatureanddeterminetheiroptimumfe卜mentationtimeMethodThestrainsproducinghisheradivecellulasewereilatedfromflowerstandsotl，moistsolI，vegetablefieldsetlandlawnsotlbyCongodioloratloncirclemethodandtheywereidentifiedas4strainsofActinomvcesof3differentspeciesbymicroscopicalexaminationontheirCOOHVshapesandsomaticshapesandGramSstainingandnamedA1A2andA3111eircell,laseactivitiesweredeter-minedbyDNSSlDectrophotometryandcomparedwiththatofBacill船subtilisandPenicilliumResultItwasshownintheresultthattheeellula$eactivitiesofeellulaseproducingbacteriafromvegetablefieldsotlandlawnsotlwereenhancedby1814and4050respincorn-parisonwiththatofBsubtilisandenhancedby3996and6645respincomparisonwiththatofPenicillium：

thecellulaseactivitiesofcellulaseproducingbacteriafromflowerstandi】andmoistsotlweredecreasedbyabout12，97and1318respincomparisonwiththatofBsubtilisandincreasedby311and286respincomparisonwiththatofPenic豇liumBesidestheactivitiesofceUulasesproducedbyvariousstrainshadcloserelationshipwithfermentationtimeshowingobviousstage：

thecellulaseactivityshowedincreasingtrendinpreliminarystagethecellulaseactivitiesofvariousstrainsreachedtheirmaximumsindifierentfermentationlime，andthentheircellulmseactivi-tiesbegantodecreasegraduallyandreturntotheirinitiallevelConclusionSamplingspotw鹤thekeytoisolatethecellulaseproducingbacteriafromthenatureThedijrenceofculturetimehadgreatinfluenceonthecelhdasc-productionsofdifferentstrainsTheindustrialp胁ductionefficiencyofcellulasecouldbeenhancedhbreedinge侬cientcellulaseproducingbacteriaKeywordsCellulnseproducingBacteria；Isolation；Enzymeactivity；Analysis纤维素是植物材料的主要成分，也是地球上最丰富的可再生资源。

植物通过光合作用使光能以生物能的形式固定下来，其生成量每年高达20130亿t，这些能量相当于全球人类每年能源消耗量的20倍，食物中所含能量的200倍，是永远不会枯竭的可再生资源。

纤维素在一定条件下可以被水解成单糖，单糖可再通过微生物发酵生产各种有用的产品，如饲料、燃料、化工原料、食品、药品等，并且可取代目前淀粉原料发酵生产的各种产品以及由化工燃料合成生产的部分有机产品。

纤维素被彻底分解而又无污染的一条有效途径，便是利用纤维素酶的水解作用一。

因此纤维素的酶促水解具有很高的应用价值，但是纤维索酶解在经济上的可行性主要受到纤维素酶成本的限制“。

目前有许多学者都在致力于选育纤维素酶高产菌株，以期能够高效地提炼出纤维素酶，并进一步应用于食品工业、饲料工业、水产业、洗涤工业等，以实现纤维素酶的经济价值。

纤维素酶是水解纤维素生成纤维二糖及葡萄糖的一类酶的总称。

微生物对纤维素的降解、转化是自然界中碳素转化的主要环节【43。

纤维索酶的来源有：

真菌。

所有能分解作者简介巫小琴（1985一），士，四川成都人初级教师从事微生物研究。

通讯作者。

收稿日期2009-08-26晶体纤维素的真菌，均能或多或少地分泌纤维素酶，所以纤维素酶的真菌源非常广泛。

目前研究和生产中采用的菌种大多是木霉、曲霉和青霉等。

制成酶制剂的有绿色木霉、黑曲霉、镰刀霉、拟青霉和斜卧青霉等的纤维素酶。

细菌。

在目前为人们研究较多的微生物中