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ALLCHROM工作站基本操作步骤

ALLCHROM工作站基本操作步骤

一.设置数据采集方法:

1.点击Method/InstrumentSetup,出现窗口。

在Detrctor窗口中选择采集通道AcquisitionChannelOn。

设置Frequency,从下拉菜单中选中需要的频率,一般默认的即可。

在Run

Time中输入运行时间,如果不知道什么时候出峰,那么运行时间应设置

的足够长。

2.如果使用的是外部触发信号,那么需要在Trigger窗口中的Type中选择外部触发External,否则选择手动触发Manual。

3.ExternalEvent对话框中如下选择或输入:

Duration栏至少输入0.02min或更多,作用是通过SS420X来启动调零或梯度。

State栏一定要选择Close.

4.保存方法,从File/Method下拉菜单中选SaveAs,出现一个窗口,输入所需要保存的文件名称之后,点击Save按键即可。

二.运行样品:

1.首先从Control下拉菜单中选PreviewRun或点击Preview

图标,观察基线是否稳定,待基线运行稳定后,点击红色的Stop

图标。

(1)单次运行:

1.从Control下拉菜单中点中SingleRun或者点击蓝色SingleRun

图标,就会出现一个窗口。

其中SampleID可以输入样品的名称,也可以不输入。

方法Method如果使用当前的方法就可以不用改动,如使用以前保存过的方法就点击

图标,从中选择以前保存的方法。

数据文件路径Datapath可以选择默认路径,也可以点击

图标,从中选择保存的路径。

数据文件Datafile可输入要保存的文件名称,并可以点击

图标选择IncrementNumber为数据文件自动增加编号。

其它项可以保持不变。

如果连续进同一样品,Numberofrun可以输入运行次数,当第一次采样完毕后可自动等待下一次采样。

2.然后点击开始Start,就会出现运行屏幕,然后屏幕下角显示Waittingfortrigger….,现在就可以开始进样。

3.进样后,搬动进样阀,屏幕就开始采集信号直到运行时间结束为止。

如果觉得运行时间设置的太短,从Ccontrol下拉菜单中选中ExtendRun,输入需要延长的时间即可。

如果出峰已经完毕,想提前中止,则可以从Control下拉菜单中单击StopRun或者Stop

图标。

(2)序列采样:

1.如果需要连续运行一批不同的样品,那么可以先建立一个序列。

在File/Sequence/SequenceWizard中,方法Method如果使用当前的方法就可以不用改动,如使用以前保存过的方法就点击

图标,从中选择以前保存的方法。

选择ForAcquisitity,然后选择下一步。

2.其中SampleID可以输入样品的名称,也可以不输入。

数据文件路径Datapath可以选择默认路径,也可以点击

图标,从中选择保存的路径。

数据文件Datafile可输入要保存的文件名称,并可以点击

图标选择IncrementNumber为数据文件自动增加编号。

Numberofunkownrunsinsequence输入运行的样品数,Repetitionsper输入每一个样品重复次数。

如需要在序列表为每一个重复添加一行,则在Createaseparaterowinthesequenceforeachrepetitions前打√。

点击完成。

3.在出现的序列表中检查序列信息,如需要修改,可在相应位置输入修改的内容。

然后从File/Sequence/Saveas保存。

4.从CONTROL下拉菜单中选择Sequencerun,出现以下窗口:

Sequence中默认为当前序列,如使用以前保存过的序列就点击

图标,从中选择以前保存的序列。

Runrange中,如运行序列表中所有样品,则选择All,否则选择Range,输入要运行的样品序号。

5.然后点击开始Start,就会出现运行屏幕,然后屏幕下角显示Waittingfortrigger….,现在就可以开始进样。

三.设置积分参数:

运行完样品之后就可以处理图谱了。

积分参数都保存在Method/Integrationeventstable积分事件表内。

默认峰宽Width为0.2,阈值Threshold为50。

积分参数可以在积分事件表内手动点击下拉菜单选择,其参数值也可以在此输入,点击积分

图标积分。

积分参数设置合适后,点击

图标Savemethod,保存参数到当前方法。

1.常用积分参数使用方法:

1)峰宽:

在屏幕上点击鼠标右键弹出菜单,从图形参数设置GraphicalProgromming中选择峰宽Width,然后用鼠标点击图谱中所需要积分的最窄峰的两侧,此时会弹出一窗口,点击Analyzenow按键。

2)阈值:

从GraphicalProgromming中选择阈值Threshold,按右下角提示选择图谱上一段比较平滑的基线,点击它的两侧,弹出窗口后,点击Analyzenow按键。

3)零值积分:

从GraphicalProgromming中选择阈值Integrationoff,按右下角提示选择图谱上不需要积分的范围,弹出窗口后,点击Analyzenow按键。

其他的积分参数以同样方法选择,按右下角提示对图谱进行处理。

如果想取消某个积分事件,只要将该事件从表中删除,重新积分即可。

注:

ManualPeak等手动积分参数采用后,参数保存在Dat/ManualIntegrationFixeseventstable手动积分参数表。

2.要显示积分项,点击鼠标右键弹出菜单,选择注释Annotations。

 

在左右两侧的列表中通过点击左右箭头图标增加或删除显示项,点击OK确认。

3.常用设置:

a)点击右键弹出菜单,选择FullUnzoom。

就会将图谱比例完全缩放。

b)点击右键弹出菜单,选择AxisSetup,就可以设置图谱坐标范围,从下

拉菜单选择X坐标,然后选择Usethisrange,就可以输入X坐标起止时间范围。

从下拉菜单中选择Y坐标,选择Manualsettrace’slimitsto,输入Y坐标的起止范围。

点击OK即可。

c)点击右键弹出菜单,选择Operations/MoveTrace,然后就可以移动图谱

的位置,不需要移动时,在Operations/MoveTrace中将”√”去掉即可。

d)如需要将两个图放在一个图谱中比较,点击右键弹出菜单,选择Add

Trace,点击Datasource对应的

图标,选择OpenData,从中选择需要添加的图谱即可。

如需要增加多个图谱,点击右键弹出菜单,选择AddMultipleTrace选择多个图谱即可。

如果要清除添加的图谱,点击右键弹出菜单选择ClearOverlays即可。

e)若需要计算柱效等参数,从Method下拉菜单中选择Advance,弹出

一个窗口,选择Column/Performance,第一项UnretainedPeakTime,随便输入一个时间值即可,如0.85分钟。

第二项ColumnLength,输入柱长Meter(米),CM(厘米),第三项ParticleDiameter,输入柱子的规格,如为5um的,输入5即可。

然后打”√”选中CalculatePerformanceParametersForThisChannel,在CalculationMethod选中USP,打”√”,为美国标准。

然后关闭窗口,点击鼠标右键弹出菜单,选择注释Annotations,从左侧如选择TheoreticalPlates(理论塔板数),Resolution(分辨率),CapacityFactor(容量因子)等参数,添加到右侧,点击OK并点击

图标Savemethod,保存设置到当前方法,重新积分即可。

f)若现在选择正在运行样品,但是想处理以前的数据文件,那么就在

AllchromPlusCilent/Server-RregisteredMode窗口中,选中右侧空白中的HPLC仪器图标,单击鼠标右键,在菜单中选OpenOffline,打开新的窗口来处理数据文件。

四.校正设置:

1.打开对照品谱图,积分完毕后,从GraphicalProgromming中选择定义峰Definepeaks,一次可选择多个峰。

或定义单个峰Definesinglepeak。

按窗口右下角提示选择需要的峰范围。

添加的峰会保存在Mehtod/Peak/Grouptable峰/组表中。

2.在峰/组表中,name项输入组分名称,units输入浓度单位,如果只是对组分计算重现性,那么fittype中选择pointtopoint,calibflag中选择Wtaverage,level1处输入一个浓度即可;如果是做线性校正,那么fittype中选择linear,允许直线过原点的话,zero处打√,calibflag中如果该浓度点有重复,选择Wtaverage,否则选择replace;如使用UV,scale处选择none,如使用ELSD,scale处选择log(amt)&log(resp)。

最后输入浓度level1,level2,level3…..。

设置完后点击

图标Savemethod,保存设置到当前方法。

3.校正:

1)单次校正:

A)首先在Method/MethodProperies中去掉Automaticallyaverage项前的√,并点击

图标Savemethod,保存设置到当前方法。

否则单次校正做同一浓度平均时,RSD可能无法计算出来。

B)然后从Analysis下拉菜单选择Analysis/Singlelevelcalibration。

数据文件Datafile可输入要校正的谱图名称,可以点击

图标,从中选择要校正的谱图。

之后在calibration项前的方框中打√,在Calibrationlevel处输入校正的浓度级别。

对于要校正的第一个谱图,在clearallcalibration前的方框中打√,以清除掉方法中以前可能存在的校正。

如果对同一浓度的谱图进行平均,那么在Averagereplicate方框中打√,否则不选择。

点击Start对该谱图进行校正处理。

C)同样从Analysis下拉菜单再选择Analysis/Singlelevelcalibration。

点击

图标,从中选择其他校正的谱图。

在calibration项前的方框中打√,在Calibrationlevel处输入校正的浓度级别,不同浓度做线性校正其他选项都不选择(注:

如果是同一浓度平均校正,则输入校正的浓度级别应和前面校正的谱图一致,同时Averagereplicate方框中要打√)。

点击Start对该谱图进行校正处理。

D)其他谱图校正同C步骤。

2)序列校正:

A)在File/Sequence/SequenceWizard中,方法Method如果使用当前的方法就可以不用改动,如使用以前保存过的方法就点击

图标,从中选择以前保存的方法。

选择Fromexistingdata,然后选择下一步。

B)点击

图标,从磁盘中选择要进行校正处理的谱图,点击完成。

C)在出现的序列表中检查序列信息,在谱图对应的的level中输入对应的浓度级别,如果是同一浓度平均校正,则输入校正的浓度级别应该相同。

在第一个谱图runtype项中选择clearallcalibration,如果是同一浓度平均校正,每一个谱图对应runtype项中都要选择Averagereplicate,否则不选择,然后从File/Sequence/Saveas保存序列。

D)从Sequence下拉菜单中选择process…,在Runrange中,如果处理序列表中所有谱图,则选择All,否则选择Range,输入要处理的谱图序号,点击Start开始处理序列。

4.校正完后从Method下拉菜单选择Reviewcalibrationcurve查看校正曲线。

5.在校正之后,从Analysis下拉菜单选择Analysis/Singlelevelcalibration选择样品谱图文件,在Sampleamount中输入样品实际称样量,在Multiplication和Dilution中输入倍数因子和稀释因子。

然后点击Start。

然后就可以计算出未知样品的浓度,接着通过查看外标报告就可以看到样品的浓度。

五.定制报告:

1.处理完谱图后,从Reports下拉菜单中选择view和print可查看和打印系统默认的面积报告,外标法报告。

2.如果用户需要自定义报告,那么可以点击工具栏中的

图标来编辑报告。

A)在空白处点击鼠标右键,从Insertfield中选择Methodname,Filename等系统名称,如有需要也可键盘输入想要的注释项。

B)在空白处点击鼠标右键,从Insertgraph中选择Datagraph,可插入当前或打开已保存的谱图。

点击确定后出现谱图。

选择Calibrationcurve可插入方法的校正曲线。

点击确定后出现校正曲线。

C)在空白处点击鼠标右键,从Insertreports中选择Runreports可插入当前谱图或打开其他谱图,并从注释Annotations中选择要输出的报告参数。

点击OK后,会出现空白的报告,在报告中点击鼠标右键,选择Showdataatdesigntime后就会显示报告内容。

ChannelAResults

RetentionTime

Area

AreaPercent

5.710

171632

25.915

6.548

142306

21.487

8.264

134249

20.270

8.530

214101

32.327

Totals

662288

100.000

如果需要查看校正曲线的信息,那么从Insertreports中选择calibrationinfo和calibrationtable。

从Peak中选择要显示的组分名称,点击OK。

出现空白的报告,在报告中点击鼠标右键,选择Showdataatdesigntime后就会显示报告内容。

在calibrationtable中选择显示的组分名称,

点击OK。

出现空白的报告,在报告中点击鼠标右键,选择Showdataatdesigntime后就会显示报告内容。

D)报告编辑完后,从File/ReportTemplete中选择Saveas保存为一个报告模板。

这样以后可以把它作为一个模板用于处理样品报告。

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