活性炭在淋巴结中的移行分布规律研究.docx

活性炭在淋巴结中的移行分布规律研究.docx

《活性炭在淋巴结中的移行分布规律研究.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《活性炭在淋巴结中的移行分布规律研究.docx（4页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

活性炭在淋巴结中的移行分布规律研究

活性炭在淋巴结中的移行、分布规律研究

【摘要】目的研究活性炭在活体淋巴结内移行和分布的规律。

方法选用20只Wistar大鼠，在每只大鼠的后脚掌皮下注射活性炭悬液，分别在注射后的1、5、24和48h取淋巴结，观察淋巴结的大体形态和颜色；淋巴结予以固定，包埋，苏木精伊红染色制成病理切片，观察活性炭在淋巴结中的分布情况。

结果注射部位所属淋巴结明显黑染，且黑染淋巴结的次序与淋巴回流方向一致。

活性炭进入淋巴结后，先分布于边缘窦，而后进入中央窦，血管、小梁及淋巴滤泡均未见活性炭。

结论活性炭有较强的趋淋巴性，在淋巴结中驻留时间长，其本身无毒性，可作为淋巴结示踪剂及药物载体。

【关键词】活性炭淋巴结

【Abstract】ObjectiveToinvestigatedistributionandmigratoryrouteofactivatedcarboninlymphnodesofrats.MethodsTheexperimentinvolved20femaleWistarratsthatwereinjectedsubcutaneouslywithsuspensionoftheactivatedcarbonattheheelsoles,afterwhich,at1,5,24and48hoursrespectively,thelymphnodesweredissectedforobservinggrossmorphologyandcolour.Withimmobilization,thelymphnodeswereslicedtoH&Estainedpathologicalsectionsforinvestigatingdistributionoftheactivatedcarbonparticlesinthelymphnodes.ResultsThelymphnodesatinjectionsitesturnedobviouslyblackstaining,withtheirsequencecoincidingwiththedirectionoflymphaticreturn.Afterentranceintothelymphnodes,theactivatedcarbonparticlesweredistributedinthemarginalsinusfirstandthenenteredthecentralsinus,withnoparticlesinthebioodvessels,trabeculaeorfolliculuslymphaticusofthelymphnodes.ConclusionsTheactivatedcarboncanbeusedasausefullymphatictraceranddrugcarrier,foritischaracterizedbyavirulence,highlymphatictropism,longresidencetimeinthelymphnodes.

【Keywords】Activatedcarbon;Lymphnodes

活性炭具有淋巴趋向性，同时又有吸附及缓释的特性。

根据这些特点，活性炭可作为药物载体用于恶性肿瘤转移淋巴结的治疗。

本文对活性炭在大鼠淋巴结内的移行和分布规律进行组织学观察，为临床应用提供理论依据。

1材料与方法

　实验动物及试剂

Wistar大鼠20只，体重60g左右，均为雌性，购自复旦大学上海医学院动物实验中心。

活性炭（activatedcarbon，Mitsubishi#1500A），其微粒直径20nm，比表面积1480m2/g（MitsubishiChemicalIndustriesCo.,Ltd.,Tokyo,Japan）。

PVPK30分散剂（NakaraiChemicalCo.,Ltd.,Kyoto,Japan）。

　活性炭混悬液的制备

将活性炭200mg，PVPK30分散剂80mg加入4ml生理盐水充分混合后制成活性炭悬液。

　实验分组

全部20只Wistar大鼠均在无菌条件下，于其右后脚掌侧皮内注射ml活性炭悬液，然后分成4组，每组5只，分别在注射后1、5、24和48h各取一组观察淋巴结黑染情况。

　淋巴结的观察点

第1站在腘窝淋巴结，第2站在腹股沟淋巴结，第3站在腹主动脉旁淋巴结。

　淋巴结观察与制片方法

各组均取淋巴结，先作大体观察黑染情况，然后用10%甲醛溶液固定，酒精脱水石蜡包埋切片苏木精伊红染色，制成病理切片，显微镜下观察淋巴结内活性炭微粒的分布情况。

2结果

　淋巴结大体观察

注射活性炭后不同时间点各组大鼠不同区域淋巴结黑染情况见表1。

注射后1h，腘窝淋巴结全部黑染，腹股沟淋巴结和腹主动脉旁淋巴结未见黑染（图1）；5h后，腹股沟淋巴结全部黑染，部分腹主动脉旁淋巴结周边染色；24h后，3站淋巴结均黑染；48h后，解剖发现各站黑染淋巴结依然明显（图2）。

表1注射活性炭后不同时间各站淋巴结黑染情况

　　　淋巴结的病理切片观察

显微镜检发现注射活性炭后5h的大鼠腘窝淋巴结活性炭微粒移行于淋巴窦，以边缘窦为多，中央窦较少（图3）。

注射48h后的腘窝淋巴结病理切片中不仅看到边缘窦有活性炭微粒，中央窦内也较前增多；部分窦内巨噬细胞胞质内见到较细小的活性炭微粒，使该细胞呈墨点状；淋巴结内血管、小梁及淋巴滤泡内未见活性炭微粒（图4）。

3讨论

　活性炭进入淋巴管的移行方向

本研究表明活性炭进入淋巴管后，其移行方向与淋巴回流方向一致。

实验中发现注射活性炭1h后的大鼠第1站腘窝淋巴结明显黑染，但第2站腹股沟淋巴结未见黑染；注射5h后发现大鼠腘窝淋巴结和腹股沟淋巴结均明显黑染；24h后第3站腹主动脉旁淋巴结才出现黑染。

黑染按淋巴结的站别依次出现，并且是全部黑染，说明活性炭颗粒是随着淋巴液回流一起移行，与淋巴回流的方向一致，所属区域淋巴结未见遗漏，此特点对于示踪淋巴结转移极为重要。

因此如果注射部位是在某器官的肿瘤旁，随着时间延长，则此器官所属区域淋巴结将依次全部黑染。

对于某脏器的实体肿瘤，肿瘤四周也许存在不同的淋巴回流方向，因此需要在肿瘤四周分别注射活性炭，才能更好的显示可能发生肿瘤细胞转移的淋巴结。

　活性炭作为淋巴结示踪剂的作用

淋巴结具有吞噬大分子物质和微粒的特性［1］。

本实验使用的活性炭是直径20nm呈多孔蜂窝状结构的微粒，局部注射后，淋巴结可快速被黑染。

病理切片显示：

48h淋巴结中仍可见大量的活性炭颗粒，提示活性炭颗粒可较长时间滞留在淋巴结内，较多的巨噬细胞还吞噬活性炭颗粒，也使得活性炭颗粒不会随淋巴回流而被快速排泄。

Aginara等［2］发现活性炭微粒通过局部缺如或不完整的毛细淋巴管的基底膜、内皮细胞间隙及巨噬细胞的吞噬作用，以渗透和扩散的方式进入淋巴管和淋巴结，将淋巴结黑染。

从本实验结果看，随着时间的延长几乎所有的淋巴结被黑染，清晰可见，从HE染色的淋巴结病理切片中均可看到散布在淋巴窦中的活性炭颗粒。

因此，术前48h在肿瘤旁组织内注射活性炭悬液，术中即可清晰辨认肿瘤器官所属淋巴结，便于手术清扫，这在日本称为点墨法［3］。

我们的研究也证明，使用活性炭后转移淋巴结的清扫数目明显高于对照组［4］。

有文献报道常规病理检查中无肿瘤转移的淋巴结中仍有%的微转移率［5］。

Toma等［6］在直肠癌手术中使用活性炭检测18例肉眼无肿瘤转移的前哨淋巴结，其中病理检查见2例有转移，3例有微转移。

因此，活性炭黑染淋巴结为临床外科医师行淋巴清扫术提供了方便，可减少较小的但有肿瘤细胞转移可能的淋巴结残留。

　活性炭黑染淋巴结的其他特点

Catarci等［7］研究发现注射活性炭后摘除的染色淋巴结，其肿瘤转移阳性率高于未注射活性炭组，两者差异有统计学意义，显示了活性炭似乎更倾向停留于有肿瘤转移的淋巴结内，其原因还有待于进一步研究。

另外，从本实验淋巴结病理切片上看到，活性炭只集中于淋巴窦内，血管中无活性炭微粒。

如果活性炭作为载体吸附化疗药物，则药物只局限于淋巴结内，可明显提高淋巴系统内的药物浓度，不易随血液循环进入全身，这也是淋巴化疗全身毒副反应较少发生的一个重要原因。

总之，活性炭作为一类大分子物质，具有极强的淋巴系统趋向性，可在术前术中使用，便于手术医师作彻底的淋巴结清扫，提高肿瘤根治术的手术效果，延长患者生存时间。

【参考文献】

［1］TanigawaN,SatomuraK,HikasaY,etal.Surgicalchemotherapyagainstlympnodemetastases:

anexperimentalstudy［J］.Surgery,1980,87

（2）:

147-152.

［2］AginaraA,TakahashiT,AanaiK,etal.Selectivedrugdeliverytoperitumoralregionlymphaticsbylocalinjectionofaclarubicinadsorbedonactivatedcarbonparticlesinpatientswithbreastcancer—apilotstudy［J］.AnticancerDrug,1997,8（7）:

666-670.

［3］高桥俊雄.胃癌［J］.日癌治，1985,20（3）:

672-673.

［4］黄广建，陈忠清，张延龄，等.胃癌病灶周围注射超微活性炭对淋巴结的显色效果［J］.中华医学杂志，2004，84（24）：

2070-2072.

［5］UeyamaT,GuoKJ,HashimotoH,etal.Aclinicopathologicandimmunohistochemicalstudyofgastrointestinalstromaltumors［J］.Cancer,1992,69（4）:

947-955.

［6］TomaA,HagiwaraA,OtsujiE,etal.Detectionofsentinellymphaticregionwithactivatedcarbonparticlesinlymphnodedissectionforcolorectalcancer［J］.CanToKagalcnDyoho,2002,29（12）:

2291-2293.

［7］CatarciM,GuadongniS,ZaracaF,etal.ProspectiverandomizedevaluationofpreoperativeendoscopicvitalstainingusingCH40forlymphnodedissectioningastriccancer［J］.AnnSurgOncol,1998,5（7）:

580-584.