临床检验基础实验课复习Word下载.docx

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慢：

薄长堆积尾部

不匀：

厚薄相间

小：

条样缺损

中央薄两头厚尾尖

2、瑞士染色

瑞氏染料：

伊红（碱）、亚甲蓝（酸）

缓冲液：

磷酸盐缓冲液（pH6.4-6.8）

时间：

染料（I液）：

5d左右，0.5-1min

缓冲剂（II液）：

等量或稍多，5-10min

2、末梢采血

1、消毒：

75%酒精

2、第一滴血因混有组织液，擦掉不用

3、静脉采血

30g/L碘酒，75%酒精

2、有抗凝剂或其他添加剂的混匀

四、血细胞计数

WBC计数

嗜酸粒计数

RBC计数

PLT计数

稀释液

2%冰乙酸

丙酮-伊红

Hayem液或枸橼酸钠甲醛盐水或生理盐水

1%草酸铵

稀释液作用

稀释及破坏成熟RBC，固定WBC

稀释，破坏RBC、其他WBC，使E着色

稀释

稀释，破坏RBC

稀释液量

0.38ml

2ml

血量

20μl

10μl

稀释倍数

20

200

计数区域

四角大方格

上下两池四角及中央五个大方格

中央大方格的五个中方格

沉淀时间

2-3min

3-5min

10-15min

公式

N/4×

10x20x106/L

N×

20x106/L

5x10x200x106/L

5x10x20x106/L

参考值

成人：

（4-10）×

109/L

新生儿：

（15-20）x109/L

儿童：

（0.05-0.5）×

成年男：

（4.0-5.5）×

成年女：

（3.5-5.0）×

（6.0-7.0）×

（100-300）×

校正

存在有核红时：

100/（100+有核红）xN

4、白细胞分类计数

1、血涂片，瑞士染色

2、体尾交界处，“弓”形检查

3、比值

中杆

中叶

嗜酸

嗜碱

淋巴

单核

比例%

1-5

50-70

0.5-5

0-1

20-40

3-8

4、核左移：

杆状核增多，出现幼稚中性粒

核右移：

5叶以上中性粒>

3%

5、MCV、MCH、MCHC

1、测定项目：

RBC计数、Hb测定、Hct测定

2、Hb测定：

血红蛋白仪法

试剂

预热

配制

文齐液（HiCN转换液）

水或文齐液预热30min

20μlEDTA-K2血+5ml文齐液

（混匀静置5min）

120-160g/L

110-150g/L

170-200g/L

3、Hct测定：

温氏法

器材

读数

EDTA-K2血

水平离心机（2264g以上，离心30min），温氏管

RBC柱层毫米数x0.01

0.42-0.49

0.37-0,48

0.47-0.67

6、血沉

魏氏测定方法

时间

109mmol/L枸橼酸钠抗凝血

魏氏血沉管，血沉架

1h

RBC下降暴露的血浆长度（mm）

<

15mm/h

20mm/h

七、尿液常规检测

1、外观：

颜色（淡黄、深黄、淡红、红色、乳白、浓茶、咖啡）

透明度（透明、微浑、浑浊）

2、尿蛋白定性

磺基水杨酸法

加热乙酸法

原理

磺酸根阴离子与尿蛋白氨基酸阳离子结合生成不溶性蛋白盐沉淀，沉淀程度与尿蛋白量成正比

加热煮沸使蛋白质变性，加入乙酸加速蛋白质沉淀

200g/L磺基水杨酸溶液

5%乙酸溶液

方法

1ml尿液+2d试剂

混匀，黑色背景下1min内观察（有空白对照）

加热（黑观察）→5%乙酸2-4d→加热（黑观察）

结果

肉眼可见微浑±

云雾状+

颗粒++

絮状+++

大量絮状或凝块++++

同左

方法学评论

灵明度高，应用于干化学法测尿蛋白，但若尿中存在高浓度尿酸（盐）、草酸盐等干扰因素或混入生殖系统分泌物时易造成假阳性结果。

对白蛋白敏感而球蛋白不敏感。

操作略复杂，同样受生殖道分泌物的干扰成假阳性。

对白蛋白和球蛋白都敏感

5、尿糖检测

对象

尿中的葡萄糖

高热、碱性环境中尿液中葡萄糖或其他还原性糖的醛基能将蓝色的硫酸铜还原为氧化亚铜，出现黄色至砖红色沉淀

班氏试剂（改良班氏定性试剂）

尿离心取上清→2ml试剂煮沸1min观察试剂是否合格→加入0.2ml尿上清→混匀煮沸1-2min（尿液：

班氏=1:

10）

蓝，色未变—蓝中绿无沉淀±

液绿，黄绿沉淀少量+较多偏黄沉淀++

液土黄，大量沉淀+++大量红沉淀++++

方法学评价

灵敏度较低，易受尿液中其他还原物质的影响而出现假阳性

6、尿酮体

环状法（Lange法）

尿液中乙酰乙酸和丙酮与亚硝基铁氰化钠作用，与氨液接触后生成紫红色物质

亚硝基铁氰化钠、冰乙酸、25-28%浓氨水

5ml尿+约250mg亚硝基铁氰化钠（混匀）+0.5ml冰乙酸（混匀）+2ml浓氨水（缓慢沿管壁注入）

看液面交界处颜色变化：

10min无紫环—10min内浅紫红环±

10min渐出现紫环+较快出现紫环++

立刻出现紫环+++或++++

7、尿胆红素（Harrison法）

尿中胆红素被氯化钡吸附形成胆红素钡盐沉淀，与Fe3+反应，被氧化成蓝色的胆青素，绿色胆绿素和黄色胆黄素，出现绿色或黄绿色反应

酸性三氯化铁试剂（Fouchet试剂）、100g/L氯化钡溶液

5ml尿+2.5ml氯化钡（混匀，3000rx3-5min，弃上清）+2滴Fouchet试剂

长时间不变色—沉淀物渐浅绿+

沉淀物绿++沉淀物立刻蓝绿+++

假阳

尿中大量药物如：

牛黄、熊胆粉、水杨酸盐、阿司匹林等

假阴

Fouchet试剂加入过量

8、尿胆原（改良Ehrlich法）

酸性溶液中尿胆原的吡咯环能与对二甲苯氨基苯甲醛（Ehrlich试剂）作用后成樱桃红色反映，其颜色变化与尿胆原含量成正比

Ehrlich试剂

2ml无胆红素尿液+0.2mlEhrlich试剂（混匀，静置10min）

观察方法

白色背景，从试管口垂直从上往下看

长时间不变色—10min后浅红+

10min后樱桃红++立刻樱桃红+++

尿中含吡啶、酮体等（加入戊醇保持红真阳，变浅绿假阳）

尿胆原易被氧化为尿胆素（所以标本应新鲜送检）

尿中含维生素C、甲醛、乌洛托品等（抑制反应）

9、尿有形成分

参考范围：

细胞：

RBC：

0-3/HPF

WBC：

0-5/HPF

扁平上皮细胞：

少许（女可为多见）/HPF

移行上皮细胞：

偶见/HPF

管型：

透明管型：

0-1/HPF

结晶：

尿酸盐、碳酸盐、磷酸盐：

少许/HPL

8、粪便常规

颜色：

黄褐色，黄色，金黄色，鲜红色，暗红色，柏油样，灰白色，绿色

形状：

软，硬，糊状，粘液状，胨状，泡沫样，水样，血样，米泔样，柏油样等

寄生虫：

查见与否

2、镜检

细胞，脂肪球，寄生虫等

3、便隐血

免疫法（单克隆抗体胶体金法）

原理：

双抗体夹心免疫层析（单抗抗人血红蛋白-人血红蛋白-多抗抗人血红蛋白）

特点：

灵敏性特别高

九、生殖系统分泌物检查

1、精液

精子计数

标本

计数

计算

精子稀释液：

碳酸氢钠（破坏精液粘稠性）

甲醛（固定精子，定量稀释）

1h以上已经液化的精液

0.38ml稀释液+20μl精液（稀释20倍）

同RBC计数

Nx5x10x20x106/L=Nx109/L

2、阴道分泌物

清洁度：

第104页

线索细胞（加德纳菌）

阴道毛滴虫

真菌

染色：

革兰染色

10、脑脊液，浆膜腔积液

颜色，透明度，凝固性（有无凝块，薄膜）

2、细胞总数计数（直接计数，也可以用红细胞稀释液稀释后计数）10个大方格

3、白细胞计数（冰乙酸破坏RBC）

4、脑脊液蛋白质定性（潘氏试验Pendytest）：

苯酚与脑脊液中的蛋白质（球蛋白为主）结合形成不溶性蛋白盐沉淀，沉淀量与蛋白量成正比

5%苯酚溶液

2-3ml苯酚+垂直滴入1-2d脑脊液+立即黑背景观察

清晰透明—微白雾状±

灰白云雾+白色浑浊++

白色絮状或沉淀+++立即白色沉淀++++

苯酚试剂不纯，器材不干净

5、浆膜腔积液蛋白质定性

黏蛋白是酸性糖蛋白，在稀乙酸中可凝结出现白色沉淀

冰乙酸

100ml水+2-3d冰乙酸（混匀）+黑色背景直接垂直滴加2-3滴浆膜腔积液

冰乙酸过量