一清颗粒成品检验方法的验证方案Word格式文档下载.docx
《一清颗粒成品检验方法的验证方案Word格式文档下载.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一清颗粒成品检验方法的验证方案Word格式文档下载.docx（11页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
组织相关的验证培训；
负责起草验证方案、组织项目的具体验证、督促验证小组成员按照验证方案的要求做好验证记录；
起草并完成验证报告，对整个验证项目负责。
验证小组成员
按照方案实施验证、并做好记录、意外情况及时汇报和记录、协助起草验证方案和报告。
6、验证程序：
分析方法的验证内容
程序
内容
建立验证方案
1、确定标准及方法
2、确定试验及检查范围
3、确定步骤
4、方案审批
分析仪器的确认
1、安装：
确认安装、检查、文件检查及保存
2、仪器校正
3、适用性预试验
4、再确认：
制订再确认的周期
5、制订使用、清洁、保养规程，建立记录
适用性试验
1、准确度试验：
回收率测定
2、精密度试验：
重现性，相对标准差常规<
1.0％，HPLC应<
2.0％
3、专属性
4、检测限
5、定量限
6、线性
7、范围
8、耐用性
验证报告
评价及批准
验证证书
审核、签发
7、简介：
本品为黄褐色的颗粒；
味微甜、苦。
本品主要能用于清热泻火解毒、火毒血热所致的身热烦躁，目赤口疮，咽喉、牙龈肿痛，大便秘结，及咽炎，扁桃体炎，牙龈炎等不良症状。
8、验证实施步骤：
8.1、为了确保验证数据的准确可靠，采取以下几个先行保障措施
8.1.1仪器：
己经过校正并在有效期内
8.1.2人员：
均经过培训，熟悉方法及使用的仪器
8.1.3对照品：
盐酸小檗碱对照品、黄芩苷对照品、大黄对照药材、黄连对照药材、大黄素对照品、黄芩对照药材。
8.1.4材料：
均符合检验要求
8.1.5参考资料：
8.1.5.1《中国药典》2010年版一部
8.1.5.2《药品生产验证指南》（2010版）
9、鉴别：
9.1、试验A：
取本品4g，加甲醇25ml，浸渍2小时并时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，置水浴中加热30分钟，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取2次，每次10ml，合并三氯甲烷液，浓缩至1ml，作为供试品溶液。
另取大黄对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。
再取大黄素对照品，加三氯甲烷每1ml含0.5mg的溶液。
作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述三种溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60~900C）-甲酸乙酯-甲酸（15：
5：
1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
置氨蒸气中熏后，日光下检视，显相同的红色斑点。
9.2、试验B：
取本品4g，加甲醇25ml及盐酸1~2滴，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。
另取黄芩对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。
再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5：
3：
1：
1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液。
供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
9.3、试验C:
取本品4g，加甲醇25ml，浸渍2小时并时时振摇，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。
另取黄连对照药材50mg，加甲醇5ml，加热回流15分钟，滤过，滤液加甲醇使成5ml，作为对照药材溶液。
再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各1~2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水（4：
2：
0.2）为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。
9.4、检测结果:
检验结果
结果判断
试验A
试验B
试验C
检测人:
检测日期:
年月日
9.5、验证标准：
在试验A中,供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
在试验B中，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
在试验C中，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。
9.6、检验结果评价:
10、含量测定:
照高效液相色谱法测定；
仪器：
LC-20AT高效液相色谱仪。
10.1、准确度：
10.1.1色谱条件与系统适用性试验：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
以甲醇-0.2mol/L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值至2.7）（42:
58）为流动相；
检测波长为275nm。
理论板数按黄芩苷峰计算应不低于5000。
流速1ml/min；
色谱柱规格：
lichrospherC18柱（5um，4.6×
200mm）；
粒度：
；
进样量：
10μl。
10.1.2对照品溶液的制备：
取黄芩苷对照品12.5mg，精密称定，置250ml量瓶中，加甲醇10ml使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml含黄芩苷50μg）。
10.1.3供试品溶液的制备：
取装量差异项下的本品，研细，取约0.75g，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇10ml，超声处理（功率250W，频率50KHz）10分钟，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液，即得。
10.1.4回收率试验：
采用加样回收法试验，取已知含量的同一批样品9份，精密称取各0.5g，按照黄芩苷含量的80%、100%、120%的比例加入黄芩苷对照品溶液4ml、5ml、6ml，按照上述色谱图条件检测，记录色谱图，计算含量。
10.1.5计算
注：
式中f为对照品的浓度除以对照品峰面积得到的值的平均值；
AT为对照品峰面积；
单位μv*sec；
nＴ为供试品的稀释倍数；
WT为供试品的称量；
单位g。
10.1.8计算结果填入下表：
含量测定黄芩苷加样回收率试验表
序号
样品称量（g）
样品中黄芩苷的含量（mg）
对照品加入量（mg）
实测值（mg）
回收率（%）
回收率的平均值（％）
RSD（%）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
检测人：
检测日期：
10.1.9结果评价：
10.2、精密度：
10.2.1重复性（设操作人员A）：
10.2.1.1色谱条件与系统适用性试验：
10.2.1.2对照品溶液的制备：
取10.1.2项对照品溶液作为对照品溶液。
10.2.1.3供试品溶液的制备：
取本品粉末约1.0g，共称六份，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇10ml，超声处理（功率250W，频率50KHz）10分钟，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液，即得。
然后分别平行进样。
10.2.1.4计算：
AT为对照品峰面积；
nＴ为供试品的稀释倍数；
WT为供试品的称量；
10.2.1.5将计算的结果填入下表
含量测定黄芩苷重复性试验表
含量（g/g）
含量的平均值（g/g）
10.2.1.6结果评价
10.2.2中间精密度（换一时间，换一操作人员，设操作人员为B）
10.2.2.1色谱条件与系统适用性试验：
10.2.2.2对照品溶液的制备：
10.2.2.3供试品溶液的制备：
10.2.2.4计算：
10.2.2.5将计算的结果填入下表
含量测定黄芩苷中间精密度试验表
10.2.2.6结果评价
10.3、专属性：
10.3.1色谱条件与系统适用性试验：
10.3.2对照品溶液的制备：
10.3.3供试品溶液的制备：
10.3.4空白溶液的制备：
精密称取阴性对照品1.0g，按供试品溶液的制备方法制备成阴性样品溶液。
含量测定专属性试验表
保留时间
供试品溶液
对照品溶液
空白溶液
10.3.5验证标准：
供试品溶液中应呈现与黄芩苷对照品保留时间相同的色谱峰；
空白溶液中在这点应无色谱峰。
10.3.6结果评价：
10.4、线性及线性范围：
精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品16.73mg置5ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释到刻度，摇匀，精密吸取2ml置50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含黄芩苷0.1338mg的对照品贮备液；
精密吸取1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml置10ml的容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含黄芩苷13.38ug、26.76ug、40.14ug、53.52ug、66.90ug、80.28ug的系列对照品，分别精密吸取上述系列对照溶液10ul，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，记录色谱图，并与对照的进样量X（ug）为横坐标，峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线图。
黄芩苷不同浓度的峰面积
浓度（mg/ml）
峰面积（μv*sec）
回归方程
相关系数
斜率：
Y轴轴距：
10.4.1结果评价：
10.5、系统重复性：
10.5.1配制工作浓度的0.02%和0.05%样品标准溶液，分别进样6次
10.5.2计算：
峰面积的平均值与相对标准偏差
0.02%的黄芩苷峰面积
峰面积
峰面积平均值
相对标准偏差
0.05%的黄芩苷峰面积
峰面积的平均值
10.6、检测限：
用系统重复性实验中的标准偏差和线性回归方程中的斜率差计算：
计算：
黄芩苷的检测限为：
10.7、定量限：
黄芩苷的定量限限为：
10.8、范围：
10.9、耐用性:
10.9.1以流动相的组成比例、同一规格的色谱柱为变动因素，得出测定结果不受影响的程度，为使方法用于常规检验提供依据。
10.9.2对照品溶液的制备：
取10.1.2项下对照品溶液作为对照品溶液。
10.9.3供试品溶液的制备：
取10.1.3项下供试品溶液作为供试品溶液。
10.9.4色谱条件1：
10.9.5色谱条件2：
流动相组分比例改变，其他条件不变。
10.9.5.1以甲醇-0.2mol/L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值至2.7）（47:
53）为流动相,C18，检测波长为275nm。
流速:
1ml/min；
10.9.5.2以甲醇-0.2mol/L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值至2.7）（52:
48）为流动相,C18，检测波长为275nm。
10.9.6将数据整理，填入下表。
含量测定耐用性试验表
分离度
理论板数
色谱条件1
色谱条件2
⑴
⑵
10.9.7结果评价：
11、验证的结果评价及建议：
12、再验证周期：
质量部门根据验证结果确定再验证周期
升级会员 