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在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在外植体切面上产生。

13、体细胞杂交:

指在人工控制条件下不经过有性过程,两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。

  14、悬浮培养:

是将植物游离细胞或细小的细胞团,在液体培养基中进行培养的方法。

15、原生质体:

指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。

16、传代:

将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。

  17、原代培养:

也称初代培养期。

从体内取出组织接种在培养瓶中培养到第一次传代前阶段,一般持续1-4周。

  18、细胞系:

经过再培养后而形成的具有增殖能力、特性专一、类型均匀的培养细胞。

  19、细胞株:

将所得到的纯净细胞群,以一定的密度接种在lmm厚的薄层固体培养基上,进行平板培养,使之形成细胞团,尽可能地使每个细胞团均来自一个单细胞,这种细胞团称为“细胞株”。

20、干细胞:

干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,它可以化成多种功能细胞。

  21、胚胎工程:

在体外受精和体外早期胚胎发育的基础上,通过卵子切割、性别控制、嵌合体制作、细胞核移植、转基因操作等定向控制、改造和创造新遗传性状的技术统称为胚胎工程,又称发育工程。

22、代谢控制发酵:

用人工诱变的方法,有意识地改变微生物的代谢途径,最大限度地积累产物,这种发酵称为代谢控制发酵。

  23、菌种退化:

指整个菌体在多次接种传代过程中逐渐造成菌种发酵力或繁殖力下降或发酵产物得率降低的现象。

  24、诱变育种是指用物理、化学因素诱导植物的遗传特性发生变异,再从变异群体中选择符合人们某种要求的单株,进而培育成新的品种或种质的育种方法。

  25、基因的直接进化:

在分子水平上,对目标基因直接处理,然后通过高通量的筛选方法,提高目标蛋白的性能。

基因的直接进化,可使已有基因获得新的特性,可获得自然界中不存在的基因,可解决许多新的理论和应用问题。

  26、酶工程:

研究酶的生产和应用的技术过程,包括酶的制备、酶的固定化、酶分子修饰与改性和酶反应器等。

  27、酶的改性:

通过各种方法改进酶的的催化特性的技术。

29、抗体酶:

一类具有催化功能的抗体分子。

又叫催化性抗体。

  30、酶分子修饰:

通过各种方法是酶分子结构发生改变,从而改变酶的催化特性的技术。

31、固定化酶:

固定在一定载体上并在一定空间范围发生催化反应的酶。

  33、酶分子定向进化:

模拟自然进化过程,在体外进行酶基因的人工随机突变,建立突变基因文库,在人工控制条件的特殊环境下,定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。

  34、什么是蛋白质工程?

  是以对蛋白质结构和功能关系的认识为依据,借助基因工程技术和X-射线衍射分析技术,从基因入手,通过定点突变改变核苷酸顺序,以达到改造现有蛋白质分子、或创造新的蛋白质分子目的的技术学科。

35、蛋白质结构域:

是指蛋白质分子上可以区分出来的亚级球状结构,是高于超二级结构的结构层次。

36、定点突变:

定点突变是对已知序列的基因(或DNA)中任意指定位置进行突变的技术。

其主要的技术过程包括核苷酸的置换、插入、或删除。

  37、趋异进化:

亲缘较近的生物分子,于所处的环境不同,靠突变而使性能上表现某些差异的现象称为趋异进化。

  38、趋同进化:

亲缘关系较远的分子,于所处的环境相同,靠进化而显示相似的形态与功能。

这种现象称为趋同进化。

  39、生物导弹:

将生物毒蛋白与特定的抗体偶联起来,利用抗体的定向运输功能,将毒素定向运输到特定细胞上去起特定的作用。

这种特殊的药物就是免疫毒素,也称为生物导弹。

  40、蛋白组学:

基因组编码的所有蛋白质,是研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的学科。

41、基因疫苗:

将含有编码某种抗原蛋白的基因序列的质粒作为疫苗,直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导宿主产生对抗该抗原蛋白的免疫应答而达到免疫的目的。

也叫DNA疫苗或核酸疫苗。

  42、基因治疗:

利用遗传学原理治疗人类疾病。

二、选择题  1.蛋白质工程的实质是  2.基因工程的实质是  3.干扰素经过改造可长期储存,从蛋白质水平上应改变的是4.蛋白质工程制造的蛋白质是5.蛋白质工程的基础是  6.玉米是生产赖氨酸的好材料,可是产量低,需要改变结构就能提高产量  7.天然蛋白质合成遵循的法则是  8.关于蛋白质工程的说法错误的是  ①蛋白质分子结构合成②DNA合成③mRNA合成④蛋白质的预期功能⑤根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列  10.下列各项与蛋白质结构多样性无关的是11.蛋白质工程中直接操作的对象是  12.当前医学上,蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代治疗剂,则基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是13.植物组织培养是指14.植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是15.植物体细胞杂交的结果是  16.科学家把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合,培育出的驱蚊草含有香茅醛,能散发出一种特殊的达到驱蚊且对人体无害的效果。

下列关于驱蚊草培育的叙述中,错误的是18.植物体细胞杂交的目的中错误的是  20.A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如下图所示,将A、B两种植物细胞去掉细胞壁后,诱导二者的原生质体融合,形成单核的杂种细胞,若经过组织培养后得到了杂种植株,则该杂种植株是  21.以下关于原生质的叙述,正确的是22.不能人工诱导原生质体融合的方法是  23.植物细胞表现出全能性的必要条件是24.细胞具有全能性的原因是  25.植物组织培养过程中的脱分化是指26.下列植物细胞全能性最高的是27.植物组织培养过程的顺序是  ①离体的植物器官、组织或细胞②根、芽③愈伤组织④脱分化⑤再分化⑥植物体28.将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时,下列条件中不需要的是29.下列有关细胞工程的叙述不正确的是30.下列细胞全能性最高的是  31.植物体细胞杂交的目的是32.下列提法正确的是  33.有关原生质体的下列叙述中,正确的是  34.下图为植物组织培养过程示意图,则下列叙述正确的是35、基因工程操作的三大基本元件是  36、基因工程的单元操作顺序是37、mRNA分离纯化技术的关键是  38、cDNA第一链合成所需的引物是    39、cDNA法获得目的基因的优点是  (B不含内含子)40、下列基因调控元件中属于反式调控元件的是  41、包涵体是一种    42、在基因工程中,外源基因表达产物的重折叠通常是指43、外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是【BI+II】  I融合基因能稳定扩增II融合蛋白能抗蛋白酶的降解III表达产物易于亲和层析分离44、基因工程菌中重组质粒的丢失机制是45、细胞具有全能性的原因是  46、植物组织培养过程中的脱分化是指47、与传统育种相比,植物体细胞杂交在育种作物新品种方面的重大突破表现在  48、某同学在学习“细胞工程”时,列表比较了动植物细胞工程的有关内容,你认为有1处是不正确的是      植物细胞工程动物细胞工程技术手段植物组织培养、植物体细胞杂交机械法去除细胞壁动物细胞培养和融合、单抗制备等胰蛋白酶处理制细胞悬浮液物理方法、化学方法、生物方法单克隆抗体的制备动物血清不可缺少特殊处理融合方法典型应用培养液区别物理方法、化学方法人工种子、杂种植物蔗糖是离体组织赖以生长的成分49、下列关于植物体细胞杂交过程的叙述中,不正确的是  50、生物技术能有效的打破物种的界限,定向地改造生物的遗传性状,培育新的农作物优良品种            51、动物细胞培养的理论基础是    52、单克隆抗体的制备过程中引入骨髓瘤细胞的目的是  53、下列关于动物细胞培养的叙述中,不正确的是  54、目前在治疗癌症方面,一种疗效高,毒副作用小的新型药物问世了,这就是“生物导弹”。

“生物导弹”治疗疾病的基本原理是  55、在下列自然现象或科学研究成果中,能为“动物细胞具有全能性”观点提供直接证据的是  56\\细胞株的特点是            57、生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。

如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是  58、酶工程的技术过程是  59、酶的转换数是指  60、有些酶在细胞进入平衡期以后还可以继续合成较长的一段时间,这是于。

  61、莫诺德常数是指62、端粒酶是  63、酶分子的物理修饰是通过物理方法改变酶分子结构而改变酶的催化特性64、酶分子氨基酸修饰的分子修饰65、用带负电荷的载体制备的固定化酶后,酶的最适pH。

66、有机介质中酶催化的最适水含量是  67、在获得酶的单一基因以后,为获得两种以上同源正突变基因,可以采用的技术是      68、采用核糖体表面展示技术,可以形成目的蛋白-核糖体m-RNA三聚体展示在核糖体表面,是于  69、在进行易错PCR时,添加一定浓度的锰离子,其作用是70、酶的膜反应器是  71、葡萄糖氧化酶可以用于食品保鲜,主要原因是通过该酶的作用可以。

72、蛋白质工程的实质是  73、蛋白质工程制造的蛋白质是  74、蛋白质工程的基本操作程序正确的是  ①蛋白质分子结构合成  ②DNA合成③mRNA合成④蛋白质的预期功能⑤根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列75、下列各项与蛋白质结构多样性无关的是76、蛋白质工程中直接操作的对象是    77、当前医学上,蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代治疗剂,则基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是78、关于蛋白质工程的说法错误的是  79、扰素经过改造可长期储存,从蛋白质水平上应改变的是80、天然蛋白质合成遵循的法则是三、判断题1、2、3、4、5、  基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。

B型双螺旋DNA的稳定因素为氢键和碱基堆砌力。

cDNA文库不包含内含子。

  Western杂交是DNA—RNA之间的杂交。

  DNA双酶切时,要先低盐缓冲液,后高盐缓冲液。

  6、如果需要得到真核生物基因的完整序列,必须用基因组文库方能达到。

7、基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。

  8、克隆的本质特征是生物个体在遗传组成上的完全一致性。

9、假基因不能合成功能蛋白质,是相应的正常基因突变引起的。

10、Northern杂交是DNA-RNA之间的杂交。

  11、核酸Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关,碱基数相同的情况下,其含量越高,则Tm越高。

12、  农杆菌介导法和基因枪法是植物转化的主要方法  13、有一些来源不同的限制性内切酶识别的是同样的核苷酸序列,这类酶称为同裂酶。

14、检测外源基因的导入时,PCR的准确性要高于Southern杂交的准确性。

15、转基因食品目前存在的最大问题是我们无法检测某种食品到底是不是转基因食品。

16、转基因生物直接食用的,称为“转基因食品”,而作为加工原料生产的食品,则不能被称为“转基因食品”。

  17、质粒DNA进行电泳时,其三种构型中,开环DNA跑的最快,共价闭环形DNA跑得最慢。

18、在生物技术的五大工程中,生化工程是核心技术,它能带动其他技术的发展。

19、cDNA是以DNA为起始材料,经过复制得到的互补DNA。

20、DNA的复制是全保留不连续复制。

  21、基因是一个功能单位,但不是一个不可分割的最小的重组单位和突变单位。

22、Western杂交可以检测外源DNA的导入与否。

23、生物技术是一门新兴的学科。

  24、生物技术是现实生产力,也是具有巨大经济效益的潜在生产力,它将是21世纪高技术革命的核心内容。

    25、生物技术是多学科综合而成的一门新学科。

  26、自1996年11月我国正式公布实施《农业生物基因工程安全管理实施办法》以来,我国已批准6种转基因  植物商品化。

  27、1977年,美国首先采用大肠杆菌生产了人类第一个基因工程药物——人生长激素释放抑制剂激素。

28、生物技术是一门新兴学科,它包括当代生物技术和现代生物技术两部分.29、生物技术主要包括五项技术。

  30、现代生物技术是所有自然科学领域中涵盖范围最广的学科之一。

  31、本世纪初,遗传学的建立及其应用,产生了遗传育种学,并于60年代取得了辉煌的成就,被誉为“第  一次绿色革命”。

  32、人类基因组计划英文简称为HGP.  33、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体  34、进入细菌的外来DNA之所以被降解,是因为细菌只修饰自身DNA,不修饰外来DNA35、只有粘粒端才可以被连接起来  36、用自身作引物合成的cDNA链,往往cDNA并不完整

  

      37、所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板,这样产生的双链DNA分子一条旧链  和一条新链组成。

  38、任何细胞都可用作受体细胞。

39、克隆子就是重组子。

  40、原核生物细胞是最理想的受体细胞。

  41、目的基因各种生物,其中真核生物染色体基因组是获得目的基因的主要来源。

42、DNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。

43、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。

44、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。

  45、酶活力指在一定条件下酶所催化的反应速度,反应速度越大,意味着酶活力越高。

46、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。

  47、培养基中的碳源,其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。

  48、膜分离过程中,膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过,而把大于其孔径的颗粒截留。

  49、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对,在酶的亲和层析分离中,可把分子对中的任何一方作为固定相。

50、  角叉菜胶也是一种凝胶,在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。

51、α-淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化,但不称为糊精化酶。

52、酶法产生饴糖使用α-淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。

  53、外源蛋白基因可以与噬菌体的外膜结构蛋白基因形成融合蛋白基因,在噬菌体表面展示54、重组质粒载体可以通过细胞转化方法将重组DNA转入受体细胞(√)  55、通过DNA重拍技术进行酶基因的体外随机突变,可以获得大量的正突变基因。

  56、基因家族重排技术需要经过不加引物的多次PCC循环,使DNA的碱基序列重新排布而引起基因突变。

    (√)  57、酶在水溶液中催化的立体选择性通常比在有机介质中催化的立体选择性强。

58、包埋法可以用于酶、细胞和原生质体的固定化。

    59、固定化原生质体于细胞内的结构完整,可以保持细胞原有的生命活动能力。

60、采用共价结合法制备得到的固定化细胞具有很好的稳定性。

  四、填空题  1、基因工程技术是生物技术的核心技术。

2、PCR包括三个步骤_变性,退火,延伸。

  3、基因工程的实施包括四个必要条件:

工具酶、基因、载体和受体细胞。

4、限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端:

平末端、黏性末端。

5、基因组文库中包括有内含子和外显子,而cDNA文库中则不含内含子  6、生物技术主要是指基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程。

7、现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志。

  8、细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、干细胞技术。

9、酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计等技术。

  10、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、筛选和鉴定克隆子。

11、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、筛选和鉴定克隆子。

12、重组DNA导入植物细胞常采用农杆菌介导的Ti质粒载体转化法、电穿孔法、微弹轰击法、花粉管通道法。

导入动物细胞常用的方法有病毒颗粒介导的病毒载体转导法、磷酸钙转染法、显微注射法等。

13、酶的生产方法有提取法,发酵法和化学合成法。

  14、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能,即提高酶的活力、减少抗原性,增加稳定性。

15、根据分子中起催化作用的主要组分的不同,酶可以分为蛋白酶和核酶两大类。

  16、莫诺德常数Ks是指生长速率达到最大比生长速率一半,限制性基质浓度时的限制性基质浓度。

17、发酵动力学是研究发酵过程中细胞生长速率,产物生成速率,基质消耗速率及其影响因素的学科。

18、微生物产酶方式可以分为同步合成型,延续合成型,中期合成型,滞后合成型四种。

  19、动物细胞培养方法主要有悬浮培养,贴壁培养、固定化细胞培养。

  20、定点突变是在DNA序列的某一特定位点上,进行碱基的改变,从而获得突变基因的操作技术。

21、锤头型核酸类酶含有11个保守核苷酸残基和3个螺旋结构域。

  22、通过人工方法获得的具有催化RNA水解的单链DNA分子,称为脱氧核酸类酶。

  23、细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、干细胞技术。

24、酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计等技术。

  25、蛋白质工程的目标是根据对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质结构进行分子设计,根据中心法  则便可以改造天然蛋白质。

五、简答题  1、基因工程操作过程的主要步骤有哪些?

  ①分离或合成基因;

②通过体外重组将基因插入载体;

③将重组DNA导入细胞;

④扩增克隆的基因;

⑤筛选重组体克隆;

⑥对克隆的基因进行鉴定或测序;

⑦控制外源基因的表达;

⑧得到基因产物或转基因动物、转基因植物  2、一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足的条件是什么?

  具有转录复制起始点。

2)具有抗菌素抗性基因。

具有若干限制酶切单一识别位点.具有较小的分子量和较高的拷贝数。

  3、重组子筛选所用的核酸分析法的内容是什么?

1)核酸杂交法  ①菌落印迹原位杂交;

②斑点印迹杂交;

③Southern印迹杂交2)聚合酶链式反应法3)DNA测序法4、基因工程研究的理论依据是什么?

  不同基因具有相同的物质基础。

基因是可切割的基因是可以转移的多肽与基因之间存在对应关系遗传密码是通用的基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代5、分离目的基因的途径有哪些?

  酶切法PCR法化学合成法基因组或cDNA文库法6、谈谈你对转基因食品的看法。

转基因食品的优点:

  可延长蔬菜的货架期及感官特性。

提高食品的品质。

提高食品的营养。

提高肉、奶和畜类产品的数量和质量。

增加农作物抗逆能力,增加农业产量。

生产可食性疫苗或药物生物功能性食品

(1)转基因食品的优点:

1.解决粮食短缺问题。

2.减少农药使用,避免环境污染。

?

3.节省生产成本,降低食物售价。

4.增加食物营养,提高附加价值。

5.增加食物种类,提升食物品质。

6.促进生产效率,带动相关产业?

转基因食品的安全性  

(1)目前有一些证据指出转基因食品具有潜在的危险。

但更多科学家的试验表明转基因食品是安全的  赞同这个观点的科学家主要有以下几个理。

首先,任何一种转基因食品在上市之前都进行了大量的科学试验,国家和政府有相关的法律法规进行约束,而科学家们也都抱有很严谨的治学态度。

另外,传统的作物在种植的时候农民会使用农药来保证质量,而有些抗病虫的转基因食品无需喷洒农药。

还有,一种食品会不会造成中毒主要是看它在人体内有没有受体和能不能被代谢掉,转化的基因是经过筛选的、作用明确的,所以转基因成分不会在人体内积累,也就不会有害。

比如说,我们培育的一种抗虫玉米,向玉米中转入的是一种来自于苏云金杆菌的基因,它仅能导致鳞翅目昆虫死亡,因为只有鳞翅目昆虫有这种基因编码的蛋白质的特异受体,而人类及其它的动物、昆虫均没有这样的受体,所以无毒害作用。

7、目的基因克隆的基本方法有哪些?

  直接从染色体DNA中分离:

仅适用于原核生物、叶绿体和线粒体基因的分离,较少采用。

人工合成:

根据已知多肽链的氨基酸顺序,利用遗传密码表推定其核苷酸顺序再进行人工合成。

适应于编码小  分子多肽的基因。

从mRNA合成cDNA:

采用一定的方法钓取特定基因的mRNA,再通过逆转录酶催化合成其互补DNA,除去RNA链后,再用DNA聚合酶合成其互补DNA链,从而得到双链DNA。

这一方法通常可得到可表达的完整基因。

  利用PCR合成:

如已知目的基因两端的序列,则可采用聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)技术,在体外合成目的基因。

从基因文库中筛选:

首先建立基因组或cDNA文库,利用探针从文库中筛选目的克隆。

  8、cDNA文库和基因组文库的主要差别有哪些?

  基因组文库克隆的是任何基因,包括未知功能的DNA序列;

cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因,包括调节基因。

基因组文库克隆的是全部遗传信息,不受时空影响;

cDNA文库克隆的是不完全的编码DNA序列,因它受发育和调控因子的影响。

基因组文库中的编码基因是真实基因,含有内含子和外显子,而cDNA文库克隆的是不含内含子的功能基因。

9、简述一项可以授予专利的生物技术发明必须满足的条件。

  具有新颖性具有创造性具有应用价值在申请专利说明书对发明做详尽的描述,使在同一领域的其他人能够了解执行。

10、重组DNA导入受体细胞方法  化合物诱导法电穿孔法农杆菌介导基因转化法微弹轰击法超声波处理法脂质体介导法体内注射转化法精子介导法11、简述现代生物技术在人类生产生活中的作用改善农业生产、解决食品短缺  ①提高农作物产量及其品质  ②发展畜牧业生产  食品生产、食品加工、食品检测提高生命质量、延长人类寿命解决能源危机、治理环境污染制造工业原料、生产贵重金属  12、科学家将分离得到的成熟的胡萝卜根的韧皮部细胞进行培养,单个细胞发育成了完整的新植株。

过程图解如下,请回答与之有关的问题:

  

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