酵母调研报告精选多篇Word格式文档下载.docx

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它在食品、医药和饲料中使用的悠久历史证明其安全性和对健康的良好作用。

在猪上的研究表明，酵母或酵母培养物能增加采食量，加速增重；

改善母猪乳质，提高仔猪断奶成绩，降低粪便中的病原菌,并使皮毛光亮，促进生长期及育肥期猪只对饲料的消化吸收和增重率。

关于活性干酵母改善断奶仔猪生产性能的作用机制推测有①影响后肠的微生物发酵，为动物增加养分的供应；

②提供蛋白质、酶、维生素和促生长因子等有益成分，推测能提高猪的生长性能；

③酵母细胞壁的甘露聚糖能粘附带一型菌毛的革兰氏阴性细菌干扰其与上皮细胞表面的结合，阻止细菌在消化道表面的定植，维护消化道微生物区系的稳定；

④从酵母细胞壁提取的酵母多糖具有免疫调节作用。

国内外对酵母及酵母培养物的应用效果作了广泛研究，但大部分集中在反刍动物和马上，对断奶仔猪方面的研究报道较少。

福邦饲用高活性干酵母含酵母细胞数大于350亿/g，含酵母活菌数≥200亿个/g。

本试验旨在研究活性干酵母的不同添加水平对断奶仔猪生产性能的影响，为活性干酵母在断奶仔猪中的应用提供试验依据。

　　1材料与方法　　1.1试验动物　　本试验选用天津宁河原种猪场遗传背景相同、体重相近的28天断奶仔猪90头，按体重、性别随机区分为5组，每组6个重复，每个重复3头猪。

试验时间为2014年4月~5月。

　　1.2试验日粮　　试验共设5种日粮处理.基础日粮以玉米--豆粕为主，参照nrc10～20kg体重仔猪的营养需要设计，按照表1的试验设计配制粉料日粮。

基础日粮配方及营养水平见表2。

　　1.3试验设计　　表1试验设计　　日粮处理　　福邦高活性干酵母酵母活菌数　　处理1－0　　处理20.0255.0×

106　　处理30.0501×

107　　处理40.1002×

107　　处理50.2004×

107　　1.4饲养管理　　密闭猪舍漏缝地板，网上平养，圈舍通风良好。

自由采食及饮水。

环境、温度及免疫程序均按天津宁河原种猪场常规饲养管理进行。

　　1.5检测指标　　生长性能指标：

于试验第0、7、14、21、28天称重、结料，计算各阶段的平均日增重、平均日采食量、饲料增重比，同时观察、记录试验猪的腹泻、死淘情况。

　　1.6统计分析　　采用spss10.0统计软件对数据进行方差分析，lsd多重比较，就活性干酵母的不同添加水平对各指标的影响进行回归分析。

　　表2基础日粮配方及营养水平　　原料玉米豆粕膨化全脂大豆　　鱼粉乳清粉豆油cahpo4　　石粉盐lysinemethioninepremix　　zno合计　　组成55.3815.0015.005.004.001.501.500.680.300.200.111.000.33　　100.0　　营养水平猪消化能　　粗蛋白钙磷lysinemet+cys　　334419.210.900.731.350.76　　注：

1%预混料为每kg全价料提供：

cu,250mg;

fe,165mg;

zn,175mg;

mn,48mg;

se,0.5mg;

i,0.4mg;

va,9000iu;

vd3,2500iu;

ve,20iu;

vk3,3mg;

vb1,1.5mg;

vb2,4mg;

vb6,3mg;

vb12,0.012mg;

烟酸,30mg;

泛酸,15mg;

叶酸,0.75mg;

生物素,0.05mg;

氯化胆碱,350mg;

诺必达,300mg;

硫酸粘杆菌素,30mg;

金霉素,105mg。

福邦高活性干酵母根据表一的设计要求添加，不足部分由玉米补齐。

　　2试验结果与讨论　　试验猪生长性能如表3及图1~4所示。

　　表3活性干酵母对断奶仔猪生产性能及腹泻率的影响　　指标体重始重2周末重4周末重　　0-2w　　平均日增重adg,g平均日采食adfi,g饲料/增重fcr3-4w　　平均日增重adg,g平均日采食adfi,g饲料/增重fcr0-4w　　平均日增重adg,g平均日采食adfi,g饲料/增重fcr腹泻率　　。

　　2.adg：

日增重，adfi：

日采食量，f/g：

料肉比，腹泻率=腹泻总头日/试验总头日*100　　处理18.89±

1.02　　处理28.88±

1　　处理3　　处理4　　处理5　　p值　　方差　　线性二次　　分析　　8.90±

1.088.9±

1.028.89±

0.981.0000.9701.00　　11.26±

0.6111.27±

0.6511.42±

1.1112.0±

1.1211.51±

1.030.6710.3140.5715.22±

0.5415.12±

1.2815.48±

1.8316.97±

1.9015.95±

1.440.3010.1240.30　　bb　　bb　　bb　　aa　　abb　　148±

20149±

21157±

23201±

16168±

180.0020.0130.03　　295bb±

33298bb±

37322abb±

46383aa±

23328abb±

440.0100.0200.042.00±

0.212.00±

0.102.05±

0.041.91±

0.071.95±

0.120.2660.2200.40　　282±

29590±

72　　275±

52576±

87　　290±

59591±

78　　355±

73677±

64　　317±

42614±

83　　0.1460.0620.180.2810.1850.42　　2.09±

0.102.11±

0.152.08±

0.291.94±

0.241.94±

0.080.4430.0810.20　　215bb±

23212bb±

32224abb±

39278aa±

42242abab±

250.0290.0270.08443±

49　　437±

53　　457±

57　　530±

41　　471±

58　　0.0700.0680.17　　2.06±

0.062.07±

0.171.92±

0.161.95±

0.070.2000.0390.110.70　　0.20　　1.90　　0.50　　0.20　　0.2500.7130.49　　注：

1.同行数据肩注大写字母不同者表示差异极显著，同行数据肩注小写字母不同者表示差异显著　　断奶后0~2周，处理3、处理4和处理5组的平均体重与对照组相比均有不同程度的提高，但各处理的平均体重差异不显著；

处理3、处理4和处理5的平均日增重和平均日采食量均高于对照组，处理4的平均日增重和平均日采食量最高，分别比对照组高了35.81%和29.83%，差异极显著；

回归分析表明，活性干酵母的添加水平对平均日采食量和平均日增重的影响成二次曲线趋势。

　　断奶后3~4周，处理3、处理4和处理5的平均日增重与对照组相比均有提高，但各处理之间差异不显著。

　　断奶后0~4周，处理3、处理4和处理5的平均体重与对照组相比均有提高，提高最多的处理4比对照组高了1.75kg，各处理的平均体重差异不显著；

处理3、处理4和处理5的平均日增重均高于对照组，最高的处理4比对照组高29.30%，差异显著；

处理4与对照　　组相比提高了平均日采食量；

回归分析表明，活性干酵母的添加水平对平均日增重的影响成二次曲线趋势。

　　腹泻率各处理组之间差异不显著。

整个试验期间各组都没有发生死亡。

　　本次试验结果表明，断奶仔猪日粮中添加活性干酵母改善生产性能，饲养效果前2周比后2周明显，处理4各个阶段的生产性能指标均优于其它处理组，故活性干酵母以2×

10个酵母活菌数/g全价料的剂量添加到断奶仔猪日粮中效果较好。

这与heugten等的研究结果基本一致。

从试验结果分析仔猪断奶后日粮中添加活性干酵母提高了日采食量，而日采食量的增加导致日增重的提高。

jurgens等认为活性干酵母能改善断奶仔猪平均日增重，mathewnet等报道断奶仔猪日粮中添加酵母培养物有促进采食量和提高平均日增重趋势。

　　7　　图1活性干酵母对0~2周adg和adfi的影响图2活性干酵母对0~2周料肉比的影响　　图3活性干酵母对0~4周adg和adfi的影响图4活性干酵母对0~4周料肉比的影响　　3．小结　　本次试验结果表明,断奶仔猪日粮中添加活性干酵母明显改善了断奶后0~2周的平均日采食　　量和平均日增重，显著改善了断奶后0~4周的平均日增重；

提高了断奶后0~4周的平均日采食量。

综合各项试验指标及回归分析的结果,活性干酵母以含酵母活菌数2×

107个/g全价料的剂量添加到断奶仔猪日粮中对生产性能的改善较好。

活性干酵母对断奶仔猪肠道微生物区系、养分消化率及免疫机能的影响还有待进一步研究。

　　参考文献　　glade,m.j.,andl.m.biesik..enhancednretentioninyearlinghorsessupplementedwithyeast　　culture.j.animsci.198662:

1635-1640　　heugten,e.van.,d.w.funderburke,andk.l.dorton.2014.growthperformance,nutrient　　digestibility,andfecalmicroflorainweanlingpigsfedliveyeast.j.animsci.81:

1004-1012.jurgens,m.h.,r.a.rikabi,andd.r.zimmermantheeffectofdietaryactivedryyeast　　supplementonperformanceofsowsduringgestation-lactationandtheirpigsj.animsci.199775:

593-597.　　kornegay,e.t.,d.rhein-welker,m.d.lindemann,andc.m.woodperformanceandnutrient　　digestibilityinweanlingpigsasinfluencedbyyeastcultureadditionstostarterdietscontainingdriedwheyoroneoftwofibersources.j.animsci.199573:

1381-1389.　　mathew,a.g.,s.e.chattin,c.m.robbins,andd.a.golden.1998.effectsofadirect-fed　　yeastcultureonentericmicrobialpopulations,fermentationacids,andperformanceofweanlingpigs.j.animsci.76:

2138-2145.　　spring,p.,c.wenk,k.a.,dawson,andk.e.,newman.theeffectsofdietary　　mannanoligosaccharidesoncecalparametersandtheconcentrationsofentericbacteriainthececaofsalmonella-challengedbroilerchickspoultryscience79:

205-211　　white,l.a.,m.c.newman,g.l.cromwell,andm.d.lindemann.2014.brewersdriedyeast　　asasourceofmannanoligosaccharidesforweanlingpigs.j.animsci.80:

2619-2628.　　5waystodestroyyouryeasttransformation　　byemilycrowon27thofjuly,2014incell/tissueculture　　transformingyeastwithdnaisaverysimilarprocesstotransforminge.coli,butwithjustenoughdifferencestotripyouupifyouletyourattentionslip.whetheryou’redoingayeasttwo-hybridscreen,orusingyeastasamodelsystem,hereareasomemistakestotoavoid…　　1.forgettingtoaddsinglestrandeddna　　whilee.colireadilytakesupdouble-strandeddna,yeastrequirestheadditionofsingle-stranded“carrierdna”toenhanceuptakeofyourplasmidorfragment.ifyouonlyaddyourplasmidtothetransformationmix,chancesareyou’llbeconfrontedwithapristinelysterileplateafterthreedaysofincubation.　　2.usingoldpeg　　pegisacrucialingredientintheyeasttransformationbuffer.unfortunately,it’sannoyingtomakeandgoesbadquickly.thepercentageofpegwillmakeorbreakthesuccessofyourtransformation;

anoldpegsolutionhashadachancetoevaporate,sothatthewatertopegratioisoff.ifyoucanstandit,makenewpegforeverytransformation.otherwise,makeitinsmallbatches,andsealtightlywithparafilmbetweenusestominimizeevaporation.　　3.usingcellsinstationaryphase　　cellsinlogphase,orexponentialgrowth,takeupdnawithmuchbetterefficiency.thisisnottosaythatcellsfromastationaryculturecan’tbetransformed–onlythatyoursuccessfultransformationratewillbemuchlower.yourbestbetistousecellsthataregrowingrapidlyatthetimeoftransformation.　　4.usingthewrongselectivemarker　　astupidmistake,butonethati’vemademoretimesthani’dliketoadmit.doublechecktosaveyourselfsometears!

　　5.cuttingcornerswhenheat-shocking　　thisisamajordifferencebetweene.coliandyeasttransformations:

whilee.coliisrelativelydelicate,andrequiresaheat-shockoflessthanaminutetotakeupdna,thecellwallmakesyeastmorehardyandresistanttoshock.thus,forefficienttransformation,yeastaregenerallyheat-shockedforupto45minutes.i’vegottenawaywithaslittleas15minutes,butanyshorterandthetransformationefficiencyisdrasticallyreduced.ifyou’renotinahurry,letitgothewhole45minutes,oryou’llgettoexperiencethejoyofdoingitalloveragain.　　酵母双杂交系统　　酵母双杂交系统酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的，研究活细胞内蛋白质相互作用，对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到，它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。

大量的研究文献表明，酵母双杂交技术既可以用来研究哺乳动物基因组编码的蛋白质之间的互作，也可以用来研究高等植物基因组编码的蛋白质之间的互作。

因此，它在许多的研究领域中有着广泛的应用。

　　1、利用酵母双杂交发现新的蛋白质和蛋白质的新功能　　酵母双杂交技术已经成为发现新基因的主要途径。

当我们将已知基因作为诱饵，在选定的cdna文库中筛选与诱饵蛋白相互作用的蛋白，从筛选到的阳性酵母菌株中可以分离得到ad-library载体，并从载体中进一步克隆得到随机插入的cdna片段，并对该片段的编码序列在genebank中进行比较，研究与已知基因在生物学功能上的联系。

另外，也可作为研究已知基因的新功能或多个筛选到的已知基因之间功能相关的主要方法。

例如：

engelender等人以神经末端蛋白alpha-synuclein蛋白为诱饵蛋白，利用酵母双杂交clontechmatchmarkersystem3为操作平台，从成人脑cdna文库中发现了与alpha-synuclein相互作用的新蛋白synphilin-1，并证明了synphilin-1与alpha-synuclein之间的相互作用与帕金森病的发病有密切相关。

为了研究两个蛋白之间的相互作用的结合位点，找到影响或抑制两个蛋白相互作用的因素，michael等人又利用酵母双杂交技术和基因修饰证明了alpha-synuclein的1-65个氨基酸残基和　　synphilin-1的349-555个氨基酸残基之间是相互作用的位点。

研究它们之间的相互作用位点有利于基因治疗药物的开发。

　　2、利用酵母双杂交在细胞体内研究抗原和抗体的相互作用　　利用酶联免疫、免疫共沉淀技术都是利用抗原和抗体间的免疫反应，可以研究抗原和抗体之间的相互作用，但是，它们都是基于体外非细胞的环境中研究蛋白质与蛋白质的相互作用。

而在细胞体内的抗原和抗体的聚积反应则可以通过酵母双杂交进行检测。

来源于矮牵牛的黄烷酮醇还原酶dfr与其抗体scfv的反应中，抗体的单链的三个可变区a4、g4、h3与抗原之间作用有强弱的差异。

geert等利用酵母双杂交技术，将dfr作为诱饵蛋白，编码抗体的三个可变区的基因分别被克隆在ad-library载体上，将bd-bait载体和每种ad-library载体分别转化改造后的酵母菌株中，并检测报告基因在克隆的菌落中的表达活性，从而在活细胞的水平上检测抗