做实验常见错误.docx

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做实验常见错误

化工学院(SCET)

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发信人:

bianxihui(东方慧),信区:

SCET

标 题:

实验室常见错误学习版

发信站:

天大求实BBS(TueJun1213:

53:

242007),本站(

实验室常见错误

楼主发言:

在做实验中,我们不可能一直都保证能进行100%的正解操作,因此我们常会犯下这样那样的错误。

小小的错误有时对实验没什么影响,但有的错误却会让人追悔莫及、前功尽弃。

初进实验室的新手往往会丢三拉四、摔瓶破罐;实验老手虽然难得胡涂,但也有一不小心时。

人总是会出错的。

而我们的很多经验也是从错误中学习得来的。

但是一种错误每人都要犯一次才学习得到,这样的代价也许是大了点因此我想。

(老师的嘱咐、师兄师姐的教导毕竟还是有限的),为了不让自己再犯同样的错误,也不让自己的错误让别人来重复,从别人所犯的错误中来吸取教训。

特此邀请dxy的站友们来谈谈自己在实验中曾犯(耳闻目睹)的错误,总结自己,警示他人。

所谈内容为药学实验,不求大而全,一个错误就可一贴。

表达要明白,最好要有事后分析小结。

以上为我的个人想法,不知战友对此提议有何高见

楼2:

很有意义的一个贴,先说几个:

1 刷瓶子,一定要里外都刷,省得你后来再花时间去找那点脏东西究竟是里面的还是外面的。

2 老教授教育我们在实验室不能穿钉了铁掌的皮鞋,因为会摩擦起电(个人觉得有点夸张)

3 见过一个来我们单位实习的学生,总是左手一个圆底瓶,右手一个,然后不知为何,两个总撞在一起,全碎。

实习三个月,打了三对,老师说他眼睛不聚焦,所以劝刚进实验室的战友,最好是只有一只手拿东西,慢就慢点,别急。

楼3:

洗NMR样品管时,一定不要在水池边摔里边的水;拔下样品管的帽时,要一手拿管,一手拔帽,不要逞英雄一个手拔。

这个教训使我在一天内损失两个样品管,导致一周的饭钱没了。

楼4:

所用样品多或者是有的样品以后还要用的时候,一定要贴上标签,既使你记忆力好得不得了也要帖,否则一旦忘记,后果——

楼4:

回收溶剂时一定要用圆底烧瓶,今天我将柱层析的流分合并后回收,没有用圆底烧瓶,直接用磨口的三角杯,结果由于负压太大,瓶碎了,我的心也跟着碎了。

楼5:

得到了新的试验数据,哪怕再理想也不要立刻开香槟庆祝,趁自己还十分清醒,立刻进行数据处理。

楼6:

对照品母液的保存,有时对照品对我们来说比金子还宝贵,所以对照品母液用完以后一定要用封口膜密封后放进冰箱保存,如果没有密封,呵呵,过些日子溶剂挥发浓度变高,就只有哭的份儿了。

楼7:

PH值的重要性:

师兄在分离纯化一样品时,得到了有两个点的组分。

由于这两个点在TLC上老师拖尾。

摸了很久的条件,发现加入少量醋酸后不拖尾了,上柱后两点也分开了,异常兴奋,指望可以拿这两个东西写篇文章。

可兴奋之余在回收溶剂的时候没有加入碱进行中和,结果组分在酸性条件下分解了,分开的点在TLC变成好几个点。

师兄为此郁郁寡欢好几天。

往层析溶剂里加酸加碱的战友们可要小心啊。

楼8:

在做植化分离时,对流份的合并,特别在薄层板上是一个点时,应从中间流份向两边合并,感觉到足够做谱的量时,就不要再合并其他流份了,如果把薄层板上看似一样的流份全合并后,再发现不纯,后悔晚已;其他未合并进去的流份流份可以单独合并存放,做为样品的母液。

楼9:

看到大家这麽激烈的发言,真是让我感动,这里也有一点小小的实验体会说出来与大家共勉,作实验时特别是分析时一定不要还没出结果就吧样品溶液给倒掉,万一结果不是太理想,可就没的救了,在刷容量瓶时,有好多同志往往只是用洗洁净涮一下,这很难干净,最好在放有洗洁净的超声器中超30分钟,取出洗去洗洁净就非常干净了

楼10:

容量瓶是要用洗液洗的,其他的办法都不是很保险。

楼11:

处理数据,大家一定要学会用excel的公式计算功能,只要建立一次,以后就只要输数据就行了,把计算器丢一边吧。

楼12:

做液相的朋友也要细心,碰到仪器出现了异常情况要冷静分析:

比如柱压高,在排除了预柱和分析柱的污染后,还要怀疑管路的堵塞,我的亲身经历是在做某个药物的血浓测定时,柱压高至27MPa,焦急万分,最后反复检查才发现是混合器的过滤孔被堵塞了,为此浪费了好几天。

楼13:

我想讲一件事:

去年我有个学生做体外血管环试验,开始几天始终不得结果,确实很辛苦。

他跟我谈了可能的原因,但我认为应测一下PSS的PH。

一测试PH很低,他一直在试剂等方面找原因,我又请他的同学按照他的PSS组成重配,结果PH仍旧。

待我检查他的实验纪录时发现,本来只有几十mg的EDTA,结果他却记成几十g了,所以不呈酸性才怪呢!

结论:

实验记录所写的东西粗心不得。

楼14:

我想谈的是要注意即时的数据处理及图像存储。

我虽不是做经典的药学实验,但我是应用影像学方法来观察工具药所引起的血流动力学改变的。

一次做实验,采到了非常漂亮的图像,当时好像是存到了机器的硬盘。

结果,第二天打开机器一看,只有实验序列号,没有图像内容。

惨!

可能是当时人多手杂,没有存盘。

所以,实验环境要安静,要有序进行。

结束实验时要认真检查,确保实验结果正确记录与保存,要自己亲自检查,勿过多依赖他人。

楼15:

一次柱毁人伤的事故:

本来不想说此事(太丢人了),但为了警示大家,也就说了。

本科做毕业论文时跟一个读研究生的师兄做课题,主要是做一种药用植物化学成分的提取分离。

第一次用大孔树脂,师兄亲自操刀,我在旁边看着。

当时也不知为什么,师兄文献没查也没有问用过的同学,直接将大孔树脂装入层析柱,然后向其中加纯水。

约过了十来分钟,就听到嘭的一声,柱子爆了,一块玻片划伤了师兄的大腿(幸好不是其它要害部门),裤子划开了在约3cm的口子,血流了出来。

我和师兄明白过来,他第一句话说:

“他x的,我这三百块的裤子啊。

”伤虽不太,其它人还是将师兄送到医院去了。

(老板一直不知道)大孔树脂吸水膨胀,这种装法当然会爆了,我留下来后收拾残局,满地都是树脂颗料,扫了好久才扫干净啊,这事印象太深了。

我从此明白:

1.做实验时要着工作装,不要穿贵重衣物;2.凡事不要想当然。

师兄就是认为装大孔树脂跟正相柱一样才这样的。

楼16:

千万不要把宜挥发的有机溶剂不密封置于冰箱中!

!

!

记得有人跟我说过一个真实的故事,他们实验室的同事将有机溶剂(好象是乙醚)提取物置于冰箱中过夜,第二天打开冰箱门时发生了爆炸.那还是一个新冰箱呢......乙醚是相当危险的,所以工业上都是尽量避免使用,及其容易发生爆炸

楼17:

做实验时,烧三蒸水,消毒,最好是记一下或者找人提醒一下.我们实验室的几个师兄师姐,好几次都烧干了锅.害的大家没的用.

楼18:

又记.今天要用碳酸钠,好家伙!

!

费了牛劲也没打开!

!

好久不用,因化学反应瓶盖粘到一块去了!

!

忧闷.提醒大家,那些容易与玻璃反映的东东,盖盖子之前,最好是把边缘的残留的打扫干净!

!

!

!

!

楼19:

做植化分离时,如果发现效果不理想,不要总是以为自己的操作技术不过关,有时换一批试剂也许就会改变结果了。

我用正丁醇萃取黄芪甲苷发现药材含量总是不合格,最后才发现,原来是试剂不合格。

楼20:

用强酸水解时,如果需要挥发溶剂,记得温度要低一些,免得有效成分被氧化。

楼21:

我也来讲一个吧:

一次,我和搭档做实验,到了处理数据的时候了,我们一起处理,结果是他看了不好删,我看了也不好也删。

两个人到了最后才发现我们的数据没有备份,在一看我们要的重要的东西被我们你一点我一点的删掉了。

把我们都郁闷了好久。

结论:

做了的实验数据一定要有备份的,再者,实验的配合问题也很重要。

楼22:

合成的酰氯化反应:

几个星期前,实验室做无水的酰氯化反应,先用苯将反应瓶中的少量水带走,因投料少,估计用了一瓶苯,想想可能水已经带光了,就将酰氯投下去,开始没什么异常,一开搅拌,马上发烟,接着就冲料了。

嗨,还是因为里面有水。

后来再做这步反应,一定要保证分水器中苯澄清,5分钟内不再有水滴分出,再加酰氯,就没发生类似现象。

做实验要以事实为准,千万不能估计,或凭感觉。

最基本的一点,就是所有配的试剂,都要写上试剂名称,浓度,配试剂人的名字和日期.因为实验室人多嘛,防止别人拿错自己的东西,也防止自己拿错别人的东西

楼23:

作免疫组化染色时,一定同时要作阴性对照,阳性对照,看似多余,其实这样会少走许多弯路,省的试验阴性以后再三反思,是抗体不好,还是组织中就没有要找的蛋白,最后还要忐忑不安的重作一遍.另外,对于一种新的蛋白,试验前查该蛋白的mapping也很重要的。

楼24:

刚入实验室时,多听,多看,多问,不要想当然抢着干,这样有时很危险的,动手之前最好明白为什么这样做。

楼25:

柱层析上样的惨痛经历:

我们一般都是干法上样,所以样品应该溶在溶剂中,再拌到硅胶里。

但有一次,由于样品比较粘稠,不太好溶,师弟性急,就把粘粘糊糊的样品拌到了硅胶里,溶剂挥发后,一研磨,也看不出与平常有什么不同。

但上样后可就惨了,流速变的slowerandslower,最后不滴了。

到头来只好挖出样品,重新来过,整整花了一天的时间来返工。

经验就是做实验别偷懒,偷一分懒,会有十分的麻烦在等你

楼26:

严重同意,作实验就是要有耐心,不断的尝试不断的忍受失败:

1、捉大鼠时一定注意戴厚手套,捏颈项及背部的皮,另一只手操作或与别人协同操作,(偶同学就今天没戴,就被咬了,很郁闷。

2、麻醉时,腹腔注射注意不要太靠上,如打到肝脏;注意计量,偶们常用1%戊巴比妥钠,按体重克算,最好不要超过0.7ml,偶有同学就有把麻的再也醒不来的。

(如果先弄好浓度,打之前称重,多少克就打多少,省心又放心)

3、做手术前,对操作台作必要的处理,最好自己先做好带夹子的橡皮带固定好,这样固定大鼠时就方便多了;另外,牙齿最好也要有钩状物固定钩住,预防在手术中大鼠对刺激反应,如果麻醉不理想的话,会要乱咬的!

(偶就有这样的血的教训了,不得不去看急诊)

4、手术结束后,清理物品,还要常规给它打抗菌素,预防感染,偶们常用庆大针剂,0.1腹腔注射,连续三天。

(不要怕这样麻烦,还是有好处的,手术伤口愈合和降低死亡率等等。

5、最后,万一被咬了,还是注意一下,偶上次到急诊后,医生给我开了TNT。

但重要还是警惕出血热,打出血热疫苗,但很多地方没有此常备药,实在不行,开点利巴维林,一周。

偶就吃了一礼拜的利巴维林。

以上几点是偶的小小体会,希望能给大家帮助。

楼27:

同病相连啊,每次实验室有眼眶取血之类的活都找我,偶也是咬牙狠心在扎呀,不狠心就没date,没date偶就死定了,每次看大鼠红红的眼睛都很愧疚,唉。

我们手术后是缝皮前,在伤口涂青霉素挺管用的还简单。

大鼠灌胃也是实验的关键,呛了的话轻则剂量不准,重则全军覆没。

一定要抓紧了,头部固定好,没事可用手术失败的大鼠练练,尤其是新手。

实验室的灌胃器是特制的,针头弯曲,还有个小球在一侧,可防止划伤食道。

麻醉药也需常配啊,上次就是用的师姐的,结果给了2ml才倒下,再也没醒,那可是好不容易做的模型,都坚持活了3天了,损失惨重!

楼28:

做电生理试验时候一定要注意仪器的接地,电脑或传感器的静电对生物电,esp脑电影响很大.不要太相信你的三头插座有接地功能.现在偷工减料的实验室装修太多了.他们通常都没有设接地线.可用带液晶显示的电量计(俗称电笔)在电脑后盖的螺丝上测量一下.在确认电源接地不好的情况下,可找一节花线,

一端与计算机背面机壳的螺丝钉相连接,另一端与水管相连接,并在连接处滴加生理盐水另外生物信号的采样设置也是很重要的.下面给出一些常用生物信号的采样参数

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