《细胞生物学》硕士研究生入学考试考试大纲资料文档格式.docx

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2．王金发.细胞生物学实验指导，北京，科学出版社。

第二部分考察要点

1．绪论（细胞生物学发展简史）

1.1.了解细胞的发现，细胞学说的创立及其内容要点和意义

一、创立

二、细胞学说的主要内容

（一）一切有机体都由细胞构成，细胞是构成有机体的基本单位。

除病毒外一切生物体都是由细胞构成的。

（二）细胞是代谢与功能的基本单位。

（三）细胞是有机体生长与发育的基础。

（四）细胞是遗传的基本单位，细胞具有遗传的全能性。

三．意义

1、揭示了细胞的统一性和生物体结构的统一性,使人们认识到各种生物之间存在共同的结构基础.

2、细胞学说的建立标志着生物学的研究进入到细胞水平,极大地促进了生物学的研究进程.

1.2.了解细胞学经典发展时期：

原生质理论的提出，细胞分裂和细胞器的发现，细胞学的建立

1.2.了解实验细胞学时期：

细胞遗传学、细胞生理学、细胞化学

1.4.了解细胞生物学的形成和当前与今后的发展方向--分子细胞生物学

2．细胞的统一性与多样性

2.1.细胞的形态结构

共性：

都有膜结构、遗传物质、核糖体

基本构件：

氨基酸、核苷酸、脂质和糖类

红细胞呈扁圆状、卵细胞圆形

2.2掌握植物细胞与动物细胞的区别

细胞器

动物细胞

植物细胞

细胞壁

无

有

叶绿体

液泡

溶解酶

圆球体

乙醛缩循环体

通讯连接方式

间隙连接

胞丝连接

中心体

胞质分裂方式

收缩环

细胞板

1．线粒体：

是细胞进行有氧呼吸的主要场所。

又称”动力车间”。

细胞生命活动所需的能量，大约95%来自线粒体。

双层膜，形状为椭球形，有少量DNA和RNA，能相对独立遗传。

存在于所有真核生物细胞中（蛔虫等厌氧菌除外）。

2.叶绿体

是绿色植物能进行光合作用的细胞含有的细胞器，是植物细胞的“养料制造车间”和“能量转换站”。

双层膜，形状为扁平椭球形或球形，。

3.内质网

是由膜连接而成的网状结构，是细胞内蛋白质的合成和加工，以及脂质合成的“车间”。

4.高尔基体

对来自内质网的蛋白质加工，分类和包装的“车间”及“发送站”。

5.溶酶体

分解衰老，损伤的细胞器，吞噬并杀死入侵的病毒或细菌。

6.液泡

是调节细胞内的环境，是植物细胞保持坚挺的细胞器。

含有色素（花青素）

7.核糖体

是蛋白质合成的场所，它是由RNA和蛋白质构成的

8.中心体

是细胞中一种重要的无膜结构的细胞器，存在于动物及低等植物细胞中。

每个中心体主要含有两个中心粒。

它是细胞分裂时内部活动的中心。

2.3掌握原核细胞、古核细胞与真核细胞的主要差别

古核细胞：

遗传信息表达系统和其他原核细胞差异相当大，与真核细胞更为接近的另一个类群

原核细胞：

没有细胞核也没有内质网等细胞器支原体是最小最简单细胞代表群：

细菌和蓝藻

真核细胞：

一、真核细胞的基本结构体系

1、脂质及蛋白质组成的生物膜系统

2、核酸和蛋白组成的遗传信息传递系统

3、特异蛋白装配的骨架系统

胞骨架：

微丝（细胞传递和运动）、微管（物质运输通道）、中等纤维（支撑细胞

核骨架：

核纤层、核基质（基因表达，染色体构建和排布有关）

2.4了解病毒与细胞的关系

病毒是非细胞形态的生命体，遗传物质含有两种RNADNA

DNA病毒：

乙肝病毒

RNA病毒：

流感、轮状、艾滋、骨髓灰质炎，烟草花叶

病毒与细胞的比较：

基本结构：

核酸和蛋白质构成的

特征是：

①含有单一种核酸（DNA或RNA）的基因组和蛋白质外壳，没有细胞结构；

②在感染细胞的同时或稍后释放其核酸，然后以核酸复制的方式增殖，而不是以二分裂方式增殖；

③严格的细胞内寄生性。

病毒缺乏独立的代谢能力，只能在活的宿主细胞中，利用细胞的生物合成机器来复制其核酸并合成由其核酸所编码的蛋白，最后装配成完整的、有感染性的病毒单位，即病毒粒。

病毒粒是病毒从细胞到细胞或从宿主到宿主传播的主要形式

关系：

由于病毒的彻底寄生性，所有病毒毫无例外，必须要在细胞内复制增殖，才能表达其基本生命现象，没有细胞的存在也就没有病毒的繁殖。

因此，病毒绝不可能起源于细胞之前，只能现有细胞后有病毒。

由于二者的同源性能，猜测病毒可能是细胞在特定条件下“扔出”的一个“病毒基因组”，或者是具有复制和转录功能的mRNA。

病毒在细胞中增值过程：

4P-27

（细胞膜）吸附——胞饮——融合——释放——翻译聚合酶RNA——复制——转录——翻译成病毒

细胞与病毒关系：

生物大分子-细胞-病毒

3．细胞生物学研究方法

3.1.观察细胞形态结构的技术方法和仪器

3.1.1.光学显微技术

●了解普通复式光学显微镜：

掌握分辨率及计算公式，像差与复合透镜

1）组成部分：

光学放大系统即目镜和物镜

2）照明系统光源和聚光镜（另滤光片）

3）镜架及样品条件系统

显微镜的分辨率定义是指在标本上能清楚分辨的两个小点之间的最小距离，是显微镜的最重要性能。

其计算公式为：

D=0.61λ／N.A.

式中：

D为分辨率（μm）；

λ为光源波长（μm）

；

N.A为物镜的数值口径（也称镜口率）（1000nm=1μm）

像差：

像差-实际像与理想象之间的偏差

复合透镜：

把凸、凹两个透镜粘合起来,组成一个复合透镜

●了解观察样品的一般制备：

固定、切片、染色4P36

取材——固定——包埋——切片——染色——观察

固定剂：

常用甲醛其他戊二醛和锇酸

包埋剂：

石蜡切片成5μm

染色剂：

1）H-E染色苏木精和伊红（碱性燃料）原理：

将染色体或染色质特异性结合改变其透光性的波长

2）锇酸-脂质

3）柠檬酸铅—蛋白质

4）乙酸双氧铀—核酸

反应颜色表：

试剂

检验物质

目的

反应结果

名称、原理

希夫试剂

DNA

紫红色

福尔根反应，酸水解最后产生自由醛基

四氧化锇、苏丹III

不饱和脂肪酸

黑色、深红色

氮汞试剂

蛋白质

红色沉淀

米伦反应

●了解荧光显微镜与观察样品的荧光染色4P32

荧光染料与DAPI特异性地直接与细胞中的DNA结合，显示出细胞核和染色体在细胞中的定位

●了解暗视野显微镜：

聚光器，分辨率

●了解相差显微镜：

用途、特有装置（光栏、相板），原理

原理：

利用光的衍射和干涉特性使相位变成振幅差，表现为明与暗的对比，肉眼能观察到无色透明物体中的细节

特有装置：

将直射光与经物体衍射光分尅；

将一半波长从相位中去掉不发生相互作用

环形光阑：

位于光源与聚光镜之间 

相差板：

物镜后加了有涂有氟化镁的相差板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ

●了解干涉显微镜：

用途、特有装置干涉器

●了解激光共聚焦扫描显微镜及其原理、用途

●

3.1.2.电子显微镜技术

●了解透射电镜：

基本构造，成像原理，分辨率；

超高压电镜

●了解透射电镜观察样品制备：

超薄切片技术，负染色和冰冻劈裂一复型技术和金属投影技术

●了解扫描电镜和隧道电镜及其原理和用途

3.2.细胞化学组成及其定位和动态分析技术

●了解细胞和细胞器的分离：

匀浆和差速离心技术

●了解生物化学和分子生物学技术

●了解细胞化学、免疫荧光细胞化学和流式细胞分离技术

●了解电镜细胞化学和电镜免疫细胞化学技术

●了解显微放射自显影、分子原位杂交

3.3.了解细胞培养、细胞工程、显微操作、活体染色等技术方法

4．细胞质膜、

4.1.质膜的化学组成和结构

4.1.1.掌握构成质膜的主要分子类别及其特点和意义

4.1.1.1.脂质：

磷脂、糖脂、胆固醇。

附：

人工脂质体及其应用

磷脂：

有一个极性头和两个非极性头尾简称脂肪酸链；

碳链为偶数，含有1-2个不饱和脂肪酸（都在内质网形成）脂双层

磷脂酰胆碱（卵磷脂）

PC

磷酯酰丝氨酸

PS

磷脂酰乙醇胺

PE

磷脂酰肌醇

PI

信号传导

最简单糖脂——脑苷类

胆固醇——疏水性强，无脂双层

人工脂质体：

1）极性在水里，非极性在空气中，搅动形成乳浊液，形成了极性在外端而非极性在内的脂分子层4P58

2）用于脂溶性靶向药物脂质体的应用，在脂质体中嵌入药物或酶，使药物更好的作用于靶细胞。

4.1.1.2.蛋白质：

外在蛋白，内在蛋白；

跨膜蛋白的一般结构特点

描述三种膜蛋白的性质和他们之间的差异

外在膜蛋白为水溶性蛋白，靠离子键或其他较弱的键与膜表面的膜蛋白分子结合。

只要改变离子的浓度甚至提高温度就可以从膜上分离下来，且膜的结构不被破坏。

内在膜蛋白与膜结合比较紧密，多数为跨膜蛋白，只有用去垢剂使膜崩解后才可分离出来。

内膜蛋白占整个膜蛋白的70%—80%。

脂锚定膜蛋白是通过与之共价相连的脂分子（如脂肪酸或糖脂）插入膜的脂双分子中，从而锚定在细胞质膜上，与脂肪酸结合的脂锚定膜蛋白多分布在质膜内侧，与糖脂相结合的脂锚定膜蛋白多分布在质膜外侧。

4.1.1.3.糖类.附：

ABO血型抗原

4.1.2.掌握质膜的结构模型

4.2细胞质膜的基本特征与功能

4.2.1膜的流动性

简述膜的流动性对细胞的重要作用。

细胞膜的流动性具有重要的生理意义：

与物质运输、细胞识别、细胞融合、细胞表面受体功能调节等有关。

4.2.2膜的不对称性

膜质双脂在mongodb脂双层中呈不均匀分布：

如：

红细胞脂膜上，鞘磷脂和卵磷脂分布在质膜外小叶，脂酰乙醇胺等多分布在质膜内小叶。

从蛋白质、脂类和糖着手，描述膜的不对称性

糖脂的分布表现出完全不对称性，其糖侧链都在纸膜或其他内膜的ES面上，膜蛋白的不确定性是指每种膜蛋白分子在纸膜上都具有确定的方向性

4.2.3膜骨架

膜骨架：

细胞质膜与膜蛋白相连的由纤维蛋白组成的网架结构。

红细胞膜骨架在红细胞内侧，有膜蛋白和纤维蛋白组成的网架结构。

红细胞内膜存在的主要蛋白有：

血影蛋白、锚蛋白、带3蛋白、带4.1蛋白、肌动蛋白和血型糖蛋白。

膜支架蛋白包括：

血影蛋白、锚蛋白、带4.1蛋白、肌动蛋白。

血影蛋白在带4.1蛋白的协助下与肌动蛋白结合形成膜骨架的基本网络，带4.1蛋白与血型糖蛋白相互作用，锚蛋白与血影蛋白、带3蛋白相互作用。

功能：

是红细胞质膜具有刚性和韧性，维持红细胞正常形态，协助细胞质膜完成多种生理功能。

4.2.4细胞质膜的基本功能

5．物质的跨膜运输

5.2.质膜的功能

5.2.1.重点掌握物质的跨膜运输

5.