饲草生产学实验实习指导书.docx
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饲草生产学实验实习指导书
饲草生产学实验实习指导书
曹社会何学青
西北农林科技大学
二零一二年二月
实验一土壤团聚体组成的测定
一、目的意义
土壤结构通常指大小不同，形状各异的土核形成的团聚体。
通常土壤团粒结构指10～0.25mm之间的土壤结构，其中2～3mm最为理想，俗称：
“蚂蚁蛋”、“海绵土”。
水稳性团聚体是由有机胶体胶结而成，其形成与土壤有机质的多少有关。
由于不同种类的牧草遗留给土壤有机质的多少不同，因而，测定土壤团聚体的组成不仅一般性的可以评价土壤肥力的高低，而且可以评价牧草的培肥能力高低。
所以，团聚体组成的测定已成为土壤结构、土壤肥力的变化监测和制定土壤培肥措施的重要内容。
二、测定原理
土壤结构的测定国内外普遍采用分筛的物理学方法，即用不同大小孔径的筛组分选出不同粒径的土壤颗粒，然后称重计算百分比。
分筛分为人工分筛与机械分筛两类。
机械分筛法简单省力，而且准确性高，目前国内外普遍采用此法。
三、方法步骤
（一）采样与取样
采样：
从土壤表层每样点采取具有代表性土样1000g，混合样品经缩减后应大于1000克。
样品在室内徒手剥碎至10～12cm大小后风干待测。
取样：
一般从缩减后的样品中均匀的称取1000g。
（二）干筛
1.置样：
将1000g风干样置于孔径为10、7、5、3、2、1、0.5、0.25mm的筛组上层后加盖。
2.分筛：
人工分筛：
将筛组夹在两臂之间摇动10次，取下上两层后其余再摇动5次。
机械分筛：
在XSB—200型振筛机（冲击147次/min；筛动221次/min）振筛30s。
3.测定分层土壤重量与计算：
用粗天平测定各层土壤的重量（精确至0.01g），之后计算其百分比例。
（四）湿筛
1.配制50g小样：
按上述百分比例配制50g小样。
因避免堵塞筛孔而将0.025mm以下的土壤不放入，所以实际小样小于50g。
2.置入小样：
将50g（实际≤50g）倒入1000ml的沉降筒，沿筒壁徐徐加入水至饱和后浸润10min。
3.将筛组置入水中：
将5、3、2、1、0.5、0.25mm的筛组放入水桶种，加水至高出筛层10cm；
4.土样转入：
将沉降筒倒置，筒口浸入水中，拔去塞子，使土壤团粒慢慢落入筛组上层，盖上盖子。
5.水中分筛：
将筛组在水中慢慢提起，迅速下降，如此重复10次后，取下上二层，再将其余筛组重复5次。
然后，分筛层用洗瓶将土壤冲洗至瓷板，再分层转移至已称重的铝盒中烘干。
6.烘干土壤称重与计算：
烘干土壤称重（精确至0.01g）后计算各级团聚体的百分含量和总含量。
表1土壤团聚体组成测定登记表
标本号：
________分析号：
_________土壤名称：
_______________土层深度：
______________
样品
≥10mm
10～7mm
7～5mm
5～3mm
3～2mm
2～1mm
1～0.5mm
0.5～0.25mm
≤0.25mm
分筛类型
干筛
湿筛
干筛
湿筛
干筛
湿筛
干筛
湿筛
干筛
湿筛
干筛
湿筛
干筛
湿筛
干筛
湿筛
干筛
湿筛
重量（g）
团聚体含量（%）
实验二牧草种子的形态识别
一、目的意义
种子是农业生产的基本材料，种子品质的优劣对于播种的成功与产量和品质好坏关系极为密切。
因为生产上实际采用的种子常混有一定量的其它植物种子和杂质，因而种子需要进行检验以保证良好的品质。
然而植物种子的形态千差万别，形态各异，所以识别不同种子的形态特征差异是种子检验工作的基本技能。
本实验的目的是了解常见饲用植物种子的表观形态特征，使学生掌握观察的基本方法。
为后续种子检验的实验奠定操作技能基础。
二、材料与器材
仪器：
扩大镜、镊子、立体解剖镜、尺子。
若干牧草种子如：
豆科：
紫花苜蓿、红三叶、白三叶、小冠花、毛苕子、红豆草、草木樨和柠条等。
禾本科：
黑麦草（一年生、多年生）、扁穗冰草、鸡脚草、雀麦、披碱草、早熟禾、高丹草等
其它科：
串叶松香草（菊科）、甜菜（藜科）、籽粒苋（苋科）
三、方法步骤
1.观察与记录
浏览观察实验所准备的各种牧草饲料作物的种子10min，记录容器上的名称和种子存放状态下的外观状态。
2.取少许种子借助器具观察
每人各取少量豆科紫花苜蓿、白三叶、毛苕子、红豆草、红豆草、禾本科黑麦草，高羊茅，早熟禾，高丹草和其它科串叶松香草、籽粒苋种子置于实验台上，借助扩大镜、镊子按种类分别逐一观察各类种子样品的混杂状况、形状与结构，初步认识并记录各类种子形态的观察结果。
对于较小的种子可以借助立体解剖镜观察。
3.细致观察描述
选取有代表性的紫花苜蓿、冬牧-70小黑麦、串叶松香草，仔细观察种子的形状、色泽、大小、构造及附属物，用文字表述其肉眼观察到的表观基本差异。
4.借助器具重点观察描述
用扩大镜、镊子、立体解剖镜和尺子等，进一步详细地观察记录种子的结构等形态特征。
5.识别混合未知样品
试识别1，2号混合牧草种子样品中含有的牧草种类。
表2种子形态观察记载表
观察项目
豆科
禾本科
其它科
紫花苜蓿
白三叶
毛苕子
红豆草
黑麦草
高羊茅
早熟禾
高丹草
串叶松香草
籽粒苋
混杂
形状
大小
气味
色泽
附属物
参考资料一常见牧草种子形态
1.紫花苜蓿：
黄色，肾形，千粒重1.4～2.3g。
2.红三叶：
黄褐色、椭圆形或肾脏形，千粒重1.5～2.2g。
3.白三叶：
心脏形，千粒重0.5～0.7g。
4.小冠花：
棒状、细长，长3.5mm，宽1mm。
5.毛苕子：
球形略长，黑色，千粒重25～30g。
6.红豆草：
半圆形，肾脏形，千粒重13～16g。
7.草木樨：
椭圆形或肾脏形，千粒重2～2.5g。
8.柠条：
不规则形，褐色、黄色，千粒重55g。
9.一年生黑麦草：
外稃披针形，背园，顶具6～8mm短芒。
10.多年生黑麦草：
内外稃等长，船形，脉纹靠边，缘具细毛。
11.披碱草：
内外稃几乎等长，颖果狭长椭圆形，褐色。
12.早熟禾：
颖果纺锤形，具三棱，千粒重0.37g。
13.高丹草：
颖果，近圆形，红黄褐色，千粒重10～15g。
14.串叶松香草：
瘦果心脏形，褐色，千粒重20～25g。
15.籽粒苋：
球形，紫黑、棕黄、淡黄，有光泽，千粒重0.5～1.0g。
参考资料二主要牧草种子分类检索表
（一）主要禾本科牧草种子分种检索表
1.颖果顶端具毛茸。
2.颖果具长柔毛。
穗轴节间有毛，基盘有毛或无毛。
3.外稃无毛，基盘无毛。
4.外稃无芒……………………………………………………………………燕麦Avenasativa
3.外稃有毛，茎盘密生鬃毛。
5.小穗轴节间披针形，密生淡棕色或白色硬毛；芒长约30mm…………野燕麦A.satua
2.颖果不具长柔毛
6.颖果与内外稃相贴，不易分离。
7.第一颖缺如，奇数外稃的背对向穗轴。
8.芒长为5mm以上………………………………………多花黑麦草Loliummultiflorum
8.无芒或具短芒…………………………………………………多年生黑麦草L.perenne
7.不为上述情况。
9.内稃多为膜质。
10.外稃两侧压扁，内稃狭窄；颖果具窄而深的腹沟，不呈舟形。
外稃9～11脉，芒长仅2mm………………………………………………………扁穗雀麦Bromuscatharticus
10.外稃不为两侧压扁；颖果具宽而浅的腹沟，呈舟形。
颖果背腹压扁。
外稃无芒或具5mm左右的芒。
11.外稃无芒或仅具1～2mm的芒，背部无毛………………无芒雀麦B.inermis
11.外稃具10mm以上的芒。
颖果腹面凹陷呈舟形。
颖果顶端具黄色毛茸，外稃紫褐色…………………………………………………………………………野雀麦B.arvensis
9.内稃多不为膜质。
12.小穗轴节呈圆柱形，先端膨大，平截或凹陷。
13.稃片长为6mm以下。
14.外稃长约3mm，无芒或仅具芒尖…………………羊茅Festucaovina
13.稃片长在6mm以上。
15.外稃长6～6.5mm，背部两边向上具刺状毛，内稃具不明显的细条纹………………………………………………………………………………牛尾草F.elatior
15.外稃长6.8～8mm，背部脉上及两边向基部具刺状粗糙，内稃具点状粗糙…………………………………………………………………苇状羊茅F.arundinacea
16.外稃具毛。
17.芒不向后弯曲，芒长在20mm以下，外稃3脉至多脉。
18.颖果长在4mm以下，小穗一枚着生每节。
19.外稃具3～5脉。
20.外稃具不明显的三脉，芒长2～4mm；小穗轴节间与内稃紧贴………………………………………………………………………冰草Agropyron.cristatum
20.外稃具明显的5脉，芒长1～2mm，小穗轴节间稍弯曲。
……………………………………………………………沙生冰草A.desertorum
6.颖果与内外稃易分离。
21.内稃为外稃所包。
基盘具绵毛。
脐不明显，具腹沟。
21.颖果三棱形，腹面呈明显小舟形…………………………………草地早熟禾Poapratensis
1.颖果顶端不具毛茸。
22.小穗含1至多花，颖等长或不等长，具1至多脉，具脊或否。
23.不具不孕小穗（枝）所成的刚毛。
第一颖长为小穗的1/3～1/2，不为膜质，基部包卷小穗。
小穗长3mm，具粗状芒；可孕小花外稃淡灰褐色……………………………………………………………………………稗Echinochloacrusgalli
（二）主要豆科牧草种子分种检索表
1.种脐为圆形。
2.种脐靠近种子长的中央。
3.脐部不具脐冠。
4.种皮具斑纹或有色斑点。
胚根尖不与子叶分开，不具胚乳
…………………………………………………………………红豆草Onobrychisviciaefolia
2.种脐不靠近种子长的中央。
5.种脐具环状脐冠。
6.胚根长为子叶长的3/4以内。
7.无胚乳。
8.表面黑紫色或褐色具黑紫色花斑……………………二色胡枝子Lespedezabicolor
7.具极薄的胚乳。
9.种子长2～2.5mm。
10.种脐之晕轮白色，晕轮与胚根尖相对处宽大，且微隆起
………………………………………………………………毛胡枝子L.tomentosa
10.种脐之晕轮浅绿白色或黄白色，晕轮两侧宽，上下端较窄
……………………………………………………………达乌里胡枝子L.davurica
9.种子长1.5～2mm。
种子椭圆状肾形、宽椭圆形或近球形，表面暗褐色或橄榄绿色，有的具灰褐色斑点……………………………………………………百脉根L.corniculatus
11.种子表面光滑或近光滑，具微颗粒。
12.胚根长为子叶长的3/4或以上。
13.种子表面具花斑或斑点。
14.种子长为1～1.5mm，暗绿色或暗褐色，具黑色花斑。
………………………………………………………杂三叶Trifoliumfragiferum
13.种子表面不具花纹、花斑或斑点。
15.种子长1.5～3mm…………………………黄花苜蓿Medicagofalcate
15.种子长1～1.5mm………………………………白三叶Trifoliumrepens
12.胚根长为子叶长的3/4以内。
16.胚根尖与子叶分开
17.种脐在种子长的1/2以上，种瘤在脐条的中间
………………………………………冠状岩黄芪Hedysarumcoronarium
17.种脐在种子长的1/2以下，种瘤在脐条的远端。
18.种子长1.5～2.5mm，表面多为上下两色，上部黄色或绿黄色，下部黄色，一色者罕见………………………………………………红三叶Trifoliumpratense
18.种子表面不为上下两色………………天兰苜蓿Medicagolupulina
16.胚根尖不与子叶分开。
19.表面不具花斑或不具花斑，种子长2mm，常一侧扁；另一侧稍圆，晕环褐色.……………………………………………………黄花草木樨Melilotusofficinalis
19.表面不具花斑、表面黄色或黄褐色，种子长1.5～3mm。
20.种子一侧扁平；另一侧圆…………白花草木樨Melilotusalbus
20.种子两侧扁或微凹。
21.表面有很亮的光泽，光滑，种瘤浅褐色，晕轮隆起，褐色，胚根与子叶间界线不明………………………………………………绛三叶Trifoliuminaarnatum
1.种脐不为圆形。
22.具胚乳。
23.种脐靠近种子长的中央，种子表面光滑。
24.胚根与子叶分开，不具环状脐冠。
种子长2.5mm以上，倒卵形….…………………………………………………………紫云英Astragalussinicus
22.无胚乳
25.种脐线形。
26.种瘤在脊背上。
27.种脐限制在种子的边缘上，长占种子圆周长的60%以上，种子近球形，稍扁…………………………………………野豌豆Viciasepium
27.种脐不限制在种子的边缘。
28.种子表面黄褐色或黄绿色，且具黑色花斑，种脐长占种子圆周长的30%～40%..………………………………………山野豌豆V.amoena
26.种瘤不在脊背上………………箭筈豌豆V.sativa
25.种脐不为线形。
28.种瘤不在脊背上，种脐为椭圆形或卵形，种子表面光滑或粗糙。
29.种子近球形，种子直径在3mm以上。
30.种脐卵形，种子长3.5～5mm……………………………………………………………………………毛苕子V.villosa
30.种脐椭圆形。
31.种子较小，长3～4mm，具紫色花斑……………………………………………………………………草原山黧豆Lupinuspratensis
31.种子较大，直径4～6mm…………………………………………………………………紫花豌豆Pisumarvensis
30.种子不为球形，为斧形，种脐在腹背上，为宽椭圆形…………………………………………………………栽培山黧豆Lupinusativus
实验三牧草种子的纯净度检验
一、目的意义
种子是农业生产的重要生产资料，种子品质的好坏直接与播种的成功密切相关。
掌握种子检验的基本方法可以了解牧草种子的品质优劣，从而为牧草生产和种子的调运、贮存、交换活动可以提供科学的数据。
二、实验仪器与材料
仪器：
天平、镊子、放大镜。
材料：
豆科种子：
紫花苜蓿Medicagosativa红三叶Trifoliumpratense
白三叶Trifoliumrepens小冠花Cornllinavaria
毛苕子ViciavillosaRoth.
禾草种子：
多花生黑麦草Loliummultiflorum苇状羊茅Festuaaroundinacea
高羊茅Festuapratensis扁穗冰草Agropyroncristatum
三、方法步骤
纯净度是指纯净种子占供试种子的百分数。
纯净度的分析一般涉及三个阶段的工作。
（一）取样
种子批（Seedlot）指一批种子所容许的最大数量。
通常大粒种子为10000kg，小粒种子为5000kg。
一个种子批至少有一个送验样品。
送验样品的取样按种子的不同存放状态有不同的要求。
一般袋装种子10袋以下，每袋均在上、中、下三层抽取；10袋以上，各袋在每袋不同位置取一个样点；散装种子：
分层与不同位点采取初次样品，初次样品经混合后得取混合原始样品，原始样品经平均样品后分出个项目的送验样品。
（二）按标准取样
按表1.要求取一定量（括号内的标记数量）的牧草种子，平摊于纸上。
（三）分拣
将平摊于纸上的种子分检出下列成分：
a.无价值种子：
破损、霉烂、瘦小有病虫害的种子。
b.有生命的夹杂物：
混杂进入的其他种子、蛹卵。
c.无生命的夹杂物：
泥沙、石块、秸秆、稃壳。
表3.送验样品的最低重量《GB中华人民共和国牧草种子检验规程》
学名
中文名
送验最低重量（g）
净度分析最低重量（g）
粒数/g
Astragalusadsurgens
沙打旺
100
10
720
Medicagosativa
紫花苜蓿
50
5
500
Trifoliumrepens
白三叶
20
2
2000
Trifoliumpratense
红三叶
50
5
600
Loliumprenne
多年生黑麦草
50
5
530
Loliummultiflorum
多花生黑麦草
50
15
180
Sorghumsudanese
苏（高）丹草
250
25
100
Bromusinermis
无芒雀麦
70
7
230
Festuaaroundinacea
苇状羊茅
50
5
450
Lotuscorniculatus
百脉根
30
3
1350
（四）计算
计算纯净度（%）。
纯净度（%）=（供试种子重—混杂物重/供试种子重）*100%
（五）容许误差
检验重复2次，2次重复间误差≥1%～2%应做第3次，最后计算平均值。
实验四牧草种子的发芽试验
一、目的与意义
发芽率是种子品质的最重要指标之一。
它是最简单最直接衡量种子品质的常用指标，属国内外一般常规种子检验中必不可少的内容。
二、仪器材料
吸水纸、发芽皿、镊子、牧草种子。
三、方法步骤
从净种子中随机取400粒4份（每份为一重复），用镊子整齐的排列在湿润的发芽床上，贴上标签、写上草名、人名、日期。
表4发芽条件与标准
牧草
发芽床
温度（℃）
光照
发芽势（d）
发芽率（D）
备注
小冠花
滤纸
20
暗
4
10
紫花苜蓿
滤纸
20
暗
4
10
白三叶
滤纸
20
暗
4
10
红三叶
滤纸
20
暗
4
10
毛苕子
沙、滤纸
20～22
暗
5
14
多花黑麦草
滤纸
20～22
光
5
14
苇状羊茅
滤纸
20～30；
15～25
暗
7
14
高羊茅
滤纸
20-30；
15～25
暗
7
14
扁穗冰草
滤纸
20～30；
15～25
暗
5
28
四、日常观察记录与管理
1.每日保持湿润，观察记录发芽状况。
2.观察要求：
a.整个发芽试验期间至少观察2次，初次与末次。
7d以上者，应增加次数。
b.初次和中间分别计数正常与明显死亡的软腐种子；末次计数记录所有正常、不正常、硬实和死亡种子数。
c.实验结束后，如怀疑存在休眠、中毒或病菌感染而导致结果不可靠，重新试验。
五、结果计算
1.第一步：
先计算每一重复各次正常苗之和，然后计算正常、不正常、硬实和死亡种子占供试种子的百分数。
发芽率=发芽终期全部正常苗数/供试种子数*100%
2.第二步：
计算4次重复的平均数至整数位。
如4次均未超出最大容许误差，则结果可靠，否则进行再次试验。
3.误差：
发芽试验2次重复间的最大容许误差（两尾检验2.5%显著水平）
表5发芽试验2次重复间的最大容许误差的两尾检验法GB标准（2.5%显著水平）
发芽率（%）
最大误差
1～99
2
5
98
3
6
97
4
7
96
5
8
95
6
9
93～94
7～8
10
91～92
9～10
11
89～90
11～12
12
87～88
13～14
13
84～86
15～17
14
81～83
18～20
15
78～80
21～23
16
73～77
24～28
17
67～72
29～34
18
56～66
35～45
19
51～55
46～50
20
*GB标准：
国家标准的符号标志。
即中华人民共和国国家标准
表6国际安全运输协会标准（ISTA，1993）
发芽率（%）
最大误差
98～99
2～3
2
95～97
4～6
3
91～94
7～10
4
85～90
11～16
5
77～84
17～24
6
60～76
25～41
7
51～59
42～50
8
*ISTA（InternationalSafeTransitAssociation）是国际安全运输协会，它是在全世界的影响力非常大的一个行业标准。
六、作业
试计算所做牧草材料的实际播种量。
播量参考值：
紫花苜蓿（15～22.5kg/hm2）白三叶（7.5kg/hm2）红三叶（15kg/hm2）
小冠花（15kg/hm2）毛苕子（60kg/hm2）多花生黑麦草（15～22.5kg/hm2）
苇状羊茅（7.5～15kg/hm2）高羊茅（7.5～15kg/hm2）扁穗冰草（15～22.5kg/hm2）
实验五牧草种子生活力测定
（TTC－染色法）
一、实验目的
掌握用TTC－染色法测定种子生活力的原理和方法。
二、测定原理
凡有生命活力的种子，胚在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生命力种子的胚则无此反应。
TTC可以渗入种子的活细胞中，并作为受氢体而被脱氢辅酶（NADH或NADPH）还原，由无色的氧化型变成红色的三苯甲腙，这样，活种子胚部被染成红色。
反之，死种子不能染色。
部分丧失生活力的种子染色较浅。
因此可根据染色部位和染色程度来判断种子的生活力。
反应式如下：
H
∣
N－N－C6H5+2HN－N－C6H5
C6H5－C∣Cl－————→C6H5－C+HCl
N=N+－C6H5N=N－C6H5
TTC（无色）TPF（红色）
2,3,5－氯化三苯基四氮唑三苯基甲腙
三、材料、设备及试剂
1.材料
紫花苜蓿、红三叶、白三叶、小冠花、毛苕子、多花生黑麦草、苇状羊茅、高羊茅、扁穗冰草的新种子或贮存3年以上的陈种子。
2.仪器
恒温培养箱，小烧杯，刀片，镊子。
3.试剂及配制
0.1％TTC溶液（称取0.1gTTC溶于100ml蒸馏水或凉开水中即成0.1％TTC溶液
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