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1、饲草生产学实验实习指导书 饲草生产学实验实习指导书曹社会 何学青西北农林科技大学二零一二年二月实验一 土壤团聚体组成的测定一、目的意义土壤结构通常指大小不同，形状各异的土核形成的团聚体。通常土壤团粒结构指100.25mm之间的土壤结构，其中23mm最为理想，俗称：“蚂蚁蛋”、“海绵土”。水稳性团聚体是由有机胶体胶结而成，其形成与土壤有机质的多少有关。由于不同种类的牧草遗留给土壤有机质的多少不同，因而，测定土壤团聚体的组成不仅一般性的可以评价土壤肥力的高低，而且可以评价牧草的培肥能力高低。所以，团聚体组成的测定已成为土壤结构、土壤肥力的变化监测和制定土壤培肥措施的重要内容。二、测定原理 土壤结构

2、的测定国内外普遍采用分筛的物理学方法，即用不同大小孔径的筛组分选出不同粒径的土壤颗粒，然后称重计算百分比。分筛分为人工分筛与机械分筛两类。机械分筛法简单省力，而且准确性高，目前国内外普遍采用此法。三、方法步骤（一）采样与取样 采样：从土壤表层每样点采取具有代表性土样1000g，混合样品经缩减后应大于1000克。样品在室内徒手剥碎至1012cm大小后风干待测。 取样：一般从缩减后的样品中均匀的称取1000g。（二）干筛1. 置样：将1000g风干样置于孔径为10、7、5、3、2、1、0.5、0.25mm的筛组上层后加盖。2. 分筛： 人工分筛：将筛组夹在两臂之间摇动10次，取下上两层后其余再摇动

3、5次。 机械分筛：在XSB200型 振筛机（冲击147次/min；筛动221次/min）振筛30s。3. 测定分层土壤重量与计算：用粗天平测定各层土壤的重量（精确至0.01g），之后计算其百分比例。（四）湿筛1. 配制50g小样：按上述百分比例配制50g小样。因避免堵塞筛孔而将0.025mm以下的土壤不放入，所以实际小样小于50g。2. 置入小样：将50g（实际50g）倒入1000ml的沉降筒，沿筒壁徐徐加入水至饱和后浸润10min。3. 将筛组置入水中：将5、3、2、1、0.5、0.25mm的筛组放入水桶种，加水至高出筛层10cm；4. 土样转入：将沉降筒倒置，筒口浸入水中，拔去塞子，使土壤

4、团粒慢慢落入筛组上层，盖上盖子。5. 水中分筛：将筛组在水中慢慢提起，迅速下降，如此重复10次后，取下上二层，再将其余筛组重复5次。然后，分筛层用洗瓶将土壤冲洗至瓷板，再分层转移至已称重的铝盒中烘干。6. 烘干土壤称重与计算：烘干土壤称重（精确至0.01g）后计算各级团聚体的百分含量和总含量。表1 土壤团聚体组成测定登记表标本号：_分析号：_ 土壤名称：_土层深度：_样品10mm107mm75mm53mm32mm21mm10.5mm0.50.25mm0.25mm分筛类型干筛湿筛干筛湿筛干筛湿筛干筛湿筛干筛湿筛干筛湿筛干筛湿筛干筛湿筛干筛湿筛重量(g)团聚体含量(%)实验二 牧草种子的形态识别一

5、、目的意义 种子是农业生产的基本材料，种子品质的优劣对于播种的成功与产量和品质好坏关系极为密切。因为生产上实际采用的种子常混有一定量的其它植物种子和杂质，因而种子需要进行检验以保证良好的品质。然而植物种子的形态千差万别，形态各异，所以识别不同种子的形态特征差异是种子检验工作的基本技能。 本实验的目的是了解常见饲用植物种子的表观形态特征，使学生掌握观察的基本方法。为后续种子检验的实验奠定操作技能基础。二、材料与器材 仪器：扩大镜、镊子、立体解剖镜、尺子。 若干牧草种子如： 豆科： 紫花苜蓿、红三叶、白三叶、小冠花、毛苕子、红豆草、草木樨和柠条等。 禾本科：黑麦草（一年生、多年生）、扁穗冰草、鸡脚

6、草、雀麦、披碱草、早熟禾、高丹草等 其它科： 串叶松香草（菊科）、甜菜（藜科）、籽粒苋（苋科）三、方法步骤1. 观察与记录 浏览观察实验所准备的各种牧草饲料作物的种子10min，记录容器上的名称和种子存放状态下的外观状态。2. 取少许种子借助器具观察 每人各取少量豆科紫花苜蓿、白三叶、毛苕子、红豆草、红豆草、禾本科黑麦草，高羊茅，早熟禾，高丹草和其它科串叶松香草、籽粒苋种子置于实验台上，借助扩大镜、镊子按种类分别逐一观察各类种子样品的混杂状况、形状与结构，初步认识并记录各类种子形态的观察结果。对于较小的种子可以借助立体解剖镜观察。3. 细致观察描述 选取有代表性的紫花苜蓿、冬牧-70小黑麦、串

7、叶松香草，仔细观察种子的形状、色泽、大小、构造及附属物，用文字表述其肉眼观察到的表观基本差异。4. 借助器具重点观察描述 用扩大镜、镊子、立体解剖镜和尺子等，进一步详细地观察记录种子的结构等形态特征。5. 识别混合未知样品 试识别1，2号混合牧草种子样品中含有的牧草种类。表2 种子形态观察记载表观察项目豆科禾本科其它科紫花苜蓿白三叶毛苕子红豆草黑麦草高羊茅早熟禾高丹草串叶松香草籽粒苋混杂形状大小气味色泽附属物参考资料 一 常见牧草种子形态1. 紫花苜蓿：黄色，肾形，千粒重1.42.3g。2. 红三叶：黄褐色、椭圆形或肾脏形，千粒重1.52.2g。3. 白三叶：心脏形，千粒重0.50.7g。 4

8、. 小冠花：棒状、细长，长3.5mm，宽1mm。5. 毛苕子：球形略长，黑色，千粒重2530g。6. 红豆草：半圆形，肾脏形，千粒重1316g。7. 草木樨：椭圆形或肾脏形，千粒重22.5g。8. 柠条：不规则形，褐色、黄色，千粒重55g。9. 一年生黑麦草：外稃披针形，背园，顶具68mm短芒。10. 多年生黑麦草：内外稃等长，船形，脉纹靠边，缘具细毛。11. 披碱草：内外稃几乎等长，颖果狭长椭圆形，褐色。12. 早熟禾：颖果纺锤形，具三棱，千粒重0.37g。13. 高丹草： 颖果，近圆形，红黄褐色，千粒重1015g。14. 串叶松香草：瘦果心脏形，褐色，千粒重2025g。 15. 籽粒苋：球

9、形，紫黑、棕黄、淡黄，有光泽，千粒重0.51.0g。参考资料二 主要牧草种子分类检索表(一)主要禾本科牧草种子分种检索表1. 颖果顶端具毛茸。2. 颖果具长柔毛。穗轴节间有毛，基盘有毛或无毛。3. 外稃无毛，基盘无毛。4. 外稃无芒燕麦Avena sativa3. 外稃有毛，茎盘密生鬃毛。5. 小穗轴节间披针形，密生淡棕色或白色硬毛；芒长约30mm野燕麦A.satua2. 颖果不具长柔毛6. 颖果与内外稃相贴，不易分离。7. 第一颖缺如，奇数外稃的背对向穗轴。8. 芒长为5mm以上多花黑麦草 Lolium multiflorum8. 无芒或具短芒多年生黑麦草L.perenne7.不为上述情况。

10、9. 内稃多为膜质。10. 外稃两侧压扁，内稃狭窄；颖果具窄而深的腹沟，不呈舟形。外稃911脉，芒长仅2mm扁穗雀麦Bromus catharticus10. 外稃不为两侧压扁；颖果具宽而浅的腹沟，呈舟形。颖果背腹压扁。外稃无芒或具5mm左右的芒。11. 外稃无芒或仅具12mm的芒，背部无毛无芒雀麦B.inermis11. 外稃具10mm以上的芒。颖果腹面凹陷呈舟形。颖果顶端具黄色毛茸，外稃紫褐色野雀麦B.arvensis9. 内稃多不为膜质。12. 小穗轴节呈圆柱形，先端膨大，平截或凹陷。13. 稃片长为6mm以下。 14. 外稃长约3mm，无芒或仅具芒尖羊茅Festuca ovina13.

11、 稃片长在6mm以上。15.外稃长66.5mm，背部两边向上具刺状毛，内稃具不明显的细条纹牛尾草F.elatior15. 外稃长6.88mm，背部脉上及两边向基部具刺状粗糙，内稃具点状粗糙苇状羊茅F.arundinacea16. 外稃具毛。17. 芒不向后弯曲，芒长在20mm以下，外稃3脉至多脉。18. 颖果长在4mm以下，小穗一枚着生每节。19. 外稃具35脉。20. 外稃具不明显的三脉，芒长24mm；小穗轴节间与内稃紧贴冰草Agropyron.cristatum20. 外稃具明显的5脉，芒长12mm，小穗轴节间稍弯曲。 沙生冰草A.desertorum6.颖果与内外稃易分离。21. 内稃为

12、外稃所包。基盘具绵毛。脐不明显，具腹沟。21. 颖果三棱形，腹面呈明显小舟形草地早熟禾Poa pratensis1. 颖果顶端不具毛茸。22. 小穗含1至多花，颖等长或不等长，具1至多脉，具脊或否。23. 不具不孕小穗（枝）所成的刚毛。第一颖长为小穗的1/31/2，不为膜质，基部包卷小穗。小穗长3mm，具粗状芒；可孕小花外稃淡灰褐色稗Echinochloa crusgalli（二）主要豆科牧草种子分种检索表1. 种脐为圆形。2. 种脐靠近种子长的中央。3. 脐部不具脐冠。4. 种皮具斑纹或有色斑点。胚根尖不与子叶分开，不具胚乳红豆草Onobrychis viciaefolia2. 种脐不靠近种

13、子长的中央。5. 种脐具环状脐冠。6. 胚根长为子叶长的3/4以内。7. 无胚乳。8. 表面黑紫色或褐色具黑紫色花斑二色胡枝子Lespedeza bicolor7. 具极薄的胚乳。9. 种子长22.5mm。10. 种脐之晕轮白色，晕轮与胚根尖相对处宽大，且微隆起 毛胡枝子L.tomentosa10. 种脐之晕轮浅绿白色或黄白色，晕轮两侧宽，上下端较窄达乌里胡枝子L.davurica9. 种子长1.52mm。种子椭圆状肾形、宽椭圆形或近球形，表面暗褐色或橄榄绿色，有的具灰褐色斑点百脉根L.corniculatus11. 种子表面光滑或近光滑，具微颗粒。12. 胚根长为子叶长的3/4或以上。13.

14、 种子表面具花斑或斑点。14. 种子长为11.5mm，暗绿色或暗褐色，具黑色花斑。 杂三叶Trifolium fragiferum13. 种子表面不具花纹、花斑或斑点。15. 种子长1.53mm 黄花苜蓿Medicago falcate15. 种子长11.5mm 白三叶Trifolium repens12. 胚根长为子叶长的3/4以内。16. 胚根尖与子叶分开17. 种脐在种子长的1/2以上，种瘤在脐条的中间冠状岩黄芪Hedysarum coronarium17. 种脐在种子长的1/2以下，种瘤在脐条的远端。18. 种子长1.52.5mm，表面多为上下两色，上部黄色或绿黄色，下部黄色，一色者罕

15、见红三叶 Trifolium pratense18. 种子表面不为上下两色天兰苜蓿Medicago lupulina16. 胚根尖不与子叶分开。19. 表面不具花斑或不具花斑，种子长2mm，常一侧扁；另一侧稍圆，晕环褐色.黄花草木樨Melilotusofficinalis19. 表面不具花斑、表面黄色或黄褐色，种子长1.53mm。20. 种子一侧扁平；另一侧圆白花草木樨Melilotus albus20. 种子两侧扁或微凹。21.表面有很亮的光泽，光滑，种瘤浅褐色，晕轮隆起，褐色，胚根与子叶间界线不明绛三叶Trifolium inaarnatum1. 种脐不为圆形。22. 具胚乳。23. 种脐

16、靠近种子长的中央，种子表面光滑。24. 胚根与子叶分开，不具环状脐冠。种子长2.5mm以上，倒卵形.紫云英Astragalus sinicus22. 无胚乳25. 种脐线形。26. 种瘤在脊背上。27. 种脐限制在种子的边缘上，长占种子圆周长的60%以上，种子近球形，稍扁野豌豆 Vicia sepium27. 种脐不限制在种子的边缘。28. 种子表面黄褐色或黄绿色，且具黑色花斑，种脐长占种子圆周长的30%40%.山野豌豆 V.amoena26. 种瘤不在脊背上箭筈豌豆V.sativa25. 种脐不为线形。28. 种瘤不在脊背上，种脐为椭圆形或卵形，种子表面光滑或粗糙。29. 种子近球形，种子直

17、径在3mm以上。30.种脐卵形，种子长3.55mm毛苕子V.villosa30.种脐椭圆形。31. 种子较小，长34mm，具紫色花斑草原山黧豆Lupinus pratensis31.种子较大，直径46mm 紫花豌豆 Pisum arvensis30. 种子不为球形，为斧形，种脐在腹背上，为宽椭圆形栽培山黧豆Lupinu sativus实验三 牧草种子的纯净度检验一、目的意义 种子是农业生产的重要生产资料，种子品质的好坏直接与播种的成功密切相关。掌握种子检验的基本方法可以了解牧草种子的品质优劣，从而为牧草生产和种子的调运、贮存、交换活动可以提供科学的数据。二、实验仪器与材料 仪器：天平、镊子、放

18、大镜。 材料：豆科种子：紫花苜蓿Medicago sativa 红三叶Trifolium pratense 白三叶Trifolium repens 小冠花 Cornllina varia 毛苕子Vicia villosa Roth. 禾草种子：多花生黑麦草Lolium multiflorum 苇状羊茅Festua aroundinacea 高羊茅Festua pratensis 扁穗冰草Agropyron cristatum 三、方法步骤纯净度是指纯净种子占供试种子的百分数。纯净度的分析一般涉及三个阶段的工作。（一）取样种子批（Seed lot）指一批种子所容许的最大数量。通常大粒种子为100

19、00kg，小粒种子为5000kg。一个种子批至少有一个送验样品。送验样品的取样按种子的不同存放状态有不同的要求。一般袋装种子10袋以下，每袋均在上、中、下三层抽取；10袋以上，各袋在每袋不同位置取一个样点；散装种子：分层与不同位点采取初次样品，初次样品经混合后得取混合原始样品，原始样品经平均样品后分出个项目的送验样品。（二）按标准取样按表1.要求取一定量(括号内的标记数量)的牧草种子，平摊于纸上。（三）分拣将平摊于纸上的种子分检出下列成分：a. 无价值种子：破损、霉烂 、瘦小 有病虫害的种子。b. 有生命的夹杂物：混杂进入的其他种子、蛹卵。c. 无生命的夹杂物：泥沙、石块、秸秆、稃壳。表3.

20、送验样品的最低重量GB中华人民共和国牧草种子检验规程学名 中文名 送验最低重量（g）净度分析最低重量（g）粒数/gAstragalus adsurgens 沙打旺10010720Medicago sativa紫花苜蓿505500Trifolium repens白三叶2022000Trifolium pratense红三叶505600Lolium prenne多年生黑麦草505530Lolium multiflorum多花生黑麦草5015180Sorghum sudanese苏(高)丹草25025100Bromus inermis无芒雀麦707230Festua aroundinacea苇状羊茅

21、505450Lotus corniculatus百脉根3031350（四） 计算计算纯净度（%）。 纯净度（%）=（供试种子重混杂物重/供试种子重）*100%（五）容许误差检验重复2次，2次重复间误差1%2% 应做第3次，最后计算平均值。实验四 牧草种子的发芽试验 一、目的与意义 发芽率是种子品质的最重要指标之一。它是最简单最直接衡量种子品质的常用指标，属国内外一般常规种子检验中必不可少的内容。二、仪器材料 吸水纸、发芽皿、镊子、牧草种子。三、方法步骤 从净种子中随机取400粒4份（每份为一重复），用镊子整齐的排列在湿润的发芽床上，贴上标签、写上草名、人名、日期。表4发芽条件与标准牧草发芽床温

22、度（）光照发芽势（d）发芽率（D）备注小冠花滤纸20 暗410紫花苜蓿滤纸20暗410白三叶滤纸20暗410红三叶滤纸20暗410毛苕子沙、滤纸2022暗514多花黑麦草滤纸2022光514苇状羊茅滤纸2030；1525暗714高羊茅滤纸20-30；1525暗714扁穗冰草滤纸2030；1525暗528四、日常观察记录与管理1. 每日保持湿润，观察记录发芽状况。2. 观察要求：a. 整个发芽试验期间至少观察2次，初次与末次。7d以上者，应增加次数。b. 初次和中间分别计数正常与明显死亡的软腐种子；末次计数记录所有正常、不正常、硬实和死亡种子数。c. 实验结束后，如怀疑存在休眠、中毒或病菌感染而

23、导致结果不可靠，重新试验。五、结果计算 1. 第一步：先计算每一重复各次正常苗之和，然后计算正常、不正常、硬实和死亡种子占供试种子的百分数。 发芽率=发芽终期全部正常苗数/供试种子数*100%2. 第二步：计算4次重复的平均数至整数位。如4次均未超出最大容许误差，则结果可靠，否则进行再次试验。3. 误差：发芽试验2次重复间的最大容许误差（两尾检验2.5%显著水平）表5 发芽试验2次重复间的最大容许误差的两尾检验法GB标准（2.5%显著水平）发 芽 率（%）最 大 误 差199259836974796589569939478109192 910118990 11121287881314 1384

24、86 1517148183 1820 157880 21231673772428 176772 29341856663545 1951554650 20* GB标准：国家标准的符号标志。即中华人民共和国国家标准表6 国际安全运输协会标准(ISTA ，1993)发 芽 率（%）最 大 误 差9899232959746391947104859011165778417246607625417515942508* ISTA (International Safe Transit Association) 是国际安全运输协会，它是在全世界的影响力非常大的一个行业标准。六、作业 试计算所做牧草材料的实际播

25、种量。 播量参考值： 紫花苜蓿(1522.5kg/hm2) 白三叶(7.5kg/hm2) 红三叶(15kg/hm2) 小冠花(15kg/hm2) 毛苕子(60kg/hm2 ) 多花生黑麦草 (1522.5kg/hm2) 苇状羊茅(7.515kg/hm2 ) 高羊茅 (7.515kg/hm2) 扁穗冰草 (1522.5kg/hm2)实验五 牧草种子生活力测定（TTC染色法）一、实验目的 掌握用TTC染色法测定种子生活力的原理和方法。二、测定原理凡有生命活力的种子，胚在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生命力种子的胚则无此反应。TTC可以渗入种子的活细胞中，并作为受氢体而被脱氢辅酶（NADH或N

26、ADPH）还原，由无色的氧化型变成红色的三苯甲腙，这样，活种子胚部被染成红色。反之，死种子不能染色。部分丧失生活力的种子染色较浅。因此可根据染色部位和染色程度来判断种子的生活力。反应式如下：H NN C6H5 + 2H NNC6H5 C6H5C ClC6H5C + HCl N = N+C6H5 N = NC6H5 TTC（无色） TPF（红色）2,3,5氯化三苯基四氮唑 三苯基甲腙 三、材料、设备及试剂1. 材料 紫花苜蓿、红三叶、白三叶、小冠花、毛苕子、多花生黑麦草、苇状羊茅、高羊茅、扁穗冰草的新种子或贮存3年以上的陈种子。2. 仪器恒温培养箱，小烧杯，刀片，镊子。3. 试剂及配制0.1TTC溶液（称取0.1gTTC溶于100ml蒸馏水或凉开水中即成0.1TTC溶液