实验1草履虫及其他原生动物.docx
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实验1草履虫及其他原生动物
实验1草履虫及其他原生动物
实验1草履虫及其他原生动物
一、实验目的
1(通过草覆虫及其他原生动物的观察,了解原生动物的主要特征。
2(认识原生动物常见种类。
二、实验材料
1(草覆虫培养液或野外采集水样。
2(各种纤毛虫、变形虫、眼虫及疟原虫的染色标本装片。
三、实验器具与药品
显微镜、双目解剖镜、载玻片、盖玻片、胶头吸管、吸水纸、擦镜纸、1%碘液、5%冰
醋酸、蓝黑墨水、中国墨汁、细胞核染料等。
四、实验内容与操作
(一)草覆虫Paramoecium观察
用吸管吸取草覆虫培养液或采集水样近液界面边缘的白色污物,对着光线,肉眼可见
许多白色小点游动于水中即为草覆虫(Paramoeciumsp.)。
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图1-1草履虫Paramecium
A(绿草履虫;B(尾草履虫;C(多核草履虫;D(双核草履虫。
(自何志辉)
常见种类有:
绿草覆虫(P.basaria)、尾草覆虫(P.caudatum)、多核草覆虫(P.multimicronucleatum)和双核草覆虫(P.aurelia)等(图1-1)。
通常采集到的种类为尾草覆虫,也称大草覆虫。
用稻草汁纯培养液观察时大多是纯草履虫,但用采集水样往往发现其它纤毛虫存在,常见如钟虫、肾形虫等(图1-2)。
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AB
图1-2钟虫(A)和肾形虫(B)(自江静波等)
使用显微镜观察大草履虫时,先撕散少许擦镜纸纤维置于载玻片上(阻碍草履虫的运动,以便观察),然后滴一滴样液在纤维网间,再加盖玻片,先用低倍镜,后转高倍镜观察。
1(外形
体长在180-300,m之间,前端圆形而略小,后半部稍阔,后端较尖,形如倒置的草鞋,因而得名。
从体前端斜向体中部有一口沟,沟底开口为胞口(图1-3)。
2(运动特点
全身密布纤毛并不断摆动,由于纤毛在体表纵行沿体轴略旋向排列,加上口沟处纤毛较长,对水的反作用力大于其他部位,因此草履虫在水中旋转前进。
纤毛为其运动胞器。
3(细胞基本结构
(1)细胞膜覆盖在体表上一层极薄而具有弹性的表膜,能使身体保持一定形状。
(2)细胞质分化为内、外质。
外质透明无颗粒,位于表膜内面一层薄而均匀的原生质,其突出形成纤毛(调暗光圈可见),外质内可见与表膜垂直排列的折光性强的椭圆形刺丝泡(加一滴蓝黑墨水可使刺丝放出),是用于防御和固着的胞器。
3
图1-3草履虫(自江静波等)
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内质呈颗粒状,内有食物泡、伸缩泡等。
(3)细胞核具一大核和一小核。
加核染色液或5%的冰醋酸一滴于盖玻片内,经半分钟细胞核呈淡红色,以便观察。
大核位于细胞中部,呈肾形,司营养作用,称营养核。
小核紧依大核中部凹处,呈球形,与生殖有密切关系,称生殖核。
4(生理特点
(1)营养草履虫分化出一系列营养胞器,如胞口、胞咽、食物泡、胞肛点等。
它们相互协调,帮助获取食物和进行细胞内消化。
草履虫前进时,由于纤毛不断摆动及口沟区纤毛的波动,使水与悬浮于水中的细菌、单细胞藻类以及小型的原生动物等被引入口沟处,再经胞口、胞咽进入内质中,形成圆形的食物泡,在内质中沿固定的路线流动,使身体各处获得营养。
不能消化的食物残渣经胞肛排出体外。
装一草履虫封片,滴入中国墨汁,观察虫体内食物泡形成至消失的过程。
(2)呼吸与排泄草覆虫以体表营呼吸作用。
伸缩泡位内、外质交界处,前、后各一个,每个伸缩泡周围有6-7根收集管,收集管把排泄物收集后送到中间的伸缩泡,伸缩泡有小孔通向体外,伸缩泡和收集管互相交替伸张与收缩,具有调节渗透压及排泄作用。
(3)生殖包括横二分裂和接合生殖。
横二分裂为无性生殖,用新鲜水样可观察到一些虫体自腰间缢缩,最后分裂成两半,各自形成一独立的虫体。
接合生殖为有性生殖(仅见于纤毛虫类),把水样搁置一定时间后可观察到草履虫的接合生殖现象,两虫体口沟相接,
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交换部分核物质后分开各自进行繁殖,最后共形成8个新个体。
(4)感应性草履虫对外界刺激会起一定的反应,观察它如何避开食盐水和障碍物。
(二)示范标本观察
1(纤毛纲Ciliata
纤毛纲是原生动物中构造最为复杂的类群,其身体表面覆盖许多纤毛。
到目前为止已发现和描述的约有6000多种。
钟虫Vorticella体形似倒置的钟,口
缘常向外扩张而成“缘唇”。
柄不分枝,内
有肌丝存在,因此能自由伸缩。
大核带状,
伸缩泡1-2个(图1-2A)。
肾形虫Colpeda身体肾形。
右缘均
匀弯曲成半圆形,左缘在口前较直,有若
干行齿状缺刻,也称为龙骨。
靠近身体末
端有一个伸缩泡。
大核位于身体中部,小
核在大核旁(图1-2B)。
2(鞭毛纲Mastigophora
鞭毛纲大多数种类具一根鞭毛,极少
数种类具2或3条鞭毛。
细胞质具有色素
体,自养或异养,或两者兼有,繁殖为纵
图1-4绿眼虫(自江静波等)二分裂。
到目前为止已发现和描述的约有
2000多种。
绿眼虫Euglenaviridis长棱形。
前端钝圆,后端尖削。
细胞质中央具1个大的胞核。
体表为具有细斜纹的表膜所覆盖。
前端储蓄泡附近有一含有红色色素的眼点(图1-4)。
3(肉足纲Sarcodina
肉足纲是一类以伪足为运动器官,体表没有坚韧的表膜的动物。
繁殖方式为二分裂。
目前已发现的约8000种。
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大变形虫Amoebaproteus由一小块的原生质所构成,体形200-500,m以上。
随时改
图1-5大变形虫(自江静波等)
变形状,内质和外质明显,常可见到扁盘形的细胞核和1个伸缩泡(图1-5)。
辐射变形虫Amoebaradiosa身体20-50,m,伪足细长,末端尖削,从身体四周放射出来(图1-6A)。
表壳虫Arcelle具有半球形的几丁质外壳,壳的颜色初时为淡黄色,后转为黄褐或深褐色。
壳腹面中央有一孔,伪足由此孔伸出(图1-6B)。
有孔虫Foraminfera具有石灰质外壳,多室或单室(图1-7)。
AB
图1-6肉足纲代表种
A(辐射变形虫(自何志辉);B(表壳虫(自江静波等)。
图1-7有孔虫(周围为配子)(自刘凌云)4(孢子纲Sporovoa
孢子纲都是营寄生生活的种类。
身体结构极简单,一般用体表吸收寄主的有机物质为营养。
间日疟原虫Plasmodiumvivax从疟疾患者的手指或耳垂取血,制作检查疟原虫制片,常见到疟原虫的环状体和大滋养体,寄生于红血细胞内,由于染色,红细胞的原生质染成玫
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瑰色,疟原虫的原生质染成蓝色,它的细胞核则染成鲜红色(图1-8)。
五、图1-8间日疟原虫生活史(自刘凌云)
作业与思考题
1(以草履虫为例,说明原生动物是单细胞的结构,而同时又是完整独立的有机体。
2(绘草覆虫结构图并注明各构造名称。
3(原生动物各纲的主要特征是什么,它们的分类依据是什么,
附录:
I(纤毛虫的临时核染色液(甲基绿-派洛宁染料)的配制
以冰醋酸(CHCOOH)和20%的甲醛溶液(HCHO)各1等份,配成100mL的溶剂,3
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将0.3g派洛宁溶入,配成0.3%的染液。
II(草覆虫的采集、培养和装片
(采集1
有机质丰富的池塘和污水沟,特别是食堂附近污水沟底部淤泥的表面一层白膜下分布较多,可用大吸管采集或用铝勺刮取。
2(培养
(1)培养液:
取没有霉烂的稻草5g,剪成一寸左右长,放入1000mL烧杯里,加清
mL,煮沸5-10分钟,过24小时冷却后即可备用。
水500
(2)培养方法:
在解剖镜下检查,发现草覆虫即用小吸管吸出移入培养液,加盖培养3—5天,再用小吸管吸收较多的草覆虫又移入盛有新培养液的玻璃缸内,加盖培养,这样可得到较纯的草覆虫培养液。
3(装片
(1)固定:
取出少许草覆虫培养液放到离心管内,进行离心,然后将上面的水吸去,换入清水,再离心,连续数次最后将经冲洗数次的草覆虫移入波恩氏固定液中加热至40:
C左右,固定1-2小时,(波恩氏液配制如下:
饱和苦味酸25mL加入福尔马林25mL和冰醋酸3mL即成)。
(2)保存:
把固定后的草覆虫放入75%酒精中长期保存。
(3)染色:
将草覆虫放入4%铁矾水溶液中1小时,用自来水或蒸馏水漂洗数次,再浸入铁苏木精中染色1小时,取出用蒸馏水漂洗数次浸入2%铁矾水溶液中,分色到适当时为止,自来水浸1小时。
(4)脱水:
经各级酒精处理,从30%?
50%?
70%?
85%?
95%?
100%,每次各30分钟至1小时。
(5)透明:
浸入1/2冬青油+1/2纯酒精,再移入纯冬青油。
每次30分钟至1小时。
(6)封片:
用加拿大树胶封片。
III(变形虫的采集和培养
1(采集
可在种植有水浮莲、莲花的池塘的粘性沉渣中采集到,也可用大吸管吸取菜地水沟底部青苔层,经镜检可发现。
2(培养
(1)培养液制作,两种方式。
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A(污泥汁:
将带有变形虫的淤泥晒干,按体积与水配成1:
3之比,煮沸30分钟(杀菌)再冷却过滤后可备用;
-8粒,煮沸5-10分钟,隔24小时后加盖保存,B(麦粒水:
在100mL清水中加麦粒7
即可备用(但只能保存3-5天)。
(2)培养方法:
用吸管从采集瓶底层吸取材料,在双目显微镜下检查,经发现后用自制的微吸管将变形虫吸入再移进培养液中。
同时可接种一些栅藻或小球藻,加盖培养一周,最适温度为20?
左右,光线不宜太强,pH值一般在6.5-7之间,经一周后可得到较纯的变形虫培养液。
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