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检验表x青海任务

表1特殊膳食用食品

食品品种

监测项目

检测方法

方法检出限

检样的处理

注意事项

婴幼儿配方食品

肠杆菌科(定性和定量)

定量:

第一法肠杆菌科平板计数法(GB4789.41-2016)

10CFU/g

1.为保证检样的代表性,取样前将样品充分混匀。

2.用75%酒精棉球消毒袋口(罐口、瓶口),使用灭菌剪刀或开罐器等无菌开口。

3.无菌开口后直接用灭菌勺等从表层和深层(四角和中央)多点取样。

——

定性:

参考平板法,见备注。

/10g

——

单核细胞增生李斯特氏菌

第一法定性检验(GB4789.30-2016)

/25g

——

克罗诺杆菌属(原阪崎肠杆菌)

第一法定性检验(GB4789.40-2016)

/100g

——

蜡样芽胞杆菌(定量)

第一法平板计数法(GB4789.14-2014)

10CFU/g

——

婴幼儿谷类辅助食品

肠杆菌科(定性和定量)

定量:

第一法肠杆菌科平板计数法(GB4789.41-2016)

10CFU/g

——

定性:

见备注。

/10g

——

单核细胞增生李斯特氏菌

第一法定性检验(GB4789.30-2016)

/25g

——

克罗诺杆菌属(原阪崎肠杆菌)

第一法定性检验(GB4789.40-2016)

/100g

——

蜡样芽胞杆菌(定量)

第一法平板计数法(GB4789.14-2014)

10CFU/g

——

注:

1.根据污染情况,选择适当的稀释度,必须上报具体数值(不得报送为“不可计数”)。

2.直接取平板法的稀释液(25g样品放入盛有225mLBPW,制成1∶10的样品匀液)100mL,置无菌培养瓶36℃±1℃过夜培养,换线接种VRBGA平板,进行肠杆菌科的定性检测——相当于取10克样本进行定性检测。

表2肉与肉制品

食品品种

监测项目

检测方法

方法检出限

检样的处理

注意事项

生禽肉(鸡肉、鸭肉等)

单核细胞增生李斯特氏菌

第一法定性检验(GB4789.30-2016)

/25g

1.禽胴体:

无菌操作取禽胴体不同部位(脖子、胸、腿和肛门)处剪取肉和皮共100g以上,均质2min,分别称取25g用于单核细胞增生李斯特菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、致泻性大肠埃希氏菌和产气荚膜梭菌检验;剩余禽胴体加入Preston增菌肉汤漂洗,按照每公斤鸡肉500毫升Preston增菌肉汤的量加入,充分洗涤后取漂洗液检验弯曲菌(方法见监测网工作手册)。

2.分割禽肉:

多块分割禽肉一起揉搓,从不同禽块上剪取至少100g的肉和皮,均质2min,分别称取25g进行单核细胞增生李斯特菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、致泻性大肠埃希氏菌和产气荚膜梭菌检验;剩余的分割禽肉(大于100g)依照上法用Preston肉汤漂洗后进行弯曲菌检验。

3.冷冻样品应在45℃以下不超过15min,或2℃~5℃不超过18h解冻后进行检验。

禽胴体为一只完整个体进行所有项目的检测;分割整块禽肉采集一个批次作为一份样品。

弯曲菌

监测网工作手册-2018

直接过滤法(中国CDC传染病所)

——

小肠结肠炎耶尔森氏菌(选做)

监测网工作手册

(GB4789.8-2016)

/25g

致泻大肠埃希氏菌

监测网工作手册-2018

/25g

产气荚膜梭菌(选做)

监测网工作手册

(GB4789.13-2012)

/25g

表3水产及其制品

食品品种

监测项目

检测方法

方法检出限

检样的处理

注意事项

单核细胞增生李斯特氏菌

第一法定性检验(GB4789.30-2016)

/25g

取样部位为内容物(应包括肠、消化腺)。

——

沙门氏菌

第一法定性检验(GB4789.4-2016)

/25g

——

副溶血性弧菌

第一法定性检验(GB4789.7-2013)

(副溶血性弧菌的毒力基因:

见监测工作手册)

/25g

1.建议选择个别能力较强的地市级,对部分样品同时进行副溶血性弧菌定性(25g)和定量检测;

2.接收样品后必须当日检测,以避免弧菌的损伤/死亡。

创伤弧菌

见备注

霍乱弧菌

溶藻弧菌

流程图

常见弧菌不同选择性琼脂平板上的菌落特征

菌种

TCBS

mCPC

4号琼脂

1.创伤弧菌

圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落,直径2-3mm

圆型、扁平、中心不透明、边缘透明的黄色菌落,直径1-2mm

NG

2.副溶血弧菌

圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落,直径2-3mm,用接种环轻触,有类似口香糖的质感。

NG

NG

3.霍乱弧菌

圆形、半透明、表面光滑的黄色菌落,直径2-3mm

圆型、紫色菌落

圆形、半透明、表面光滑的无色菌落,菌落中心常呈灰色或灰黑色,并随培养时间延长而加深

4.溶藻弧菌

圆形、半透明、表面光滑的黄色菌落,直径2-3mm

NG

NG

5.河弧菌

圆形、半透明、表面光滑的黄色菌落,直径2-3mm

NG

NG

注:

1.NG:

不生长或生长很差。

2.每种菌均需从选择性琼脂平板上分别挑取3~5个典型或可疑菌落进行下一步的实验。

3.可选择弧菌显色培养基进行前四种菌的选择性分离,但河弧菌必须使用TCBS(显色培养基效果不佳)。

表4蛋与蛋制品

食品品种

监测项目

检测方法

方法检出限

检样的处理

注意事项

鲜蛋(不包括鸡蛋)

大肠埃希氏菌计数

第二法平板计数法(GB4789.38-2016)

1蛋壳

1.1鸭蛋等(6枚)

50CFU/枚

1.2鹅蛋等(3枚):

100CFU/枚

1.3鹌鹑蛋、鸽子蛋等(12枚):

25CFU/枚

2蛋内容物

10CFU/g(mL)

分别检测蛋壳和蛋内容物。

1.蛋壳:

按蛋的大小,取鸭蛋6枚(鹅蛋3枚、鹌鹑蛋/鸽子蛋等至少12枚),放入装有300mL无菌BPW的无菌袋中,浸泡10min,反复轻揉1min后无菌取出蛋样品,洗液混匀后用于下一步检验。

2.蛋内容物:

取在上述步骤中经BPW洗过的6枚鸭蛋(鹅蛋3枚、鹌鹑蛋/鸽子蛋等至少12枚),在流水下洗净,待干后置75%的酒精浸泡30~60s,取出置于生物安全柜中晾干,酒精棉球擦拭气室端蛋壳,用无菌镊子敲碎气室位置的蛋壳,捅破内层卵壳膜,无菌取出蛋内容物,混匀用于下一步检验。

1蛋壳:

取蛋壳洗液进行检验。

1.1大肠埃希氏菌计数

平板法:

取洗液1mL,平行接种5个平板,每个平板涂布0.2mL,计5个平板的合计菌落数。

若样品污染状况严重,建议取25mL洗液进行十倍稀释后,选择适宜稀释度按照上述步骤进行检测。

检测结果进行公式换算:

菌落数×稀释倍数×300/具体检测用蛋数量(如果是洗液未经稀释直接检测则公式为:

菌落数×300/具体检测用蛋数量),结果报告为CFU/枚。

1.2沙门氏菌

剩余洗液直接进行沙门氏菌检测,结果报告检出/未检出沙门氏菌。

2蛋内容物:

取蛋黄和蛋清混合液进行检验。

2.1大肠埃希氏菌计数

平板法:

取检样25g(mL),按照GB4789.38进行检验,结果报告为CFU/g(mL)。

2.2沙门氏菌:

取检样25g(mL)进行检验。

沙门氏菌

第一法定性检验(GB4789.4-2016)

——

表5焙烤及油炸类食品

食品品种

监测项目

检测方法

方法检出限

检样的处理

注意事项

中式糕点

菌落总数

第一法平板计数法(GB4789.2-2016)

10CFU/g

为保证检样的代表性,取样前将样品充分混匀,无菌开口后多点(四角和中央)取样;不能混匀的,无菌开口后直接用灭菌刀(勺)从表层和深层多点取样。

1散装(包括自行简易包装)

1.1散装:

直接无菌打开采样袋。

1.2自行简易包装:

用75%酒精棉球消毒袋口(罐口、瓶口),使用无菌剪刀或开罐器等无菌开口。

2预包装:

用75%酒精棉球消毒袋口(罐口、瓶口),使用灭菌剪刀或开罐器等无菌开口。

——

大肠菌群

第二法平板计数法(GB4789.3-2016)

10CFU/g

金黄色葡萄球菌(定量)

第二法平板计数法(GB4789.10-2016)

10CFU/g

——

沙门氏菌

第一法定性检验(GB4789.4-2016)

/25g

——

表6冷冻饮品

食品品种

监测项目

检测方法

方法检出限

检样的处理

注意事项

冰淇淋、雪糕、冰棍等

菌落总数

第一法平板计数法(GB4789.2-2016)

10CFU/g

1样品在原装容器内,置45℃以下不超过15min或在2℃~5℃不超过18h,待其稍融化后称取可食部分进行检验。

一旦融化,不能再次冷冻。

2①散装:

混匀样品后多点(四角和中央)取样;不能混匀的,直接用灭菌刀(勺)从表层和深层多点取样。

②自行简易包装、预包装:

用75%酒精棉球消毒袋口或盒盖,无菌开口从表层和深层多点取样。

——

大肠菌群

第二法平板计数法(GB4789.3-2016)

10CFU/g

——

单核细胞增生李斯特氏菌(定性和定量)

第一法定性检验(GB4789.30-2016)

第三法MPN计数法(GB4789.30-2016)

/25g

0.3MPN/g

定量检测:

检样量3.33g(mL)。

金黄色葡萄球菌(定量)

第二法平板计数法(GB4789.10-2016)

10CFU/g

——

沙门氏菌

第一法定性检验(GB4789.4-2016)

/25g

——

注:

根据污染情况,选择适当的稀释度,必须上报具体数值(不得报送为“不可计数”)。

表7坚果与籽类及其加工制品类

食品品种

监测项目

检测方法

方法检出限

检样的处理

注意事项

坚果/籽类的酱

大肠菌群

第二法平板计数法(GB4789.3-2016)

10CFU/g

取样前将样品充分混匀取样。

1散装(自行简易包装):

直接无菌取样。

2预包装:

用75%酒精棉球消毒袋口(罐口、瓶口、袋口),使用灭菌剪刀或开罐器等无菌开口。

无菌操作取25g样品,按照手册或国标方法进行检测。

——

霉菌

监测网工作手册(GB4789.15-2016)

10CFU/g

单核细胞增生李斯特氏菌

第一法定性检验(GB4789.30-2016)

/25g

金黄色葡萄球菌(定量)

第二法平板计数法(GB4789.10-2016)

10CFU/g

沙门氏菌

第一法定性检验(GB4789.4-2016)

/25g

表8调味品

食品品种

监测项目

检测方法

方法检出限

检样的处理

注意事项

酱及酱制品

大肠菌群

第二法平板计数法(GB4789.3-2016)

10CFU/g

取样前将样品充分混匀取样。

1散装(自行简易包装):

直接无菌取样。

2预包装:

用75%酒精棉球消毒袋口(罐口、瓶口、袋口),使用灭菌剪刀或开罐器等无菌开口。

无菌操作取25g样品,按照国标方法进行检测。

——

金黄色葡萄球菌(定量)

第二法平板计数法(GB4789.10-2016)

10CFU/g

沙门氏菌

第一法定性检验(GB4789.4-2016)

/25g

表9餐饮食品(专项监测)

食品品种

监测项目

检测方法

方法检出限

检样的处理

注意事项

外卖配送餐

菌落总数(选做)

第一法平板计数法(GB4789.2-2016)

固体:

10CFU/g

液体:

1CFU/mL

混匀样品后多点(四角和中央)取样;不能混匀的,直接用灭菌刀(勺)从表层和深层多点取样。

——

大肠埃希氏菌计数

第二法平板计数法(GB4789.38-2016)

固体:

10CFU/g

液体:

1CFU/mL

——

单核细胞增生李斯特氏菌

第一法定性检验(GB4789.30-2016)

/25g(mL)

——

金黄色葡萄球菌(定量)

第二法平板计数法(GB4789.10-2016)

固体:

10CFU/g

液体:

1CFU/mL

——

蜡样芽胞杆菌(定量)

第一法平板计数法(GB4789.14-2014)

固体:

10CFU/g

液体:

1CFU/mL

——

沙门氏菌

第一法定性检验(GB4789.4-2016)

/25g(mL)

——

致泻大肠埃希氏菌

监测网工作手册

/25g(mL)

——

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