微生物检测教案.docx
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微生物检测教案
黑龙江大学
课程名称:
微生物检测
主讲教师:
杜春梅
职务职称:
副教授
授课对象:
生命科学学院(生物工程、生物技术、食品工程)
选课人数:
116
学年学期:
2008-2009学年春季学期
总学时数:
44(理论课26学时,实验课16学时)
参考书目:
现代食品微生物检验技术,张伟、袁耀武主编,化学工业出版社,2007
食品微生物检验技术,魏明魁、段鸿斌主编,化学工业出版社,2008
食品卫生微生物检验学,李志明编著,化学工业出版社,2009
食品检验技术(微生物部分),刘用成主编,中国轻工业出版社,2006
安全食品微生物学,李卫华等译(StephenJ.Forsythe著),中国轻工业出版社,2007
药品微生物学检验手册,马绪荣、苏德模主编,科学出版社,2003
药品微生物学鉴定技术,全国医药职业技术教育研究会编,化学工业出版社,2004
微生物学检验(第二版),刘运德主编,人民卫生出版社,2007
第一周(80min)
教学目的:
掌握食品药品微生物检验的指标,了解微生物检验在实际生产生活中的重要意义。
教学方法:
多媒体课件,讲授
教学重点难点:
微生物检验的指标、范围、意义是本次课的重点和难点
教学内容:
第一章绪论
根据美国疾控和预防中心的信息引出微生物学检验的必要性。
(5min)
一、关于食物中毒(20min)
1.概念
2.举例说明
3.细菌性食物中毒的特点
4.细菌性食物中毒类型
5.食品中污染的细菌分类:
致病菌、条件致病菌、非致病菌
二关于药品污染(15min)
1药品污染的严重后果(举例说明)
2药品污染的范围和常见原因
三、食品和药品中污染的微生物类型(图片展示)(20min)
1食品和药品中常见的细菌
2食品和药品中常见的真菌
3食品和药品中常见的病毒
4食品中常见的寄生虫
5螨
课后问题:
为什么大肠菌群作为指示菌?
(作为指示菌大肠菌群的优点有哪些?
)
第二周(80min)
教学目的:
掌握微生物检验的基本程序和要求。
教学方法:
多媒体课件,讲授
教学重点难点:
如何取样具有代表性是本次课的重点
学生参考书目:
食品检验技术(微生物部分),刘用成主编,中国轻工业出版社,2006;114-132
教学内容:
课堂讨论:
为什么大肠菌群作为指示菌?
(5min)
第一章绪论
四、微生物检验(重点,40min)
1、概念
2、微生物检验的范围(举例说明)
3、微生物检验的指标(重点和难点)
(1)菌落总数
(2)大肠菌群
(3)致病菌
(4)霉菌及其毒素
(5)其它指标:
病毒、寄生虫、昆虫
3、微生物检验的意义
第二章微生物检验的一般程序
一、检验前准备(5min)
二、样品的采集(举例说明,20min)
强调样品必须具有代表性、要有科学的取样方案和正确的样品制备方法
1、微生物限度检验的特殊性
2、抽样对微生物限度检测值的影响
3、样品的种类
4、采样方法
(1)药品取样
(2)食品取样
(3)生产工序监测采样
(4)采样数量和标签
三、样品的送检(2min)
四、样品的处理(10min)
1、基本要求
2、供试液制备的一般方法
3、有抑菌成分的样品的处理
五、样品的检验(2min)
六、结果与报告(1min)
展示程序图,并作概况讲解
自学问题:
下列食品的检样如何制备?
1、清凉饮料、冷冻饮品;2、冷食菜、豆制品;3、糕点、果脯等;4、酒类;5、调味品;6、方便;面(素食米粉);7、罐藏食品;8、粮食
第三周(80min)
教学目的:
掌握微生物检验种常见食品药品的制备技术
教学方法:
多媒体课件,讲授
教学重点难点:
区分卫生学和致病菌的取样方案
学生参考书目:
食品检验技术(微生物部分),刘用成主编,中国轻工业出版社,2006;114-132
教学内容:
第三章各类食品、药品微生物检验样品的采集与制备
第一节各类食品检样的制备(40min)
一、肉与肉制品样品的采集与制备
1、采样
2、样品制备
二、乳与乳制品
1、采样
2、样品处理
三、蛋与蛋制品
1、采样
2、检样的处理
四、水产品
1、采样
2、检样的处理
讨论自学问题:
下列食品的检样如何制备?
1、清凉饮料、冷冻饮品;2、冷食菜、豆制品;3、糕点、果脯等;4、酒类;5、调味品;6、方便;面(素食米粉);7、罐藏食品;8、粮食
第二节各类药品微生物检验样品的采集与制备(40min)
一、一般供试品
(一)取样:
(二)稀释剂
(三)供试液制备
二、特殊供试品
(一)眼膏及软膏剂
(二)栓剂及油剂
(三)胶囊剂
(四)胶剂
(五)偏酸偏碱的供试品
第四周(80min)
教学目的:
掌握食品、药品和水的卫生细菌学检验方法
教学方法:
多媒体课件,讲授
教学重点:
平板菌落计数法测菌落总数,多管发酵法大肠菌群
教学难点:
菌落总数的计数方法和大肠菌群的MPN检索
学生参考书目:
食品检验技术(微生物部分),刘用成主编,中国轻工业出版社,2006;132-147
教学内容:
第四章卫生细菌学检验
一、菌落总数(40min)
1概念
2食品、药品的测定方法
3水样的测定
(1)饮用水的标准
(2)水样采集与制备
(3)测定程序、稀释度选择和报告方式
(4)
注意事项
(5)
其它测定方法:
滤膜法
试管稀释法
平板表面涂布法
6其它菌落总数的测定方法
二、大肠菌群(40min)
1、测定程序
2、检测方法
(1)薄膜集菌法
(2)多管发酵法
(3)COLIID检测法
(4)TTC(氯化三苯四氮唑)显色快速法
(5)DC(去氧胆酸钠)半固体试管快速法
(6)纸片快速法
3、耐热大肠菌群的测定
(1)耐热大肠菌群的定义
(2)耐热大肠菌群的检查
第五周(80min)
教学目的:
了解大肠埃希菌的特性,掌握其检验方法
教学方法:
多媒体课件,讲授
教学重点:
检验方法
教学难点:
ELISA检测肠毒素,MUG-Indole检查法
学生参考书目:
食品检验技术(微生物部分),刘用成主编,中国轻工业出版社,2006;132-147
教学内容:
第六章病原菌的检验
第一节大肠埃希菌(Escherichiacoli)
一、大肠埃希菌的生物学特性(10min)
1、形态与染色
2、培养特性
3、生化特性
4、抵抗力
5、抗原结构
6、致病力
二、大肠埃希菌检查法(30min)
IMViC
三糖铁琼脂(展示图片后,课堂讨论)
⏹志贺氏菌都能分解葡萄糖,产酸不产气,大多不发酵乳糖,不产生H2S。
应该产生什么现象?
⏹大肠杆菌,能分解葡萄糖产酸产气,大多数能分解乳糖,不产生H2S。
应该是什么现象?
⏹沙门氏菌,能分解葡萄糖,不发酵乳糖,大多数产生H2S,多数产气。
⏹下面照片所示2-3-4,可能是大肠杆菌、沙门氏菌还是志贺氏菌?
硫化氢试验
血清学试验
氧化酶试验
三、MUG-Indole检查法(20min)
1、原理
2、检验程序
3、注意事项
四、肠毒素检验(10min)
1、产毒培养
2、ELISA(enzymelinkedimmunosorbentassay)检测LT和ST
五、快速检测(10min)
第六周,第七周(160min)
教学目的:
了解沙门菌的特性,掌握其检验方法
教学方法:
多媒体课件,讲授
教学重点:
检验方法
教学难点:
血清学检查法
学生参考书目:
食品检验技术(微生物部分),刘用成主编,中国轻工业出版社,2006;132-147
教学内容:
第六章病原菌的检验
第二节沙门菌检查法
一、生物学特性(40min)
1、形态
2、培养特性
3、生化特性
4、抗原结构
(1)抗原构造
(2)抗原变异
5、发病机理和症状
二、沙门菌常规检查法(80min)
1、培养基及诊断血清
2、检验程序
预增菌:
增菌
分离培养
生化试验
赖氨酸脱羧酶试验
尿素酶试验
氰化钾试验
动力检查
血清学凝集试验
3、结果判断及报告
增添一些必要的生化试验。
4、注意事项
三、沙门菌噬菌体检验法(10min)
四、荧光抗体法(10min)
五、其它方法(10-20min)
ELISA
DNA探针
PCR技术
第八周,第九周(160min)
教学目的:
了解金黄色葡萄球菌的特性,掌握其检验方法
教学方法:
多媒体课件,讲授
教学重点:
致病性,检验方法
教学难点:
血浆凝固酶试验
学生参考书目:
食品检验技术(微生物部分),刘用成主编,中国轻工业出版社,2006;132-147
教学内容:
第六章病原菌的检验
第三节金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)检查法
一、生物学性状(40min)
(一)形态与染色
(二)培养特征
(三)生化反应
(四)抗原构造
(五)抵抗力
(六)致病性
二、常规检查法(80min)
增菌培养
分离培养
纯培养
革兰氏染色镜检
血浆凝固酶试验:
结果判定
三、其他鉴别试验(40min)
溶血试验法
肠毒素测定:
磷酸酶试验
耐热DNA酶试验:
触酶试验
第十周,第十一周(160min)
教学目的:
了解梭菌的特性,掌握产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、肉毒梭菌检验方法
教学方法:
多媒体课件,讲授
教学重点:
致病性,检验方法
教学难点:
特征性生化试验和动物毒素试验
学生参考书目:
食品检验技术(微生物部分),刘用成主编,中国轻工业出版社,2006;132-147
教学内容:
第六章病原菌的检验
第四节梭菌(Clostridium)检查法
一、梭菌概述(20min)
(一)梭菌形态特征
(二)培养特性
(三)检查方法
二、产气荚膜梭菌检查(60min)
(一)生物学特性
(二)产气荚膜梭菌半定量测定
(三)特征性生化试验
牛乳发酵
乳糖分解-明胶液化试验
卵磷脂酶试验与奈格尔试验
三、破伤风梭菌检查法(60min)
(一)生物学特性
1、梭菌形态特征
2、培养特性
3、生化反应
4、致病力
(二)检验方法
1、增菌产毒培养:
2、革兰染色镜检
3、毒力试验
4、分离培养
5、结果判定
(三)注意事项
四、肉毒梭菌检查法(20min)
第十二周(80min)
教学目的:
掌握GMP中的微生物检验标准和技术
教学方法:
多媒体课件,讲授
教学重点难点:
空气洁净度的检测方法
学生参考书目:
药品微生物检定技术,李榆梅主编,化学工业出版社,2006;85-96
教学内容:
提问讨论:
肉罐头中应检查哪种梭菌(10min)
第六章GMP中的微生物检验
一空气洁净度标准(10min)
1、英制(粒/ft3):
209E空气洁净度标准
2、公制(粒/L):
原苏联、澳大利亚标准,分三级。
3、国际公制(粒/米3)
二、洁净环境中微生物学警告水平和行动水平的建立(10min)
1警告水平
2行动水平
三、模拟生产操作步骤微生物学评估(10min)
四、空气洁净度的检测方法(重点和难点,30min)
1、制定采样计划和采样位置的关键因素
2、采样频率
3、洁净室采样点布置
4、设备
5、测定方法
(1)浮游菌测数
(2)沉降菌测试
五、微生物环境控制程序(10min)
第十三周(80min)
随堂考试
回顾所学内容(40min)
课堂答疑(40min)