各种培养基配方.docx
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各种培养基配方
1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)
2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)
可溶性淀粉
20g
硝酸钾
1g
氯化钠
0.5g
磷酸氢二钾
0.5g
硫酸镁
0.5g
硫酸亚铁
0.01g
琼脂
20g
水
1000mL
pH
7.2~7.4
146种培养基配方
牛肉膏
蛋白胨氯化钠
3g
5g
10g
琼脂
15~20g
pH
7.0~7.2
水
1000mL
精品资料
配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)
硝酸钠
磷酸氢二钾
2g
1g
氯化钾
0.5g
硫酸镁
0.5g
硫酸亚铁
0.01g
蔗糖
30g
琼脂
15~20g
水
1000mL
pH
自然
121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g
蛋白胨5g
磷酸二氢钾1g
七水合硫酸镁0.5g
精品资料
1/3000孟加拉红(rose
bengal,玫瑰红水溶液)
100mL
琼脂15—20g
pH自然
蒸馏水800mL
112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g
蔗糖(或葡萄糖)20g
琼脂15—20g
pH自然
培养基的配制:
马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:
(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱
精品资料
布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个
鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)
甘露醇(或葡萄糖)
磷酸二氢钾七水合硫酸镁
10g
0.2g
0.2g
氯化钠
0.2g
二水合硫酸钙
0.2g
碳酸钙
5g
蒸馏水
1000mL
pH
7.0—7.2
113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基
精品资料
肉膏蛋白胨液体培养基100mL
琼脂0.35—0.4g
pH7.6
121℃灭菌20min。
9、合成培养基
偏磷酸铵
1g
氯化钾
0.2g
七水合硫酸镁
0.2g
豆芽汁
10mL
琼脂
20g
蒸馏水
1000mL
pH
7.0
加12mL0.04%的溴钾酚紫(pH5.2—6.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基
黄豆芽100g
精品资料
蔗糖(或葡萄糖)50g
水1000mL
pH自然
培养基的配制:
称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加入水1000mL,煮沸约30min,用纱布过滤。
用水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化。
121℃灭菌20min。
11、油脂培养基
蛋白胨
牛肉膏氯化钠
香油或花生油
10g
5g
5g
10g
1.6%中性红水溶液
1mL
琼脂
15—20g
蒸馏水
1000mL
pH
7.2
121℃灭菌20min
注:
(1)、不能使用变质油。
(2)、油和琼脂及水先加热。
精品资料
(3)
、调好pH值后,再加入中性红。
(4)、分装时,需不断搅拌,使油均匀分布于培养基中。
12、淀粉培养基
蛋白胨
10g
牛肉膏
5g
氯化钠
5g
可溶性淀粉
2g
蒸馏水
1000mL
琼脂
15—20g
121℃灭菌20min
13、明胶培养基
牛肉膏蛋白胨液100mL
明胶12—18g
pH7.6
在水浴锅中将上述成分溶化,不断搅拌。
溶化后调pH7.2—7.4。
121℃灭菌30min。
精品资料
14、蛋白胨水培养基
蛋白胨10g
氯化钠5g
蒸馏水1000mL
pH7.6
121℃灭菌20min。
15、糖发酵培养基
蛋白胨水培养基1000mL
15.6%溴钾酚紫乙醇溶液1—2mL
pH7.6
另配制20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10mL。
培养基的配制:
(1)、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基(pH7.6)分装于试管中,在每管内放一倒置的小玻璃管(Durhamtube),使之充满培养液。
(2)、将已分装好的蛋白胨水和20%的各种糖溶液分别灭菌,蛋白胨水121℃灭菌20min;糖溶液112℃灭菌30min。
(3)、灭菌后,每管以无菌操作分别加入20%无菌糖溶液0.5mL(按每10mL培养基
精品资料
中加入20%的糖液0.5mL,则成1%的浓度)。
配制用的试管必须洗干净,避免结果混乱。
16、葡萄糖蛋白胨水培养基
蛋白胨5g
葡糖糖5g
磷酸氢二钾2g
蒸馏水1000mL
将上述各成分溶于1000mL水中,调pH7.0—7.2,过滤。
分装试管,每管10mL,112℃灭菌30min。
17、麦氏(Meclary)琼脂(酵母菌)
葡萄糖1g
氯化钾1.8g
酵母浸膏2.5g
醋酸钠8.2g
琼脂15—20g
蒸馏水1000mL
113℃灭菌20min。
精品资料
18、柠檬酸盐培养基
磷酸二氢铵
磷酸氢二钾氯化钠
1g
1g
5g
硫酸镁
0.2g
柠檬酸钠
2g
琼脂
15—20g
蒸馏水
1000mL
1%溴麝香草酚蓝乙醇液
10mL
培养基的配制:
将上述各成分加热溶解后,调pH6.8,然后加入指示剂,摇匀,用脱脂棉过滤。
制成后为黄绿色,分装试管,121℃灭菌20min后制成斜面,注意配制时控制好pH,不要过碱,以黄绿色为准。
19、醋酸铅培养基
pH7.4的牛肉膏蛋白胨琼脂
100mL
硫代硫酸钠0.25g
10%醋酸铅水溶液1mL
精品资料
培养基的配制:
将牛肉膏蛋白胨琼脂100mL加热溶解,待冷却至60℃时加入硫代硫酸钠0.25g,调至pH7.2,分装于三角瓶中,115℃灭菌15min。
取出后待冷却至55—60℃,加入10%醋酸铅水溶液(无菌的)1mL,混匀后倒入灭菌试管或平板中。
20、血琼脂培养基
pH7.6的牛肉膏蛋白胨琼脂100mL
脱纤维羊血(或兔血)10mL
培养基的配制:
将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化,待冷却至50℃时,加入无菌脱纤维羊血(或兔血)摇匀后倒平板或制成斜面。
37℃过夜检查无菌生长即可使用。
21、玉米粉蔗糖培养基
玉米粉
磷酸二氢钾
60g
3g
维生素B1
100mg
蔗糖
10g
七水合硫酸镁
1.5g
水
1000mL
121℃灭菌30min,维生素B1单独灭菌15min后另加。
精品资料
22
、酵母膏麦芽汁琼脂
麦芽粉3g
酵母浸膏0.1g
水1000mL
121℃灭菌30min。
24、棉籽壳培养基
培养基的配制:
棉籽壳50%,石灰粉1%,过磷酸钙1%,水65%—70%,按比例称好料,充分搅拌均匀后装瓶,较薄地平摊盘上。
25、复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)
蛋白胨
乳糖
磷酸氢二钾
10g
10g
3.5g
琼脂
20—30g
蒸馏水
1000mL
5%碱性复红乙醇溶液
20mL
精品资料
培养基的配制:
先将琼脂加入900mL蒸馏水中,加热溶解,再加入磷酸氢二钾及蛋
白胨,使溶解,补足蒸馏水至1000mL,调pH至7.2—7.4。
加入乳糖,混匀溶解后,115℃灭菌20min。
称取亚硫酸钠置一无菌空试管中,加入无菌水少许使溶解,再在水浴中煮沸
10min后。
立刻滴加于20mL5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色褪成淡粉红色为止。
将
此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中,充分混匀,倒平板,放冰箱中备用,贮存时间不宜超过2周。
26、伊红美蓝培养基(
蛋白胨水培养基
EMB
培养基)
100mL
20%乳糖溶液
2mL
2%伊红水溶液
2mL
0.5%美蓝水溶液
1mL
培养基的配制:
将已灭菌的蛋白胨水培养基(pH7.6)加热熔化,冷却至60℃左右时,再把已灭菌的乳糖溶液,伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。
摇匀后,立即倒平板。
乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度,115℃灭菌20min。
27、乳糖蛋白胨培养液(“水的细菌学检查”用)蛋白胨10g
牛肉膏3g
乳糖5g
精品资料
氯化钠5g
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL
蒸馏水1000mL
培养基的配制:
将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中,调pH至7.2—7.4。
加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL,充分混匀,分装于有小倒管的试管中。
115℃灭菌20min。
28、石蕊牛奶培养基
牛奶粉100g
石蕊0.075g
水1000mL
pH6.8
121℃灭菌15min。
29、LB(Luria-Bertani)培养基
蛋白胨10g
酵母膏5g
氯化钠10g
蒸馏水1000mL
精品资料
pH7.0
121℃灭菌20min。
30、基本培养基
磷酸氢二钾10.5g
磷酸二氢钾4