各种培养基配方.docx

1、各种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）2、2 、高氏（ Gause ） 1 号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH7.2 7.4146 种培养基配方牛肉膏蛋白胨氯化钠3g5g10g琼脂1520gpH7.07.2水1000mL精品资料配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状， 倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至 1000mL 。121 灭菌 20min 。查氏（ Czapek ）培养基（培养霉菌用）硝酸钠磷酸氢二钾2g1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸

2、亚铁0.01g蔗糖30g琼脂1520g水1000mLpH自然121 灭菌 20min 。4、马丁氏（ Martin ）琼脂培养基（分离真菌用） 葡萄糖 10g蛋白胨 5g磷酸二氢钾 1g七水合硫酸镁 0.5g精品资料1/3000 孟加拉红 （ rosebengal ，玫瑰红水溶液）100mL琼脂 15 20gpH 自然蒸馏水 800mL112 灭菌 30min 。临用前加入 0.03% 链霉素稀释液 100mL ，使每毫升培养基中含链霉素 30g 。5、马铃薯培养基（简称 PDA ）（培养真菌用） 马铃薯 200g蔗糖（或葡萄糖） 20g琼脂 15 20gpH 自然培养基的配制：马铃薯去皮，切

3、成块煮沸 30min ，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂， 熔化后补足水至 1000mL 。121 灭菌 30min 。6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1) 、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水 6 12 小时，至 15 阴暗处发芽，上面盖纱精品资料布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。(2) 、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在 65 水浴中糖化 3 4小时，糖化程度可用碘滴定之。加水约 20mL ，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。(3) 、将糖化液用 4 6 层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个

4、鸡蛋白加水约 20mL ，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。(4) 、将滤液稀释到 5 6 波美度， pH 约 6.4 ，加入 2% 琼脂即成。 121 灭菌 30min 。7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）甘露醇（或葡萄糖）磷酸二氢钾 七水合硫酸镁10g0.2g0.2g氯化钠0.2g二水合硫酸钙0.2g碳酸钙5g蒸馏水1000mLpH7.0 7.2113 灭菌 30min 。8、半固体肉膏蛋白胨培养基精品资料肉膏蛋白胨液体培养基 100mL琼脂 0.35 0.4gpH 7.6121 灭菌 20min 。9、合成培养基偏磷酸铵1g氯化钾0.2g七水合硫酸镁0.2g豆芽汁1

5、0mL琼脂20g蒸馏水1000mLpH7.0加12 mL0.04% 的溴钾酚紫（ pH5.2 6.8 ，颜色由黄变紫，作指示剂） 。121 灭菌20min 。10 、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基黄豆芽 100g精品资料蔗糖（或葡萄糖） 50g水 1000mLpH 自然培养基的配制：称新鲜豆芽 100g ，放入烧杯中，加入水 1000mL ， 煮 沸 约 30min ， 用纱布过滤。用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖） 50g ，煮沸熔化。 121 灭菌 20min 。11 、油脂培养基蛋白胨牛肉膏氯化钠香油或花生油10g5g5g10g1.6% 中性红水溶液1mL琼脂15 20g蒸馏水1000m

6、LpH7.2121 灭菌 20min注： (1) 、不能使用变质油。(2) 、油和琼脂及水先加热。精品资料(3) 、调好 pH 值后，再加入中性红。(4) 、分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。12 、淀粉培养基蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠5g可溶性淀粉2g蒸馏水1000mL琼脂15 20g121 灭菌 20min13 、明胶培养基牛肉膏蛋白胨液 100mL明胶 12 18gpH 7.6在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。溶化后调 pH7.2 7.4 。121 灭菌 30min 。精品资料14 、蛋白胨水培养基蛋白胨 10g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH 7.6121 灭菌 20

7、min 。15 、糖发酵培养基蛋白胨水培养基 1000mL15.6 % 溴钾酚紫乙醇溶液 1 2mLpH 7.6另配制 20% 糖溶液（葡萄糖、乳糖、蔗糖等）各 10mL 。培养基的配制：(1) 、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基（ pH7.6 ）分装于试管中，在每管内放一倒置的小玻璃管（ Durham tube ），使之充满培养液。(2) 、将已分装好的蛋白胨水和 20% 的各种糖溶液分别灭菌，蛋白胨水 121 灭菌20min ；糖溶液 112 灭菌 30min 。(3) 、灭菌后，每管以无菌操作分别加入 20% 无菌糖溶液 0.5 mL （按每 10mL 培养基精品资料中加入 20% 的糖液

8、 0.5mL ，则成 1% 的浓度）。配制用的试管必须洗干净，避免结果混乱。16 、葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨 5g葡糖糖 5g磷酸氢二钾 2g蒸馏水 1000mL将上述各成分溶于 1000mL 水中，调 pH7.0 7.2 ，过滤。分装试管， 每管 10mL ，112 灭菌 30min 。17 、麦氏（ Meclary ）琼脂（酵母菌）葡萄糖 1g氯化钾 1.8g酵母浸膏 2.5g醋酸钠 8.2g琼脂 15 20g蒸馏水 1000mL113 灭菌 20min 。精品资料18 、柠檬酸盐培养基磷酸二氢铵磷酸氢二钾氯化钠1g1g5g硫酸镁0.2g柠檬酸钠2g琼脂15 20g蒸馏水1000 mL1

9、% 溴麝香草酚蓝乙醇液10 mL培养基的配制：将上述各成分加热溶解后，调 pH6.8 ，然后加入指示剂，摇匀，用脱脂棉过滤。制成后为黄绿色，分装试管， 121 灭菌 20min 后制成斜面，注意配制时控制好pH ，不要过碱，以黄绿色为准。19 、醋酸铅培养基pH7.4 的牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL硫代硫酸钠 0.25g10% 醋酸铅水溶液 1 mL精品资料培养基的配制：将牛肉膏蛋白胨琼脂 100 mL 加热溶解，待冷却至 60 时加入硫代硫酸钠 0.25g ，调至 pH7.2 ，分装于三角瓶中， 115 灭菌 15min 。取出后待冷却至 55 60 ， 加入 10% 醋酸铅水溶液（无菌的）

10、 1mL ，混匀后倒入灭菌试管或平板中。20 、血琼脂培养基pH7.6 的牛肉膏蛋白胨琼脂 100 mL脱纤维羊血（或兔血） 10 mL培养基的配制：将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化，待冷却至 50 时，加入无菌脱纤维羊血（或兔血）摇匀后倒平板或制成斜面。 37 过夜检查无菌生长即可使用。21 、玉米粉蔗糖培养基玉米粉磷酸二氢钾60g3g维生素 B1100mg蔗糖10g七水合硫酸镁1.5g水1000 mL121 灭菌 30min ，维生素 B1 单独灭菌 15min 后另加。精品资料22 、酵母膏麦芽汁琼脂麦芽粉 3g酵母浸膏 0.1g水 1000 mL121 灭菌 30min 。24 、棉籽壳培养

11、基培养基的配制：棉籽壳 50% ，石灰粉 1% ，过磷酸钙 1% ，水 65% 70% ，按比例称好料，充分搅拌均匀后装瓶，较薄地平摊盘上。25 、复红亚硫酸钠培养基（远藤氏培养基）蛋白胨乳糖磷酸氢二钾10g10g3.5g琼脂20 30g蒸馏水1000 mL5% 碱性复红乙醇溶液20 mL精品资料培养基的配制：先将琼脂加入 900 mL 蒸馏水中，加热溶解，再加入磷酸氢二钾及蛋白胨，使溶解，补足蒸馏水至 1000 mL ，调 pH 至7.2 7.4 。加入乳糖，混匀溶解后， 115 灭菌 20min 。称取亚硫酸钠置一无菌空试管中，加入无菌水少许使溶解，再在水浴中煮沸10min 后。立刻滴加于

12、 20 mL 5% 碱性复红乙醇溶液中，直至深红色褪成淡粉红色为止。将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中， 充分混匀，倒平板，放冰箱中备用，贮存时间不宜超过 2周。26 、伊红美蓝培养基（蛋白胨水培养基EMB培养基）100 mL20% 乳糖溶液2 mL2% 伊红水溶液2 mL0.5% 美蓝水溶液1 mL培养基的配制： 将已灭菌的蛋白胨水培养基 （ pH7.6 ）加热熔化， 冷却至 60 左右时， 再把已灭菌的乳糖溶液， 伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。 摇匀后， 立即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度， 115 灭菌 20m

13、in 。27 、乳糖蛋白胨培养液（ “水的细菌学检查 ”用） 蛋白胨 10g牛肉膏 3g乳糖 5g精品资料氯化钠 5g1.6% 溴甲酚紫乙醇溶液 1 mL蒸馏水 1000 mL培养基的配制：将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于 1000 mL 蒸馏水中， 调 pH 至 7.2 7.4 。加入 1.6% 溴甲酚紫乙醇溶液 1 mL ，充分混匀，分装于有小倒管的试管中。 115 灭菌 20min 。28 、石蕊牛奶培养基牛奶粉 100g石蕊 0.075g水 1000 mLpH 6.8121 灭菌 15min 。29 、LB （ Luria-Bertani ）培养基蛋白胨 10g酵母膏 5g氯化钠 10g蒸馏水 1000 mL精品资料pH 7.0121 灭菌 20min 。30 、基本培养基磷酸氢二钾 10.5g磷酸二氢钾 4