移液器的使用方法.docx
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移液器的使用方法
移液器的使用方法及注意事项
一、范围
本标准适用于移液器使用、维护和保养。
二、内容
一个完整的移液循环,包括吸头安装——容量设定——预洗吸头——吸液——放液——卸去吸头等六个步骤。
每一个步骤都有需要遵循的操作规范。
1.吸头安装:
正确的安装方法叫旋转安装法,具体的做法是,把白套筒顶端插入吸头(无论是散装吸头还是盒装吸头都一样),在轻轻用力下压的同时,把手中的移液器按逆时针方向旋转180度。
切记用力不能过猛,更不能采取剁吸头的方法来进行安装,因为那样做会对您手中的移液器造成不必要的损伤。
2.容量设定:
正确的容量设定分为两个步骤,一是粗调,即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;二是细调,当容量值接近自己的预想值以后,应将移液器横置,水平放至自己的眼前,通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响。
在容量设定时,还有一个需要特别注意的地方。
当我们从大值调整到小值时,刚好就行;但从小值调整到大值时,就需要调超三分之一圈后再返回,这是因为计数器里面有一定的空隙,需要弥补。
3.预洗吸头:
在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。
其次,在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时就需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。
4.吸液:
先将移液器排放按钮按至第一停点,再将吸头垂直浸入液面,浸入的深度为:
P2、P10小于或等于1毫米,P20、P100、P200小于或等于2毫米,P1000小于或等于3毫米,P5ML、P10ML小于或等于4毫米(浸入过深的话,液压会对吸液的精确度产生一定的影响,当然,具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握),平稳松开按钮,切记不能过快。
5.放液:
放液时,吸头紧贴容器壁,先将排放按钮按至第一停点,略作停顿以后,再按至第二停点,这样做可以确保吸头内无残留液体。
如果这样操作还有残留液体存在的话,您就应该考虑更换吸头了。
6.卸掉吸头:
卸掉的吸头一定不能和新吸头混放,以免产生交叉污染。
两分钟检查法:
这是可以对手中移液器进行快速检查的一种简单方法,通过检查,来判断我们手中的移液器是否处于一种正常的工作状态。
1、测漏:
我们手中的移液器叫空气排代式移液器,如果出现漏气的情况,那我们的取样结果就肯定不会准确,这将直接影响到我们实验的最终结果,后果是比较比较严重的。
那么,如何判断移液器是否漏气呢?
这就需要我们对它做一个简单的测试,首先,取一个透明的容器,装上水,将需要测试的移液器装上吸头,吸上水,如果是P2、P10、P20、P100、P200的移液器,请将吸头浸入液面1——2毫米,静待20秒,观察吸头内部液面是否下降,如果下降了,就说明您手中的移液器出现了漏气的情况;如果是P1000、P5000、P10ML的移液器,请将吸头朝下悬垂20秒,观察是否有液体下滴,如果有,说明您手中的移液器也出现了漏气的情况。
出现了漏气的情况怎么办呢?
2、查找故障原因:
首先,检查吸头安装是否到位,换掉吸头再次测试,以排除因吸头的关系产生的漏气情况;接着,检查白套筒的端口部份(即白套筒与吸头接触的部份)是否有刮痕;然后,再检查白套筒与手柄之间的连接螺帽是否松动。
如果这些情况都没有,就说明密封圈或活塞组件有损坏,请您跟我们取得联系,我们会上门为您解决。
3、检查外观:
按动排放按钮,感觉是否顺畅,听是否有噪音,观察排放杆是否有弯曲;旋转调节按钮,观察计数器的读数是否有偏差。
3、白套筒端口向下,轻轻提起手柄放入盛放盘内,按住活塞尾部,将白套筒端口向上,置于盛放盘上部,小心取出活塞组件,以免弄掉零件;
4、从活塞杆上或白套筒内取出密封圈,放入盛放盘内。
5、安装,其步骤与拆卸正好相反。
需要注意的是,密封圈的黑色部份朝向白套筒,白色部份朝向手柄。
维护保养:
1、定期清洁我们手中的移液器,用酒精棉即可,主要擦拭手柄、弹射器及白套筒外部,既可以保持美观,又降低了对样品产生污染的可能性。
2、在吸取过高挥发、高腐蚀液体后,应将整支移液器拆开,用蒸馏水冲洗活塞杆及白套筒内壁,并在晾干后安装使用。
以免挥发性气体长时间吸附于活塞杆表面,对活塞杆产生腐蚀,损坏您的移液器。
移液器的使用方法
调节量程
在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。
在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
装配枪头(吸液嘴)的
在将枪头套上移液枪时,正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。
如果是多道(如8道或12道)移液枪,则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。
枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法
移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。
吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米。
在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。
这时可以采取两种移液方法。
一是前进移液法。
用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。
接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。
最后松开按钮。
二是反向移液法。
此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。
先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。
接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。
移液器的正确放置
使用完毕,可以将其竖直挂在移液枪架上,但要小心别掉下来。
当移液器枪头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。
维护保养时的注意事项
如不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。
最好定期清洗移液枪,可以用肥皂水或60%的异丙醇,再用蒸馏水清洗,自然晾干。
高温消毒之前,要确保移液器能适应高温。
校准是可以在20-25度环境中,通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行。
使用时要检查是否有漏液现象。
方法时吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。
如果漏液,原因大致有一下几方面:
1、枪头是否匹配;
2、弹簧活塞是否正常;
3、如果是易挥发的液体(许多有机溶剂都如此),则可能是饱和蒸汽压的问题。
可以先吸放几次液体,然后再移液。
可充电式助理移液器设备轻巧、无线,便于携带。
配有充电器,充电一次可以连续使用6-8个小时,内置0.45μm疏水膜过滤膜,可防止液体吸入以保护内部部件。
助理移液器可以代替传统的吸耳球,适用于所有1-100毫升玻璃或塑性移液管。
移液器的吸吹速度由泵速调节器控制,操作者可根据使用的移液管容量大小选择档位,以加快或减慢吸/吹速度。
助理移液器的主要原器件从德国和美国采购,塑料件采用可回收使用材料。
移液器配备低环境污染的1.2伏可充电锂电电池。
1、可与多种规格的移液管配套使用
2、可充电便携式设计
3、种电压规格可选:
110和220伏
4、可充电便携式设计,且配备低环境污染的1.2伏可充电镍氢电池及充电器,充电一次可连续使用6-8小时
5、内置0.45μm疏水过滤器,可防止液体吸入以保护内部部件
6、吸吹速度由泵速调节器控制,操作者可根据使用的移液管容量大小选择挡位,以加快或减慢吸/吹速度
7、可与多种规格的移液管配套使用
微量移液器基本使用方法
1)选择适当的Pipetman:
不同型号的微量移液器,各有其吸取体积范围,请依取用溶液体积取用适当的微量移液器。
P100.5~10
P202~20
P10020~100
P20050~200
P1000200~1,000
P50001,000~5,000
2)设定体积:
设定体积时,由低旋转至高值,须先超越所欲设定值至少三分之一转后,再反转至设定值;由高旋转至低值,则直接转至设定值即可。
请勿将体积调整圈转到超过最低或最高的使用范围。
3)套上微量移液器头,吸取溶液:
吸取溶液时,尖端请先套上微量移液器头(tip),P1000使用藍色微量移液器头,P200及P20使用黄色微量移液器头。
将按钮压至第一段,尽可能保持微量移液器垂直,将微量移液器头尖端浸入溶液,再缓慢释放生物技术核心实验第一章基本操作技术按钮(图1.2)。
释放按钮不可太快,以免溶液冲入吸管柱内而腐蚀活塞。
微量移液器头尖端浸入溶液的程度随吸取的体积及使用型号而定:
P10<1mm
P20,P1002~3mm
P200,P10002~4mm
P50003~6mm
4)释放溶液:
将微量移液器头与容器壁接触,慢慢压下按钮至第一段,停一兩秒再压至第二段,把溶液完全压出。
1.1.3使用注意事项
1)勿将微量移液器本体浸入溶液中。
2)吸取黏度高之试液,请先将微量移液器头尖端以刀片或剪刀将出口切大,并先行预润后再吸取。
3)吸取酸液或具腐蚀性溶液后,请将微量移液器拆解开,各部位零件以蒸馏水冲洗干净,擦干后再正确组合回復原狀。
4)微量移液器的任何部份切勿用火烧烤,亦不可吸取温度高于70℃的溶液,避免蒸气侵入腐蚀活塞。
5)套有微量移液器头的微量移液器,无論微量移液器头中是否有溶液,均不可平放,需直立架好。
6)P5000必须使用过濾头,过濾头潮湿即需更换。
7)若不小心使溶液进入吸管柱内时,应予以拆解,将活塞组件、吸管柱、O-ring、铁氟龍垫等各部位以清水冲洗干净后,再以酒精擦拭,擦干后再正确组合回復原狀。
6MethodsinBiotechnologyVol1
8)定期自行以天平检查准确度,若有任何问题请送厂维修。
微量移液器PipetmanP的使用
A,保持微量移液器垂直,将按钮压至第一段;B,微量移液器头尖端浸入溶液,缓慢释放按钮;C,保持微量移液器垂直,将微量移液器头与容器壁接触,慢慢压下按钮至第一段;D,压至第二段把溶液完全释放出;E,释放按钮回原狀。
微量移液器的使用方法
一、标准操作
适用的液体:
水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液。
1)按到第一档,垂直进入液面几毫米。
2)缓慢松开控制按钮,否则液体进入吸头过速会导致液体倒吸人移液器内
部吸人体积减少。
3)打出液体时贴壁并有一定角度,先按到第一档,稍微停顿1s后,待剩余液体聚集后,再按到第二档将剩余液体全部压出。
二、黏稠或易挥发液体的移取
在移取黏稠或易挥发的液体时,很容易导致体积误差较大。
为了提高移液准确性,建议采取以下方法:
1)移液前先用液体预湿吸头内部,即反复吸打液体几次使吸头预湿,吸液或排出液体时最好多停留几秒。
尤其对于移取体积大的液体(如1000~1),建议将吸头预湿后再移取。
2)采用反相移液法:
吸液时按到第二档,慢慢松开控制按钮,打液时按到第二档,部分液体残留在吸头内。
三、常见的错误操作
1)吸液时,移液器本身倾斜,导致移液不准确(应该垂直吸液,慢吸慢放)。
2)装配吸头时,用力过猛,导致吸头难以脱卸(无需用力过猛,选择与移液器匹配的吸头)。
3)平放带有残余液体吸头的移液器(应将移液器挂在移液器架上)。
4)用大量程的移液器移取小体积样品(应该选择合适量程范围的移液器)。
5)直接按到第二档吸液(应该按照上述标准方法操作)。
6)使用丙酮或强腐蚀性的液体清洗移液器(应该参照正确清洗方法操作)。
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