植物生理生化课件.docx

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植物生理生化课件

植物生理生化（生化部分）

绪论

（一）目的要求：

掌握植物生化的定义、内容和任务，了解植物生化的发展和现状，了解植物生化与其它学科的关系。

（二）重点植物生化的定义、内容和任务

（三）难点植物生化与其它学科的关系

（四）学时1

一、生物化学的定义

生物：

是指自然界里存在的植物、动物和微生物。

这些生物千差万别，种类极其丰富，如以微米计的病毒、细菌，大到百米高的参天大树，把这些客观存在统称为生物的条件就是：

他们的组成成分与新陈代谢的同一性，即所有生物在物质组成及物质转化过程中具有相同或相近的规律性。

生物化学：

研究物质组成的化学本质与物质转化的化学性质的学科，就是生物化学。

简单说就是研究生命现象本质的科学。

生物化学研究的内容：

1.静态生化：

是研究生物体内物质的化学组成、结构、性质和功能。

这些物质有：

蛋白质、核酸、碳水化合物、脂类化合物等----四大生物分子，这些物质的静态生化前四章我们要讲。

2.动态生化：

研究生物体内物质代谢、能量转化及其调节--------新陈代谢

研究生物体生命现象的信息传递与表达（第九章以后的内容）

俗话说种瓜得瓜，种豆得豆生化就是探讨子代具有亲代相同或相似得这种化学特性，主要内容有：

DNA复制、转录、翻译过程。

二、生物化学的历史简介

三、生物化学的重要性

工业上：

工业生物化学研究生化在各领域如轻纺、酿造及食品加工中的应用。

农业上：

生化为栽培、育种、遗传、施肥及植保各方面提供了理论基础和实践技术，如生物农药。

医药业：

无论是医疗还是医药都受生化知识的影响，了解一个病理的机理和治疗都依靠生化知识。

另外，国防上，生化战争（武器）都是从生化学角度出发的-----病毒、细菌。

如美伊战争美国总认为伊拉克有生化核武器。

四、要求

1、弄懂基本的理论知识，这门课理论性较强，必须理解记忆。

2、必须认真听课，做好笔记。

3、及时复习和预习。

五、主要参考书：

聂剑初等主编《生物化学简明教程》、阎龙飞等主编《基础生物化学》

沈同等主编《生物化学》

阎龙飞等主编《分子生物化学》

第一章蛋白质

（一）目的要求：

掌握蛋白质的基本组成单位——氨基酸的结构特点、性质以及蛋白质的结构、性质和功能，理解蛋白质的结构与功能的关系。

（二）重点氨基酸的结构特点和性质；蛋白质的结构和性质

（三）难点氨基酸的酸碱性和等电点蛋白质的结构蛋白质结构与功能的关系

（四）学时4

一.蛋白质的生物学意义

1.是一切生物体的细胞和组织的主要组成成分；

2.催化新陈代谢的各种反应的酶多数是蛋白质；

3.在遗传信息的控制、细胞膜的透性、高等动物的记忆和识别等方面起重要作用；

4.生物体的防御体系——抗体就是一类高度专一性的蛋白质如免疫球蛋白；

5.以干扰素的形式存在于细胞内，以消灭在抗体作用下漏网的病毒；

6.生命活动所需的许多小分子物质和离子都是靠蛋白质来运输的；

7.生物的运动离不开蛋白质。

如肌肉收缩是由肌球蛋白和肌动蛋白作相对滑动来实现的。

第一节氨基酸------蛋白质的基本组成单位

氨基酸是指含氨基的羧酸，也就是说氨基酸是由氨基和羧基构成的。

参与蛋白质组成的有20种氨基酸，他们也称标准氨基酸。

除脯氨酸为亚氨基酸外，其它均为α—氨基酸，即羧酸的α—C原子上的一个H被氨基取代；构型均为L型的。

除甘氨酸R为H，α—C不是手性碳外，其他的α—C原子都是不对称碳原子，因此具有旋光性（L—型、D型）。

α—氨基酸的结构通式为：

R—CH—COO-

+3NH

R为侧链基团，方框内的基团为各种氨基酸所共有的。

R不同，就成为各种不同的氨基酸。

不同的蛋白质所含氨基酸种类和数目不同。

脯氨酸（图）

甘氨酸（图）

一、氨基酸的分类及化学结构

（一）常见的蛋白质氨基酸

由于组成蛋白质的20种常见的氨基酸的差异主要表现在侧链R基团上，因此根据组成蛋白质的20种氨基酸R基团的极性不同，将氨基酸分成四大类：

1、具有非极性或疏水的R基团的氨基酸

这类氨基酸共8种，R基团包括脂肪烃、芳香环、仲胺，不易溶于水。

它们是Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Phe、Try（Trp）、Met。

这里面有两个特殊的氨基酸是脯氨酸（α-亚氨酸），另一个是蛋氨酸（含硫氨基酸）结构如下：

2、不带电荷的R基团的极性氨基酸

这些氨基酸的R基团虽然带有极性基团，如—OH、—SH、酰氨基等。

但它们并不解离或解离极弱，所以不带电荷。

比疏水氨基酸较易溶于水。

共7种：

Gly、Ser、Thr、Cys、Tyr、Asn、Gln。

其中极性最小的是甘氨酸，最大的是酪氨酸（Tyr）和半胱氨酸（Cys）结构如下：

甘氨酸

3、带负电荷的R基团氨基酸（又称酸性氨基酸）

这类氨基酸都含有一个完全解离的第二羧基，所以在PH7时带负电荷。

共2种：

Asp、Glu。

结构如下：

图

4、带正点荷的R基团氨基酸

这类氨基酸在pH7时带正电荷，共3种：

Lys、Arg、His。

结构如下：

图

在20种氨基酸中，Val、Leu、Ile、Met、Phe、Lys、Thr、Try、在人和动物体内不能合成，必须从食物中得到，称为必需氨基酸。

（二）稀有的蛋白质氨基酸

除了这20种氨基酸外，还有一些稀有氨基酸，它们都是这些氨基酸的衍生物，只存在于个别蛋白质中。

如：

4—羟脯氨酸（图）

5—羟赖氨酸（图）

它们没有相应的遗传密码，在多肽链合成中由其前体（Pro）（Lys）修饰而成。

（三）非蛋白质氨基酸

除了蛋白质中的20种氨基酸和少数稀有氨基酸外，还有一些决不参与蛋白质组成的氨基酸呈游离或结合态存在于细胞或组织中，称为非蛋白氨基酸。

如：

β—丙氨酸

鸟氨酸（Orn）

瓜氨酸（Cit）

二、氨基酸的重要理化性质

（一）氨基酸的酸碱性与等氨电点

由于氨基酸中同时存在NH2和COOH，所以在水溶液中或在晶体状态下都以离子形式存在。

与无机盐不同的是它以两性离子形式存在。

这些两性离子既可作酸提供质子，又可以作为碱接受H+：

作为酸：

（图）

作为碱：

（图）

所以这类化合物叫两性电解质，当其完全质子化时可以作为一个二元酸：

（1）两性离子：

同时带有正负两种电荷的离子。

两性离子的概念不同与两性电解质。

前者为离子，后者为分子。

（2）两性电解质：

既能解离出正离子又能解离出负离子的电解质。

氨基酸分子上带有能释放出质子的氨基正离子和能接受质子的羧基负离子，因此氨基酸是两性电解质。

作为二元酸的氨基酸的电离情况：

图

从上式可以看出氨基酸的带电状态与溶液的pH值有关，改变pH可以使氨基酸带上正电荷或负电荷，也可以使它处于正负电荷数相等即静电荷为零的兼性离子状态，在电场中既不向阳极移也不向阴极移动，此时外界的pH值称为等电点pI,[A+]=[A-]

适用于R基团不解离的中性氨基酸,对于有三个可解离基团的氨基酸如谷氨酸和赖氨酸,取等电兼性离子两边的pKa值的平均值即为pI。

任意氨基酸在pI以上的任一pH时，氨基酸带负电荷在电场中向正极移动，反之易然。

溶液pH离pI越远，氨基酸所带净电荷越大。

方程式：

（图）

处于等电点状态的氨基酸，由于静电作用，溶解度最小，容易沉淀析出，利用这一性质可以分离制备某些氨基酸。

由于氨基酸都有特定的等电点，所以在某一pH条件下，各种氨基酸所带的电荷各不相同，根据这一性质，可通过电泳法、离子交换法等对混合氨基酸进行分离或制备。

（二）氨基酸的光学性质

1、氨基酸的光学活性

除甘氨酸所有天然α-氨基酸的α-碳原子上三个基团都不相同，这样的碳原子叫不对称碳原子，从而产生两种不同的对映体，而且具有旋光性，在偏振计上检查时，它们能使平面偏振光发生偏转，向右（+），向左（—）。

属于右旋的氨基酸有：

Ala、Ile、Glu、Asp、Val、Lys、Arg等以符号+

属于左旋的氨基酸有：

Ser、Leu、Pro、Trp、Ile、Phe、等。

2、氨基酸的立体化学

由于氨基酸的手性碳的存在，也可用异构体D、L型来区分，一般氨基酸只有D、L两种异构体。

另外Thr、Ile、共有四种异构体。

一般的氨基酸只有D、L两种异构体，以甘油醛为标准。

D-甘油醛L-甘油醛D-丙氨酸L-丙氨酸

其中α-NH2相当-OH，R基团相当于-CH2OH

2、氨基酸的吸收光谱

蛋白质中的20种氨基酸都不吸收可见光（380-760nm），所以都是无色的，但酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸都具有芳香环，因此能显著地吸收紫外光（220-300nm）。

由于大多数蛋白质都含有酪氨酸，其吸收峰在280nm，故可测定样品在280nm的消光值来快速测定蛋白质的含量。

（三）氨基酸的化学反应

氨基酸的化学反应主要是指α-NH2和α-COOH以及R基团所参与的反应。

1、与茚三酮的反应

是一个广泛使用的α-NH2反应，能用于极微量的氨基酸的定性和定量的测定。

其试剂是茚三酮，茚三酮与氨基酸一起加热，产生一种蓝紫色的物质。

脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应不释放氨，产生黄色物质。

2、桑格反应（Sanger反应）：

与2，4-二硝基氟苯的反应

在弱碱性溶液中，氨基酸的α-氨基很容易与2，4-二硝基氟苯（DNFB）作用，生成稳定的黄色2，4二硝基苯氨基酸（DNP-氨基酸）。

（见图）

3、Edman反应：

与异硫氰酸苯酯反应

在弱碱性条件下，氨基酸中的α-氨基可与异硫氰酸苯酯（PITC）反应，产生相应的苯氨基硫甲酰氨基酸（PTC-氨基酸），在无水氢氟酸中，PTC-氨基酸即环化为苯硫乙内酰脲（PTH），这种物质在酸中极稳定。

（见图）

Sanger和Edman在分析蛋白质一级结构中都做出了很大贡献，也为此获得了诺贝尔奖。

氨基酸还有一些特殊的反应，可以参看沈同主编的教材。

第二节蛋白质的结构

一、蛋白质的一级结构

定义：

根据国际理论化学和应用化学协会的确定蛋白质的一级结构是指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，包括二硫键的位置又叫化学结构。

那么什么叫多肽链呢？

（一）肽键与肽

1.肽键

蛋白质是由许多氨基酸通过肽键连接形成的生物大分子。

肽键是一个氨基酸的α-氨基和另一个氨基酸的α-羧基脱水而成，又叫酰胺键。

2.肽

以肽键相连而成的化合物叫肽，如上面的这个叫二肽（由两个氨基酸残基组成的肽叫二肽）。

组成蛋白质的氨基酸单位已不是完整的分子，因此每一个氨基酸单位称为氨基酸残基。

由两个氨基酸残基形成的肽叫二肽，由三个氨基酸残基形成的肽叫三肽。

一般含氨基酸残基少于10个的肽叫寡肽，超过10个的叫多肽。

多肽为链状结构，所以也叫多肽链。

蛋白质就是由几十到几百甚至几千个氨基酸形成的多肽链。

通常每个肽分子都有一个游离的α-NH2和α-COOH前者叫N末端（习惯写在左边），后者叫C-末端（写在右边）。

（二）活性肽

当蛋白质水解时会产生长短不一的各种肽段外，生物体内还存在着许多游离状态的天然肽，它们具有特殊的生物学功能，称之为活性肽。

如谷胱甘肽是由Glu,Cys,Gly形成的三肽，谷胱甘肽在氧化还原过程中作为某些酶的辅酶。

由于GSH中含有一个活泼的巯基，很容易氧化，两分子的GSH脱氢以二硫键相连成氧化型谷胱甘肽（GSSG）。

二、蛋白质的二级结构

（一）蛋白质的二级结构

是指肽链沿一定的方向折叠盘绕，通过氢键作用形成的空间构象。

由于二级结构是肽链主链沿一定的方向折叠盘绕而成，然而肽链是不能任意旋转的。

多肽链折叠的空间限制

肽键形式上是单键，但X射线衍射技术研究发现，它是刚性的，并且具有平面结构。

肽键具有部分双键的性质，其键长（1.32A。

）介于C—N（1.49A。

）单键和C=N（1.27A。

）双键之间。

因此组成肽键的部分形成一个平面（酰胺平面）见图：

肽单位：

图

肽键具有部分双键的性质，其根本原因在于酰胺氮上的孤对电子和相邻羧基的共振作用形成的共振杂化体，所以肽键不能自由旋转，结果每个肽单位中的6个原子必须处于同一平面，此刚性结构平面叫肽平面或酰胺平面，每个肽平面之间由α—C相连接。

而平面两侧的C—N和C—C键可以自由旋转。

因此可以把肽脸看成被α—C原子隔开的许多平面组成的。

这样多肽链上所有的酰胺平面都可以相互旋转，而形成无数蛋白质的构象。

事实并不这样，一个天然蛋白质在一定的条件下往往只有一种或很少几种构象。

这是因为，主链上1/3是肽键，不能自由旋转，同时主链上的R基团的大小及电荷情况的影响，使得天然蛋白质分子中只存在一种或少数几种稳定构象。

思路：

肽键（单键）具有双键的性质——杂化体——不能自由旋转——肽单位同一平面——叫肽平面（酰胺平面）——蛋白质只存在：

α—螺旋、β-折叠、β-转角等几种构象。

（二）二级结构的基本类型

1．α—螺旋

是蛋白质中最常见最典型的二级结构主要存在于毛发皮革角甲等中。

主要特征如下：

（1）肽键中的酰胺平面绕α-C旋转形成。

天然蛋白质的α螺旋结构大多呈右手螺旋，也发现极少数呈左手螺旋。

（P18）

（2）在α螺旋结构中每隔3.6个氨基酸残基螺旋上升一圈，沿中心轴上升一圈，相当于向上平移5.4A。

，每个氨基酸残基向上平移1.5A。

，每个残基沿轴旋转100度。

（3）在主碳链的螺旋上所有R基团都伸向外侧，保证α—螺旋的稳定性。

（4）相邻的螺圈之间形成氢键，氢键几乎与中心轴平行。

氢键是由羰基上的氧每隔三个残基与第四个氨基酸残基亚氨基上的氢形成的。

α螺旋体的结构允许所有残基参与氢键的形成。

因此α螺旋构象是相当稳定的。

2.β-折叠

β-折叠是几乎伸展的多肽链连接而成的锯齿状片层结构，这种结构中肽链按层排列，它依靠相邻两条肽链间或一条肽链内的两个肽段间的>C=O与>N-H所形成的氢键来稳定其结构。

主要特征如下：

（1）多肽链伸展

（2）氢键与肽键垂直

（3）氨基酸残基侧链R交替的分布啊在片层平面的上下两侧

（4）β-折叠可分为平行式（两条肽链都从氮端到碳端）和反平行式（两条肽链方向相反）

3．β-转角（也叫β-回折β-发卡结构）---------了解

特点：

多肽链回折180。

后，使得氨基酸残基的>C=O与>N-H所形成的氢键。

4．无规则卷曲

除上述三种结构外，还存在一些不确定的无规律性的盘曲，即无规则卷曲。

蛋白质的超二级结构和结构域（新东西）

超二级结构和结构域是介于二级结构与三级结构之间的两种结构水平。

超二级结构在蛋白质分子中，若相邻的二级结构单元（α—螺旋、β-折叠、β-转角）组合在一起形成空间上可以辨认的二级结构组合体，充当三级结构的构件。

基本组合形式如下：

1.αα组合形式:

是α-螺旋构象的聚集体。

也可以说是由二股或三股右手α-螺旋缠绕而成的左手超螺旋。

重复距离14nm氨基酸残基的非极性链伸向螺旋的内部（稳定力）。

2.βαβ组合形式：

由两段平行式的β-链（单股β-折叠）和一段连接（α—螺旋）组成。

3.βββ组合形式：

由三条或多条反平行式β-折叠链通过β转角（或其它肽链）连接而成，也叫β-曲折。

是β-折叠构象的聚合体。

2．结构域（又叫辖区）

定义：

在超二级结构的基础上，多肽链进一步卷曲折叠成几个空间上可以区分的相对独立近似球体的三维实体，称为一个结构域。

一个蛋白质分子中的结构域可以相似或不同，如弹性蛋白的两个结构域具有β-折叠桶结构，而木瓜蛋白酶的两个结构域一个是α—螺旋，一个是β-折叠桶。

两个结构域间常常只有一段肽链相连即铰链区，从而使结构易发生相对运动，有利于蛋白质发挥生理功能。

三、蛋白质的三级结构

定义：

在二级结构、超二级结构和结构域的基础上，多肽链进一步盘曲折叠成更为复杂的球状分子结构，叫三级结构。

小分子蛋白质结构域就是它的三级结构，大分子蛋白质的三级结构中有两个或两个以上的结构域。

三级结构举例说明——肌红蛋白-----幻灯片

肌红蛋白是由一条多肽链和一个血红素辅基构成，它是典型的具有三级结构的蛋白质，存在动物肌肉里，起到运氧和贮氧的功能。

其特点如下：

肌红蛋白分子共有153个氨基酸组成，其主链由八段α—螺旋折叠而成，最长的含有23个氨基酸残基，最短的含有7个氨基酸残基。

在拐角处主要是脯氨酸，还有一些不易形成α—螺旋的氨基酸如亮氨酸和丝氨酸。

氨基酸残基的全部极性R基团都位于分子外部表面，使肌红蛋白具有可溶性。

全部非极性R基团都位于分子内部，形成一个疏水基。

四、蛋白质的四级结构

定义：

由两个或两个以上具有三级结构的亚基或亚单位通过非共价键彼此缔合在一起而形成的具有特定三维结构的聚集体叫蛋白质的四级结构。

亚基：

一条两条多条多肽链以二硫键相连而成。

单独的亚基无完整的生物活性，亚基只有在四级结构才有意义。

一个蛋白质的亚基可以相同也可以不同。

具有四级结构的蛋白质又叫寡聚蛋白。

四级结构举例说明----血红蛋白

血红蛋白分子是第一个被弄清四级结构的蛋白质，它是一个四聚体，成人的血红蛋白由2条α链和2条β链组成，为不均一的四级结构（α2β2）。

α链141个AA，β链146个AA。

α及β链的三级结构与肌红蛋白相似，呈球状，也都含有一个血红素分子。

四级结构对生物功能是非常重要的，血红蛋白和肌红蛋白都是氧的载体，但血红蛋白是四聚体，其功能比肌红蛋白强。

血红蛋白是红细胞中重要的蛋白质，其功能是运输氧至组织，运输CO2至肺。

蛋白质的空间结构（二三四级结构）也成为蛋白质的构象或高级结构。

是指蛋白质分子中原子和基团在空间的排列、分布和肽链的走向。

蛋白质的一个特征就是具有特定的空间结构。

一个任意排列的多肽链没有生物活性。

蛋白质的空间结构是以其一级结构为基础的，一级结构决定着高级结构，高级结构决定着生物功能。

总结：

四级结构：

聚合体

三级结构：

球状分子

结构域：

结构域高级结构

超二级结构：

不同折叠形式的组合

二级结构：

多肽链折叠

一级结构：

氨基酸的排列顺序初级结构

维持蛋白质空间构象的作用力

1.氢键：

多发生于多肽链中负电性很强的N或O的孤对电子与N-H或O-H或O-H的氢原子间的相互吸引力。

血红蛋白，其功能是运输O2至组织，运输CO2至肺，分子中包含很多氢键。

（１）蛋白质主链间形成的氢键比例多。

如，α－螺旋、β－折叠，氢键是主要作用力。

（２）Ｈ２Ｏ中的Ｈ或ＯＨ也可与多肽链中的相关原子形成氢键，尤其蛋白质分子的侧链易形成这类氢键。

２．范德华力：

是分子间或原子间相互靠得太近时，由于电子的重叠而产生的相吸相斥的作用。

３．疏水作用：

又叫疏水键，它是疏水基因或疏水侧链为避开水分子而相互靠近聚集形成的力。

疏水键常位于蛋白质内部，对蛋白质的三级结构具有重要作用。

４．离子键：

又叫盐键，是正负电荷间静电吸引而形成的作用力。

蛋白质分子结构与功能的关系

１．一级分子结构与功能的关系：

一级结构是高级结构的基础，具有保守性，同一物种一级结构不变，不同种的一级结构中起决定作用的氨基酸残基不变，而不起作用的氨基酸残基在变，变化越大亲缘越远。

以细胞色素C为例：

（P24）

一级结构与分子疾病（遗传疾病）：

人类的一切疾病都归结为基因疾病。

人体基因组马上破译，这样就可以把遗传疾病消灭掉，即切掉错误基因，换上正确基因，后代不得病。

例如：

非洲的镰刀型贫血病是由于血红蛋白的谷氨酸变成了颉氨酸，使红血球由圆形变为镰刀型，即而发病。

一级结构与蛋白质的前体激活：

无功能的蛋白质叫前体蛋白质，如果是酶叫酶原，它们必须经过激活才有生物学活性。

激活：

切掉某些肽段，剩下部分盘绕成高级结构。

2.蛋白质空间结构（高级结构）与功能的关系（了解）

第三节.蛋白质的重要性质

一、蛋白质的两性性质与等电点

蛋白质分子是由各种氨基酸组成的高分子，有许多可解离的基团，除了肽链末端的氨基和羧基外，主要是肽链上氨基酸残基侧链基团，如氨基、羧基、咪唑基、胍基、羟基、硫基等。

所以也能象酸一样解离，也能象碱一样解离，也是两性离子。

其中解离式大致可以写成：

图

可以看出蛋白质在碱性介质中，蛋白质如酸一样释放H+而带负电荷（再电场中向正极移动）。

在酸性介质中蛋白质如碱一样，接受H+而带正电荷（在电场中向负极移动）。

此时溶液的PH值为该蛋白质的等电点，等电点是蛋白质的一个特征性常数，每种蛋白质都各具一个其大小与其氨基酸组成有关，碱性氨基酸含量较多的蛋白质具有较高的等电点，酸性氨基酸较多的蛋白质具有较低的等电点时，蛋白质分子净电荷为0，失去胶体稳定条件，易沉淀析出，因此处于等电点时，溶解度最小，同时粘度，导电能力最小，因此常利用蛋白质在等电点时，溶解度最小，来分离提纯蛋白质。

二、蛋白质的胶体性质。

蛋白质是大分子化合物，在水溶液中的颗粒直径在1-100nm，恰在胶体颗粒的范围内，具有胶体溶液的性质：

布朗运动，丁达尔现象、电泳现象，不能透过半透膜及吸附能力：

蛋白质溶液是一种很稳定的胶体溶液，不容易发生凝聚而沉淀，这是由蛋白质的性质决定的。

（1）蛋白质的核表面有许多的构性基因如NH2、COOH、-SH等，易与水分子发生水合作用，使蛋白质分子表面形成水膜（又叫水化层），这样蛋白质被水层隔开，不易聚集。

（2）静电斥力。

蛋白质在非等电状态含带有电荷，由于同种电荷相斥，结果使颗粒总保持一定距离，而不发生聚集沉淀。

三、蛋白质的沉淀。

稳定的蛋白质溶胶如被脱水变性或消除电荷，均会使稳定因素消失，这称为蛋白质沉淀现象。

沉淀蛋白质的常用方法。

1、中性盐沉淀。

向蛋白质中加入中性低浓度时，蛋白质溶解度增加，称为盐溶。

这时因为少量的中必（硫胺、NA2SO4、NACL）被蛋白质分子吸附而使电荷反向增大，增加其溶解性。

当加入过量的中性盐时，中性盐酸性比蛋白质强，可以破坏水膜且又可中各颗粒正电荷，结果，发生沉淀这称为盐析作用，这是常用蛋白质分离法。

2、有机溶剂沉淀：

乙醇、甲醇、丙酮等有机溶剂，能破坏蛋白质分子的水化膜。

同时还参与水的电离，从而影响蛋白质的解离，使之易聚集而沉淀。

3、重金属盐类沉淀。

当蛋白质在碱性溶液中（PH>PI）呈负离子状态，可与带正电荷的重金属离子如（Ag+.CA2+.Hg2+.Pb2+）等结合成不溶性的蛋白质盐而沉淀，当发生Pb、Hg中毒时，可服大量牛奶、豆浆、鲜蛋清，使蛋白质与Pb、Hg结合，同进服用催吐剂。

4、生物碱试剂沉淀。

蛋白质在酸性溶液中（PH

5、加热变性沉淀：

几乎所有的蛋白质加热均可变性凝固，蛋白质变性既可表现为沉淀状态，也可为溶液状态。

蛋白质沉淀有时是已变性，有时也可以未变性，这取决于沉淀的方法和条件。

四、蛋白质的变性和复性。

1、蛋白质变性

天然蛋白质受到理化因素的影响，而次级键发生断裂，引起构象变化，致使蛋白质的理化性质改变的现象叫蛋白质的变性，但一级结构未被破坏，这种现象叫蛋白质的变性作用。

变性后的蛋白质叫变性蛋白质。

变性后的表现：

生物活性丧失，溶解度降低，粘度增大，结晶能力丧失。

变性因素：

物理因素：

高温、高压、超声波、紫外线、X-射线、剧烈振动，搅拌。

化学因素：

强酸、强碱、重金属盐、去垢剂、三氯乙酸、浓乙醇等。

2、蛋白质的复性

当变性因素除去之后，已变性的蛋白质又可重新回复到天然构象，这一现象，叫蛋白质的复性。

五、蛋白质的呈色反应

1、双缩脲反应：

这是用以检测肽键存在的特征反应。

由于蛋白质中含有许多双缩脲结构的肽键，因此凡含有2个或2个以上肽键的化合物均能与CUSO4反应，生成蓝紫色或红紫色化合物。

2、考马斯亮蓝反应：

蛋白质+考马斯亮蓝-酸性-色化合物（用于微量蛋白质的测定）

3、蛋白质的分子量。

可以根据化学组成，或根据理化性质，如用沉降速度表示，分子量越大，在离心机中沉降的速度越快。

一般将单位离心力场的沉降速度称沉降系数用S表示。

第一章复习要点：

名词解