Evlution300紫外操作规程.docx

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Evlution300紫外操作规程

Evlution--300紫外操作规程

标题：

Evolution300紫外分光光度计标准操作规程

起草部门

颁发部门

GMP办公室

颁发日期

制定人

制定日期

文件编号

审核人

审核日期

批准人

批准日期

执行日期

分发

1.目的

1.1.规范Evolution300紫外分光光度计的操作，保证正确使用Evolution300紫外分光光度计。

2.适用范围

2.

2.1.适用于赛默飞公司的Evolution300紫外分光光度计。

3.责任者

3.

3.1.仪器操作员：

严格按SOP操作仪器，保持仪器的干净整洁;确保仪器能够正常运行，确认仪器是否在计量效期内。

3.2.质量总监：

相关仪器文件的审批，仪器使用的管理。

4.相关定义

无

5.工作程序

4.

5.

5.1.准备

5.1.1．开机前检查

5.1.1.1.每次开机前应检查样品室应洁净、无异物。

5.1.1.2.检查仪器是否在检定效期内。

5.1.2．检查电源

5.1.2.1.紫外分光光度计应有良好的接地，并配有220V（±5%）电压，零地电压小于5V，每次开机前应检查插头与插座吻合是否正常。

5.1.3．检查放置环境

5.1.3.1.紫外分光光度计应放置在稳定、无振动的位置，周围环境温度应在10℃~30℃、相对湿度不超过75%RH的范围内。

5.1.4．仪器使用记录填写

5.1.4.1.检查上述项目，没有不符合项判定为正常状态，有不符合项判定为不正常状态。

5.2.操作

5.2.1．点击电脑桌面上的VISIONpro快捷图标,根据不同的要求，可以选择不同的测量模式。

ainmenubarToolbar

DatastoreStatusbar

5.2.1.1.自左向右：

1.建立一个新的方法；2.从磁盘调用方法；3.使用当前文件名把采样方法保存到磁盘；4.从磁盘调用结果文件；5.使用当前文件名把选择的数据文件保存到磁盘。

5.2.1.2.自左向右选择：

1.扫描扫描应用；2.固定波长Fixed应用；3.定量Quant应用；4.Rat应用；5.多成份分析MulticomponentAnalysis应用；6.DNA应用。

5.2.1.3.自左向右：

1.开始运行批样品测量；2.暂停Rate应用中的数据采集；3.按照所选方法，采集样品基线或调零；4.停止当前的运行；5.访问Help系统。

5.2.1.4.自左向右：

1.扫描应用记忆当前的；2.恢复到记忆的窗口版面；3.按照不重叠方式的平铺窗口；4层.叠式窗口；5.从磁盘调用窗口版面（窗口版面可以通过File菜单存储和调用）。

5.2.1.5.自左向右：

1.选到Method窗口；2.选到Graph窗口；3.选到Results窗口；4.选到Calibration窗口；5.选到Kinetics窗口。

5.2.1.6.自左向右选择：

1.取消跟踪光标；2.使用跟踪光标（使用箭头键，可沿逐个数据点移动。

）；3.清除所有数据的图谱；4.栅格形式的切换；5.设置图谱坐标范围；6.切换图注显示7.切换峰标显示；8.背景色的白/灰切换9.图谱线形的点/线切换。

5.2.2．使用扫描

5.2.2.1.启动VISION。

5.2.2.2.点击扫描图标进入扫描应用。

5.2.2.3.设置扫描方法（ScanMethod）。

a.从下拉菜单可选的内容中选择数据格式（DataMode）。

b.点击起始波长（选择数据格式）的数值框，将打开数值输入对话框。

可以用鼠标点击数值输入对话框的虚拟键盘，或直接用计算机的键盘，输入起始波长值。

波长终点（stopwavelength）的设置也是一样的。

c.选择带宽（bandwidth），扫描速度（Scanspeed）和数据点间隔（datainterval），也可能还有换灯波长（LampChangewavelength）。

d.输入样品个数。

e.设置循环（Cycles）和循环时间（CycleTime）。

f.在数据采集过程中，或采集完成后，可使用Math菜单中的功能，选择操作所需的显示特性、平滑（Smooth）和结果表。

g.设置自动坐标（AutoScale）。

h.要使用自动保存（AutoSave），点击其On/Off方框使其on，并输入子文件名和序号。

i.要将方法锁定，点击锁定（Lock）按键，输入自己的口令。

j.如要将方法锁定，点击锁定（Lock）按键，输入自己的口令。

5.2.2.4.若使用了池控制器，参考“样品池控制器方法设置”。

5.2.2.5.点击基线校正（BaselineCorrection）按钮，建立相关应用的基线。

此时打开下面窗口

5.2.2.6.按照需要的运行，选择相关的基线校正。

100%TBaseline为标准的用户基线。

如果仪器装有漫反射附件（DRA），其他两个，即0%TBaselineCorrection和StandardReferenceCorrectionwith0%TBaseline也供选择。

5.2.2.7.点击Zero-Base（调零-基线）图标。

5.2.2.8.点击Run（运行）图标。

5.2.2.9.点击Proceed（运行）按键。

5.2.2.10.在时间或动力学实验中，可以选择SynchronizationStart（同步启动）选项，通过Tools>Options>SystemSettings>页使该项可选。

将仪器设置为同步启动后，数据的采集将在点击OK按键或倒计时结束时立即开始。

下面即为运行中同步/倒计时启动对话框实例：

5.2.2.11.如果需要，在第一样品池中加入反应试剂，关闭样品仓仓盖，点击Proceed按键。

5.2.2.12.将测量Cell控制器的第一个样品，后将下一个样品移动到位将得到下一个样品反应的提示。

5.2.2.13.采集过程中的任何时候，按Pause（暂停）图标或选择Command菜单中的Pause，将中断采集。

5.2.2.14.要是采集时间未结束，仪器将继续采集，只是不显示出来，直到再次按动Pause图标，数据采集将按照方法参数继续进行。

5.2.2.15.继续此过程，直至全部样品测试完成。

5.2.3．扫描数据处理

5.2.3.1.点击菜单栏中的Math，从菜单或子菜单中选取运算操作。

操作窗口即在工作区域打开。

5.2.3.2.在库区中，指到要处理的batch,sample或result，按住鼠标左键，把数据拖到运算窗口的Batch,SampleorResult位置。

当数据被拖动时，它的影像在库区中将伴随光标，之后随光标同一起转为带有斜杠的黑色圆环；到达数据可放置区域时，光标与代表batch,sample或result数据的符号复原，释放鼠标按键时就把数据放到该处。

5.2.3.3.若需要,设置Math窗口中的参数。

比如进行标峰（PeakPick）时，其窗口中有3个下拉菜单：

点击数值区域时，将打开输入数值的数字小键盘，输入数值。

在Sensitivity下拉菜单中选择Manual的话，3个灵敏度参数就变成可选的。

5.2.3.4.在Scangraph中可以看到光谱数据的计算或修正结果。

a.将batch、sample或cycle从库区拖放到ScanGraph窗口。

b.点击cycle来查PeakPick后的cycle结果。

c.从Graph菜单选择需要的标记方式,在Graph工具栏（图谱工具栏）点击ToggleLabels（标记切换）按键开关标记。

5.2.3.5.与功能相关的，有可能从ResultsTable（结果表格）显示结果。

从Math窗口的下拉菜单，可以选择将结果以波长或吸光度的顺序排列。

5.2.4．固定波长（Fixed）应用。

5.2.4.1.点击本图标启用Fixed应用。

5.2.4.2.设置Fixed方法窗口中的参数。

a.依照所选的Fixed方法，可同时测量10个不同波长。

点击方框，然后用打开的屏幕数值小键盘或PC的键盘输入波长数值，没有顺序要求。

b.DataMode（数据方式）在Absorbance与%T之间选择。

c.FixedMode的设置在Normal（普通）,ArithmeticCombinationof2wavelengths（双波长相关的计算）和PeakHeight（峰高）之间选择。

PeakHeight方式中要输入峰值和峰两侧起点的波长值。

d.设置方法余下的参数。

e.设置样品的个数,若需要，可以点击Details（详细资料）按键，编

辑样品名称和详情描述，作为方法的组成部分。

通过双击样品名称来编辑它。

f.要使用AutoSave（自动保存），点击On/Off方框到On，输入文件名的词根和号码。

g.点击Lock（锁定）按键，并按提示输入密码，即将方法锁定，之后解锁需重输密码。

5.2.4.3.使用样品池控制器时，referto“样品池控制器方法设置”。

a.点击Zero-Base（调零-基线）图标。

b.当PresentReference（s）（提供参比）对话框出现时，将参比放置到光路或对应的附件样品位置上，盖好样品仓盖，点击Proceed（运行）按键。

c.运行样品采集，点击Run（运行）图标。

将打开PresentSample（提供样品）对话框，如果样品名及其描述还未输入，此时也可以输入。

将样品放置到光路或对应的附件样品位置上，盖好样品仓盖。

d.点击Proceed（运行）按键。

5.2.5．运行定量方法校正（在样品浓度能够测量之前，必须用已知浓度溶液进行校正）。

5.2.5.1.点击应用工具栏的Quant（定量）图标，开始Quant应用。

5.2.5.2.在Quant方法窗口点击CalibrationMethod（方法校正）标签。

5.2.5.3.在CalibrationMethod页参数中输入所需的数值。

5.2.5.4.从下拉菜单中选择所需的Quantmode。

5.2.5.5.若需要，输入所需的波长和系数。

5.2.5.6.设置自动坐标（AutoScale）：

选用扫描方法中的自动坐标按钮（任何与图形相干的应用方法都有此按钮），将在数据获取过程结束后，自动改变坐标以显示完整的采集到的数据。

如果不选这个项目，在数据获取过程结束后的吸光度坐标的范围，将保持在所指定的数值。

5.2.5.7.设置方法余下的参数。

5.2.5.8.输入标样（Standards）个数（1到50）和每个标样的重复（replicates）次数（1to3）。

5.2.5.9.点击More按键，打开第二个方法参数窗口。

在这个窗口里能选择初始曲线拟合（InitialCurveFit），浓度单位，小数点后位数，在“ValidUntil”中指定校正方法有效（使用）期，“FlierDetection”在On/Off间切换，也可能有参比阈值（ReferenceThreshold）和最大吸收值（MaximumAbsorbance），还能选择相关系数的高低限。

5.2.5.10.点击Clo