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组织培养方案
“植物组织培养”项目竞赛方案
第一部分竞赛规程
一、竞赛项目名称
植物组织培养。
二、竞赛目的
随着植物组织培养技术迅速发展及应用范围不断扩大，花卉企业、果蔬生产基地、种苗公司等农业企业对组培技术人才的需求也不断提高。
通过举办组培技能竞赛，顺应农业行业需求，为生产一线培养高素质技能型人才，也为高职农业领域的专家、教师共同探索植物组培教学改革、交流经验搭建平台。
三、竞赛方式与内容
（一）竞赛方式
比赛采取理论知识考试和操作技能考核相结合的方式，其中理论占30%、技能占70%。
（二）竞赛内容
以教育部颁布的职业学校相关专业教学指导方案和国家职业标准《花卉园艺师》（三级）中对《植物组织培养》规定的知识和技能要求为基础，结合技能型人才培养要求和农业生产岗位需要，适当增加新知识、新技术、新技能等相关内容。
1.理论知识考试
按国家职业标准《花卉园艺师》（三级）中对《植物组织培养》规定的应知要求和高职高专《植物组织培养》课程相关的基础知识，采取闭卷方式进行。
每名选手须参加理论考试，考试时间为60分钟。
2.操作技能竞赛内容
（1）竞赛内容
在规定时间内完成规定的MS母液配制、MS固体培养基的配制、一般外植体的消毒和接种及香蕉或金线莲组培苗继代无菌接种操作。
①MS母液配制
根据表1配方进行计算（扩大倍数和母液体积按照大赛要求填写），将结果填入表中，并配制相应溶液。
表1母液配制配方
母液配制
母液
成分
规定量（mg/L）
扩大倍数
称取量（mg）
母液体积（ml）
配制1L培养基吸取量（ml）
钙盐
CaCl2.2H2O
440
微量元素
KI
0.83
激素
NAA
0.01mg/ml
—
②MS培养基的配制
根据表2进行计算，并将结果填入表中。
请利用提供的母液和材料，以MS+0.01mg/LNAA+3%蔗糖+0.7%琼脂，pH为5.8，配制培养基500ml，并均匀分装到12个培养瓶，最后由承办方统一灭菌。
（表2中浓度由参赛选手按照大赛提供的母液标签填写）
表2MS培养基配制
母液
浓度
配制体积（ml）
母液吸取量（ml）
称取量（g）
大量元素
—
钙盐母液
—
铁盐
—
微量元素
—
有机物
—
萘乙酸
—
蔗糖
—
琼脂条
—
③外植体消毒和接种
在20min内，要求参赛小组熟练掌握一般外植体处理、体表灭菌和接种技术，包括材料整理、冲洗，灭菌剂选择，消毒时间、顺序，如何接种等。
其中材料在无菌室外的处理由承办方统一操作，20min只计算无菌室内的操作时间。
④香蕉或金线莲组培苗继代培养的无菌操作
在30min内，按无菌操作规范要求完成继代瓶苗的转瓶操作，每人接种16瓶培养基，每瓶转接苗的株数香蕉为6-8苗，金线莲为8苗，茎段长短视材料而定，把材料转接到培养基中，均匀分布，无交叉污染等动作。
（2）竞赛时间
理论考试（统一安排）时间：
60分钟；
技能竞赛时间：
125分钟，建议安排如下：
①培养基母液配制（45分钟）；
②MS固体培养基配制（30分钟）；
③外植体消毒和接种（20分钟）；
④继代培养无菌操作（30分钟）。
（三）竞赛成果
1.配好的母液3瓶（根据提供的母液配制配方），贴上标签，写上参赛选手的参赛号数；
2.配好并装好瓶的培养基12瓶（每队），贴上标签，写上参赛选手的参赛号数；
3.外植体接种4瓶（每人），贴上标签，写上参赛选手的参赛号数；
4.继代无菌操作16瓶（每人），贴上标签，写上参赛选手的参赛号数。
四、竞赛规则
（一）比赛规则
1．参加理论考试与操作技能考试的参赛选手必须持本人身份证与参赛证参加竞赛。
2.参赛选手出场顺序、位置、竞赛所用材料、工具由抽签决定，不得擅自变更、调整。
3.参赛选手提前15分钟检录进入赛场，并按照指定位号参加竞赛。
迟到15分钟者，取消竞赛资格；竞赛开始15分钟后，选手方可离开赛场。
4.植物组织培养项目选手应在竞赛试卷或实物标签上填写竞赛号。
试卷（或实物标签）上不得有任何暗示参赛选手身份的标记，否则取消成绩。
5.参赛选手在竞赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判同意。
选手若需休息、饮水或去洗手间等，耗用时间计算在竞赛时间内。
6.竞赛在规定时间结束时，参赛选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延竞赛时间。
选手操作完成后，在《实际操作现场记录表》上签名确认，方可离开赛场。
（二）注意事项
1.参赛对象必须是高职高专在校生。
2.参赛选手须按规定的时间报到、比赛。
3.参赛选手不得穿有学校标识的服装。
4.比赛所用材料、仪器、工具均由承办院校提供。
5.遵守纪律，尊重评委，服从指挥。
五、竞赛场地与设备
（一）竞赛场地
竞赛场地开阔、平整，采光、照明和通风良好，为参赛各组提供竞赛相关仪器设备。
（二）竞赛设备
每2人为一单元，共用1套。
1.MS母液配制
大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素，电子分析天平（感量0.0001g）1台、电炉1只、电子天平（感量0.01g）1台、烧杯（200ml）3只、容量瓶（1000ml）1只、容量瓶（500ml）1只、容量瓶（250ml）1只、试剂瓶3只、玻璃棒3支、塑料滴管2支、洗瓶2只、蒸馏水5L、95%酒精1瓶、0.1mol/LHCl1瓶、0.1mol/LNaOH1瓶、抹布1块、称量纸2包、吸水纸1包、标签纸1张、草稿纸2张、水芯笔1支、计算器1个、白色实验工作服1件/人等。
2.MS培养基的配制
电磁炉1只、MS母液、琼脂条1袋、蔗糖1瓶、搪瓷杯（500ml）1只、培养瓶24只、烧杯（500ml）1只、烧杯（200ml）1只、蒸馏水2L、洗瓶1只、量筒（50ml）1只、移液管（10ml）3支、移液管（5ml）5支、0.1mol/LHCl1瓶、0.1mol/LNaOH1瓶、精密pH试纸（5.4－7.0）1包、抹布1块、称量纸1包、吸水纸1包、标签纸1张、草稿纸2张、水芯笔1支、计算器1个等。
3.香蕉或金线莲组培苗继代繁殖的无菌操作
瓶苗6瓶、培养基32瓶、单人单面工作台2台、剪刀4把、镊子4把、酒精灯2只、无菌滤纸2包、喷壶2个、酒精棉2瓶、一次性口罩3只、记号笔2支等。
六、评分办法与标准
（一）评分办法
理论知识考试和操作技能考核分别采用百分制计分，按理论知识占30%、操作技能占70%权重确定成绩。
理论知识和操作技能由该项目裁判员统一评分，称量、定容、pH测定终止举手示意裁判确认，否则该项操作不计分。
每位裁判对每小组评分，去掉一个最高分，去掉一个最低分，最后所得总分除以有效计分的裁判人数，就是该小组的操作技能分。
（二）评分标准
植物组织培养项目考核要点与分值
序号
考核内容
考核要点（评分细则）
分值
得分
1
母液配制
计算
计算填空（每空0.5分，扣完为止）
4
试剂
称量
1.天平零点和水平检查（0.5分）、托盘清扫（0.5分）；
2.称量操作规范（1分）；
3.试剂、样品洒落（2分）；
4.重称（2分）；
5.称样量范围（1分）；
6.称量结束工作，试剂、凳子归位、天平复位（1分）。
8
溶液
配制
1.玻璃棒搅拌正确（1分）；
2.试剂完全溶解（1分）；
3.加水至容量瓶约3/4时平摇（1分）；
4.加水至近标线约1cm处等待1～2min（0.5分）；
5.定容体积准确（1分）；
6.摇匀操作准确（1分）；
7.溶液洒出（2分）；
8.贴好标签（0.5分）。
8
分工
协作
分工合理，相互协作，完成速度快
5
2
培养基配制
计算
计算填空（每空0.5分，扣完为止）
2
配制
1.移液工具*选择正确（1分）；
2.一次性吸取，液体不能进到吸气球里（1分）；
3.数量准确（1分）；
4.移出时不滴不漏，桌面不湿（1分）；
5.移进时吹净（1分）。
6.琼脂完全溶解（1分）；
7.定容准确（2分）；
8.pH值测定、调节正确（1分）；
9.熟练操作（1分）。
10
熬制
与
分装
1.熬煮火适中，搅拌及时，琼脂充分熔化（1分）；
2.定容准确（1分）；
3.pH值调节正确（1分）；
4.分装迅速，均匀且不沾瓶口，台面洁净（2分，沾瓶口或溅出每瓶扣1分，扣完为止）；
5.具协调组织能力（1分）；
6.贴好标签、标签内容准确（1分）。
7
配制效果及分工协作
1.培养基效果（3分）。
高压冷却后培养基未凝固则本项不得分；培养基凝固但硬度偏大或偏软则本项扣2分。
2.分工合理，相互协作，完成速度快。
（3分）
6
3
外植体消毒和接种
材料
选择
选择健壮、无病的外植体。
（1分）
1
材料
预处理
包括材料整理、冲洗要到位。
（1分）
1
消毒
消毒剂选择（1分），消毒顺序合理（1分），时间准确（1分），操作熟练（1分）。
4
接种
接种熟练、速度快（2分），操作正确（2分）。
4
4
无菌操作
无菌操作
1.讲究个人卫生、洗净双手、手部无饰品等杂物（2分）；
2.使用酒精棉球消毒，顺序正确、全面、彻底、熟练（2分）；
3.使用酒精灯程序正确，消毒灭菌彻底（2分）；
4.接种用具摆放合理，在有效区域内操作（3分）；
5.操作正确，切割速度快，外植体大小合适（4分）；
6.接种动作正确，速度快、熟练，瓶口始终保持在有效灭菌区域内（12分）；
7.接种数量适宜，布局合理，方向正确，深浅适度，整齐（5分）；
8.接种完成后清理接种垃圾，保证工作台干净，台上的物品摆放整齐（2分）。
32
定量
在规定的时间内接种完规定的数量，少接一瓶扣1分，扣完为止
5
文明操作与安全
操作文明、安全（1分），工作台场地清洁干净（1分），用具摆放整齐（1分）。
3
合计分值
100
七、奖项设置
按“2012年福建省高等职业院校技能大赛”组委会规定执行。
设团体奖。
八、申诉与仲裁
（一）申诉
1.参赛选手对不符合竞赛规定的实验材料，有失公正的检测、评判、奖励，以及对工作人员的违规行为等，均可提出申诉。
2.参赛选手申诉均须通过本代表队领队，在本赛项结束后1小时内以书面形式向大赛执委会仲裁组提出。
（二）仲裁
1.“2012年福建省高等职业院校技能大赛”组委会设仲裁工作组，负责受理选手申诉，并将处理意见通知领队和当事人。
2.大赛执委会仲裁组的裁决为最终裁决。
九、竞赛成绩发布
按“2012年福建省高等职业院校技能大赛”组委会规定执行。
第二部分技术文件
一、竞赛要求
（一）竞赛委员会工作人员
1.忠于职守，努力工作，全心全意为参赛选手和裁判服务，提供良好的竞赛环境和条件。
2.遵守竞赛纪律和规则，保证公平公正，不以权谋私。
3.违反规定，给竞赛带来恶劣影响或造成严重损失的，将给予必要的处理。
（二）裁判员
1.遵守裁判规则，尊重参赛选手，维护竞赛秩序。
2.在执裁过程中，排除可能来自各方面的干扰，杜绝不正当行为。
3.违反裁判规则，营私舞弊，将受到批评或警告，情节严重的取消裁判资格。
（三）领队和参赛选手
1.服从指挥，文明礼让，体现良好的职业道德和竞赛精神。
2.严格遵守竞赛规则，不得违规作弊。
如发现作弊将视情节扣分，严重者将被取消参赛资格。
3.竞赛中如发生争议，现场以裁判为准，重要事项以仲裁组裁定为准。
二、赛场环境
竞赛场地除参赛选手、裁判、工作人员外，其他人不得入内。
三、竞赛技术平台
硬件技术平台：
序号
仪器名称
型号
规格
1
全自动数显立式高压蒸汽灭菌器
YXQ-LS-50SⅡ
控温范围：
109度~126度
2
立式压力蒸汽灭菌器
LDZX-50KB
控温范围：
109度~126度
3
单人水平净化工作台
SW-CJ-1BU罗纳得（上海），单人单面水平
工作区尺寸：
长×宽×高=82cm×48cm×60cm
4
电子分析天平
SHIMADZU
感量0.0001g，最大量程≧220g。
感量0.01g，最大量程1000g。
5
不锈钢蒸馏水器
YN-ZD-ZK
10L/h
6
电热恒温鼓风干燥箱
DHG-9246A
工作温度50-300度
7
穗凌立式单温冷藏柜
LG4-180L
180L
四、安全操作
1.玻璃仪器轻拿轻放，操作规范。
2.使用电炉和电磁炉时注意电源情况。
3.药品轻拿轻放，用完及时回位，多取出的药品不可倒回瓶中，避免取药时撒出污染环境。
4.外植体消毒时，注意药品的选择和使用规范，避免直接接触伤及皮肤或吸入鼻孔。
5.比赛过程严格按照项目组要求做好各种防护准备（戴口罩、穿统一工作服装等）。
6.发现设备问题及时跟裁判反映，先暂停操作。
第三部分竞赛须知
一、参赛队须知
1.竞赛采用团队比赛形式，每个参赛队必须参加所有项目的竞赛。
2.参赛队名称：
统一使用学校名称。
3.参赛队组成：
参赛选手为高职高专在校生，不分性别、不分年级，每队2名选手，指定队长1名。
4.每个参赛队只能配1名指导教师，负责本校参赛队的参赛组织和与竞赛组织机构的联络。
5.参赛队报名时确定各选手的分工及各专项竞赛内容的指导教师。
参赛选手按照分工参加比赛，不得调换参赛内容。
6.参赛选手在报名获得确认后，原则上不再更换，如筹备过程中，选手因故不能参赛，参赛学校主管部门需出具书面说明，按相关程序补充参赛人员并接受审核；竞赛开始后，参赛队不得更换参赛选手，允许队员缺席竞赛。
任何情况下，不允许更换新的指导教师，允许指导教师缺席。
7.各参赛队在竞赛工作区域的赛位采用抽签方式确定。
8.参赛队所有人员在竞赛期间未经组委会批准，不得接受任何与竞赛内容相关的采访，不得将竞赛的相关情况及资料私自公开。
二、指导教师须知
每个参赛队的指导教师不得进入竞赛现场指导。
三、参赛选手须知
1.参赛选手须认真填写报名表内容，提供个人身份证明，弄虚作假者，将取消比赛资格和竞赛成绩。
2.参赛选手凭大赛组委会颁发的参赛证和有效身份证件（身份证、学生证）参加竞赛及相关活动，参赛队按照赛程安排和规定时间前往指定地点。
3.参赛选手进入赛场前抽取赛位号，并对抽签结果签字确认。
4.参赛选手按规定时间进入竞赛场地，对现场条件进行确认并签字，按统一指令开始竞赛。
5.竞赛连续进行，教师指导、选手休息、饮食及如厕时间均计算在比赛时间内。
6.参赛队须按照竞赛要求及程序提交竞赛结果及相关文件，禁止在竞赛成果上做任何与竞赛无关的标记。
7.竞赛结束时间到后，选手不得再进行任何与比赛有关的操作。
参赛队若提前结束比赛，应向裁判员举手示意，裁判员记录竞赛完成时间。
8.参赛选手须严格遵守操作规程，确保人身及设备安全。
若因选手个人原因出现安全事件或设备故障，由裁判组裁定其竞赛结束，保留竞赛资格，累计其有效竞赛成绩；非选手个人原因出现的安全事件或设备故障，由裁判组做出裁决，可视具体情况给选手补足排除故障耗费时间。
9.参赛选手须严格遵守赛场规章制度，服从裁判，文明竞赛。
有作弊行为的，参赛队该项成绩为0分；如有不服从裁判、扰乱赛场秩序等不文明行为，按照相关规定扣减分数，情节严重的取消竞赛资格和竞赛成绩。
10.参赛队完成竞赛并提交结果后，应对赛位进行清理、对设备进行整理并恢复到初始状态；竞赛工作人员到达现场清点工具、设备等，参赛选手签字确认；工具、设备损坏的，须有实物存在；工具、设备丢失的，参赛队照价赔偿。
第四部分竞赛操作流程
一、竞赛准备
参赛选手提前15分钟到指定地点等待检录。
二、竞赛检录
参赛选手需带本人身份证和参赛证参赛，经工作人员检录后进入竞赛现场。
三、等候竞赛
在裁判长宣布竞赛开始之前，参赛选手安静的在指定位号处等待。
四、正式竞赛
裁判长宣布竞赛开始，参赛选手正式进行竞赛。
五、提交竞赛成果
竞赛时间到，由裁判长宣布竞赛结束，参赛选手提交4样竞赛成果，即母液、培养基、外植体接种、继代接种瓶，按照工作人员的指示摆放整齐。
六、退出竞赛场地
在工作人员的指引下，按顺序退出竞赛场地。
七、查询竞赛成绩
按照组委会规定公布比赛成绩，具体查询方式另行通知。
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