分子生物学检验技术.docx

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分子生物学检验技术

湖北医药学院2011-2012学年二学期

课程考试试卷答案（B卷）

课程名称：

分子生物学检验技术考试时间：

120分钟年级：

xxx级

专业：

xxx

题目部分，（卷面共有65题，100分，各大题标有题量和总分）

一、A型题（40小题，共40分）

1、合成DNA的原料是

A、dAMP、dGMP、dCMP、dTMP

B、dATP、dGTP、dCTP、dTTP

C、dADP、dGDP、dCDP、dTDP

D、ATP、GTP、CTP、UTP

E、AMP、GMP、CMP、UMP

答案：

B

2、D、NA的热变性特征是

A、碱基间的磷酸二酯键断裂

B、一种三股螺旋的形成

C、对于一种均-DNA的碱基组成，其变性温度范围不变

D、熔点温度因鸟嘌呤-胞嘧啶碱基对的含量而异

E、在260nm处的光吸收率降低

答案：

D

3、HIV与一般逆转录病毒的一个明显区别在于

A、HIV基因组复制和表达受病毒本身3个反式调控因子影响

B、HIV基因组复制和表达受病毒本身6个反式调控因子影响

C、tat基因编码一种反式激活蛋白

D、Nef蛋白是一种多功能蛋白，兼有正、负调节效应

E、是细菌细胞内携带的染色体外DNA分子

答案：

B

4、关于类核下列哪项不正确

A、类核存在于胞浆内

B、类核的中央部分由RNA和支架蛋白组成

C、类核的外围是单链DNA结构

D、类核无核膜

E、染色体经高度折叠、盘绕集在一起形成

答案：

C

5、下列哪项不是原核生物基因组特征

A、只有一个复制起点

B、基因数量少，体积小

C、具有类核结构

D、由DNA和RNA分子组成

E、具有操纵子结构

答案：

D

6、下列哪项不属于结构基因

A、5’非编码区

B、3’非编码区

C、外显子

D、内含子

E、重复序列

答案：

E

7、α-卫星DNA可由哪种限制性内切酶消化获得

A、Alu

B、HindⅢ

C、HinfI

D、KpnI

E、EcoRI

答案：

B

8、AluI切割Alu序列家族成什么片段

A、130bp和170bp

B、150bp和150bp

C、50bp+250bp

D、20bp+170bp+130bp

E、170bp+31bp+130bp

答案：

A

9、一般来说染色体的G带

A、富含碱基GC

B、富含短重复序列

C、基因密度高

D、富含碱基AT

E、呈阳性

答案：

D

10、不同类型的重复序列在哪一方面不存在差异

A、重复次数

B、序列长度

C、碱基组成

D、复性速度

E、变性温度

答案：

C

11、某一个体其体细胞中染色体数目比二倍体多了一条，称为

A、亚二倍体

B、超二倍体

C、多倍体

D、嵌合体

E、亚三倍体

答案：

B

12、人类基因组大小表示单位为

A、摩尔

B、摩尔根

C、纳米

D、重组频率

E、kb

答案：

B

13、物理图一般采用什么作为其路标

A、RFLP

B、STS

C、SNP

D、VNTR

E、STR

答案：

B

14、种类最多的遗传病是

A、单基因病

B、多基因病

C、染色体病

D、体细胞遗传病

E、肿瘤

答案：

A

15、微卫星DNA一般指重复序列核苷酸数为

A、2～6

B、6～12

C、2～66

D、12～66

E、100～300

答案：

A

16、α-卫星DNA仅存在于哪一类生物中

A、原核生物

B、真核生物

C、哺乳动物

D、模式生物

E、灵长类生物

答案：

E

17、与遗传性高发乳腺癌相关的基因是

A、APC

B、BRCA

C、DCC

D、FHIT

E、Rb

答案：

B

18、人类结肠癌癌变的序列中哪一个发生最早

A、ras的突变

B、FAP的丢失

C、DCC的丢失

D、p53的丢失

E、c-myc基因的过度表达

答案：

A

19、下列哪种肿瘤具有家族遗传性

A、结肠癌

B、肝癌

C、肺癌

D、视网膜母细胞瘤

E、骨肉瘤

答案：

D

20、恶性肿瘤中最常见的基因突变是

A、APC突变

B、BRCA突变

C、DCC突变

D、p53突变

E、Rb突变

答案：

D

21、myc基因在下列哪种肿瘤中扩增频率最高

A、小细胞肺癌

B、上皮癌

C、乳腺癌

D、结肠癌

E、肝癌

答案：

A

22、在酵母中也存在的细胞癌基因是

A、sis基因

B、erb基因

C、src基因

D、ras基因

E、myc基因

答案：

D

23、改变myc基因正常表达的最常见方式是

A、基因扩增

B、基因点突变

C、基因甲基化

D、染色体易位

E、染色体突变

答案：

D

24、下列哪种属于抑癌基因

A、c-myc

B、c-sis

C、H-ras

D、Prb-A

E、Rb

答案：

E

25、当TE溶液pH为多少时，可减少DNA的脱氨反应

A、5．0

B、6．0

C、7．0

D、8．0

E、9．0

答案：

D

26、紫外分光光度法只用于检测浓度大于多少的核酸溶液

A、0．25ug／mL

B、0．20ug／mL

C、0．15ug／mL

D、0．10ug／mL

E、0．05ug／mL

答案：

A

27、A260／A280等于多少时为纯RNA的指标

A、1．8

B、1．9

C、2．0

D、2．1

E、2．2

答案：

C

28、下列哪种试剂对RNA酶活性无影响

A、RNasin

B、DFPf

C、EDTA

D、DTI+

E、SDS

答案：

C

29、质粒纯化的标准方法是哪种

A、CsCl一EB法

B、PEG法

C、柱层析法

D、电泳法

E、磁珠分离法

答案：

A

30、欲有效回收>50kb的DNA片段，下列哪种方法较好

A、DEAE纤维素膜插片电泳法

B、电泳洗脱法

C、冷冻挤压法

D、酚／氯仿抽提法

E、琼脂糖水解酶法

答案：

B

31、内切酶消化ugDNA常用的酶量为

A、1～5U

B、5～10U

C、10～20U

D、20～30U

E、50V

答案：

A

32、内切酶通常保存在何种温度条件下最恰当

A、4℃

B、0℃

C、－10℃

D、－20℃

E、－70℃

答案：

D

33、内切酶消化DNA常用的温度为

A、25℃

B、30℃

C、37℃

D、40℃

E、50℃

答案：

C

34、关于原核表达载体下列何项描述不正确

A、需有适宜的选择标志

B、有强启动子

C、有SD序列

D、有终止翻译序列

E、有增强子序列

答案：

E

35、通常PCR的退火温度应低于引物Tm多少

A、10℃左右

B、15℃左右

C、20℃左右

D、25℃左右

E、30℃左右

答案：

D

36、决定PCR扩增中的退火温度的是

A、模板链的长度

B、模板链C+G组成

C、引物的Tm值

D、TaqDNA聚合酶浓度

E、引物的长度

答案：

C

37、PCR在结核分枝杆菌检测中易导致假阴性，下列原因不导致假阴性的是

A、反应体系中存在抑制因子

B、引物的特异性不高

C、标本中结核分枝杆菌数量太少

D、结核分枝杆菌基因变异

E、操作不当或实验器材不合格

答案：

B

38、关于RNA探针的描述下列何项不正确

A、可用于随机引物法标记

B、特异性高

C、灵敏度高

D、可用非同位素法标记

E、不易降解

答案：

E

39、液相杂交是下列哪一种

A、Southern印迹杂交

B、Northern印迹杂交

C、Dot印迹杂交

D、Slot印迹杂交

E、RPA实验

答案：

E

40、在Southern印迹中常用的核酸变性剂是

A、甲醛

B、乙醛

C、氢氧化钠

D、碳酸钠

E、盐酸

答案：

C

二、判断题（10小题，共10分）

1、PCR是目前惟一能在体外进行基因扩增的技术。

答案：

错

2、R质粒可以决定细菌的性别。

答案：

错

3、HCV病毒基因组为单链正股RNA病毒。

答案：

对

4、“后基因组计划”的核心是基因功能的确定。

（）

答案：

错

5、Phagedisplay是研究基因工程产品蛋白质问相互作用的方法。

（）

答案：

对

6、在波长为260nm时，A值等于1时的光密度大约相当于50ug／mL的单链DNA：

（）

答案：

错

7、EDTA等金属离子螯合剂可以抑制RNA酶的活性。

（）

答案：

错

8、限制性内切酶通常识别8～10个特异性核苷酶。

（）

答案：

错

9、寡核苷酸探针一般由17～50个核苷酸组成。

答案：

对

10、程序性细胞死亡的DNA在琼脂糖凝胶电泳后呈现有一定间隔的梯状条带，而坏死细胞的DNA则呈现无间隔的模糊片状条带。

（）

答案：

对

三、填空题（5小题，共10分）

1、质粒按转移方式分型为______、______、______。

答案：

接合型质粒可移动质粒自传递型质粒

2、ras家族包括______、______和______。

答案：

H-rasK-rasN-ras

3、EDTA作为二价金属离子螯合剂，通过螯合______、______等二价金属离子可抑制DNA酶的活性。

答案：

Mg2+　Ca2+

4、总RNA提取法中最常用的是______法。

答案：

一步

5、在PCR反应中，导致非特异性扩增的因素包括______、______和______等。

答案：

引物长度引物浓度　dNTP浓度

四、概念题（5小题，共15分）

1、基因诊断

答案：

是通过直接检测目的基因（或该基因的转录产物）的存在状态对疾病作出诊断的方法。

2、原癌基因

答案：

又称细胞癌基因。

被激活时能使正常细胞转化为癌细胞，具有致癌能力。

3、差速离心

答案：

逐渐增加离心速度，可以使样品中沉降速度不同的颗粒逐步分离开来。

4、蛋白质芯片

答案：

通过机械点涂的方式，将多肽或蛋白质高密度点阵并固定在载体表面，与标记的配体进行杂交，根据杂交信息的有无、多少进行定性与定量分析的方法。

5、生物芯片

答案：

是根据生物分子之间特异性相互作用的原理，设计其中一方为探针，并固定于微小的载体表面，通过分子间的特异性反应，检测另一方的有无、多少或结构的改变等。

五、简答题（5小题，共25分）

1、癌基因包括哪几种?

各有何特点?

答案：

癌基因包括病毒癌基因和细胞癌基因两种，具有潜在诱导细胞恶性转化的特征。

病毒癌基因是病毒基因组中特殊的核苷酸序列，能引起细胞转化；细胞癌基因则是存在于正常细胞基因组中的癌基因，在正常情况下处于静止或低表达状态，不仅对细胞无害，而且对维持细胞正常功能具有重要作用，但在异常表达时，其产物可使细胞无限制分裂。

2、简述ras基因的检测方法。

答案：

（1）PCR／ASO探针法，该方法快速、灵敏度高，但点突变的检出仅限于突变探针的探测位点，不能检出探针邻近部位的点突变。

（2）PCR-单链构象多态性法，使肿瘤点突变更易于检出。

3、简述抑癌基因的作用。

答案：

抑癌基因是存在与正常细胞内的一类可抑制癌细胞生长的基因，有潜在的抑癌作用。

抑癌基因在调控细胞增值和分化方面的作用与原癌基因同样重要，与调控细胞分裂和分化的过程相关，可能与生长因子、某些蛋白激酶类活性密切相关，只是抑癌基因给予细胞的信号与原癌基因相反。

4、简述DNA一蛋白质亲和层析法的基本原理。

答案：

该法的基本原理是根据序列特异性DNA结合蛋白与其特异的DNA结合序列的可逆性结合作用，以特异DNA序列作为配体，用层析方法将蛋白质分离纯化。

5、简述应用2-DE图像分析软件包进行的操作过程包括哪些。

答案：

其操作过程包括：

图像采集、斑点检测、背景消减、图像内以及图像间的比较，从而获得生理与病理状态下蛋白质斑点的上调、下调及出现或者消失的信息。

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