原奶检验标准.docx

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原奶检验标准

4.1感官检验

4.1.1色泽和组织状态：

取适量式样于50ml烧杯中，在自然光下观察色泽和组织状态

4.1.2滋味和气味：

取牛乳50ml于250ml三角瓶中置电炉上煮沸，冷却至70-80℃，保持瓶口与鼻子之间的距离在10cm左右，用手煽动瓶口上方的气体，使空气吸向自己，闻其气味。

冷却至25℃时，用温水漱口，品尝其滋味。

4.2理化检验

4.2.1全脂乳固体

4.2.1.1仲裁检验按GB5409中规定的方法

4.2.1.2验收检验按本标准4.2.1.2.1～4.2.1.2.2进行

4.2.1.1.1仪器：

FT120型（或S50型）全组份分析仪、50ml烧杯

4.2.1.2.2方法:

取约40ml、20～40℃经过滤、混匀的牛乳样品于烧杯中，将烧杯放在全组份分析仪的吸样管下，选择相应的检测程序，按检测键，待电脑显示屏出现检测结果时，即可读数。

4.2.2脂肪：

按GB/T5413.3检验。

取样量为10克。

4.2.3蛋白质：

按GB/T5413.1检验。

取样量为4克。

4.2.4酸度：

按GB/T5409检验。

4.2.5杂质度：

按GB/T5413.30检验。

4.2.6乳糖：

按GB/T5413.5检验

4.2.7牛奶温度：

取样后，立即将校准过的温度计插入样品中，待温度计温度不再变化时（一般为1分钟左右），读取读数。

4.3卫生检验

4.3.1抗生素：

按GB/T4789.27检验。

4.3.2六六六、滴滴涕：

按GB/T5009.19检验。

4.3.3黄曲霉毒素：

按GB/T5009.24检验。

4.3.4铅：

按GB/T5009.12检验。

4.3.5汞：

按GB/T5009.17检验。

4.3.6无机砷：

按GB/T5009.11检验。

4.3.7锡：

按GB/T5009.16检验。

4.3.8铬：

按GB14962检验。

4.3.9马拉硫磷：

按GB/T5009.36检验。

4.3.10倍硫磷：

按GB/T5009.20检验。

4.3.11甲胺磷：

按GB/T14876检验。

4.3.12菌落总数：

按GB/T4789.2、GB/T4789.18检验；平板法按3MPetrifilm细菌总数检测法检验

4.3.13耐热芽孢

4.3.13.1仪器和材料:

生化培养箱（36℃±1℃）、高压蒸汽灭菌锅、恒温水浴锅（46℃±1℃）、天平、电炉吸管（1ml和10ml，标有0.1ml单位的刻度）、三角瓶（容量为250ml、300ml）、平皿（皿底直径为9cm）、试管（15mm×150mm）、酒精灯、试管架、试管筐、灭菌刀或剪刀、灭菌镊子、酒精棉球、记号笔、白瓷缸（用于煮开水）、温度计（1℃～100℃）、超净工作台

4.3.13.2培养基和试剂

4.3.13.2.1营养琼脂培养基：

营养琼脂按说明分装于300ml三角瓶中，高压灭菌（121℃、15分钟）。

4.3.13.2.2生理盐水：

8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，分装、高压灭菌（121℃、15分钟～20分钟）。

4.3.13.3方法

4.3.13.3.1用10ml灭菌吸管吸取5ml乳样加入灭菌试管中。

4.3.13.3.2在另一支试管中加入与乳样等量的水。

4.3.13.3.3在装水的试管中插一根温度计。

4.3.13.3.4将装有乳样和水的试管同时放入热水中（在电炉上用白瓷缸把水煮至有小气泡时）。

4.3.13.3.5直至“装水试管”的温度达到80℃，计时，保温10分钟。

4.3.13.3.610分钟后，取出试管，用冷却水冷却奶样至室温。

4.3.13.3.7用1ml灭菌吸管分别吸1ml冷却后混匀的乳样于两个灭菌平皿中。

4.3.13.3.8及时将凉至46℃的营养琼脂注入平皿约15ml，并转动平皿使之混匀；同时做环境对照试验。

4.3.13.3.9待营养琼脂凝固后，翻转平板。

置于36℃±1℃的培养箱内培养72h±2h，取出计数（同菌落总数测定计数方法）。

4.3.14耐热芽孢的测定

4.3.14.1设备和材料:

生化培养箱（55℃±1℃）、高压蒸汽灭菌锅、恒温水浴锅（46℃±1℃）、天平、电炉、吸管（1ml和10ml，标有0.1ml单位的刻度）、三角瓶、平皿（皿底直径为9cm）、试管（15×150mm）、酒精灯、试管架、试管筐、灭菌刀或剪刀、灭菌镊子、酒精棉球、记号笔、白瓷缸（用于煮开水）、温度计（1-100℃）、超净工作台

4.3.14.2培养基和试剂

4.3.14.2.1营养琼脂培养基：

营养琼脂按说明制备、分装于300ml三角瓶中，高压灭菌（121℃、15分钟）。

4.3.14.2.2生理盐水：

8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，分装后高压灭菌121℃、15分钟。

4.3.14.3方法

4.3.14.3.1用10ml灭菌吸管吸取5ml乳样加入灭菌试管中。

4.3.14.3.2在另一支试管中加入与乳样等量的水。

4.3.14.3.3在装水的试管中插一根温度计。

4.3.14.3.4将装有乳样和水的试管同时放入沸水浴中（在电炉上用白瓷缸把水煮沸，并保持沸腾）。

4.3.14.3.5直至“装水试管”的温度达到100℃，计时10分钟（如果水不到100℃就沸腾，则等候时间需延长；或在水中加入盐以提高沸点温度，但要避免奶样沸腾）。

4.3.14.3.610分钟后，取出试管，用冷水冷却乳样至室温。

4.3.14.3.7用1ml灭菌吸管分别吸1ml冷却后混匀的乳样于两个灭菌平皿中。

4.3.14.3.8及时将凉至46℃的营养琼脂注入平皿约15ml，并转动平皿使之混匀；同时做环境对照试验。

4.3.14.3.9待营养琼脂凝固后，翻转平板。

置于55℃±1℃的培养箱内培养72h±2h，取出计数（同细菌菌落测定计数方法）。

4.3.15嗜冷菌：

按IDF101A：

1991检验。

4.4掺假

4.4.1掺碱的检出

4.4.1.1仲裁按GB/T5409中2.8检验。

4.4.1.2验收检验按本标准中4.4.1.2.1～4.4.1.2.4进行

4.4.1.2.1原理：

鲜奶中如掺碱，可使指示剂变色，根据颜色的不同，粗略判断加碱量的多少。

4.4.1.2.2试剂配制：

玫瑰红酸（0.05%乙醇溶液）：

称取0.05g玫瑰红酸溶于100ml95%的乙醇中。

4.4.1.2.3检验方法：

于盛有2ml牛乳的试管中加入2ml玫瑰红酸溶液，摇匀，观察颜色变化。

4.4.1.2.4结果判定：

正常色：

如图

（1）

（2）（3）（4）；异常色：

如图（5）

（1）

（2）

（3）（4）

（a量）（b量）

（c量）

注：

牛奶酸度及新鲜度影响最终颜色的判定，酸度越高、新鲜度越差终颜色越黄。

4.4.2掺食盐的检出

4.4.2.1仲裁按GB/T5409检验。

4.4.2.2验收检验按本标准中4.4.2.2.1～4.4.2.2.6进行

4.4.2.2.1原理：

鲜奶中氯化物与硝酸银反应，生成氯化银沉淀，用铬酸钾指示剂，当牛奶中的氯化物与硝酸银作用后，过量的硝酸银与铬酸钾生成砖红色的Ag2CrO4沉淀。

4.4.2.2.2试剂配制

4.4.2.2.2.19.6g/L硝酸银溶液：

取分析纯硝酸银置于105℃烘箱内烘30分钟，取出放在干燥器内冷却后，称取9.6g溶于1000ml蒸馏水中。

4.4.2.2.2.2100g/l铬酸钾溶液：

称取分析纯铬酸钾10g溶于100ml蒸馏水中。

注：

两种试剂均应储存于棕色试剂瓶备用。

4.4.2.2.3仪器

4.4.2.2.3.1吸管：

2ml

4.4.2.2.3.2试管：

18×180mm

4.4.2.2.4实验方法

取2ml牛乳于试管中，加入100g/l铬酸钾溶液5滴，摇匀，再加入9.6g/L硝酸银溶液1.5ml，摇匀后，观察结果。

注：

在加入硝酸银后，应立即观察颜色，做出判定；否则，判定结果会偏高。

4.4.2.2.5结果判定

正常色：

掺盐乳：

呈黄色，且随着掺入量的增多，颜色由土黄色向鲜黄色变化

（a盐量）（b盐量）

（c量盐）

（c盐量）

4.4.2.2.6注意事项

4.4.2.2.6.1试剂加入顺序不同影响测定结果，先加入硝酸银其结果偏高10mg～20mg%，因此应按“牛奶+指示剂+硝酸银”或“指示剂+牛奶+硝酸银”的顺序进行。

4.4.2.2.6.2日常试验应尽量在20ºC左右的室温下进行，仲裁试验必须在20ºC条件下进行。

4.4.3掺亚硝酸盐、硝酸盐检出

4.4.3.1仲裁按GB/T5413.32检验。

4.4.3.2验收按本标准中4.4.3.2.1～4.4.3.2.5进行。

4.4.3.2.1原理：

鲜奶中的亚硝酸盐与显色试剂作用，形成红色的化合物；鲜奶中的硝酸盐被还原成亚硝酸盐后，再与显色试剂形成红色化合物。

4.4.3.2.2试剂：

哈尔滨龙泽科技有限公司的鲜奶亚硝酸盐和硝酸盐试剂。

4.4.3.2.3操作方法：

取鲜奶亚硝酸盐或硝酸盐试剂一耳勺（0.04g～0.05g）倒入试管中，加入被检奶样1ml，振荡溶解（必要时加热溶解），1分钟～2分钟观察结果。

4.4.3.2.4结果判定：

正常乳：

呈无色

掺亚硝酸盐或硝酸盐乳：

呈粉红色，且由掺入量的增加，颜色逐渐加深。

（a量）（b量）

4.4.3.2.5注意事项

4.4.3.2.5.1伊利集团各事业部统一使用“哈尔滨龙泽科技有限公司”所生产的药品，且一次性采购量不超过6个月的用量。

4.4.3.2.5.2药品贮存

4.4.3.2.5.2.1药品瓶必须用颜色较深的纸包好避光保存。

4.4.3.2.5.2.2药品置于干燥的环境中保存，最好放在干燥器中。

4.4.3.2.5.2.3已打开包装的药品要密封好后于干燥器中避光保存，如果发现有结块现象应立即停止使用。

4.4.4掺糊精的检出（比浊法定性检测）

4.4.4.1试剂：

B试剂，C试剂

4.4.4.2检测步骤去除脂肪

被检样品离心脱脂加冰醋酸（每50ml加2.3ml-2.5ml冰醋酸）

离心（弃去沉淀）离心收集乳清

加B试剂（每5ml乳清加0.6mlB试剂）离心（弃沉淀）收集上清液为待检乳

取1ml乳清于小试管中，加C试剂待检样和C试剂界面有白色沉淀产生，摇匀后仍有均匀浑浊者为糊精

待检乳清：

C试剂＝1：

3（V/V）

阳性（有糊精掺假）。

4.4.5掺淀粉的检出

4.4.5.1仲裁按GB/T5409中2.11检验。

4.4.5.2验收检验按本标准中4.4.5.2.1～4.4.5.2.4进行。

4.4.5.2.1原理：

淀粉遇碘呈兰色反应。

4.4.5.2.2试剂：

KI—I试剂：

碘化钾20g加碘5g先用大约20ml的蒸馏水溶解，然后定容至250ml。

4.4.5.2.3方法：

取乳2ml，加热煮沸，观察乳液是否有沉积现象，然后加入3~5滴KI—I试剂。

4.4.5.2.4判定结果：

正常色:

掺淀粉奶：

呈兰色，且颜色深浅与掺入量成正比。

a量b量

c量：

4.4.6掺硫酸盐的检出

4.4.6.1仲裁按GB/T5409中2.6.1.2检验；

4.4.6.2验收检验按本标准中4.4.6.2.1～4.4.6.2.5进行。

4.4.6.2.1原理

鲜奶中的硫酸盐与氯化钡形成硫酸钡沉淀，过量的钡离子与玫红酸钠反应生成玫红酸钡呈玫瑰红色。

若鲜奶中掺入硫酸盐后，因氯化钡被硫酸盐全部沉淀，无游离的钡离子，因而不能与玫红酸反应，故呈黄色。

4.4.6.2.2试剂配制：

4.4.6.2.2.1称取氯化钡3克，加蒸馏水少许溶解后，加浓盐酸20ml，加蒸馏水至250ml。

4.4.6.2.2.2玫红酸钠1克，氯化钠49克，干燥研磨至粉末状，密闭保存。

4.4.6.2.3方法：

取乳2ml于小试管中，加入玫红酸钠指示剂约0.3克混匀，加氯化钡溶液4～5滴混匀，放置3分钟～5分钟后观察结果。

4.4.6.2.4结果判定：

正常乳：

呈玫瑰红色

最低检出量：

0.1%。

掺入硫酸盐乳呈黄色或土黄色。

4.4.6.2.5注意事项：

4.4.6.2.5.1严格控制酸度，酸度过大易褪色，酸度不足不显色。

4.4.6.2.5.2对不能判定奶样可取奶10ml，加10%氯化钡溶液0.5ml～1ml离心沉淀，正常鲜奶沉淀物很少，掺硫酸盐奶有较多量硫酸钡沉淀

4.4.7掺蔗糖的检出：

4.4.7.1仲裁按GB/T5413中2.10检验。

4.4.7.2验收检验按本标准中4.4.7.2.1～4.4.7.2.5进行

4.4.7.2.1原理：

蔗糖在酸性溶液中水解产生的果糖与溶于强酸内的间苯二酚溶液加热后显红色沉淀反应。

4.4.7.2.2试剂配制：

称取间苯二酚0.4克用少量蒸馏水溶解，加浓盐酸200ml，再加蒸馏水稀释至600ml置棕色瓶，现用现配。

4.4.7.2.3方法：

取间苯二酚盐酸溶液1.5ml于小试管中，加鲜乳5滴，加热煮沸2.5分钟，观察结果。

4.4.7.2.4结果判定：

正常色：

掺蔗糖量：

（a量）

（b量）

（c量）

4.4.7.2.5注意事项：

4.4.7.2.5.1盐酸浓度不能高也不能低否则影响显色反应。

4.4.7.2.5.2试剂须置棕色瓶中，配制及贮存过程中被有机物污染，颜色变黄或变红则不能使用。

4.4.7.5.2.3加热时间过长，其它醛类糖也能产生浅红色的反应。

4.4.8掺饴糖（糖稀）及葡萄糖的检出

4.4.8.1.原理：

饴糖中的葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化生成葡萄糖酸及过氧化氢；后者在过氧化物酶的作用下，使还原性氧受体邻联甲苯铵氧化成兰色化合物。

4.4.8.2.方法：

用医院用来检验尿糖用的尿糖试纸测试。

4.4.8.3.结果判定：

按照尿糖试纸上的要求进行判定。

4.4.9掺甲醛的检出

4.4.9.1原理：

甲醛常被作为防腐剂而掺入牛乳中，鲜奶中的甲醛在酸性溶液中与三氯化铁产生紫色反应。

4.4..9.2试剂配制：

称取0.2g三氯化铁溶于100ml浓盐酸中。

4.4.9.3仪器

4.4.9.3.1吸管：

2ml，0.5ml

4.4.9.3.2试管：

18mm×180mm

4.4.9.3.3试管架

4.4.9.3.4可调式电炉

4.4.9.4实验方法：

取乳样2ml于小试管中，加入三氯化铁盐酸溶液0.5ml，混匀于沸水中水浴1分钟，观察颜色。

4.4.9.5结果判定

正常：

呈黄色或淡黄褐色。

掺甲醛乳：

呈紫色。

最低检出量1/4000。

有些涂料中含有甲醛或甲醛的衍生物，亦可检出。

4.4.10掺硫代硫酸钠的定性检验

4.4.10.1实验原理:

I2+2S2O32-=2I-+S4O62-

碘与淀粉在有I-存在时能形成一种蓝色可溶性的吸附化合物，当加入硫代硫酸钠后，硫代硫酸钠与碘反应，从而使蓝色消失。

4.4.10.2实验试剂：

1.碘

碘化钾溶液：

7g碘与18g碘化钾溶于100ml水中，稀释至1000ml。

贮存于棕色试剂瓶中，避光保存。

2.10g/L淀粉指示剂，现用现配。

4.4.10.3实验方法：

取2ml牛奶，加入2滴淀粉指示剂，摇匀后，加入0.05ml碘

碘化钾溶液，立即摇匀后观察颜色。

4.4.10.4结果判定：

正常乳：

蓝色（下图的颜色均为正常色）

掺假乳：

乳白色或灰白色（如下图）

4.4.10.5附加说明：

4.4.10.5.1正常色（蓝色）不可能把所有的蓝颜色都逐一的列出来，只要是蓝色系列均为正常色。

4.4.10.5.2一定要在操作中摇匀后立即观察颜色，否则时间长了颜色会逐渐退去，影响结果的判定。

4.4.11掺尿素的检出

4.4.11.1.原理：

尿素与二乙酰——肟在酸性条件下，经镉离子（或三价铁离子）的催化产生缩合，并在氨基硫脲存在下，生成3，5，6—三甲基—1，2，4三胺的红色复合物。

4.4.11.2.试剂配制

4.4.11.2.1酸性试剂：

在1升容量瓶中加入蒸馏水约100ml，然后加入浓硫酸44ml及85%磷酸66ml，冷却至室温后，加入硫氨脲30mg，硫酸镉2克溶解后用蒸馏水稀释至1000ml。

贮棕色瓶中冰箱内保存半年不变。

4.4.11.2.22%二乙酰——肟试剂：

称取二乙酰一一肟2克，溶于100ml蒸馏水中。

贮棕色瓶中放置冰箱内，可保存半年不变。

4.4.11.2.3应用液：

取酸性试剂90ml加2%二乙酰一一肟10ml混合均匀，即可使用。

4.4.11.3.方法：

取应用液1ml～2ml于试管中，加鲜奶一滴加热煮沸约1分钟观察结果。

4.4.11.4结果判定：

正常：

无色或微红色

掺入尿素或尿的奶立即呈深红色。

掺入量越大，显色越快，红色越深；

注：

正常奶煮沸时间超过2分钟，也可出现淡红色。

4.4.12掺过氧化氢的检出（半定量试纸条检验）

4.4.12.1实验原理：

过氧化氢酶将过氧化氢的氧转移至有机的氧化还原指示剂，形成一种蓝色的氧化产物。

4.4.12.2药品：

半定量试纸条

4.4.12.3操作方法

4.4.12.3.1取下一试纸条后，立即密封保存管。

4.4.12.3.2将试纸条浸入待测溶液一秒种，将反应区充分浸润。

4.4.12.3.3轻轻移开试纸条，抖落过量的水分，15秒后将反应区的颜色与标准比色条对比。

4.4.12.4结果判定：

通过与标准色对比，确定牛乳中的过氧化氢含量，如发现检测中的试纸的蓝色过深，是由于过氧化氢的含量过高而导致。

4.4.13.5注意事项：

未开启包装的试纸条应在冰箱中保存，开封后应尽可能干燥低温保存。

尽量保存在10℃～25℃下。

4.4.13掺不溶性物质的检出

4.4.13.1原理：

牛乳中如果掺杂了石膏，滑石粉等不溶于牛乳的物质，在一定速度和时间内用离心机进行离心后，由于其比重较大，会沉淀于离心管的底部，通过观察沉淀的多少，来判断是否为正常牛乳。

4.4.13.2仪器

4.4.13.2.1离心机：

有速度显示器，有适合于离心管并可向外转动的套管，转速可达到1000r/min

4.4.13.2.2离心管：

锥形，标有刻度，最大容量50ml，最小刻度0.1ml

4.4.13.3实验方法

4.4.13.3.1将采好的牛乳样品搅拌均匀，并将温度调为20℃，将牛乳倒入离心管至30ml刻度处。

4.4.13.3.2将离心管放入离心机中（要对称放置），使离心管迅速旋转，以1000r/min的转速旋转5分钟。

4.4.13.3.3取出离心管，倒出上清液，加15ml20℃蒸馏水，用搅拌棒充分搅拌后，倒入蒸馏水至30ml刻度处。

4.4.13.3.4将离心管放入离心机中，以1000r/min的转速旋转3分钟。

注：

将离心管放入离心机中，使离心管的刻度线在离心机旋转时既不朝上也不朝下，而是处于中间位置。

这样即使沉淀物顶部倾斜，沉淀物也很容易估算。

4.4.13.3.5取出离心管，竖直握住离心管，以适当背景为对照，使眼睛与沉淀物顶部平齐，读取沉淀物体积数。

如果沉淀物顶部倾斜，则估算其体积数（可以读取倾斜面的1/2处刻度）。

4.4.13.4结果判定

正常乳：

沉淀物体积≤0.1ml

掺杂乳：

沉淀物体积＞0.1ml

4.4.14掺豆粉（植物油脂）的检出

4.4.14.1原理：

根据豆油中的脂肪酸含量和乳脂肪脂肪酸含量具有明显的差异性，通过检测待测样品的脂肪酸组成判断样品是否掺加豆粉。

4.4.14.2试剂配制：

463标准购自NuChek-Prep公司，色谱纯氯仿、甲醇、正已烷。

2MNaOCH3/CH3OH溶液和草酸溶液。

4.4.14.3仪器

4.4.14.3.1用配备了火焰-离子检测器的GC测定，气相柱为CP-Sil88熔融石英毛细管柱（100m×0.25mm，Chrompack，Bridgewater，NJ）

4.4.14.3.24000转离心机

4.4.14.3.315ml离心管

4.4.14.3.4氮气瓶

4.4.14.4实验方法：

4.4.14.4.1乳脂类的提取

称取1g左右的牛乳，加入1.0ml的水、5ml甲醇、2.5ml的氯仿，振荡2min后，再加入2.5ml的水和2.5ml的氯仿，振荡2-3min，使溶液从一相系统转变成二相系统。

离心分离出氯仿层，用氮气吹去氯仿，称重，可得出提取的脂肪量。

4.4.14.4.2乳总脂类的甲基化

取2mg提取的脂类，加入1.5ml的正已烷和40μl乙酸甲酯，再加入100μl的NaOCH3/CH3OH在室温下甲基化20min，然后置于冷冻箱10min，取出后迅速加入60μl的草酸，离心弃去沉淀，并将溶液通过无水Na2SO4层以吸附其中的水分。

4.4.14.4.3GC测定

用配备了火焰-离子检测器的GC测定，气相柱为CP-Sil88熔融石英毛细管柱（100m×0.25mm，Chrompack，Bridgewater，NJ），H2为载气，燃烧气体为H2、N2和空气。

升温程序为：

45℃/4min-（13℃/min）-175℃/27min-（4℃/min）-215℃/35min，测定时间为86min。

4.4．14.5结果判定

正常：

18:

2n65.83％以下，18:

3n30.95％以下

掺豆粉乳：

18:

2n65.83％以上，18:

3n30.95％以上。

最低检出量：

掺2％的豆粉

4.4.15掺大豆蛋白或乳清粉的检出（毛细管电泳法）

4．4．15．1原理

根据牛乳蛋白与大豆蛋白毛细管电泳出峰时间的不同来检测牛乳中是否掺入大豆蛋白；根据牛乳蛋白中乳清蛋白的峰面积的差异来检测牛乳中是否掺入乳清粉。

4．4．15．2仪器

BeckmanP/ACETMSystemMDQ毛细管电泳仪

4．4．15．3试剂

大多试剂均为进口试剂，未注明的均来自于sigma_aldrich，水为超纯水

4.4．15．3．1samplebuffer:

7.0mol/L尿素，0.02mol/L甲撑双丙稀酰胺基-三羟甲基氨基甲烷基-丙烷[BTP]，pH7.5

4.4.15．3．2runbuffer:

6.0mol/L尿素，0.02mol/L无水柠檬酸三钠，0.2mol/L柠檬酸，0.05%（w/v）羟脯胺酰基甲基纤维素[HPMC]，pH3.0

4.4.15．3．3others:

β-巯基乙醇，γ-MAPS[γ-甲基丙稀酰基-三（甲氧基）硅烷]，丙稀酰胺（电泳纯）[华美]，APS（过硫酸胺）[华美]，TEMED（四甲基已二胺）[BIO-RAD]，甲醇（色谱级），HCl（分析纯），NaOH（分析纯），冰醋酸（分析纯）。

4．4．15．4操作步骤

4．4．15．4.1样品预处理：

将样品与samplebuffer按1：

4的比例混合，加入0.5％的β-巯基乙醇，摇匀，室温静置1hr，用0.45um的膜过滤

4．4．15．4.2电泳：

上样前预电泳40min，将准备好的样品上样进行电泳

4．4．15．4.3procedure:

ddH2O,20psi,2min→runbuffer,20psi,2min→injecti