实验报告.docx
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实验报告
免疫检验技术
实践报告
实践一直接凝集试验
一、玻片凝集试验((细菌鉴定)
(一)实验目的
1,学会细菌玻片凝集试验的操作和结果判断。
2,理解抗原抗体反应的特异性,能做出正确的检验报告。
(二)实验原理
玻片凝集试验是用已知的诊断血清,与被检的未知细菌进行凝集试验,如出现特异性凝集,可确定被检细菌的种属或型别。
(三)实验材料
1,待检细菌:
2,试剂:
诊断血清:
3,器材:
玻片、接种环、酒精灯
(四)实验结果记录
反应物
反应现象
(凝集或不凝集)
结果判断
(阳性或阴性)
(五)实验报告
(六)实验讨论
1,志贺菌抗体与伤寒沙门菌能发生凝集吗为什么
2,做玻片凝集试验时,应怎样操作才能使凝集现象明显,利于结果的判断
报告者:
报告日期:
二、试管凝集试验(肥达反应常量法)
(一)实验目的
1,学会试管直接凝集试验的操作方法,熟练使用吸量管移液并进行连续二倍稀释。
2,能够正确进行首管血清喜事度的计算。
3,能够准确判断试管凝集试验的各级凝集程度和凝集效价,并准确报告结果。
(二)实验原理
肥达试验是用伤寒沙门菌的H(鞭毛)和O(菌体)以及甲型(A)、乙型(B)副伤寒沙门菌的诊断菌液与病人血清做凝集试验,对伤寒、副伤寒作辅助诊断。
如果需要,有些地区可增加丙型(C)副伤寒沙门菌等其他沙门菌的诊断菌液。
(三)实验材料
1,诊断菌液
2,待检血清
3,器材:
小试管、刻度吸管、试管架等
(四)实验结果记录
试管号
1
2
3
4
5
6
对照管
血清最终稀释度
TO菌液反应现象
TH菌液反应现象
PA菌液反应现象
PB菌液反应现象
*反应现象分别以—、+、++、+++、++++表示。
(五)实验报告
(六)实验讨论
1,如何进行血清的连续二倍稀释
2,如果首管血清要求是1:
15稀释,稀释后的总液量是3ml,应该如何进行稀释
3,试管直接凝集反应,是稀释抗原还是稀释抗体为什么
4,应如何观察试管凝集反应的结果
报告者:
报告日期:
三、大孔反应板法(肥达反应微量法)
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,待检血清
2,试剂:
3,器材:
大孔反应板、吸量管、盖玻板
(四)实验结果记录
孔号
1
2
3
4
5
6
7
生理盐水对照
阳性血清对照
血清最终稀释度
TO菌液反应现象
TH菌液反应现象
PA菌液反应现象
PB菌液反应现象
PC菌液反应现象
*反应现象分别以—、+、++、+++、++++表示。
(五)实验报告
(六)实验讨论
报告者:
报告日期:
实践二环状沉淀试验(CRP检测)
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,肺炎球菌C多糖(诊断试剂)
2,待检血清
3,小试管、毛细滴管、试管架等。
(四)实验结果记录
反应物
实验管
对照管
待检血清+C多糖诊断试剂
待检血清+生理盐水
(五)实验报告
(六)实验讨论
应怎样进行环状沉淀试验的结果观察
报告者:
报告日期:
实践三免疫比浊测定法(IgG定量测定)
(一)实验目的
熟悉免疫比浊测定法的原理、方法及结果判断。
(二)实验原理
本试验以透射比浊法检测人血清IgG。
在反应系统中保持抗IgG(抗体)过量时,所形
成的免疫复合物与IgG(抗原)的量呈正相关,而形成的浊度与入射光的衰减呈正相关,测定吸光度A值可反映液相中的IgG量。
通过参照标准曲线得知待测血清红IgG含量。
(三)实验材料
1,待检血清、标准血清、人IgG参考品
2,聚乙二醇-氟化钠溶液
3,其他试剂:
羊抗人IgG抗血清、生理盐水、蒸馏水等
4,器材:
分光光度计721、水浴箱、微量移液器、刻度吸管、试管等
(四)操作方法
1,系列参考管用生理盐水稀释人IgG参考标准品,使其浓度分别为5.5g/L、11.0g/L、
22.0g/L、44.0g/L(浓度可根据不同制剂变动)。
取上述IgG参考标准液各10μl分放于4个试管中;另取生理盐水10μl,放于第5支试管中,作为空白对照。
分别做好标记。
2,血清测定管将待检血清和标准血清均做1:
10稀释(待检/标准血清+生理盐水),混匀。
各取10μl分放于预先标记的试管中。
3,抗体准备用PEG-NaF溶液稀释羊抗人IgG抗血清(按商品效价稀释)。
4,抗原抗体反应向上述参考管、空白管、标准管、待测管中分别加入稀释抗血清,
混匀后置37℃水浴30分钟。
5,比浊用分光光度计进行测定,使用340nm波长,用生理盐水空白管校正零点。
逐次
测定各参考管、标准管和待测管,准确读取和记录各自的A值。
(五)实验结果记录
1
2
3
4
5
6
7
参考标准品1:
10
10μl
参考标准品1:
16
10μl
参考标准品1:
20
10μl
参考标准品1:
32
10μl
待检血清
(1:
10)
10μl
标准血清
(1:
10)
10μl
生理盐水
10μl
PEG-羊抗人IgG
1ml
1ml
1ml
1ml
1ml
1ml
1ml
340nm波长(A)
(六)实验报告
(七)实验讨论
报告者:
报告日期:
实践四单向琼脂扩散试验(IgG定量检测)
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,%琼脂凝胶
2,参考血清:
3,特异性抗血清:
4,待检血清
5,其他:
载玻片、三角烧杯、试管、移液管、微量加样器、有盖搪瓷盘、打孔器、温箱等。
(四)实验结果记录
标准1
标准2
标准3
标准4
标准5
测定
直径(mm)
绘制标准曲线:
(五)实验报告
(六)实验讨论
报告者:
报告日期:
实践五双向琼脂扩散试验、对流电泳
一、双向琼脂扩散试验
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,1%琼脂
2,待测抗原(抗体)、已知抗体(抗原)
3,其他物品:
载玻片、打孔器、带盖搪瓷盘、滴管等
(四)实验结果记录
1
62
53
4
(五)实验报告
(六)实验讨论
报告者
报告日期:
二、对流电泳
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,缓冲液醋酸-巴比妥钠
2,1%琼脂
3,抗体:
4,抗原:
5,电泳仪、打孔器、载玻片、加样器等
(四)实验结果记录
阳性对照
阴性对照
待检血清
结果
电泳时电压
电泳时间
(五)实验报告
(六)实验讨论
报告者
报告日期:
实践六酶联免疫吸附试验
ELISA夹心法测HBsAg
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,试剂盒
2,待检血清
3,酶联仪
(四)实验结果记录
(五)实验报告
(六)实验讨论
1,试验过程中,洗涤的目的是什么
2,ELISA阳性有何临床意义
报告者:
报告日期:
实践七斑点金免疫层析技术检测HCG
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,测试条
2,待检者尿液
(四)实验结果记录
对照线:
检测线:
(五)实验报告
(六)实验讨论
试分析以下结果:
1,仅对照线呈红色。
2,检测线、对照线均未呈红色。
报告者:
报告日期:
实践八中性粒细胞吞噬功能的检测
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,%甘油
2,45.0g/LNaCl
3,葡萄球菌菌液
(四)实验结果记录
计数中性粒细胞总数
吞噬葡萄球菌的中性粒细胞数
吞噬率%=
(五)实验报告
(六)实验讨论
1,人体内的吞噬细胞有哪些
3,中性粒细胞吞噬功能检测的注意事项是什么
报告者:
报告日期:
实践九血清总IgE的检测(ELISA法)
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,试剂盒
2,待检血清
(四)实验结果记录
1,标准品检测结果记录
标准品浓度(U/ml)
0
10
50
100
吸光度值(A)
根据标准品检测结果制备标准曲线。
2,待检血清检测结果记录
反应物
吸光度值
IgE浓度
待检血清
(五)实验报告
(六)实验讨论
1,实验材料和操作方法对实验结果有何影响
2,说明实验结果的临床意义。
报告者:
报告日期:
实践十抗链O试验(胶乳法)
(一)实验目的
(二)实验原理
(三)实验材料
1,抗链O检测试剂盒
2,待检血清
(四)实验结果记录
1,定性检测
反应物
反应现象
(凝集或不凝集)
结果判断
(阳性或阴性)
待检血清
2,半定量检测
稀释倍数
1:
2
1:
4
1:
8
待检血清中ASO含量
(IU/ml)
400
800
1600
检测结果
(五)实验报告
(六)实验讨论
1,实验材料和操作方法对实验结果有何影响
2,说明实验结果的临床意义。
报告者:
报告日期: