糖发酵实验报告.docx

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糖发酵实验报告

糖发酵试验

一、目

1．了解糖发酵原理和在肠道细菌判定中关键作用。

2．掌握经过糖发酵判别不一样微生物方法。

二、原理

多糖?

单糖?

丙酮酸?

酸性产物（或产酸产气）?

ph下降?

指示剂呈酸性变色（若产气者有气泡出现）。

不一样细菌可依据分解利用糖能力差异表现出是否产酸产气作为判定菌种依据。

是否产酸,可在糖发酵培养基中加入指示剂（通常为溴甲酚紫,即b.c.p,其ph在5.2以下呈黄色,ph在6.8以上呈紫色）,经培养后依据指示剂颜色改变来判定。

是否产气可在发酵培养基中放入倒置小倒管观察。

不一样微生物含有发酵不一样糖（醇）酶类,所以发酵路径及发酵产物各不相同。

比如:

大肠杆菌能使乳糖发酵,产酸产气,而伤寒杆菌则不能;大肠杆菌能使葡萄糖发酵,产酸产气,而伤寒杆菌则只产酸、不产气。

糖发酵试验是常见判别微生物生化反应,在肠道细菌判定上尤为关键。

绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,不过它们在分解糖类物质能力上有很大差异。

有些细菌能分解某种糖产生有机酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢气、甲烷、二氧化碳等）;有些细菌只产酸不产气。

比如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气;伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气,不能分解乳糖;一般变形杆菌分解葡萄糖产酸产气,不能分解乳糖。

发酵培养基含有蛋白胨,指示剂（溴甲酚紫）,倒置德汉氏小管和不一样糖类。

当发酵产酸时,溴甲酚紫指示剂可由紫色（ph6.8）变为黄色（ph5.2）。

气体产生可由倒置德汉氏小管中有没有气泡来证实。

三、器材

1．菌种大肠杆菌,一般变形杆菌斜面各一支。

2培养基葡萄糖发酵培养基试管和乳糖发酵培养基试管各3支（内装有倒置德汉氏小管）。

3仪器或其她用具试管架,接种环等。

四、操作步骤

1．用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培养基名称和所接种细菌菌名。

2取葡萄糖发酵培养基试管3支,分别接入大肠杆菌,一般变形杆菌,第三支不接种,作为对照。

另取乳糖发酵培养基试管3支,一样分别接人大肠杆菌,一般变形杆菌,第三支不接种,作为对照。

在接种后,轻缓摇动试管,使其均匀,预防倒置小管进入气泡。

3将接种过和作为对照6支试管均置37℃培养24～48h。

4．观察各试管颜色改变及德汉氏小管中有没有气泡。

篇二:

发酵实习试验汇报

第一部分、试验部分

试验一、酸乳制作

一、试验目

1、掌握酸乳制作方法、基础原理;

2、了解发酵剂制备过程中操作关键点;

3、对最终产品进行感官评定及理化检测,并进行品质比较。

二、基础原理

酸乳也成为酸牛奶,是大家喜爱饮用发酵乳。

所谓发酵乳、鲜乳或乳制品等关键原料添加乳酸菌,发酵以后形成含有特殊风味乳制品。

乳经过发酵制成发酵乳以后营养价值提升,发酵乳中蛋白质、钙盐轻易消化吸收,含有消化、抑制肠道内异常发酵和杀死肠道中有害菌作用。

酸奶是以牛奶为原料经过均质、消毒、发酵等过程加工而成。

酸乳品种很多,依据发酵工艺不一样,能够分为凝固型酸乳和搅拌型酸乳两大类。

凝固型酸乳在接种发酵菌株后,立刻进行包装,并在包装容器内发酵、成熟。

搅拌型酸乳先在发酵罐中接种、发酵,发酵结束后在进行无菌灌装并后熟。

其基础原理就是经过乳酸菌发酵牛奶中乳糖产生乳酸,乳酸使牛奶中酪蛋白（约占全乳2.9%,占乳蛋白85%）变性凝固而使整个奶液呈凝乳状态。

同时,经过发酵还能够形成酸奶特有香味和风味,本试验关键学习凝固型酸奶制作方法。

三、试验材料

1、材料:

纯牛奶、白糖、酸牛奶

2、仪器:

电炉、水浴锅、电子天平、恒温培养箱、相关玻璃器皿

四、试验步骤

1、取ml纯牛奶放入锅中加热;

2、当达成一定温度后,根据8%百分比加入160g白糖,搅拌溶解

3、将牛奶加热到90℃;

4、小组分装,每个三角瓶中加入50ml牛奶,

5、将分装好牛奶放到95℃水浴锅中,灭菌5min;

6、冷却到45℃,在酒精灯下,接种适量酸牛奶（一勺）,并搅拌均匀,封好口;

7、在37℃温箱中保温培养2-4h,

8、转入0-4℃冰箱中冷藏保留;

9、品质判定

五、试验结果

品质判定:

1.色泽:

色泽均匀一致,呈乳白色。

2.气味:

含有与种子酸奶一样香味,无酒精发酵味,无霉味或其她不良

味道。

3.状态:

凝块均匀,无气泡,没有乳清析出。

4.口感:

口感就好,与种子酸奶味道一致,清香,顺滑,没有颗粒状物质。

总结:

此次试验所制作酸乳,质量品质和外观色泽均非常好。

六、思索题

1、牛乳杀菌工艺有哪多个？

牛乳杀菌工艺中最经典就是巴氏杀菌法和超高温灭菌法,还有煮沸杀菌法。

2、乳酸菌在乳中发酵原理是什么？

牛乳为何是凝固？

基础原理就是经过乳酸菌发酵牛奶中乳糖产生乳酸,乳酸使牛奶中酪蛋白（约占全乳2.9%,占乳蛋白85%）变性凝固而使整个奶液呈凝乳状态。

试验二、甜酒酿制作

一、试验目

1、学习甜酒酿发酵工艺;

2、明确发酵原理。

二、试验原理

甜酒酿是以糯米为关键原料,经过微生物发酵酿制而成。

因为酵母不能直接利用淀粉,所以必需先用糖化菌如根霉、毛霉等把淀粉分解成单糖或双糖。

所以,甜酒酿是在糖化菌和酵母菌共同作用下酿制而成,甜酒酿制作过程包含糖化和酒化两个过程。

糖化过程是在糖化菌如根霉分泌糖化酶作用下,将淀粉水解成葡萄糖;酒化过程是酵母菌利用葡萄糖经过emp路径生成丙酮酸,然后进入无氧呼吸将丙酮酸转化为乙醇。

三、试验材料

1、材料:

糯米、酒药

2、器材:

烧杯、锡箔纸、吸管、电子天平、电磁炉、不锈钢匙、玻璃棒等

四、试验步骤

1、选择原料;选择粒大饱满、无蛀虫、无杂物、色泽鲜亮、质量好新糯米共1100g,每

小组大约有275g左右;

2、淘洗浸泡;将米在水中浸泡12-二十四小时,后用自来水冲洗,浸米目是使米中淀粉

粒子吸水膨胀,便于蒸煮糊化;将浸泡好米用自来水冲洗洁净,并沥干。

3、蒸煮米饭;将洗净沥干米在高压锅中隔水蒸煮10-20分钟,常压30-40分钟。

要求达

到熟而不糊,外硬内软,内无白心,疏松易散,透而不烂,均匀一致。

4、淋饭降温;用冷开水淋洗糯米饭,以达成降温增水目,并使熟饭表面光滑,易于拌

入酒药,利于糖化发酵菌繁殖;淋饭时要边拌边淋,使米饭快速降温至35℃左右,避免因缓慢冷却造成微生物污染。

5、接入酒曲;将冷却至30℃左右米饭,按糯米量1%（约11g）接入酒药,将大米平均分

成4份,拌匀装入烧杯,并在中央用玻璃棒打一孔道,搭成喇叭型凹窝（中间低,周围高）,表面再撒上少许酒药,用封口膜封口。

6、保温发酵;30℃培养48小时,待喇叭型凹窝内有很多液体渗出,即可食用,但此时酒

味淡泊,略有酸味,若要品尝酒香浓郁酒酿,可合适延长发酵时间。

7、后熟发酵;在8-10℃下培养2-3天。

8、质量评定;酒香浓郁,液体清澈透明,酒液充沛。

五、结果思索题

结果分析:

在保温发酵48小时后,将烧杯移除后,看到在烧杯底部出现少许清澈液体,在喇叭口大米表层出现了白色霉菌。

在后发酵过程中,烧杯底部清澈液体量不停增加。

此时出现淡淡酒精味,略有酸味。

品鉴时,烧杯底部出现了2cm厚清澈液体,酒精味浓郁,有一股淡淡清香。

1、甜酒酿制作过程中应注意问题有哪些？

在甜酒酿制作过程中应注意在挑选糯米时候选择粒大饱满新糯米,在蒸煮时候,注意不要将米饭蒸糊,在淋饭降温时候用冷开水快速降温,避免因为缓慢降温冷却造成其她微生物污染。

在接种酒曲以后要搅拌均匀,接入适量酒药,表面撒上少许酒药,注意用a4纸封口。

保温发酵温度为30℃,培养时间为48小时。

在进行质量汇报时,当发觉米饭上层霉菌出现黑色或者黄色时,不要食用。

在进行品尝鉴评时候,将上层霉菌除去。

2、说明甜酒酿制作发酵原理？

甜酒酿是在糖化菌和酵母菌共同作用下酿制而成,甜酒酿制作过程包含糖化和酒化两个过程。

糖化过程是在糖化菌如根霉分泌糖化酶作用下,将淀粉水解成葡萄糖;酒化过程是酵母菌利用葡萄糖经过emp路径生成丙酮酸,然后进入无氧呼吸将丙酮酸转化为乙醇。

试验三、槐耳粗多糖提取

一、试验目

1、掌握发酵产物精制过程;

2、明确提取、浓缩、醇沉和干燥原理。

二、试验原理

温度升高能使细胞壁通透性增加并促进膨胀,增加了可溶性成份溶解和扩散速度,所以浸取温度越高,浸出速度越快。

但温度升高后,一些目产物不稳定发生分解变质,同时使挥发性目产物挥发散失。

所以,要把浸取温度控制在合适范围。

在目产物浸出过程中,溶剂ph值对浸出速度有影响。

一些目产物可溶解于酸性溶剂,则要使用酸性溶剂浸提;有些目产物易溶解于碱性溶液,所以要选择碱性溶剂提取。

依据目产物酸碱性质可确定提取过程中溶剂ph值范围。

分级沉淀法是指在混合组分溶液中加入与该溶液能互溶溶剂,经过改变溶剂极性而改变混合组分溶液中一些成份溶解度,使其从溶液中析出。

如在含有糖类或蛋白质水溶液中,分次加入乙醇（乙醇:

中强极性,能与水以任何百分比相混,乙醇浓度越高溶液极性越低。

多种目产物在乙醇中溶解度随乙醇浓度改变而改变）,使醇含量逐步增高,逐层沉淀出分子量由大到小蛋白质、多糖、多肽。

浓缩方法有蒸发浓缩、冷冻浓缩和吸收浓缩等,其中蒸发浓缩是将溶液加热沸腾,使溶剂汽化除去,从而提升溶液中溶质浓度,能够分为常压蒸发浓缩和真空蒸发浓缩两类。

干燥时,发酵产品提取过程中最终一个步骤,是将潮湿固体中水除去过程,与蒸发相比,水分是不在沸腾状态下汽化,而是在其本身温度低于沸点条件下进行,很多原因如物料性质和形状、物料本身温度、干燥介质温度、湿度和流动情况等影响着干燥速度。

方法有空气加热干燥法、杰出加热法和冷冻升华干燥法。

三、试验器材

1、材料:

槐耳

2、器材:

分液漏斗、电炉

四、试验步骤

1、浸泡

2、:

250g槐耳,粉碎后加入8倍蒸馏水浸泡24h;

3、热浸提:

ph自然,100℃,不时搅拌,2h;

4、过滤,残渣加入适量水,反复抽提一次,合并两次提取所得滤液;

5、浓缩,采取蒸发浓缩法,加热至小于150ml左右体积;

6、去蛋白,连续2-3次加入氯仿:

正丁醇=4:

1溶液去除蛋白（sevag法）,至不显示蛋白

反应为止,离心搜集上清液。

（注:

sevag法:

加入0.2倍多糖体积氯仿和乙醇混合液,震荡分离15min左右,直到氯仿和水界面没有沉淀为止,且反复处理2-3次才能有效去除多糖中蛋白质。

）

7、此次试验经浓缩和抽提以后取得80g粗多糖提取液。

将所得多糖粗提取液平均分

成4份,依据每份质量体积根据70%、75%、80%、85%乙醇浓度加入乙醇,室温下静止24h;

8、离心（滤纸过滤,切记不要震荡）;3600rpm,离心10min

9、搜集沉淀,采取对流加热干燥方法,60℃加热干燥至恒重;

10、称重,根据下表统计数据。

六、思索题

1、沉淀多糖最适乙醇用量是什么？

沉淀多糖最适乙醇用量是75%浓度,大约是粗多糖浓缩液4倍体积乙醇。

2、粗多糖提取率是多少？

以最适乙醇浓度75%为标准,粗多糖提取率=1.02g/（250g/4）x100%=1.632%篇三:

发酵试验汇报

《发酵工程原理》综合试验

——小型发酵罐使用与发酵过程监测与分析

学院名称:

食品学院

年级专业:

09级生物工程

试验日期.11.23-25

摘发酵罐是用于培养微生物或细胞封闭容器或生物反应装置。

可用于研究、分析或生产。

有多个在材料、大小和形状上各异产品。

最常见为全搅拌罐式反应器。

发酵罐广泛应用于乳制品、饮料、生物工程、制药、精细化工等行业,罐体设有夹层、保温层、可加热、冷却、保温。

罐体与上下填充头（或雏形）均采取旋压r角加工,罐内壁经镜面抛光处理,无卫生死角,而全封闭设计确保物料一直处一无污染状态下混合、发酵,设备配置空气呼吸孔,cip清洗喷头,人孔等装置。

本试验经过控制适宜培养条件,使大肠杆菌快速连续生长,在发酵过程中定时取

样测定不一样时期发酵液细菌浊度及残留还原糖改变了解发酵过程中菌体生长及对培养基利用情况。

关键词:

大肠杆菌液体发酵最大比生长速率平均细胞得率系数

前言...........................................................................................................................................................3

1.材料与设备...................................................................................................................................................4

1.1.材料...................................................................................................................................................4

1.1.1.菌种.......................................................................................................................................4

1.1.2.培养基...................................................................................................................................4

1.1.3.其她材料...............................................................................................................................4

1.2.设备...................................................................................................................................................4

2.试验方法.......................................................................................................................................................4

2.1.步骤...................................................................................................................................................4

2.2.菌种准备...........................................................................................................................................5

2.2.1.配制培养基...........................................................................................................................5

2.2.2.接种与培养...........................................................................................................................5

2.3.上罐前准备...................................................................................................................................5

2.4.实罐灭菌...........................................................................................................................................6

2.5.发酵操作...........................................................................................................................................6

2.5.1.取样........................................................................................................................................6

2.5.2.接种........................................................................................................................................7

2.5.3.电脑监控................................................................................................................................7

2.5.4.发酵管理...............................................................................................................................7

2.6.发酵过程中各项生理指标测定...................................................................................................7

2.6.1.od值测定..............................................................................................................................7

2.6.2.葡萄糖测定...........................................................................................................................7

2.7.放罐清洗...........................................................................................................................................8

3.结果与分析...................................................................................................................................................9

3.1.菌体浓度与吸光值关系标准曲线...................................................................................................9

3.2.发酵过程各参数改变规律...............................................................................................................9

3.3.1干菌体浓度............................................................................................................................9

3.2.2葡萄糖浓度.........................................................................................................................10

3.2.3ph值、do值和其她部分参数...........................................................................................10

3.4.各参数整理与分析.........................................................................................................................11

3.5.最大比生长速率.............................................................................................................................13

3.6.平均细胞得率系数....................................................................................................................