人教-选修一21微生物的实验室培养课件第一课时2.ppt
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专题专题2:
2:
微生物的培养与应用微生物的培养与应用到目前为止，几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学有关微生物包括哪五类：
微生物包括哪五类：
病毒病毒细菌细菌放线菌放线菌真菌真菌原生动物原生动物原核生物界原核生物界原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界微生物基础知识微生物基础知识微生物的类群原生生物：
原核生物:
真菌:
病毒:
如酵母菌单细胞的动植物如草履虫、单细胞藻类等微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物无细胞结构真核细胞细菌、蓝藻、放线菌放线菌放线菌放线菌原核细胞特点：
特点：
结构都相当简单结构都相当简单,个体多数十分微小个体多数十分微小.通常要用光学显微镜通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含且体内一般不含有叶绿素有叶绿素.不能进行光合作用不能进行光合作用.细菌的外形与大小细菌的外形与大小细菌：
细菌：
单细胞不分枝的原核微生物单细胞不分枝的原核微生物。
细菌细胞细菌细胞微小而透明微小而透明，通常用适当染料，通常用适当染料染染色色后显微镜观察后显微镜观察图图1-1常见的三种细菌典型形态常见的三种细菌典型形态A.球菌球菌B.杆菌杆菌C.弧菌弧菌细菌细胞由外向里依次有鞭毛鞭毛鞭毛鞭毛、菌菌（纤）毛纤）毛纤）毛纤）毛、荚膜荚膜荚膜荚膜、细胞壁细胞壁细胞壁细胞壁、细胞膜、细胞膜、细胞膜、细胞膜、细胞质细胞质细胞质细胞质，细胞质细胞质细胞质细胞质中又有液泡、储中又有液泡、储中又有液泡、储中又有液泡、储存性颗粒、核质存性颗粒、核质存性颗粒、核质存性颗粒、核质等等等等。
细菌的构造细菌的构造图图图图1-31-3细菌的结构细菌的结构细菌的结构细菌的结构*细胞壁细胞壁nn结构特点：
坚韧且有弹性结构特点：
坚韧且有弹性结构特点：
坚韧且有弹性结构特点：
坚韧且有弹性n细胞壁有哪些功能？
细胞壁有哪些功能？
n固定细胞外形；固定细胞外形；固定细胞外形；固定细胞外形；ww保护细胞免受外力的损伤；保护细胞免受外力的损伤；保护细胞免受外力的损伤；保护细胞免受外力的损伤；ww阻拦大分子物质进人细胞阻拦大分子物质进人细胞阻拦大分子物质进人细胞阻拦大分子物质进人细胞；使细胞具有致病性及对使细胞具有致病性及对使细胞具有致病性及对使细胞具有致病性及对噬菌体的敏感性。
噬菌体的敏感性。
噬菌体的敏感性。
噬菌体的敏感性。
伤伤寒寒杆杆菌菌细细胞胞壁壁中中含含毒毒素素有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做体，叫做芽孢芽孢。
芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环。
芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。
例如，有的细菌的芽孢，煮沸境有很强的抵抗力。
例如，有的细菌的芽孢，煮沸33小时以后才小时以后才死亡。
芽孢又小又轻，可以随风飘散。
当环境适宜（如温度、水死亡。
芽孢又小又轻，可以随风飘散。
当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.菌落：
菌落：
n单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
n菌落是鉴定菌种的重要依据。
菌落是鉴定菌种的重要依据。
菌落细菌的菌落特征细菌的菌落特征因种而异因种而异放线菌放线菌11、结构：
、结构：
单细胞原核单细胞原核分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）链霉素、土霉素、四环素、链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素氯霉素、红霉素、庆大霉素微生物中发现了几千种抗生素，其中微生物中发现了几千种抗生素，其中2/32/3是是由放线菌产生的由放线菌产生的应用应用:
病毒的结构病毒的结构病毒病毒SARS病毒、病毒、禽流感病毒禽流感病毒朊病毒（蛋白质病毒）朊病毒（蛋白质病毒）2、病毒的增殖：
、病毒的增殖：
真菌真菌如图是酵母菌电子显微如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构镜下的形态结构酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌青霉青霉生殖生殖直立菌丝直立菌丝营养菌丝营养菌丝腐生生活腐生生活孢子生殖孢子生殖细菌的营养类型细菌的营养类型n根据细菌所利用的能源和碳源的不同，根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。
将细菌分为两大营养类型。
n自养菌（自养菌（autotrophautotroph）n异养菌（异养菌（heterotrophheterotroph）n腐生菌腐生菌n寄生菌寄生菌大部分病原菌大部分病原菌微生物包括哪五类：
微生物包括哪五类：
病毒病毒细菌细菌放线菌放线菌真菌真菌原生动物原生动物特点：
特点：
结构都相当简单结构都相当简单,个体多数十分微小。
个体多数十分微小。
通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构，且体内一般不含有叶有的甚至没有细胞结构，且体内一般不含有叶绿素，不能进行光合作用。
绿素，不能进行光合作用。
原核生物界原核生物界原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界1、了解培养基的基础知识，掌握培养基的配、了解培养基的基础知识，掌握培养基的配制、分装方法。
制、分装方法。
2、掌握常用的消毒和灭菌的方法，进行无菌、掌握常用的消毒和灭菌的方法，进行无菌技术的操作技术的操作一、一、教学目标教学目标无菌技术的操作。
无菌技术的操作。
二、课题重点和难点：
二、课题重点和难点：
一、基础知识：
一、基础知识：
（一）培养基
（一）培养基培养基（培养液）是培养基（培养液）是由人工方法配制而成由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。
液。
不管哪种培养基，一般都含有不管哪种培养基，一般都含有水水、碳碳源源、和、和氮源氮源、无机盐无机盐等等营养物质，另外营养物质，另外还需要满足微生物生长对还需要满足微生物生长对pHpH、特殊营养特殊营养物质物质,例如例如:
生长因子生长因子（即细菌生长必需，即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物而自身不能合成的化合物,如维生素、某如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶些氨基酸、嘌呤、嘧啶）以及以及氧气氧气、二氧二氧化碳化碳、渗透压渗透压等等的要求。
的要求。
（一）.培养基：
微生物生存的环境和营养物质1.基本成分：
思考：
微生物“吃”什么？
水、无机盐、碳源、氮源碳源无机碳源：
无机碳源：
有机碳源：
有机碳源：
COCO22、COCO3322-、HCOHCO33-牛肉膏、蛋白胨等牛肉膏、蛋白胨等自养微生物自养微生物异养微生物异养微生物氮源NHNH44、NONO33-牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注：
含注：
含CHONCHON的的有机物有机物为为异异养型微生物提供养型微生物提供碳源碳源、氮源氮源、能源能源
（一）.培养基：
1.基本成分：
水、无机盐、碳源、氮源2.特殊营养：
维生素、碱基等（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）3.pH、氧气的需求：
4.种类：
固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基有有无无凝固剂琼脂凝固剂琼脂分离分离鉴定鉴定工业工业生产生产化学成分：
化学成分：
物理性质：
物理性质：
天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多微生物的分离、计数等半固体培养基加入琼脂较少观察微生物运动、鉴定菌种、保藏菌种等液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学组成合成培养基由已知成分配制而成，培养基成分明确菌种分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成，培养基成分不明确工业生产目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物选择培养基添加（或缺少）某种化学物质培养、分离出特定的微生物选择培养基选择培养基加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基:
分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基:
分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基:
分离固氮菌分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基:
分离自养型微生物分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基加入青霉素等抗生素的培养基:
分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基核苷的培养基:
分离杂交瘤细胞分离杂交瘤细胞这些营养成分是构成细胞结构的这些营养成分是构成细胞结构的元素和化合物的基本元素，碳源：
如元素和化合物的基本元素，碳源：
如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：
如能量。
氮源：
如N2、氨盐、硝酸盐、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
白质、核酸及含氮代谢物等。
1、从细胞的化学元素组成来看，培养、从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？
基中为什么都含有这些营养成分？
课堂探究课堂探究牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方H2O定容至1000mlNacl5g蛋白胨10g牛肉膏5g琼脂20.0g分析营养构成？
（二）无菌技术
（二）无菌技术无菌技术的概念无菌技术的概念无菌操作泛指无菌操作泛指在培养微生物的操作中，在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
所有防止杂菌污染的方法。
获得纯净培养物的获得纯净培养物的关键是关键是防止外来杂菌的入防止外来杂菌的入侵侵，无菌技术就是防止杂菌污染的操作技术。
，无菌技术就是防止杂菌污染的操作技术。
消毒消毒1、无菌技术的种类、无菌技术的种类灭菌灭菌使用较为温和的物理和化学方法（酒精、紫外线）使用较为温和的物理和化学方法（酒精、紫外线）来杀死来杀死部分对人体有害部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢的微生物（不包括芽孢和孢子。
子。
使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所有微使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物（包括芽孢和孢子）。
生物（包括芽孢和孢子）。
以化学剂或物理方法以化学剂或物理方法消灭消灭所有所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到霉菌及病毒，而达到完全无菌完全无菌之过程。
之过程。
对实验对实验操作的空间操作的空间、操作者的、操作者的衣着和手衣着和手进行清进行清洁洁消毒消毒；将将培养器皿、接种用具和培养基培养器皿、接种用具和培养基等进行等进行灭菌灭菌；接种的过程要在接种的过程要在酒精灯火焰酒精灯火焰附近进行。
附近进行。
避免避免已经灭菌处理的材料用具已经灭菌处理的材料用具与周围物品接触与周围物品接触11、煮沸消毒法煮沸消毒法:
100:
100煮沸煮沸5-6min5-6min22、巴氏消毒法巴氏消毒法：
70-7570-75下煮下煮30min30min或或8080下煮下煮15min9（15min9（牛奶）牛奶）33、化学药剂消毒法化学药剂消毒法:
用用75%75%酒精、新洁尔灭等酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒进行皮肤消毒;氯气消毒水源（酒精擦拭双手氯气消毒水源（酒精擦拭双手44、紫外线消毒：
紫外线消毒：
（工作台、接种室）（工作台、接种室）（能使能使蛋白质变性，还能损伤蛋白质变性，还能损伤DNADNA的结构）的结构）
（1）
（1）消毒的方法消毒的方法3.3.常用的消毒与灭菌的方法常用的消毒与灭菌的方法（11）、灼烧灭菌：
）、灼烧灭菌：
接种用具和接种过程中的试接种用具和接种过程中的试管口或瓶口放在酒精灯火焰的管口或瓶口放在酒精灯火焰的充分燃烧层充分燃烧层中进行中进行灼烧灭菌。
灼烧灭菌。
试管口或瓶口试管口或瓶口等容易被污染的部位等容易被污染的部位3、常用的消毒与灭菌的方法、常用的消毒与灭菌的方法（22）、干热灭菌：
）、
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