支原体肺炎诊断及病原学检测_精品文档.ppt

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支原体肺炎诊断支原体肺炎诊断及病原学检测及病原学检测肺炎支原体肺炎的诊断nn临床表现临床表现nn影像学表现影像学表现nn病原学诊断病原学诊断潜伏期潜伏期1-3周周起病形式多样，多数起病形式多样，多数患者仅以低热、疲乏患者仅以低热、疲乏起病起病部分患者可以突发高部分患者可以突发高热并伴有明显的头痛、热并伴有明显的头痛、肌痛、恶心等全身中肌痛、恶心等全身中毒症状毒症状呼吸道症状以干咳最呼吸道症状以干咳最突出，常持续突出，常持续4周以周以上，多伴有显著咽痛，上，多伴有显著咽痛，偶有胸痛、痰中带血；偶有胸痛、痰中带血；呼吸道以外的症状中，呼吸道以外的症状中，以耳痛、麻疹样或猩以耳痛、麻疹样或猩红热样皮疹较多见红热样皮疹较多见阳性体征以显著的咽阳性体征以显著的咽部充血和耳鼓膜充血较部充血和耳鼓膜充血较多见多见外周血白细胞总数和外周血白细胞总数和中性粒细胞比例多正常，中性粒细胞比例多正常，有些患者可升高有些患者可升高病变多为边缘模糊、密度较低的云雾样片状浸润影，病变多为边缘模糊、密度较低的云雾样片状浸润影，从肺门向外周肺野放射，肺实质受累时也可呈大片从肺门向外周肺野放射，肺实质受累时也可呈大片实变影实变影肺部肺部阳性体征少而影像表现明显阳性体征少而影像表现明显是支原体肺炎的是支原体肺炎的一个重要特点一个重要特点与普通细菌性肺炎通常表现为下肺单一的实变影或与普通细菌性肺炎通常表现为下肺单一的实变影或片状浸润影相比，支原体肺炎片状浸润影相比，支原体肺炎累及上肺者或同时累累及上肺者或同时累及双肺者更多一些，且吸收较慢及双肺者更多一些，且吸收较慢肺部影像学表现肺部影像学表现病原学诊断病原学诊断nn血清特异性抗体检测血清特异性抗体检测血清特异性抗体检测血清特异性抗体检测nn传统检测方法：

明胶凝集法传统检测方法：

明胶凝集法传统检测方法：

明胶凝集法传统检测方法：

明胶凝集法，补体结合试验，补体结合试验，补体结合试验，补体结合试验。

无法区分。

无法区分。

无法区分。

无法区分IgGIgG和和和和IgMIgMnn酶免疫试验或免疫荧光法酶免疫试验或免疫荧光法酶免疫试验或免疫荧光法酶免疫试验或免疫荧光法：

可以分别检测特异性：

可以分别检测特异性：

可以分别检测特异性：

可以分别检测特异性IgGIgG和和和和IgMIgM，11周出现，周出现，周出现，周出现，33周高峰，但部分反复发生肺炎支原体感周高峰，但部分反复发生肺炎支原体感周高峰，但部分反复发生肺炎支原体感周高峰，但部分反复发生肺炎支原体感染的成年患者，特异性染的成年患者，特异性染的成年患者，特异性染的成年患者，特异性IgMIgM可能持续阴性可能持续阴性可能持续阴性可能持续阴性nn血清冷凝集试验：

不再做为肺炎支原体感染的诊断参考血清冷凝集试验：

不再做为肺炎支原体感染的诊断参考血清冷凝集试验：

不再做为肺炎支原体感染的诊断参考血清冷凝集试验：

不再做为肺炎支原体感染的诊断参考nn快速培养鉴定法快速培养鉴定法快速培养鉴定法快速培养鉴定法nn基于核酸技术的肺炎支原体检测方法基于核酸技术的肺炎支原体检测方法基于核酸技术的肺炎支原体检测方法基于核酸技术的肺炎支原体检测方法最早采血时间应在起病后的最早采血时间应在起病后的7-107-10天，这样才能确定是否天，这样才能确定是否MPMP感染感染血清学诊断标准血清学诊断标准诊断诊断“金标准金标准”：

急性期及恢复期的双份血清标急性期及恢复期的双份血清标本中，肺炎支原体特异性抗体滴度呈本中，肺炎支原体特异性抗体滴度呈44倍或倍或44倍倍以上增高，均可确诊肺炎支原体感染以上增高，均可确诊肺炎支原体感染nn明胶颗粒凝集试验特异性抗体滴度明胶颗粒凝集试验特异性抗体滴度ll：

160160，或补，或补体结合试验特异性抗体滴度体结合试验特异性抗体滴度11：

6464，或特异性，或特异性IgMIgM阳性，也可作为诊断肺炎支原体近期感染或急阳性，也可作为诊断肺炎支原体近期感染或急性感染的依据。

性感染的依据。

nnMP-MP-IgMIgM阳性代表着近期感染。

阳性代表着近期感染。

MP-MP-IgGIgG阳性一般代阳性一般代表着既往感染。

表着既往感染。

人人类类对对Mp无无先先天天免免疫疫性性，尚尚无无可可实实际际应应用用的的有有效效疫疫苗苗，感染后也不能产生完全的保护性免疫感染后也不能产生完全的保护性免疫Mp特特异异性性的的IgM抗抗体体在在发发病病后后不不久久即即可可出出现现升升高高，14周周内内达达到到峰峰值值，然然后后在在几几个个月月内内逐逐渐渐下下降降到到没没有有临临床床意意义义的的水水平平。

急急性性感感染染后后IgM的的持持续续时时间间在在不不同同个个体体中中差差异异较较大大。

儿儿童童的的IgM反反应应一一般般强强于于成成人人，约约50%的成人患者无法在的成人患者无法在Mp感染后测到感染后测到IgM的升高的升高IgG的的出出现现时时间间晚晚于于IgM，5周周左左右右达达到到峰峰值值，上上升升速速度度较较慢慢且且在在体体内内的的持持续续时时间间较较长长（4年年左左右右），但但在在感感染染数数月月后后就就会会下下降降到到较较低低水水平平。

有有些些儿儿童童无无法法测测得得明明显的显的IgG反应反应特特异异性性IgA的的免免疫疫反反应应与与IgM类类似似，但但其其在在成成年年人人尤尤其其是老年人中的反应水平更高是老年人中的反应水平更高MP的的免疫性免疫性血清学检测原理血清学检测原理nn冷凝集试验：

冷凝集试验：

MPMP感染患者血清中常含有较高滴度感染患者血清中常含有较高滴度的寒冷红细胞凝集素（简称冷凝集素）。

它能与的寒冷红细胞凝集素（简称冷凝集素）。

它能与患者自身红细胞或患者自身红细胞或“O”O”型人红细胞于型人红细胞于0044条件条件下起凝集反应，在下起凝集反应，在3737时已凝集的红细胞呈可逆时已凝集的红细胞呈可逆性的完全散开。

性的完全散开。

凝集试验与凝集试验与ELISA的原理的原理比较比较ELISA凝集试验凝集试验补体结合实验补体结合实验冷冷凝凝集集试试验验：

冷冷凝凝集集素素是是对对Mp最最早早的的体体液液反反应应，50%的的病病人人在在Mp感感染染第第2周周时时的的滴滴度度可可达达到到1:

32以以上上，而而6周周内内即即降降至至感感染染前前的的水水平平。

冷冷凝凝集集试试验验虽虽然然简简便便、快快速速，但但它它不不是是针针对对Mp的的特特异异性性试试验验，多多种种其其他他微微生生物物感感染染（如如EB病病毒毒、巨巨细细胞胞病病毒毒、肺肺炎炎克克雷雷伯伯菌菌）和和自自身身免免疫疫性性疾疾病病时时冷冷凝凝集集素素滴滴度度均均可可升升高高。

同同时时，该该试试验验的的敏敏感感性性也也只只有有5060%，对对于于12岁岁以以下下的的儿儿童童其其敏敏感感性性则则更差更差补补体体结结合合试试验验（CFT）：

十十几几年年前前，CFT仍仍是是Mp血血清清学学试试验验的的标标准准方方法法，但但越越来来越越多多的的研研究究表表明明该该方方法法的的敏敏感感性性和和特特异异性性都都不不够够高高。

CFT所所用用的的抗抗原原为为Mp的的氯氯仿仿-甲甲醇醇糖糖脂脂抽抽提提物物，它它可可与与人人类类、细细菌菌及及植植物物的的某某些些抗抗原原表表位位发发生生交交叉叉反反应应（如如脑脑膜膜炎炎时时，CFT滴滴度度可可明明显显升升高高）。

CFT测测定定的的主主要要是是IgM，对对IgG不不很很敏敏感感，导导致致其其整整体体敏感性偏低。

敏感性偏低。

各血清学检测方法的特点各血清学检测方法的特点间间接接血血凝凝试试验验（PHA）：

将将提提纯纯的的Mp抗抗原原连连接接到到红红细细胞胞（禽禽类类或或羊羊）上上，与与血血清清中中的的抗抗Mp抗抗体体可可发发生生凝凝集集反反应应。

该该试试验验的的敏敏感感性性和和特特异异性性均均明明显显优优于于CFT。

PHA不不能能区区分分抗抗体体的的类类型型，因因此此单单份份测测定定出出现现低低滴滴度度的的抗抗体体阳性结果并不能确定是既往感染还是新近感阳性结果并不能确定是既往感染还是新近感染。

染。

明明胶胶颗颗粒粒凝凝集集试试验验（PA）：

其其原原理理与与间间接接血血凝凝试试验验基基本本相相同同，只只是是用用人人工工合合成成的的明明胶胶颗颗粒粒取取代代了了红红细细胞胞作作为为凝凝集集试试验验的的载载体体，从从而而使使结结果果判判定定更更清清晰晰，静静置置稳稳定定性性更更好好，非非特特异异性性反反应应大大大大减减少少，检检测测的的敏敏感感性性也也有有了了进进一一步步提提高（对高（对IgM和和IgA更敏感）更敏感）酶酶联联免免疫疫吸吸附附试试验验（ELISA）：

是是目目前前Mp血血清清学学试试验验中中常常用用的的方方法法，可可分分开开检检测测IgM、IgG和和IgA，敏敏感感性性和和特特异异性性均均能能达达到到较较高高的的水水平平。

虽虽然然单单次次测测定定IgM（或或IgA）阳阳性性即即可可基基本本判判定定为为Mp的的新新近近感感染染，但但阴阴性性时时却却无无法法排排除除感感染染的的可可能能性性。

IgG一一般般须须进进行行间间隔隔2周周以以上上的的双双份份血血清清测测定定，有有4倍倍以以上上滴滴度度上上升升时时才才能能做做出出Mp新新近近感感染染的的诊诊断断。

因因此此，在在ELISA测测定定中中应应强强调调同同时时检检测测IgG和和IgM（或或IgA），且且最最好好能能对对间间隔隔2周周以以上上的的双双份份配配对对血血清清进进行抗体转化情况的测定，从而做出明确的行抗体转化情况的测定，从而做出明确的诊断诊断其其它它方方法法：

间间接接免免疫疫荧荧光光试试验验（IFA）、乳乳胶胶凝凝集集试试验验（LA）、免免疫疫印印迹迹测测定定（WB）、黏黏附附抑抑制制试试验验、放放射射免免疫沉淀试验、补体介导的杀伤试验等疫沉淀试验、补体介导的杀伤试验等其他病原学检测方法其他病原学检测方法nnPCRPCR、单克隆抗体法等检测分泌物中抗原及、单克隆抗体法等检测分泌物中抗原及、单克隆抗体法等检测分泌物中抗原及、单克隆抗体法等检测分泌物中抗原及DNADNA，敏感性、，敏感性、，敏感性、，敏感性、特异性高，可用于早期诊断，但操作复杂，同位素、假阳特异性高，可用于早期诊断，但操作复杂，同位素、假阳特异性高，可用于早期诊断，但操作复杂，同位素、假阳特异性高，可用于早期诊断，但操作复杂，同位素、假阳性的问题限制了推广和使用，性的问题限制了推广和使用，性的问题限制了推广和使用，性的问题限制了推广和使用，PCRPCR实验条件要求严格，只实验条件要求严格，只实验条件要求严格，只实验条件要求严格，只限于实验研究。

限于实验研究。

限于实验研究。

限于实验研究。

nnMPMP的分离培养和鉴定是支原体检测的金标准，的分离培养和鉴定是支原体检测的金标准，的分离培养和鉴定是支原体检测的金标准，的分离培养和鉴定是支原体检测的金标准，MPMP对培养对培养对培养对培养条件要求苛刻，生长缓慢，一般为条件要求苛刻，生长缓慢，一般为条件要求苛刻，生长缓慢，一般为条件要求苛刻，生长缓慢，一般为7-107-10天，作出判定需天，作出判定需天，作出判定需天，作出判定需3-43-4周。

利用肺炎支原体生长过程中分解葡萄糖并产酸的特点周。

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利用肺炎支原体生长过程中分解葡萄糖并产酸的特点设计了快速培养鉴定方法，通过观察培养基颜色的变化来设计了快速培养鉴定方法，通过观察培养基颜色的变化来设计了快速培养鉴定方法，通过观察培养基颜色的变化来设计了快速培养鉴定方法，通过观察培养基颜色的变化来早期发现肺炎支原体的生长。

早期发现肺炎支原体的生长。

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