迅速送检。
应尽快送实验室进行检测,延误送检时间,会影响到检测质量和结果的可靠性。
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二、血液样品的采集'_U@o!
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1、病毒检验用血液样品。
应在动物发病初体温升高期采集。
血液样品必须是脱纤血或是抗凝血。
抗凝剂可选用肝素或EDTA,枸缘酸钠对病毒有轻微毒性,一般不宜采用。
采血前,在真空采血管或其它容器内按每毫升血液加入0.1%肝素1ml或EDTA20mg。
采集的血液立即与抗凝剂充分混合,防止凝固。
采脱纤血时,先在容器内加入适量小玻璃珠,加入血液后,反复振荡,以便脱去血液纤维。
采集的血液经密封后贴上标签,以冷藏状态立即送实验室。
必要时,可在血液中按每毫升加入青霉素和链霉素各500~1000IU,以抑制血源性可采血中污染的细菌。
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2、细菌检验样品。
采血应在动物发病初体温升高或发病期,未经药物治疗期间采集。
血液应脱纤或加肝素抗凝剂(或EDTA或枸缘酸钠),但不可加入抗生素。
采集的血液经密封后贴上标签,以冷藏状态立即送实验室,否则须置4℃冰箱内暂时保存,但时间不宜过久,以免溶血。
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3、血清学检验样品。
用作血清学检验的样品不加抗凝剂或脱纤处理。
为保障血清质量,一般情况下,空腹采血较好。
采集的血液贴上标签,室温静置待凝固后送实验室,并尽快将自然析出的血清或经离心分离出的血清吸出,按需要分装,再贴上标签冷藏保存备检。
较长时间才检验的,应冻结保存,但不能反复冻融,否则抗体效价下降。
作血清学检验的血液,在采血、运送、分离血清过程中,应避免溶血,以免影响检验结果。
采集双份血清检测比较抗体效价变化的,第一份血清采于发病的初期并作冻结保存,第二份血清采于第一份血清后3~4周,双份血清同时送实验室。
4、寄生虫检验样品。
因不同的血液寄生虫在血液中出现的时机及部位各不相同,因此需要根据各种血液寄生虫病的特点,取相应时机及部位的血液制成血涂片,送实验室。
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三、组织样品的采集7_#8G_n=g
组织样品一般由扑杀动物或病死尸体剖中采集。
从尸体采样时,先剥去动物胸腹部皮肤,以无菌器械将腹腔打开,根据检验目的和生前疫病的初步诊断,无菌采集不同的组织。
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1、病毒检验样品。
作病毒检验的组织,必须以无菌技术采集,组织应分别放入灭菌的容器内并立即密封,贴上标签,放入冷藏容器立即送实验室。
如果时间较长,可作冻结状态运送,也可将组织块浸泡在PH7.4左右的乳汉液或磷酸缓冲肉汤保护液内,并按每毫升保护液加入青霉素、链霉素各1000IU,然后放入冷藏容器内送实验室。
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2、细菌检验样品。
供细菌检验的组织样品,应新鲜并以无菌技术采集。
如遇尸体已经腐败,某些疫病的致病菌仍可采集于长骨或肋骨,从骨髓中分离细菌。
采集的所有组织分别放入灭菌的容器内并立即密封,贴上标签,放入冷藏容器立即送实验室。
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四、粪便样品的采集.UyE|t4_
1、病毒检验样品。
分离病毒的粪便必须新鲜。
少量采集时,以灭菌的棉拭子从直肠深处或泄殖腔粘膜上蘸取粪便,并立即投入灭菌的试管内密封,或在试管内加入少量PH7.4的保护液再密封。
贴上标签冷藏送实验室。
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2、细菌检验样品。
作细菌检验的粪便,最好在动物使用抗菌药物之前,从直肠或泄殖腔粘膜上采集,采样方法与供病毒检验的相同。
可投入无菌缓冲盐水或肉汤的指形管内,贴上标签冷藏送实验室。
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3、寄生虫检验样品。
粪便样品应选取新排出的或直接从直肠内采得,以保持虫体或虫体节片及虫卵的固有形态,一般寄生虫检验的粪便用量较多。
采得的粪便以冷藏不冻结状态送实验室。
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第三节 几种畜禽疫病的样品采集Ts_i_JK
一、禽流感的样品采集、保存和运输P<<$__o-a"
病毒主要在呼吸道粘膜细胞内增殖。
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(一)病禽N(__/_)_e
1、至少从5只濒死禽采集样品。
样品包括:
泄殖腔拭子和气管拭子(置于缓冲液中)各5个(小珍禽可采集新鲜粪便);气管和肺的混样5个,肠管及内容物的混样5个;肝、脾、肾和脑等组织样品(不能混样)各5个。
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采集方法:
1)泄殖腔棉拭子:
将棉拭子插入肛门并旋转,使粪便沾在拭子上,后放在运输缓冲液中。
2)气管棉拭子:
活鸡采样时,将棉拭子插入活鸡的气管内,轻轻擦拭气管壁并放入缓冲液中。
死亡动物采气管样品时,可在肺和气管离体情况下进行采集,应将棉拭子插入较深部位用力擦拭,并按上述方法将棉拭子放在运输缓冲液中。
3)粪便样品:
可从活禽市场采取新鲜粪便,用棉拭子沾取粪便,并将采好的样品放在运输缓冲液中。
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2、分别采集至少10个病鸡的血样(急性发病期血清)。
采集10只病禽的血样,使用一次性采血器,心脏或翅静脉采血,每只禽采血样2ml~3ml,经离心或自然析出血清后,将血清移到指形管中。
封好口,贴好标签。
不同禽只的血样不能混合。
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(二)病死禽MqmQ5__2HR
无发病禽时,可从死亡不久的病禽采样,采样要求同病禽。
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棉拭子单独放入容器,容器中盛放含有抗菌素的PH值为7.0~7.4的PBS液。
抗生素的选择视当地情况而定,组织和气管拭子悬液中加入青霉素(20001U/mL)、链霉素(2mg/mL)、庆大霉素(50цg/mL)、制霉菌素(100001U/mL)。
但粪便和泄殖腔拭子所用的抗生素浓度应提高5倍。
加入抗生素后pH值应调至7.4。
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(三)样品的保存和运输T_^bAO-d#
1、血样要单独存放,不能混合。
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2、样品应密封于塑料袋或瓶中,置于有制冷剂的容器中运输,容器必须密封,防止渗漏。
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3、样品若能在24小时内送到实验室,冷藏运输。
否则,应冷冻运输。
若样品暂时不用,则应冷冻(最好-70℃或以下)保存。
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二、新城疫]>_3_Y~KH(
新城疫病毒存在于病鸡所有器官、体液、分泌物和排泄物,以脑、脾和肺含毒量最高,骨髓含毒时间最长。
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样品:
眼分泌物、泄殖腔拭子、脾脏、气管粘膜、脑等。