干化学理论指南Word格式文档下载.docx

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又如，尿素氮（BUN）也采用半透膜层去除干扰。

单个实验所需时间当结果在MonitorResults（显示器结果）屏幕上可用时即可访问分析结果，而无需等到完成整个样本处理。

每项测试需要5-11µ

L的样本量。

下表列出了获得每种实验类型的分析结果所需的时间。

实验类型

获得分析结果时间

电势测定法

大约2.5分钟

比色法、两点速率法和多点速率法

大约5.5分钟

免疫速率法

大约7.5分钟

1．1．2干片包装和保存

储存干片弹匣

可根据推荐的贮存说明，将干片盒存放在冷冻箱或冷藏箱中。

存放在冷冻箱中的干片盒，需要至少60分钟才能达到室温；

大多数存放在冷藏箱中的干片盒，需要至少30分钟才能达到室温。

关于每种检验项目的具体信息，请见“Vitros检验方法”。

注意：

1.钠干片贮存在冷冻室中，取出后至少回温2小时。

对于准备在二周内使用的钠干片，可暂时放在冷藏室，取出后回温至少90分钟。

2.铝箔包装袋可保护干片弹匣，使其远离极端的湿度和强光环境。

在干片弹匣温度达到室温之前，不要打开铝箔包装的密封。

3.干片回温时间不得超过24小时。

用不同色彩作标记的外包装

淡紫色（冷藏箱）

蓝色（冷冻箱）

关于正确存放的更多信息，请见“Vitros化验方法”。

干片盒的外包装纸盒上标有检验项目名称、干片批号、失效日期和用一个小温度计显示的贮存温度。

外包装纸盒用不同色彩作出标记，以指明其所需的存放环境。

需存放在冷冻箱里的以蓝色标记，可存放在冷藏箱中的以淡紫色标记。

如果包装和存放正确，那么在纸盒上标明的失效日期之前，干片都可保持稳定。

更多关于适当的存放方法的信息，请见“产品说明书”。

干片盒编码标签

每个干片盒的顶部和侧面都有标签。

侧面标签的底部可供分析仪的条码扫描器读取。

顶部标签

SS1SS2第一行

黄色白色侧面标签第三行第二行

顶部标签用不同的色彩作标记，对应不同的干片供应装置。

黄色指明是干片供应装置1，而白色指明是干片供应装置2.

侧面标签用检验项目的名称、世代号和批号来识别每个干片盒。

●第一行在左上角显示缩写的检验项目名称。

检验项目名称的右侧是两位数的干片世代号。

最右侧是一个条码，该条码只是在干片的制造过程中使用。

●第二行显示涂料配方、M批号和顺序号。

这些用空格分隔开的号码，详细标明了独特的公式和制造工艺，帮助对干片在制造过程中所使用的材料进行识别。

●第三行显示一个8位数的批号。

批号对那些作为同一组生产的、从而具有相同的化学性质、世代和涂料的干片/干片盒进行识别。

批号的前两位数确定具体的化学性质，随后的两位数确定世代号，而最后的四位数确定干片的涂料批号。

注：

不要在干片盒上的有条码的标签上写画，那样会损坏标签。

无论以何种方式损坏标签，分析仪的条码扫描器都不能读取标签了。

干片回温：

除Na+必须在室温平衡2小时外，其余试剂均应在室温平衡达1小时。

当试剂平衡至室温后，24小时之内必须装入试剂仓；

如果内包装被打开，则应立即装入试剂仓。

1．2定标品

1．2．1定标操作

定标是将系统响应值与患者分析物浓度建立关联。

必须经常定期定标来判断整个检测系统包括分析仪，试剂或环境是否发生改变或漂移。

必须使用与“Vitros干片”配套的定标品，对由分析仪执行的所有检验项目应进行适当校准，即定标。

分析仪的定标需要使用两个或更多的Vitros定标品，这些定标品可根据分析物的浓度不同，提供相应的定标。

SAVs（）

定标品一般是人工的，与人血清不完全相同，由于两者存在“基质效应”的差别，当环境条件改变时可能会使检测结果发生偏移，例如，制造高值胆红素定标品时，需将PH升高来溶解大量胆红素，当将该定标品加入干片后，由于PH的改变，此时干片中发生化学反应与患者血清参与的化学反应略有不同。

为了消除基质效应带来的差异，出厂时给每个定标品赋予不同的“补充分配值”（SupplementaryAssignedValues，SAVs）。

通过SAVs将参考方法的准确性延续至患者检测结果，而与定标品基质成分无关。

对所有的检验项目进行精确的定标时，需要使用最新制备的定标品或一直以正确方法存放的定标品。

定标品包括冻干的定标品和液体定标品。

定标的条件：

●定标应该每6个月进行一次；

●试剂的批号改变时

1.干片批号改变时；

2.当离子检验项目用的参比液的批号有改变时；

3.当免疫检验项目用的免疫清洗液的批号有改变时；

●政府规定要求时

还需要对以下情况定标：

●进行了大量的维护工作

●质量控制性能超出范围

●其它的状况原因，例如，输入了新的RT/CM校正因数，或实验室环境温度发生了超出±

5C的变化。

在你为分析仪的定标进行了编程之后，分析仪对定标品进行处理并计算出新的定标参数。

然后，这些定标参数被保留在硬盘上，以便用于确定病人试样和控制液中分析物的浓度。

下面是成功定标所必需的条件：

●正确的仪器维护

●分析仪的温度和湿度在技术要求之内

●正确的定标品或质控品复原技巧

●移液管或取液器的正确使用

●干片和定标品的正确存放条件

●正确的定标品使用时间，干片和参比液在分析仪上的正确存放时间

●正确的定标品批号

●系统内可接受的精度

●材料新鲜（干片、定标品和液体）

1．2．2定标品复原

∙将所需的装有定标品材料的瓶子和稀释液从冷藏箱或冷冻箱中取出。

∙使定标品和稀释液达到室温，放在冷藏箱中的材料至少要60分钟。

（蛋白类定标液从冷藏回温至少30分钟）

重要提示：

不要试图采用将这些材料放置在温水池中的方法使它们变暖；

这样做可能使这些定标品失效。

∙液体定标品的操作：

1.轻轻地将液体定标品颠倒数次，使液体混合。

2.在即将使用之前，再将每个瓶号的金属密封件和橡皮塞除去。

不要将定标品敞开放置。

∙复原冻干的材料：

所使用的稀释液和冻干物的编号必须相符，否则会使定标无效。

1.轻轻地将稀释液颠倒数次使其混合均匀。

不要摇晃，避免产生气泡。

2.轻轻从顶部敲击装冻干的定标品小瓶，除去吸附在瓶盖上的定标品。

3.在溶解前将冻干的定标品及相应稀释液的金属密封件除去，并拔出瓶塞。

4.使用一个清洁、干燥、A级、容积3.0毫升的移液管或者校准好的取液器，将适当的稀释液移送到每个装着冻干的定标品的瓶子中。

5.用瓶塞重新将瓶盖好。

6.将多余的稀释液丢弃掉。

7.将复原的定标品放置达30分钟。

每隔一段时间就将瓶号水平旋动和上下颠倒，以确保定标品彻底混合均匀。

不要摇晃。

8.肉眼观察并确保所有冻干品的微粒都完全溶解后再使用。

9.在不使用的时候不要打开瓶盖，建议操作者在瓶子上标注复原时间和操作者。

10.立即使用或将定标品放在2°

–8°

C冷藏箱中（冷藏不超过24小时）。

为了最大限度地减少酶活性的损失，用于多点速率检验项目的定标品测定前在室温下保存的时间不得长于30分钟。

1．2．3验证定标和结果分析

对可用于分析仪和分析物的质控品进行分析，以此来验证每一项定标。

应该至少在两个控制级别上进行分析，包括高值及低值质控品。

下列情况说明定标通过了验证：

∙分析仪未报告任何定标错误。

∙质控品的结果处于实验室确定的可接受范围之内。

如果质控超出了范围，应检查：

●仪器是否得到正确维护

●温度和湿度是否在技术要求之内

●定标品或质控品所采用的复原技术是否符合要求

●移液管或取液器的使用是否准确

●干片和/或干片盒的存放是否正确

●定标品是否在使用期限之内，或干片、参比液和免疫清洗液在分析仪上存放的时间是否在存放期限之内

●定标品批号是否正确

●系统内部的精度

●材料是否新鲜

检查过上述条件后，再次运行定标操作。

定标报告的解读

报告参数说明：

TEST–被定标项目的名称

FLUID–被定标的液体名称

KIT#-该定标所使用的定标液组合的号码

SITETEMP–定标该项目时的环境温度值

LOT/GEN–被定标的该项目的干片批号

PARAMETERS–该定标成功后所计算出的定标参数。

其中包括：

INTERCEPT–截距

SLOPE–斜率

CURVATURE–曲率

KITLOT–所使用的定标液批号

BOTTLE–所使用的定标液的瓶号

SAV–由J&

J提供的分配给每一个定标液浓度的增补值

RESPONSE–测量到的干片反映

IIMPEDANCE–阻抗值，仪器用来保证电极测定的真实性。

其中包括：

IMPEDANCESLOPE–阻抗斜率

IMPEDANCEINTERCEPT–阻抗截距

1．3质控品

1．3．1干式生化质控品的分类

1、PVI/PVII----常规质控品（常规项目）

2、LIQPVI/LIQPVII----液态质控品（NH3、PROT）

3、ISOPVI/ISOPVII----同工酶质控品（CK、CK-MB）

4、TDMPVI/TDMPVII/TDMPVIII----药物浓度质控品

5、CRPPVI/CRPPVII----C反应蛋白质控品（CRP）

6、UPROPVI/UPROPVII----尿蛋白质控品（UPRO）

1．3．2质控操作介绍

在VITROS250上运行质控品可以保证系统性能。

除非有单独实验方法学要求，您可用商品化高值及低值质控品。

质控运行程序与样品检测相同。

需要在以下情况时检测质控。

●质控最低频率为每24小时一次（不同地方可有更高频率要求）。

●在定标后。

●日常保养外的其他服务活动后，如更换灯泡。

●白参考校正实验后更新校正因子。

●实验室温度比定标时变化5C以上。

选择和准备质控品

一些商品化质控品内含有的其它组分和添加剂（如防腐剂和稳定剂）会使质控与真正的人血清基质不同。

另外，质控液中酶活性会受液体中缓冲液，pH和稀释液温度影响。

我们推荐您使用VITROS质控I和II。

VITROS生化干片最适用于检测人血清，而质控品并不总与患者真实样品相似，因此，在选择质控液时请考虑以下因素：

1.分析组分：

∙确认质控品中有您要分析的组分，尤其对于未结合胆红素Bc,高密度脂蛋白胆固醇HDLC及脂肪酶。

∙用包含有ditaurinebilirubin（Bc的代用品）来监测Bc（VITROS质控品，Chemtrack液体胆红素质控，Ortho增强胆红素质控是现有的几个例子）。

2．基质

∙质控是人还是动物基质。

比如淀粉酶和白蛋白在牛血清中结果比人血清中要低。

∙是冻干或液态质控。

液态质控中含有稳定剂（尤其是乙二酰乙二醇）与干片的检测要求不相符和。

3．人以外其它来源分析组分

∙源于动物的分析组分在干片上有不同的反应，特别是淀粉酶，乳酸脱氢酶，脂肪酶，碱性磷酸酶等酶类。

例如猪淀粉酶和脂肪酶比人源性的酶检测值明显要高。

4．不同瓶之间浓度变化（对于氨检测影响较大）。

5．液体的稳定性（尤其是氨，钙离子，CO2和酶）。

6．不同分析水平的分析浓度（正常范围及不正常范围）。

冻干质控品的复原

∙制备之前需要将冻干粉平衡到室温。

由冷藏冰箱取出的瓶子需要在室温放置大约30分钟以上，冷冻冰箱取出的瓶子在室温下放置60分钟以上。

∙轻轻地颠倒瓶子几次以完全混匀当中的内容物，不要摇晃瓶子产生气泡。

∙轻轻弹瓶子几次，使粘在瓶盖上的冻干粉到瓶中。

∙打开封口及塞子。

注意不要使瓶子长时间敞开口。

∙在每瓶中用干净干燥的A级加样管或加样枪加入3毫升正确的稀释液，丢掉剩余的稀释液。

∙盖紧盖子，轻轻倒置瓶子不要晃瓶子。

手工不连续振荡需要大约３０分钟。

肉眼观察所有冻干粉都完全溶解。

∙未使用之前保证质控品密闭。

标示复溶的日期，时间。

∙复溶质控品在2–8°

C（36°

–46°

F）可保存最大稳定性。

使用时将复溶物从冰箱取出，混匀，将部分装入杯中剩余盖好再放入冰箱保存。

使用前将复溶液室温大约放置１５分钟使其平衡至室温，试验后丢弃掉剩余下的质控品。

∙复溶的质控品可以保存７天。

液态质控

VITROS液态质控不需要复溶，按以下准备液态质控品：

∙在打开之前需要平衡到室温（大约需要３０分钟）

∙轻轻地倒置瓶子几次以完全混匀内容物，不要摇晃瓶子。

∙使用前打开封口和盖子

∙不使用时将质控品密闭，初次使用时，建议您标示日期和时间。

∙质控品在2°

F）.可保存最大稳定性。

使用时将质控品在从冰箱取出，混匀，将部分装入杯中，剩余质控品在盖好并用膜密封后放入冰箱保存。

试验后丢弃掉剩余下的质控品。

质控品使用后可以保存７天。

如果您使用其他生产厂家的质控，请按照其说明制备处理

复溶或开瓶后质控品的稳定性

1、PV2－8°

C保存，7天内稳定；

ALKP，BuBc，Ca，CK，TBIl3天内稳定。

2、LIQPV2－8°

C保存，7天内稳定

3、ISOPV2－8°

C保存，5天内稳定

4、TDMPV2－8°

5、CRPPV2－8°

6、UPROPV2－8°

有关稳定性的具体时间请参照质控品工作表

1．3．3质控品工作表中名词的定义

世代（GEN）是指定标时可用相同补充分配值（SAVs）的试剂批号。

相同世代的试剂批号在检测表上有相同的均值范围。

世代号在每个试剂盒的外包装上及每个干片闸标签的侧面和顶端都能找到。

质控的均值范围（RangeofMean，ROM）是指Vitros生化系统上产生的该批号的最低及最高的平均值范围，是每个试剂盒特定世代号所特有的。

在质控检测表中，每个被测物的每个世代号都有其相应的ROM。

基线标准偏差（BaselineSD）是Vitros生化系统质控系统使用的一个值，和均值一起计算12s，22s及13s的质控规则限，用于每天的质控判断。

质控检测表中实验室内SD是Vitros生化系统质控系统基线SD（参考“使用质控”部分）所推荐的值。

在质控检测表中，每个被测物都有相应的SD值，包括天内及天间重复检测的变异。

天间变异包括由不同试剂弹匣，不同质控瓶，环境因素及保养故障产生的小变异。

这些值不包括使用不同试剂批号或多次定标而产生的变异。

实验室内SD可以通过实验室每天的质控结果计算而成，可能与质控检测表中的实验室内SD不同。

计算得到的实验室内SD与质控检测表中的实验室内SD可以相比较，但我们推荐在质控系统中使用质控检测表中的实验室内SD。

定标验证是通过观察每个质控水平的结果，评估定标是否被接受的手段。

结果至少要在质控的ROM内。

原始基线均值是系统定标后立即进行两个值的连续（一个样品杯重复两次）测定的平均值，必须使用新的开瓶的PV，用于验证定标。

这些值在Virtros生化系统QC体系中当作基线均值运用，直到获得更有力的均值评估方法。

如果没有使用推荐的质控品为每日质控，那么记录原始基线均值作为定标验证手段，用于错误分析和前期定标的验证。

基线均值是观察20-30天质控结果的平均值。

在Vitros生化系统中，它应替代原始的基线均值，因为用它来评估均值的准确性要优于原始的基线均值。

这个值可以通过Vitros生化系统的软件计算而来，参见附5。

当前均值是用于建立基线均值后，或有不明原因的系统改变后，周期性地评估Vitros生化系统。

当前均值将是每月计算的均值。

这个值可以通过Vitros生化系统的软件计算而来。

当前SD是当前均值计算而来的标准离散度。

Delta（δ）是两个平均值的绝对差。

如果δ比δ表中的值要高许多，说明两个值是不同的。

依据实验室的操作规程及差值的大小可能需要进行错误分析。

δ表中n=2的值是适用于任何质控评估的标准。

表中的δ值是通过标准统计学技术计算而来，用于两个均值之间的比较。

我们用质控检测表中的SD作为比较的基础。

对小样本来说（n=2），计算的δ值保证两个均值不同（其实相同）的可能性很小。

样本数在20以上，计算的δ值保证两个不同的均值相同的可能性很小。

这样，对实验室人员来说，某一型误差发生的危险与样本量增加,对评估两个均值差异的影响可以得到一个平衡。

1．4离子参比液

参比液是用于离子法检测钾，钠，氯时使用的参照溶液，反应成分为1.2M氯化铯、0.2M碳酸氢钠和0.07M氢氧化钾。

Vitros350/250系统使用同一种参比液，每盒供300个测试使用。

Vitros950系统的参比液每盒有800个测试。

储存条件：

∙不要摇晃。

.

∙储存在2°

F），未开盖的参比液在有效期内都稳定。

∙不得冷冻。

操作步骤：

1.在打开前参比液要达到系统的内部温度，最少需要30分钟，不得大于72小时。

2.轻轻地将参比液颠倒数次使其混合均匀。

3.参比液打开后需要立即放入机器中。

4.参比液在机器上可以存放24小时。

不使用的参比液从机器上取下后盖上盖子冷藏保存。

5.24小时后丢弃参比液。

1．5免疫洗液

VITROS免疫冲洗液在VITROS生化系统上作为免疫速率分析的洗液使用。

免疫洗液的操作：

1.使未开封的试剂杯包装升温到系统内部温度（至少需30分钟–最多24小时）；

2.轻轻地颠倒，充分混匀。

切勿震荡。

3.打开试剂包装，取出液杯并取下塞子；

4.然后立即按VITROS操作指导的说明将加液小碗放置到分析仪上；

5.按照VITROS操作指导的说明分析样本；

6.3天后，丢弃液杯及其中剩余的液体。

每次免疫洗液批号更改时，需定标CRBM、CRP、DGXN、PHBR和PHYT。

1．6特殊项目介绍

1．6．1Vitros胆红素的方法学

实验室人员和临床医师都习惯于采用术语直接胆红素来表示与葡萄糖醛酸结合的胆红素（Bc）,而用术语间接胆红素来表示未结合胆红素（Bu）。

血清胆红素的各种不同组份浓度的分别测定，比单独的总胆红素测定（TBIL），可以为临床医师提供更为重要的诊断信息。

该信息可以协助临床医师进行诊断、治疗以及监控已确诊的病情。

依据现在采用的分析方法，详细的胆红素组份可以被逐一直接测定，或通过其它胆红素组份的直接测定结果而计算获得。

而采用Vitros化学分析系统，则TBIL、Bu和Bc都是直接测定的。

VITROS结合非结合胆红素干片方法通过在VITROS生化系统上使用VITROS结合非结合胆红素干片和VITROS定标品试剂盒 

4 

（CalibratorKit 

4）来完成。

VITROS结合非结合胆红素干片为涂覆在聚酯基材上的多层分析成分。

将一滴患者样本滴在干片上，并通过扩散层均匀地分布到下面的试剂层。

在扩散层中的咖啡和苯甲酸钠（sodiumbenzoate）的作用下，Bu从白蛋白中分离出来，并且与Bc一起通过屏蔽层迁移到试剂层。

蛋白质（包括白蛋白结合的δ胆红素和血红蛋白）、脂类和脂色素保留在扩散层中。

屏蔽层可以有效阻断可能的干扰成分以防其进入扩散层，从而防止它们影响测量。

在试剂层中，Bu和Bc附着于一种阳离子媒染剂上。

这样，胆红素的吸收率峰值发生偏移，使摩尔消光系数显著升高。

当与媒染剂结合后，胆红素单葡萄糖醛酸（mono-glucuronides）和双葡萄糖醛酸（di-glucuronides）具有相同的光谱，并且数量上一起表示为Bc。

在400至420nm波长附近，非结合胆红素和结合胆红素具有类似的摩尔吸收特性；

而在460nm波长，非结合胆红素具有比结合胆红素更高的摩尔吸收率。

因为这些独特的光谱特性，两个波长（400和460nm）处的反射强度被用于确定非结合胆红素和结合胆红素的浓度。

而其它多数惯用的胆红素方法，特别是那些采用重氮化合物法，只能直接测定总胆红素和直接胆红素组份（约等于Bc），而不能直接测定未结合胆红素（Bu）。

对于重氮化学法，一旦总胆红素和直接胆红素的值测定得出后，未结合胆红素（Bu）可由计算得出（间接胆红素＝总胆红素－直接胆红素）。

虽然此途径不失为一种可供选择的可行方法，但重要的是必须认识到：

任何一种被测组份的测定中的变异及差错，都可能对间接胆红素的计算产生比较明显的错误。

而在Vitros化学系统上，由于使用VitrosBuBc干片直接测定未