第二节 酶反应与酶抑制剂Word文件下载.docx

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肠还释放脂酶，水解脂肪，于是食物从大分子分级分解成小分子。

当食物变成单糖，氨基酸，脂酸后，便在肠壁吸收，渗入到血流，运输到各种组织。

当食物代谢分解释放的能量有盈余时，酶的催化作用又促使产生一些化学物质，把能量暂时储存起来，而当需用时，又可迅速释出。

例如三磷酸腺苷（ATP）即为能量储存物质，分子内有3个磷酸基，在分解而裂去一个磷酸基时，可释出33千焦能量，变为二磷酸腺苷（ADP）。

同样，二磷酸腺苷再水解，脱去一个磷酸基，变成单磷酸腺苷，又可释出33千焦能量，但单磷酸腺苷再水解脱去最后一个磷酸基时，只释出12.5千焦能量。

2.2青霉素

许多药物的作用机理，在于抑制酶的催化作用，从而干扰生命活动。

这种药物的结构，可能与酶反应的底物的结构相似。

青霉素和头孢菌素的抑制细菌作用，是由于干扰细菌合成细胞壁。

细菌依赖着细胞壁保护其细胞，细胞壁由一些多糖链和多肽链交织而成。

在交织构成过程中，一条包括由D－丙氨酰－D－丙氨酸二肽的链加到一条有几个甘氨酸组成的肽链上，这加成反应由转肽酶与羧肽酶所催化。

青霉素和头孢菌素的构象和D－丙氨酰－D－丙氨酸的构象十分相象，因之青霉素正好适应D－丙氨酰－D－丙氨酸在酶上的作用部位。

而药物与酶分子作用部位的结合，意味着占有这部位而排斥了丙氨酸二肽的结合，这样就干扰了肽链的交织，从而阻止了细胞壁的构成，于是危及细菌的生长。

这作用称为代谢拮抗（Biologicalantagonism），丙氨酸肽链是代谢物，青霉素是拮抗物。

拮抗物（Antaganist）与代谢物（Metabilite）间存在一定构象关系。

青霉素和头孢菌素的半合成类似物中，也存在类似构效关系，只有构象与前述青霉素或D－丙氨酰－D－丙氨酸相似的，才有抑菌作用。

青霉素类药物D--丙氨酰丙氨酸

头孢菌素类化合物环内第三位存有双键，该双键如迁移至第二位，便失去抑菌活性，因为双键位置的变异，也同时意味着构象的差别。

在头孢菌素类化合物中，羧基占有环上的假平伏键。

在这构象中，酰氨基的氧原子与羧基的碳原子相距较近。

在没有抗菌活性的△2－头孢菌素类化合物中，羧基处于环上的假直立键。

在这构象中，酰胺基的氧原子与羧基的碳原子相距较远。

前者构象与丙氨酸二肽相近，因此也可在酶上同一受体部位作用，后者的构象就有偏离，就不适应多肽的作用所在，因此不能与酶很稳固结合而产生抑菌作用。

头孢菌素类△2－头孢菌素类

（有抗菌活性）（无抗菌活性）

2．3抗艾滋病毒药物

艾滋病即获得性免疫缺陷综合症（Acquiredimmunedeficiencysyndrome），病毒是RNA病毒，以RNA为模板，合成DNA，通过将有关核苷酸制成磷酸酯而成为长链。

因为所用原料包括脱氧胸腺嘧啶核苷，将其3位OH基改为叠氮基成为齐多夫定（zidovudine,AZT）与脱氧胸腺嘧啶核苷结构相近，都能与逆转录酶结合，但叠氮基不能磷酸化，不能形成DNA长链。

艾滋病患者服用齐多夫定后体重增加，免疫功能改善，免疫T细胞增加，高剂量组患者体内找不到病毒。

齐多夫定虽不能根治艾滋病，但可降低该病死亡率，可减少并发症的发作及严重性。

脱氧胸腺嘧啶核苷齐多夫定

一些类似的药物也可抑制艾滋病毒繁殖，如Didanosine,DDI可延缓艾滋病毒进程，延长患者寿命；

Zalcitabine（ddC）与齐多夫定合用，可见体内免疫T细胞增多，dioxolane-T以O代替CH成非糖结构，代谢降解减慢，对艾滋病毒明显抑制；

还有stavudine（D4T）

didanosinezalcitabine

ddIddC

stavudinedioxolane-T

dtT

艾滋病毒RNA的外衣是蛋白质。

病毒蛋白由大分子的前体蛋白水解而成，水解的断裂点是苯丙氨酸与脯氨酸间的肽键和酪氨酸与脯氨酸间的酰胺键。

模仿蛋白质的片断结构，带有苯丙氨酰脯氨酸的结构改造的化合物成为indinavir,nelfinavir,ritonavir,raquinavir是艾滋病毒蛋白水解酶抑制剂，应用后迅速降低病毒浓度。

2．4血管紧张素转化酶抑制剂

肾脏分泌有一种酶称肾素（Rennin），又称肾高血压蛋白酶，产生后分泌至血循环中，使血浆中一种球蛋白分解，产生血管紧张素（angiotensin），这种蛋白称血管紧张素原（angiotensinogen），来自肝脏。

裂去羧端的肽段后，生成10个氨基酸组成的血管紧张素Ⅰ，后者又经在肺脏产生的血管紧张素转化酶（angiotensinconvertingenzyme）的催化作用，再裂去羧端的两个氨基酸，成为八肽的血管紧张素Ⅱ。

肾素，血管紧张素，醛固酮合成一个系统，对维持生命活动起重要作用。

醛固酮调节电解质的平衡与血压的上下，由血管紧张素Ⅱ诱导分泌。

血管紧张素Ⅱ又通过收缩小动脉以升高血压，从而起到调节血压的作用。

当体内钠离子浓度下降时，肾素与血管紧张素水平就升高；

当钠离子过量时其水平又降低。

肾素，血管紧张素系统保证体内一定的钠离子浓度。

如果体内调节失灵，产生过量血管紧张素与醛固酮时，又可导致高血压。

肾素

NH2－天冬－精－缬－酪－异亮－组－脯－苯丙－组－亮―|―缬－异亮－组……

血管紧张素原

转化酶

NH2－天冬－精－缬－酪－异亮－组－脯－苯丙－|－组－亮―COOH

血管紧张素Ⅰ

NH2－天冬－精－缬－酪－异亮－组－脯－苯丙－COOH

血管紧张素Ⅱ

血管紧张素Ⅱ是强效的升高血压物。

血管紧张素Ⅰ本身没有升高血压作用。

如果抑制血管紧张素转化酶从而限制血管紧张素Ⅱ的产生，自应有降低血压作用。

1965年，Ferrira等发现拉丁美洲所产毒蛇毒汁中提取的物质可阻止狗产生实验性肾型高血压，其有效成分是一组由9－13个氨基酸组成的多肽物质，对血压的效应正是由于抑制了血管紧张素转化酶。

这组多肽相互间有着结构上的相似性，其中替普罗肽（teprotide,SQ20881）的氨基酸顺序为：

NH2－焦谷－色－脯－精－脯－谷胺－异亮―脯－脯－COOH

它对好几种动物模型都有降压作用。

当时血管紧张素转化酶的结构尚未阐明，但知其为一种羧肽酶，与胰羧肽酶相似，1973年早就发现D－苄基丁二酸是羧肽酶的竞争性抑制剂。

血管紧张素转化酶是二肽羧肽酶，其催化作用水解裂去2个氨基酸。

酶上的阳离子部位与酶中心的锌离子间距离比羧肽酶A的相应距离多一个氨基酸残基。

鉴于脯氨酸对替普罗肽所起的作用，便合成了2－D－甲基丁二酰脯氨酸（SQ13，297）与2－D－甲基戊二酰脯氨酸，实验结果抑制血管紧张素转化酶作用远比D－苄基丁二酸强。

在其分子中，羧基是与酶系统的锌离子作用的基团，将其换为氨基、酰氨基、胍基等，作用并不增强，但如换为巯基，可生成难以解离的硫醇锌盐，与酶的结合更为牢固，抑制作用更强，称卡托普利（Captopril,SQ14,225），又称巯甲丙脯酸。

SQ13,297

卡托普利分子中的巯基，易与体内一些蛋白作用，从而产生皮疹等副作用。

因而在卡托普利的基础上又开发了伊那普利（enalapril），赖诺普利（lisinopril）等新的血管紧张素转化酶抑制剂，作为心血管系统药物。

2．5酶蛋白的结构与作用

酶是生命作用的重要催化剂，主要由蛋白质组成。

有的酶还要其它物质配合才能发挥其功能，如有的酶须有金属离子，有的酶须有辅酶。

辅酶只是松弛地结合在酶上，但有的辅酶必须破坏化学键才能除去，称为补基（Protheticgroup）。

酶有活性中心。

在带有金属离子的酶内，金属离子往往处在活性中心，例如单胺氧化酶有铜离子，血管紧张素转化酶有锌离子。

底物与活性中心的结合，便是经酶的催化而进行对生命活动有重要作用的生化反应。

抑制剂也能与活性中心结合，但不能进行类似的生化反应，却因占有了活性中心，从而阻断了酶的催化功能。

组成酶蛋白的各种氨基酸带有不同官能团，成为蛋白螺旋的各种侧链，其中赖氨酸，精氨酸、组氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、色氨酸、天冬氨酸等带有极性基团，因而有亲水性。

有些是碱性基团，电离可生成阳离子（－N＋H3），有些是酸性基团，电离可生成阴离子（COO－），有些氨基酸带有甲基，异丙基等烃基，是亲脂而疏水的基团。

苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、组氨酸等带有苯基或杂环芳香体系，这些都是Л电子体系的平面结构。

酶的活性中心，可能正是氨基酸所带的官能团。

这些基团与药物分子的相应基团由于相互作用而结合，乃产生药理效应。

2．6酶催化反应的化学过程

酶催化的代谢反应的特色为迅速完成，催化反应的过程主要是质子或电子的转移。

在反应中止时，酶又恢复了原来的化学结构，以下两个实例说明酶反应的原理。

核糖核酸的功能为将核糖核酸的磷酸酯键水解，反应历程与用稀的氢氧化钠水解核糖核酸相似。

酶催化反应与NaOH液不同之处在于酶的活性中心的质子接受体A与质子给予体HB的两个部位同时配合作用。

经第一步反应后A转变为HA，乃改以质子给予体形式作用；

HB成为B，乃以质子接受体形式作用，再进行第二步反应。

这时A，B又恢复原形，又可循环往复反应不止。

正因为A，B同时配合，催化的效率远胜于NaOH单靠OH，因而可以快速进行。

在核糖核酸酶的第12位组氨酸有碱性咪唑基，119位组氨酸有酸性咪唑基

碱性咪唑酸性咪唑

第41位的赖氨酸的铵离子也可能参与催化反应

第二个例子是磺胺药物在体内的代谢催化，转化反应为氨基乙酰化

催化酶的第58位是组氨酸，102位为天冬氨酸，195为丝氨酸，这三个氨基酸的咪唑基、羧基、羟基分别参与反应。

通过电子转移，先将醋酸的乙酰基暂先转移到丝氨酸的羟基，然后磺胺结合到咪唑基，再与乙酰基作用，这时酶上的基团又恢复原状。

药酶上的羧基，羟基，咪唑基，可说是酶的活性中心。

对所催化的反应来说，酶蛋白的氨基酸所带官能团，分别起着不同作用：

（！

）如第一例的A与B，或第二例的羧基，羟基，咪唑基，实际参与了催化反应，可说是酶的活性中心。

（2）另有一些基团，本身虽未参与反应，却将底物（如前例的核糖核酸或磺胺）结合在活性部位附近，以利反应

（3）还有一些基团并不与底物结合，但相互作用保持了酶蛋白的构象，使活性构象有一定空间排列，对酶的作用也是必要的。

（4）酶蛋白的另一些基团可能不起重要作用。

2．7药物与酶的结合力

药物如抑制酶的作用,必须能与酶牢固地结合.结合通过两者的一些原子或基团产生结合力.

（1）共价键多数药物与酶（以及下节所说的受体）的结合是可逆的,当细胞外液的药物浓度降低时,结合所成的复合物又复解离.仅少数药物如烷化剂、酰化剂等,可与受体产生共价键结合,例如甲氮芥（Mechlorethamine）可与活性氢（如SH，NH）进行烷化反应。

青霉素可将细菌细胞壁上的组分酰化,一些砷化合物或汞化合物可与蛋白上的巯基生成硫醇盐。

（2）离子键药物分子内的羧基或磺酰基在生理酸碱度中可电离为阴离子,与酶分子的阳离子产生静电结合。

药物分子的脂肪胺可与蛋白质的羧基或核酸的磷酸基作用，因此大量的天然药物（如生物碱）与合成药物是胺化合物。

（3）氢键药物与酶分子中所带的羰基，酯基，酰胺基，醚基，酯基，羟基等可形成氢键，成氢键后体系的能量降低。

不过，这些基团在体液中与水分子也可形成氢键，药物与酶结合时，也同时解离与水分子的氢键，就部分抵销了与酶生成氢键所降低的能量。

（4）范德华引力范德华引力是较弱的力，但若干基团间产生的引力加在一起，也可积小成大。

此外，药物的非极性部分与酶的非极性部分靠近时，将其水分子挤出，也可降低体系的能量，使复合物更趋稳定，这种作用称疏水性结合。

（5）电荷转移共轭体系的电子易于流动，当药物与受体上的苯基、杂环基、羰基等共轭基团并行时，电子产生流动，生成电荷转移复合物。

一些药物与酶的作用方式，举例如下：

二氢叶酸还原酶催化二氢叶酸还原为四氢叶酸。

四氢叶酸为生成嘌呤及嘧啶的重要物质。

甲氨蝶呤是二氢叶酸还原酶的抑制剂，从而干扰核酸的生成，于是抑制细菌的生长，同样还抑制白血病癌细胞。

二氢叶酸还原酶的氨基酸顺序已经测定，酶与甲氨蝶呤间结合也经用X射线衍射阐明。

药物的杂环与酶的第6和第7位的两个丙氨酸所成肽链平行，产生电子转移，药物与第2位氨基与酶上113位苏氨酸的羟基产生氢键，第4位氨基与酶上第5位异亮氨酸生成氢键。

环上第1位氮原子与酶的27位天冬氨酸羧基相近，可能生成离子键。

药物分子侧链氮原子的取代甲基与酶上28位和50位的亮氨酸以及54位和94位异亮氨酸的烃基产生范德华引力。

药物分子第1位羧基与酶上57位精氨酸胍基产生离子键，3位羧基与酶上32位赖氨酸和52位精氨酸的碱基相近，也可生成离子键。

若干磺胺药物是碳酸酐酶抑制剂，因而有利尿作用，并可治疗脑积水与青光眼，乙酰唑胺（Acetazolamide）是强大的碳酸酐酶抑制剂，该酶催化二氧化碳与水的作用

X射线衍射指出，该酶以锌离子为中心，与酶的肽链上93，95，117位的三个组氨酸的咪唑基上的氮生成配位键，锌离子的第4个配位键可以结合一个水分子，该水分子的氢原子又可与酶上197位的丝氨酸的羟基以氢键结合。

当甲酰唑胺与酶作用时，磺酰胺上的氮便占有锌离子的第4个配位价，氮上的氢又可与丝氨酸的羟基生成氢键，这样就挤去了水分子，从而抑制了水与CO2的作用。

此外，磺酰胺的硫上氧原子又与邻近的198位丝氨酸的羟基形成氢键，乙酰基上羰基也与酶上91位谷氨酰胺产生氢键，甲基又与酶上129位苯丙氨酸的苯基以范德华力相吸引。

硫氧杂环是平面基团，正插在酶上亲水部位与疏水部位之间。