S100蛋白S100作业指导书Word文档格式.docx
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1瓶,9ml。
浓度1.0mg/l,磷酸缓冲液50mmol/l,pH7.2含防腐剂。
校准品:
Cal1阴性定标液(白盖),2*1ml血清,含防腐剂
Cal2阳性定标液(黑盖),2*1ml血清,含防腐剂
质控品:
ElecsysS100质控品1和2(PreciControlS100)
货号03330648
其他所需材料:
Elecsys2010/cobase411分析仪所需材料:
货号
11662988122,ElecsysProCell,6x380mL,
系统缓冲液
11662970122,ElecsysCleanCell,6x380mL,
检测池洗液
11930346122,ElecsysSysWash,1x500mL
附加洗液
11933159001,SysClean适配器
11706829001,Elecsys1010分析杯,12x32
反应管,或货号11706802001,Elecsys2010分析杯,60x60反应管
11706799001,Elecsys2010分吸吸头,30x120移液管吸头
ModularAnalyticsE170/cobase601
免疫分析仪所需材料:
货号04880340,ProCellM,2x2L
货号04880293,CleanCellM,2x2L
货号03023141001,PC/CC杯,50杯用于在测定前预热ProcellM及CleancellM。
清洗液,用于在检测完毕后或更换试剂时清洗系统。
03005712190,ProbeWashM,12x70mL货号.
货号12102137001,分析杯/分析吸头组合装M,48分析杯x84反应管或加液器吸头,废物袋
货号03023150001,WasteLiner,废物袋
货号03027651001,SysClean适配器M
三种分析仪均需要的材料:
货号11298500316,ElecsysSysClean,5x100mL系统清洗液
4.仪器和校准
使用仪器:
瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys2010/E170/E411全自动电化学发光免疫自动分析仪
仪器校准:
每批S100试剂盒必须用新鲜试剂和S100Cal1,Cal2定标一次。
另外,以下情况需要再次定标:
Elecsys2010:
•一个月(同一批号试剂)
•7天(放置仪器上的同一试剂盒)
各种分析仪均适用的情况:
根据要求进行标定:
如质控结果超出范围时;
根据规定进行多次标定。
5.操作步骤(以E170为例)
5.1校准操作步骤:
在编缉各项目的参数时,已经在Application—Calib菜单中定义好了定标类型和几点定标。
因此在对各项目进行定标时,只需在定标菜单Calibration中进行即可。
3.2进入Calibration—Status菜单,用鼠标选择需定标的项目,再根据需要点单点定标(BLANK键)或两点定标(TWOPOINT!
)、跨距定标(SPAN键)、多点定标
(FULL®
),再选择其它项目进行相应选择,最后点SAVE将定标物放入在Calibration—Calibrator中定义好的位置,点Start,再点Start,仪器开始定标。
在Calibration—Status菜单中看定标结果,点CalibrationResult键看定标结果,点ReactionMonitor键看每个定标物的反应曲线。
5.2样本检测程序:
单个样本输入,在主菜单下选择Workplace-Testslection,在SequenceNo栏输入标本号,然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目,点SAVE键,样本号自动
累加。
批量常规标本的输入,在主菜单下选择Workplace-Testslection,在SequenceNo栏输入起始标本号,然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目,点REPEAJ
输入该批标本的最后一个标本号,点OK即可。
进样分析,将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好,放入进样盘内,按START®
,输入该批上机标本的起始标本号,再点START键,仪器自
动开始推架检测标本。
6.质量控制
用ElecsysS100质控品1和2(PreciControl)。
质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。
质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。
检测值应落在确定的范围内,如出现质控值落在范围以外,应采取校正措施。
7.计算方法
仪器会自动根据Cal1和Cal2的测定值计算Cut-off值。
每一个标本的结果以有反应性或无反应性以及Cutoff指数形式(标)报告。
本信号/Cutoff8.参考范围
健康成人和恶性黑色素瘤患者
检测结果如下:
ElecsysS100来自健康成人和不同期别的恶性黑色素瘤随访患者的标本,用.
医院XXXXXX检验科
免疫室分析项目作业指导书
ElecsysE170/E411
MY020LA文件编号:
—0P-3页页,共第3版本:
A/02008-02-01生效日期:
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Distant.*visceral
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0.077
0.7=9
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健康成人范围的样本量b)>95%没有疾病,不患肿瘤c)可能为颅脑损伤的成年患者测定。
夕卜伤后小时内进行ElecsysS100GCS表现为轻微颅脑外伤(格拉斯
哥昏迷计分:
13-15分)和至少有一种症状的患者3S100ElecsysCCT作为参照,用(头颅计算机线断层摄影术)检查。
以健康个体的X95%®
作为分界点,6小
时内必须进行CCT测定可获得如下结果:
PPV8.8-13.3%,NPV99.1-100%32.9%(95%J信区间:
,99.7%PPV(阳性预测值)11%!
敏度98.8%,和特异度NPV(阴性预测值)30-35.9%)。
灵敏度96.5-100%,特异度
CCTpositive
negative
Tol^l
EItS10CpO&
ilve
B3
670
753
329
330
「她
84
999
1003
g/L
卩d)0.098每个实验室必须调查各自患者群体的参考范围变异性,必要时根据具体情况制订自己的参考范围。
9.分析性能
分析仪的代表性试验数据如下。
各实验室由于具体情况不同,所得出的数据可能会稍有差异。
精密度
根据NCCL(全国临床实验室规范化操作委员会)制订的改良试验计划(EP5-A),应用Elecsys试剂盒、人血液标本和质控液验证ElecsysS100试剂盒检测重复
性。
每日测6次共10日(n=60);
在E170分析仪上的组间精密度(n=21),得结果如下:
Elecsys1010^2010
Withinrunprecision
Tota:
lp
recition
S^rr止
K^car,
風
EDuo/L
CV
%
SD啦L
CV%
Hufrartsc^rr1
0.08
0.002
2.1
0.W2
2.S
Hurra0EC^rr2
0.24
0.003
1.1
QMS
2.0
Hum'
寻叽rr
213
0.042
C.052
2.4
Pr'
iciuDntrtS100l
0.26
0.005
IE
C.006
2.3
PreciControlS100.2
333
0.046
14
OC5t
17
El70
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■runprecision
Totalprecision
Sample
V1eart
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0.09
0.001
1.0
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3.1
H..i'
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IB
30CE
2.5
卜Li‘3
2.25
0.3*5
0.7
2.24
3.064
2.9
PnedControlSlOO1
0.27
0.0C1
1.3
0.2B
3,007
27
PreaControlS1002
3.39
0.031
0.9
3.38
P3..092
r27
分析灵敏度(低浓度检测限制)
<
0.005戈g/L.
OP-MY020LA文件编号:
—4第页页,共4版本:
21
(标准差)(系统定标,定标2SD检测限制定义为可以区别零浓度定标液的最低可测浓度值,计算公式为定标液最小浓度+)。
2SD组间精密度范围之内,标本数
液最小浓度+方法比较
将ElecsysS100现在的试剂盒ElecsysS100(产品目录号03051986(y))与LiamatSangteclOO(x1)和LiaisonSangteclOO
(x2)
进行比较,得到以下线性关系(pmoVL)。
Passir^Bablok®
Eltteys/LiarW伽)y二0.550冏+0.C25r^O.729
SDfmdSfil■(fl
标本数:
934
379
标本的浓度范围为0.01and2.08卩g/L。
分析特异性
所使用的单克隆抗体没有交叉反应<1%
功能灵敏度
<0.02ug/l
功能灵敏度是指可以重复检测到的最低分析浓度,并且批内变异系数为20%。
10.干扰因素
测定结果不受黄疸(胆红素<428(1mol/L,或<25mg/dl)、溶血(血红蛋白<0.621mmol/L,或<1.0g/dl)、高脂血〔症〕(脂肪乳剂<1500mg/dl)和生物素(<205nmol/ml,或<50ng/mL)的影响。
标准:
回收率90-110%。
对于因某些疾病需要而接受高剂量生物素治疗的患者(>5mg/天),必须在末次生物素治疗8小时后采集标本。
浓度达1000IU/mL的类风湿因子对检测没有干扰。
当S100浓度达10ug/ml时,未出现高剂量钩镰效应。
体外对18种常用药物进行试验未发现药物对本测定结果有影响。
由于本试剂盒使用单克隆鼠抗体,所以因治疗或者诊断需要而接受单克隆鼠抗体的患者,其标本检测结果可能有误。
极少数标本中可出现大量链亲和素和抗钉抗体而影响测定结果。
ElecsysS100附带有试剂添加剂以减少以上不良影响。
所以,在诊断中必须结合患者病史、各项实验室检查及其它临床资料来综合评估测定结果。
11.临床意义
S100是一种小分子蛋白质二聚体,分子量为10.5kD,是钙离子结合蛋白多基因家族中的一员1,2。
S100A1(a)和S100B(B)是首先发现的成员,最初由Moore作为一种不能分离的混合物从
牛脑中分离出来3,后来因其能溶于100%&
和硫酸铵溶液中,所以命名为S100。
同时,至少还发现了21种不同成员4。
S100A1和S100B主要在中枢神经系统细胞表达,特别是星型胶质细胞,但是在黑色素细胞和其他组织也有一定程度的表达。
。
1,5,6的异型或同型二聚体组成
的蛋白质,具有多种调节细胞内和细胞外活动的功能B1和A1这种由.
LAB-OP-MY02C5页,共第页
5版本:
恶性黑色素瘤患者,特别是II、川和IV期患者,血清S100浓度升高情况可能预示其疾病进展情况。
一系列的浓度测定对成功跟踪和监测患者治疗非常有用
7,8,9,10,11,12,13。
另外,大脑损伤后,CSF(脑脊液)中S100浓度升高,并且释放到周围血液中。
血清S100浓度增加提示血脑屏障被破坏,并且这种升高可能出现在神经损害之前14。
多种不同原因,如脑外伤15,16,17,18,19,10和中风21,22,23引起的大脑损伤患者均可检测到S10&
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