浅论吴茱萸及其炮制品中总酚酸含量测定Word下载.docx
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吴茱萸经不同方法炮制后总酚酸的含量不同。
所用检测方法简便、准确、快速，可作为吴茱萸中总酚酸含量的测定方法。
【关键词】吴茱萸;
总酚酸;
炮制品
【ABSTRACT】Objective:
ToestablishamethodfordeterminingthecontentsoftotalphenolicacidinEvodiarutaecarpa（Juss.）Benthanditsprocessed:
Totalphenolicacidwasdeterminedbythemethodofspectrophotometryat760nmwithchlorogenicacidasreference thesystematicsolution,%dodecylsulfonicacisodiumsalt2mL,andmixedsolutionwith1%K3[Fe（CN）6]1%were alsoFeCl3（1∶1）/Lhydrochloricacidwasaddedtothesolutiondilutedto:
Thecontentsoftotalphenolicacidwere%and%.inthetwokindsofEvodiarutaecarpa（Juss.）Benth,therewasnonotabledifferencebyttest（）.Thecontentsoftotalphenolicacidwasthehighestinitsprocessedproductbyvinegar,thesecondwasliquorice,theotherswerenotablelowerthanEvodiaru
taecarpa（Juss.）Benth,therewasnotabledifferencebyttest（）.Conclusion:
Thecontentsoftotalphenolicacidweredifferentinitsdifferentprocessed methodwassimple,accurateand wasabettermethodtodeterminethecontentsoftotalphenolicacidinEvodiarutaecarpa（Juss.）Benth.
【KEYWORDS】Evodiarutaecarpa（Juss.）Benth,Totalphenolicacid,Processeddrugs
吴茱萸[Evodiarutaecarpa（Juss.）Benth.]又名淡茱萸、吴萸，是芸香科植物吴茱萸接近成熟的果实。
吴茱萸性味辛、苦、温，入肝、肾、脾、胃经。
有温中散寒、疏肝理气、降逆止呕、燥湿定痛、抑菌、驱蛔、抗血栓形成、利尿、抗肿瘤、抗缺氧、镇痛、升高体温等作用。
吴茱萸气味芳香，有小毒，临床上多炮制后入药。
吴茱萸中含有多种有效成分，但有关吴茱萸中总酚酸方面的研究报道少见。
据文献报道[13],总酚酸具有抗血栓形成、溶纤和抗脂质过氧化的作用，是治疗心肌缺血、心绞痛、心肌梗死等心血管疾病的有效成分。
我们以铁氰化钾三氯化铁混合液为显色剂，绿原酸为对照品，用分光光度法测定吴茱萸及其炮制品中总酚酸的含量，为全面了解吴茱萸提供参考依据。
1材料与方法
仪器与试药
752紫外可见分光光度计
绿原酸对照品（中国药品生物制品检定所提供，编号：
110753200413）
乙醇、铁氰化钾、三氯化铁、盐酸、十二烷基硫酸钠均为分析纯试剂。
实验方法
对照品溶液的制备精确称取绿原酸对照品，用95%乙醇溶解，定容为，得/mL绿原酸对照品溶液。
供示品溶液制备精密称取吴茱萸生药和各种炮制品约，均精密称定，用50mL蒸馏水浸泡4h，沸水浴提取三次，提取时间分别为40min，20min，20min，提取液合并（包括残渣），置于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，过滤，弃去初滤液，取20mL续滤液备用。
吴茱萸炮制品制备
（1）醋炙吴茱萸:
吴茱萸按10∶3（g∶g）加米醋浸透,文火炒干。
（2）盐炙吴茱萸：
吴茱萸按10∶2（g∶g）加盐水（浓度为15%）喷匀，闷润至柔软，微火炒干。
（3）甘草炙吴茱萸：
吴茱萸按10∶（g∶g）称取甘草片，浸泡20min，第一煎加8倍量水，煮沸后保持30min;
第二煎加5倍量水，煮沸后保持25min。
二煎滤液合并，浓缩，趁热拌入吴茱萸，闷润，翻拌，至汁液全部吸尽，个身膨起，文火炒干。
（4）汤洗7遍：
用热水洗7遍，自然晾干。
（5）汤洗7遍后干燥：
用热水洗7遍后文火炒干。
（6）酒炙吴茱萸：
净吴茱萸按10∶2（g∶g）加黄酒浸透,文火炒干。
（7）姜炙吴茱萸：
净吴茱萸按10∶1（g∶g）称取鲜姜，捣烂，加少许水，取汁，拌入吴茱萸浸透，微火炒干。
总酚酸测定方法
精密吸取供试品溶液适量，置于25mL容量瓶中，加无水乙醇至5mL，加入%十二烷基磺酸钠溶液2mL，1%铁氰化钾-1%三氯化铁（1∶1）混合液2mL，摇匀，暗处放置5min，加/L盐酸溶液至25mL，摇匀，暗处放置20min，平行空白，在760nm处测定吸光度。
2009年10月甄攀等：
吴茱萸及其炮制品中总酚酸含量测定第5期2009年10月河北北方学院学报（医学版）第5期
2结果
吸收曲线
精密吸取对照品溶液、供试品溶液各适量，按总酚酸测定方法显色后，从400nm到800nm扫描，每隔10nm（峰值时隔2nm）读一次吸光度。
以吸光度为纵坐标，波长为横坐标作图，得到吸收曲线（图1）。
在760nm处有较大吸收，因此选定760nm作为检测波长。
图1对照品和样品的吸收曲线
1.样品2.绿原酸对照品工作曲线
精密称取绿原酸，用无水乙醇定溶至10mL,分别精密吸取50、100、200、300、400、500μL，按法测定吸光度，以吸光度为纵坐标，绿原酸的浓度为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为A=+，r=，在～μg/mL范围内呈线性关系。
显色稳定性试验
精密吸取对照品溶液、供试品溶液各适量，按总酚酸测定方法显色后，分别于5、10、15、20、25、30、35、40min测定吸光度。
吸收值随放置时间的延长有明显减小的趋势，但在40min内基本稳定，RSD=%。
显色后尽可能在30min内完成测定。
精密度试验
精密吸取对照品溶液适量，按总酚酸测定方法显色后，于760nm测定吸光度。
吸光度的RSD=%，精密度较好。
重复性试验
分别称取同一批生吴茱萸6份，每份约为，精密称定，按法制成供试品溶液，分别吸取360μL于6个25mL容量瓶中，按方法测定吸光度，利用工作曲线计算总酚酸含量，RSD为%，说明方法的重复性较好。
回收率实验
样品与标准品以1∶1，2∶1，4∶1混合，按方法测吸光度，计算回收率，分别为%、%、%，平均回收率为%，RSD为%。
含量测定
吴茱萸生药总酚酸含量测定实验中测定了两批吴茱萸总酚酸的含量。
分别称取吴茱萸，精密称定，各3份，按方法制成供试品溶液，然后取25mL滤液稀释至50mL，取1mL上样，按方法测定含量，结果如表1。
表1吴茱萸生药总酚酸含量
吴茱萸炮制品中总酚酸的含量测定分别精密称取吴茱萸炮制品约，精密称定。
按法制成供试品溶液，然后取，按方法测定含量（见表2）。
表2炮制后吴茱萸中总酚酸含量
3讨论
测定的两批吴茱萸药材中总酚酸的含量分别为%和%，经t检验差异没有统计学意义（）。
吴茱萸炮制品中以醋制吴茱萸总酚酸含量最高，为%，其次为甘草制吴茱萸，为%，其余炮制品中总酚酸的含量都明显低于吴茱萸生药中的含量，经t检验，这些炮制品中总酚酸的含量与生药相比差异都有显着性意义（）,说明这些炮制方法使酚酸类成分损失严重。
测定总酚酸时，为了后续研究的需要，使用了绿原酸对照品，使得总酚酸含量数值较高。
为了说明这个问题，实验中又使用没食子酸为对照品进行了校对，发现没食子酸的显色灵敏度提高约10倍，回归方程为A=+（r=）。
因此，如果以没食子酸表示，吴茱萸1中总酚酸的含量为%，吴茱萸2中总酚酸的含量为%。
说明以不同的对照品表示，同一药品中总酚酸的含量不同，与文献[5，6]报道一致，可能是绿原酸和没食子酸所含的酚羟基数目不同造成的。
【参考文献】
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