薄层色谱TLC的使用指南Word文件下载.docx
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浓度为0~40%的比较常用。
在旋转蒸发器上非常容易除去。
乙醇/己烷或戊烷：
对强极性化合物5~30%比较合适。
二氯甲烷/己烷或戊烷：
5~30%，当其他混合溶剂失败时可以考虑使用。
3）将1~2mL选定的溶剂体系倒入展开池中，在展开池中放置一大块滤纸。
4）将化合物在标记过的基线处进行点样。
我们用的点样器是买来的，此外，点样器也可从加热过的Pasteur吸管上拔下（你可以参照UROP。
在跟踪反应进行时，一定要点上起始反应物、反应混合物以及两者的混合物。
5）展开：
让溶剂向上展开约90%的薄板长度。
6）从展开池中取出薄板并且马上用铅笔标注出溶剂到达的前沿位置。
根据这个算Rf的数值。
7）让薄板上的溶剂挥发掉。
8）用非破坏性技术观察薄板。
最好的非破坏性方法就是用紫外灯进行观察。
将薄板放在紫外灯下，用铅笔标出所有有紫外活性的点。
尽管在5.301中不用这种方法，但我们将采用另一常用的无损方法--用碘染色法。
（你可以参看URO）P。
9）用破坏性方式观测薄板。
当化合物没有紫外活性的时候，只能采用这种方法。
在5.301中，提供了很多非常有用的染色剂。
使用染色剂时，将干燥的薄板用镊子夹起并放入染色剂中，确保从基线到溶剂前沿都被浸没。
用纸巾擦干薄板的背面。
将薄板放在加热板上观察斑点的变化。
在斑点变得可见而且背景颜色未能遮盖住斑点之前，将薄板从加热板上取下。
10）根据初始薄层色谱结果修改溶剂体系的选择。
如果想让Rf变得更大一些，可使溶剂体系极性更强些；
如果想让Rf变小，就应该使溶剂体系的极性减小些。
如果在薄板上点样变成了条纹状而不是一个圆圈状，那么你的样品浓度可能太高了。
稀释样品后再进行一次薄板层析，如果还是不能奏效，就应该考虑换一种溶剂体系。
11）做好TLC标记，计算每个斑点的Rf值，并且在笔记本中画出图样。
TLC显色试剂的选择
显色试剂显色剂可以分成两大类：
一类是检查一般有机化合物的通用显色剂；
另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多，本章只能列举一些常用的显色剂。
l．通用显色剂
硫酸常用的有四种溶液：
硫酸-水（1：
1）溶液；
硫酸-甲醇或乙醇（1：
1）溶液；
1.5mol／L硫酸溶液与0.5-1.5mol／L硫酸铵溶液，喷后110C烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
0.5％碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
中性0.05％高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I：
1%高锰酸钾溶液；
溶液5%碳酸钠溶液；
溶液I和溶液H等量混合应用。
酸性高锰酸钾试剂喷1.6％高锰酸钾浓硫酸溶液（溶解时注意防止爆炸），喷后薄层于180oC加热15~20min。
酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时150C烤薄层。
5%磷钼酸乙醇溶液喷后120C烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色，再喷2mol／L盐酸溶液，则蓝色加深。
溶液I:
1%铁氰化钾溶液；
溶液2%三氯化铁溶液；
临用前将溶液I和溶液H等量混合。
2．专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:
（1）烃类
1硝酸银/过氧化氢检出物：
卤代烃类。
溶液：
硝酸银0.1g溶于水ImL,力口2-苯氧基乙醇100ml，用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。
方法：
喷后置未过滤的紫外光下照射；
结果：
斑点呈暗黑色。
2荧光素/溴检出物：
不饱和烃。
I.荧光素0.1g溶于乙醇IOOmI;
H.5%溴的四氯化碳溶液。
先喷⑴，然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素（曙红）,荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
3四氯邻苯二甲酸酐检出物：
芳香烃。
2%四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯（10：
1）的溶液。
喷后置紫外光下观察。
4甲醛/硫酸检出物：
多环芳烃。
37%甲醛溶液0.2ml溶于浓硫酸l0ml。
（2）醇类
3,5一二硝基苯酰氯检出物：
醇类。
I.2%本品甲苯溶液；
n.0.5%氢氧化钠溶液；
皿.0.002%罗丹明溶液。
先喷⑴，在空气中干燥过夜，用蒸气薰2min,将纸或薄层通过试液（n）30s,喷水洗，趁湿通过（皿）15s，空气干燥，紫外灯下观察。
硝酸铈铵检出物：
I.1%硝酸铈铵的0.2mol/L硝酸溶液；
n.N,N-二甲基-对苯二胺盐酸盐1.5g溶于甲醇、水与乙酸（128m1+25m1+15m1）混合液中，用前将⑴与（n）等量混合。
喷板后于105oC加热5min。
3香草醛/硫酸检出物：
高级醇、酚、甾类及精油。
溶液：
香草醛1g溶于硫酸100ml。
方法：
喷后于120C加热至呈色最深。
④二苯基苦基偕肼'
检出物：
醇类、萜烯、羰基、酯与醚类。
本品15mg溶于氯仿25ml中。
喷后于110C加热5~IOmin。
结果：
紫色背景呈黄色斑点。
（3）醛酮类
品红／亚硫酸检出物：
醛基化合物。
I.0.01%品红溶液，通入二氧化硫直至无色；
n.0.05mol/L氯化汞溶液；
皿.O.05mol/L硫酸溶液。
将I、n、皿以1：
1：
10混合，用水稀释至l00ml。
邻联茴香胺检出物：
醛类、酮类。
本品乙酸饱和溶液。
2,4-二硝基苯肼检出物：
醛基、酮基及酮糖。
I.0.4%本
品的2mol/L盐酸溶液；
本品O.1g溶于乙醇100ml中，加浓盐酸lml。
喷溶液I或H后，立即喷铁氰化钾的2mol/L盐酸溶液。
饱和酮立即呈蓝色；
饱和醛反应慢，呈橄榄绿色；
不饱和羰基化合物不显色。
绕丹宁检出物：
类胡萝卜素醛类。
I.1%-5俭丹宁乙醇溶液；
H.25%氢氧化铵或27%氢氧化钠溶液。
先喷溶液I，再喷溶液干燥。
（4）有机酸类
1溴甲酚绿检出物：
有机酸类。
溴甲酚绿0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氢氧化钠溶液5ml。
浸板。
蓝色背景产生黄色斑点。
2高锰酸钾／硫酸检出物：
脂肪酸衍生物。
见通用显色剂酸性高锰酸钾。
3过氧化氢检出物：
芳香酸。
0.3%过氧化氢溶液。
喷后置紫外光（365nm）下观察。
结果：
呈强蓝色荧光。
42，56-二氯苯酚-靛酚钠检出物：
有机酸与酮酸。
0.1%
本品的乙醇溶液。
喷后微温。
蓝色背景呈红色。
（5）酚类
1Emerson试剂（4-氨基安替比林/铁氰化钾（皿））检出物：
酚类、芳香胺类及挥发油。
I.4-氨基安替比林1g溶于乙醇100ml;
II.铁氰化钾（皿）4g溶于水50ml,2用乙醇稀释至100ml。
先喷溶液I,3在热空气中干燥5min,4再喷溶液H,5再于热空气中干燥5min，6然后将板置含有氨蒸气（25％氨溶液）的密闭容器中。
斑点呈橙-淡红色。
挥发油在亮黄色背景下呈红色斑点。
7Boute反应检出物：
酚类、氯、溴、烷基代酚。
将薄层置有N02蒸气（含浓硝酸）的容器中3〜10min,8再用NH2蒸气（浓氨液）处理。
9氯醌（四氯代对苯醌）检出物：
酚类。
1％本品的甲苯溶液。
10DDQ（二氯二氰基苯醌）试剂检出物：
2%本品的甲苯溶液。
11TCNE（四氰基乙烯）试剂检出物：
酚类、芳香碳氢化物、杂环类、芳香胺类。
0.5%〜1%本品的甲苯溶液。
12Gibb'
s（2,136-二溴苯醌氯亚胺）试剂检出物：
溶
液：
2%本品的甲醇溶液。
⑦氯化铁检出物：
酚类、羟酰胺酸。
溶液：
1%〜5%氯化铁的0.5mol／L盐酸溶液。
酚类呈蓝色、羟酰胺酸呈红色。
（6）含氮化合物
1FCNP硝普钠/铁氰化物）试剂检出物：
脂肪族含氮化物，如氨基氰、胍、脲与硫脲及其衍生物,肌酸及肌酐。
10%氢氧化钠溶液、10%硝普钠溶液、10%铁氰化钾溶液与水按1：
3混合,在室温至少放置20min,冰箱保存数周，用前将混合液与丙酮等体积
混合
2Dragendoff（碘化铋钾试剂）试剂检出物：
芳香族含氮化合物，如生物碱类、抗心律不齐药物。
I．碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中；
碘化钾8g溶于水20ml中。
将上述溶液I及H等量混合，置棕色瓶中作为储备液，用前取储备液lml、冰醋酸2ml与水l0ml混合。
呈橘红色斑点。
4-甲基伞形酮检出物：
含氮杂环化合物。
本品0.02g溶于乙醇35ml，加水至100ml。
喷板后置25%氨水蒸气的容器中，取出后于紫外灯（365nm）下观察。
碘铂酸钾检出物：
生物碱类及有机含氮化物。
10%六氯铂酸溶液3ml与水97ml混合，加6%碘化钾溶液，混匀。
临用前配制。
硫酸高铈铵／硫酸检出物：
生物碱及含碘有机化物。
硫酸铈1g混悬于4ml水中，加三氯乙酸1g,煮沸，逐滴加入浓硫酸直至混浊消失。
喷后薄层于1l0oC加热数分钟。
阿朴吗啡、马钱子碱、秋水仙碱、罂粟碱、毒扁豆碱与有机碘化物均能检出⑥Ehrlich（对二甲氨基苯甲醛／盐酸）试剂检出物：
吲哚衍生物及胺类。
1%本品的浓盐酸溶液与甲醇按1：
1混合。
喷后板于50oC加热20min。
呈不同颜色的斑点。
（7）胺类
1硝酸/乙醇检出物：
脂肪族胺类。
50滴65%硝酸于乙醇
100ml中。
需要时120oC加热。
22,6-二氯醌氯亚胺检出物：
抗氧剂、酰胺（辣椒素）、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氢化物、药物、苯氧基乙酸除草剂等。
新鲜制备的0.5%〜2%本品乙醇溶液。
喷后薄层于110oC加热10min,再用氨蒸气处理。
3茜素检出物：
胺类。
0.1%本品的乙醇溶液。
4丁二酮单肟/氯化镍检出物：
I.丁二酮单肟1.2g溶于热水35ml中，加氯化镍0.95g,冷却后加浓氨水2ml;
H.盐酸羟胺0.12g溶于200ml水中。
将溶液I及H混合，放置1天,过滤。
（5）Pauly（对氨基苯磺酸）试剂检出物：
酚类、胺类和能偶合的杂环化合物。
磺酸4.5g溶于温热的12mol／L盐酸45ml中,用水稀释至500ml，取10ml于冰中冷却，加4.5%亚硝酸钠冷溶液lOml，于OoC放置15min。
用前加等体积10%碳酸钠溶液。
硫氰酸钻（II）.检出物：
生物碱、伯、仲、叔胺类。
硫氰酸
铵3g与氯化钴1g溶于水20ml。
白色至粉红色背景上呈蓝色斑点,2h后颜色消退。
若将薄层喷水或放入饱和水蒸气容器内,可重现色点。
1,2-萘醌-4-磺酸钠检出物：
芳香胺类。
本品0.5g溶于95ml水，加乙酸5ml，滤去不溶物即得。
喷后反应30min显色。
葡萄糖/磷酸检出物：
葡萄糖2g溶于85%磷酸
l0ml与水40ml混合液中,再加乙醇与正丁醇各30ml。
喷后于115C加热I0min。
8）硝基及亚硝基化合物
1a-萘胺检出物：
3,5一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。
I.O.5%a-萘胺乙醇溶液；
II.10%氢氧化钾甲醇溶液。
方法：
先喷溶液I，再喷溶液I。
呈红褐色斑点。
②二苯胺/氯化钯检出物：
亚硝胺类。
1.5%二苯胺乙醇溶液与0.1g氯化钯的0.2%氯化钠溶液lOOml，按5：
1混合。
喷后置紫外光（254nm）下观察。
显紫色斑点。
（9）氨基酸及肽类
1茚三酮检出物：
氨基酸、胺与氨基糖类。
本品O.2g溶于乙醇l00ml中。
喷后于110oC加热。
呈红紫色斑点。
2茚三酮/乙酸镉检出物：
氨基酸及杂环胺类。
茚三酮1g
及乙酸镉2.5g溶于l0ml冰醋酸中，用乙醇稀释至500ml。
喷后于120oC加热20min。
31,2-萘醌-4-磺酸钠检出物：
氨基酸。
临用前将本品O.02g溶于5%碳酸钠l00ml中。
喷后室温干燥。
不同氨基酸呈不同色点。
4靛红/乙酸锌检出物：
氨基酸与某些肽类。
靛红1g与乙酸锌1g溶于95%异丙醇l00ml中，加热至80oC,冷却后加乙酸1ml,冰箱保存。
喷后于80〜85"
C加热30min。
5茚三酮/冰醋酸检出物：
二肽及三肽。
1%茚三酮吡啶溶
液与冰醋酸按5：
喷后于l00oC加热5min。
6香草醛检出物：
氨基酸及胺类。
I．本品1g溶于丙醇50ml中;
I．1mol／L氢氧化钾溶液lml,用乙醇稀释至lOOml。
先喷溶液I后于110oC干燥lOmin，再喷溶液于110oC再干燥
lOmin，于紫外光（365nm）下观察。
（10）甾类
1香草醛/硫酸检出物：
甾体激素。
1%香草醛浓硫酸溶液。
喷后于105C加热5min。
2氯化锰检出物：
雌激素类。
氯化锰O.2g溶于含硫酸2ml的甲醇60ml中。
喷后置紫外光（365nm）下观察。
3高氯酸检出物：
5%高氯酸甲醇溶液。
喷后于110C加热5min,置紫外光（365nm）下观察。
4三氯化锑/乙酸检出物：
甾类与二萜类。
三氯化锑20g溶于乙酸20ml与氯仿60ml混合液中。
喷后于100oC加热5min,紫外光长波下观察。
二萜类斑点呈红黄-蓝紫色。
5对甲苯磺酸检出物：
甾族化合物、黄酮类与儿茶酸类。
20%本品的氯仿溶液。
喷后于100C加热数分钟，紫外光长波下观察。
斑点呈荧光。
6氯磺酸/乙酸检出物：
三萜、甾醇与甾族化合物。
氯磺酸5ml在冷却下加乙酸l0ml溶解。
喷后于130oC加热5~l0min,置紫外光长波下观察。
结果；
斑点显荧光。
（11）糖类
①茴香胺、邻苯二酸试剂检出物：
碳氢化合物。
1.23g茴香胺及1.66g邻苯二酸于l00ml95%乙醇中的溶液。
喷雾或浸渍。
己糖呈绿色、甲基戊糖呈黄绿色、戊糖呈紫色、糖醛酸
呈棕色
②四乙酸铅／2，7一二氯荧光素检出物：
甙类、酚类、糖酸类溶液：
I.2%四乙酸铅的冰醋酸溶液；
H.1%2,7一二氯荧光素乙醇
溶液。
取溶液I各5ml混匀，用干燥的苯或甲苯稀释至200ml,试剂溶液只能稳定2h。
3邻氨基联苯/磷酸检出物：
糖类。
O.3g邻氨基联苯加85%磷酸5ml与乙醇95ml。
喷板后llOoC加热15~20min。
斑点呈褐色。
4苯胺/二苯胺/磷酸检出物：
还原糖。
4g二苯胺、4ml苯胺与20ml85%磷酸共溶于200ml丙酮中。
喷后于85C加热l0min。
产生各种颜色。
1,4-己醛糖、低聚糖呈蓝色。
5双甲酮/磷酸检出物：
酮糖。
双甲酮（5,5-二甲基环己烷-1,3-二酮）10.3g溶于90ml乙醇与l0ml85%磷酸中。
喷板后于110oC加热15〜20min。
日光下观察，白色背景上呈黄色斑点，紫外光长波下呈蓝色荧光。
6联苯胺/三氯乙酸检出物：
0.5g联苯胺溶于l0ml乙酸，再加10ml40%三氯乙酸水溶液，用乙醇稀释至100ml。
喷后置紫外光下照射15min。
斑点呈灰棕-红褐色。
7对二甲氨基苯甲醛/乙酰丙酮检出物：
氨基糖类。
I.5ml50%氢氧化钾溶液与20ml乙醇混匀，取此溶液0.5ml，加乙酰丙酮0.5ml与正丁醇50ml的混合液l0ml,此两种溶液均需新鲜配制,临用前混合；
II.1g对二甲氨基苯甲醛溶于30ml乙醇中，再加30ml
浓盐酸，需要时此溶液可用正丁醇180ml稀释。
先喷I后于
105oC加热5min,再喷然后于90C干燥5min。
斑点呈红
论坛问答：
1在薄层层析中,展开剂的选择很重要,我从事合成时间不长,每次选展开剂的时候都不是很恰当,请各位经验丰富的老师赐教!
一种简单的办法是根据你产的溶解性选择一种极性最强的溶剂学（如醇类,乙氰等）,再根据你实际展开的情况慢慢加入极性弱的溶剂（如四氯化碳、石油醚、二氯甲烷等）调节体系的极性。
以得到最好的展开效果。
把我的祖传秘方告诉你吧
PE（60-90）
EtAc/PE=1:
2
EtAc/PE/AcOH=15:
5:
1
EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:
1:
8年来我用这四种体系,没有出现过什么问题.我一直在用的是乙酸乙酯：
环已烷,不断调节比例,直到有满意的Rf值,有拖尾时可能要加酸或碱,我一般乙酸和三乙胺。
我用了好几年了,都还好。
不妨一试
从展开的角度上来看,确实能行,如果是分离就不一定行了
分离的话只好调低一点Rf,还是可以的
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