平板分离技术与活菌计数实验报告Word格式文档下载.docx
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1．3在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是此之外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。
【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。
公式：
观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量
1．4采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
〖思考3〗从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是（平均菌落数÷
涂布的稀释液体积）×
稀释倍数。
〖思考4〗利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是恰当的稀释度。
〖思考5〗第二位同学的结果接近真实值。
你认为这两位同学的实验需要改进的操作是第一位同学需设置重复实验组；
第二位同学统计的三个菌落数相差太大，说明操作有误，需重新实验。
1．5统计的菌落数比活菌的实际数目板上观察到的只是一个菌落。
因此，统计结果一般用菌落数来表示。
1．6果的可信度。
1．7对照实验是指除了的条件外，其他条件都称为对照组，未满足该条件的称为实验组。
〖思考6〗请设计本实验的对照实验组：
方案1：
其他同学用A同学的土样进行实验。
方案2：
A同学以不接种的培养基作为空白对照。
2．实验设计
2．1实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。
2．2根据图示2－7填写以下实验流程：
2．3土壤微生物主要分布在距地表
2．4分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。
细菌稀释度为104、105、106，放线菌稀释度为103、104、105，真菌稀释度为102、103、104。
2．5培养不同微生物往往需要不同培养温度。
细菌一般在℃培养1～2d，放线菌一般在25～28℃培养5～7d，霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4d。
2．6在菌落计数时，每隔果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
菌种中有些菌体增殖快，有些菌体增值慢，所以培养时间要充足，使得每个菌体都能形成肉眼可观察到的菌落。
2．7菌落的特征包括等方面。
〖思考8〗土壤微生物种类最多、数量最大的原因是什么？
土壤中营养物质含量丰富，环境条件适宜等。
2．9实验过程
1
2。
将称好的土样倒入盛有棉塞。
3
4）实验时要对培养皿作好标记。
注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。
5
〖思考9〗在研究未知微生物时务必规范操作，以防被致病微生物感染，实验后一定要
洗手。
3．结果分析与评价
3．1对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助
3．2在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的。
氨会使培养基的碱性增强，ph升高。
因此，我们可以通过检测培养基ph变化来判断该化学反应是否发生。
3．3在以ph升高，指示剂将变
〖思考10〗测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。
你认为在该实验中至少应取三个水样。
（三）课堂总结、点评
（四）实例探究
例1．对细菌群体生长规律测定的正确的表述是
A．在液体培养基上进行b．至少接种一种细菌
c．接种一个细菌D．及时补充消耗的营养物质
解析：
细菌群体生长规律的测定是人们在一定条件下进行的。
这些条件是：
一种细菌、恒定容积的培养基，液体培养基、定时测定细菌总数。
在这些条件下，才能测定出细菌的生长规律。
测定时只能用一种细菌的子细胞群体的变化规律表达微生物的生长；
恒定容积是给微生物提供一定的生存环境；
液体培养基才能通过样品推测细菌总数。
若接种多种细菌，则会发生种间斗争而不能测定一种微生物的生长规律。
在接种时，要保证一定的接种量。
答案：
A
例2．在微生物群体生长规律的测定中，种内斗争最显著最激烈的时期是
A．调整期b．对数期c．稳定期D．衰亡期
种内斗争是一种生态因素。
种内斗争反应了种内生物对生存空间和生活资源的争夺。
在生活空间充裕，营养充足的时候，种内斗争的程度是比较低的。
随着微生物个体数目的增加，每个个体的生存空间越来越少，营养物质也越来越少，每个个体对生存空间和资源的争夺也越来越激烈，种内斗争就越来越激烈。
由此可知，在稳定期的种内斗争最激烈。
在衰亡期，微生物的数目已经开始减少，ph已经极度不适于微生物的生存，次级代谢产物积累到很高的程度，这时的微生物的生存斗争主要是与无机环境的斗争。
c
☆综合应用
例3．（20XX年江苏）抗生素作为治疗细菌感染的药物，其高效性和巨大的经济价值使抗生素工业经久不衰。
其中青霉素的发现和应用具有划时代的意义。
⑴青霉素发酵产生青霉素。
青霉菌的新陈代谢类型是，青霉素是青霉菌的
代谢产物。
⑵在生产和科研中，常选用处于期的青霉菌作为菌种或研究材料，因为此时的青霉菌代谢旺盛，和比较稳定。
⑶对青霉菌菌体生长情况的测定：
取一定体积的发酵液，经离心分离、反复洗涤后，，再计算发酵罐中菌体的总重量。
青霉菌属于真菌，其代谢类型应为异养需氧型，而青霉素作为它的代谢产物，并不是它生长、繁殖所必需的，所以青霉素应属于次级代谢产物。
在测定培养基上青霉菌菌体的生长情况时，常用的方法有两种：
一种是测量青霉菌的细胞数目，另一种是测重量，取一定体积的发酵液，经离心分离、反复洗涤后，称菌体的湿重，或烘干后称干重，再由此计算出其中的细胞总重量。
在细菌生长的四个主要时期中，因为处于对数期的细菌代谢旺盛，个体的形态和生理特性比较稳定，常作为生产用的菌种和科研的材料。
⑴异养需氧型次级⑵对数个体的形态生理特性⑶称菌体的湿重（称烘干后的重量）
（五）巩固练习
1．在一个“淀粉—琼脂”培养基的5个圆点位置，分别用不同方法处理，将此实验装置放在37℃恒温箱中，保温处理24h后，将碘液滴在培养基的5个圆点上，其实验结果记录于下表：
（c）
篇二：
20XX生物实验技能竞赛参赛通知
湖北省第二届大学生生物学实验技能竞赛方案
发布时间：
20XX年05月25日
湖北省第二届普通高等学校大学生生物学实验技能竞赛方案
为培养大学生生物学实验动手能力、科学思维能力、研究创新能力的途径和方法，使学生更好的掌握生物学基本实验技能，提高大学生参与生物学实验的热情和兴趣，养成严谨求实的科学态度、认真踏实的学习风气、刻苦钻研的科研精神，激发大学生创新精神，促进生物学实验教学改革深入发展。
为此，湖北省教育厅决定举办第二届湖北省普通高等学校大学生生物学实验技能竞赛。
一、竞赛组织工作
湖北省普通高等学校大学生生物学基本实验技能竞赛活动由湖北省教育厅举办，湖北省教育厅高等教育处和湖北省高等学校生物学实验教学示范中心联席会共同负责组织实施。
竞赛工作在竞赛组委会领导下，由竞赛承办高校实施。
经湖北省高等学校生物学科实验教学示范中心联席会讨论，本届竞赛由华中农业大学具体承办。
组委会下设专家组，专家组成员原则上由中心主任或常务副主任组成且相对固定。
专家组在湖北省高等学校大学生生物学实验技能竞赛组织委员会领导下承担竞赛命题审核、评定竞赛成绩及奖项等工作。
本届专家组名单如下：
柳俊（华中农业大学生物学实验教学中心主任）
谢志雄（武汉大学生物学实验教学中心常务副主任）
潘继承（湖北师范学院生物学实验教学中心主任）
杨道兵（华中农业大学水产学院副院长）
杨建明（湖北大学生物学实验教学中心常务副主任）
吴元喜（华中科技大学生物实验教学中心主任）
李晓华（中南民族大学生命科学学院副院长）
王玉凤（华中师范大学生命科学学院副院长）
陈茂彬（湖北工业大学生物工程学院教授）
二、参赛单位
本届大学生生物实验技能竞赛参赛单位为：
设有生命科学相关本科专业的普通本科高等学校或省级以上生物学实验教学示范中心单位。
每个参赛单位限报3名选手。
三、竞赛要求与内容
（一）竞赛要求
竞赛依据高等学校生命科学相关专业大学生基本实验技能的要求，从群落、种群、个体、器官、组织、细胞、分子水平等各个层次考察学生的实验动手能力。
主要涉及动物学实验（动物生物学实验）、植物学实验（植物生物学实验）、微生物学实验、细胞生物学实验、遗传学实验、生物化学实验、分子生物学实验等专业基础实验课中的常用生物学基本实验技能，具体包括：
1．解剖技术：
植物解剖及形态观察、动物解剖及形态观察；
2．显微技术：
光学显微镜技术、荧光显微技术、倒置显微技术；
3．制片技术：
切片制片技术，包括徒手切片技术、石蜡切片技术、冰冻切片技术；
非切片制片技术，包括压片、撕片、涂片等制片技术；
4．生物分类的方法与技能：
微生物分类的方法与技能、植物分类的方法与技能、动物分类的方法与技能；
5．细胞、组织培养技术与分析：
微生物分离与培养技术、动物细胞原代与传代培养技术；
6．生物分子的分离纯化及鉴定技术：
糖类、脂类、蛋白质、核酸等分离纯化与鉴定技术；
生物小分子分离与鉴定；
酶的活力测定与动力学常数测定；
7．分子生物学和遗传分析技术：
基因克隆表达技术、基因表达产物的细胞定位、动植物细胞染色体制片技术、染色体组型分析、杂交试验的基因分析、DnA标记技术与基因定位；
8．野外实习与专业实践：
生物识别、标本采集与制作；
9．综合运用基本实验技能，合理设计实验（选择实验方法、实验条件、仪器和试剂等）解决实际问题的能力（包括查阅文献、参考书及其他信息来源获得信息的能力）。
实验技能竞赛应依据生命科学专业基础实验中的常用的生物学基本实验技能（包括基本原理、基本知识、操作技能等内容），从结构识别判断、操作技能、分析计算能力和综合设计应用等方面设计竞赛内容，具体为：
结构识别判断：
利用所学基本知识、实验原理与技能方法，通过图片识别判断动植物的基本形态结构、菌落形态、细胞及亚细胞结构；
依据给出的实验现象（如电泳图谱）和数据进行判断。
操作技能：
含各课程基本的实验技能，并能熟练掌握常用仪器设备的使用方法，能现场使用提供的实验仪器设备等获得相关数据。
分析计算能力：
指对现场实验操作所获得的实验数据进行分析处理，并结合现象进行分析总结，完成规范的实验报告。
综合设计应用：
指利用给出的背景知识和实验条件，利用所学基本原理、实验知识、实验技能和基本仪器使用方法，综合设计实验方案、解决实际问题的能力。
（二）竞赛内容范围
本届竞赛内容原则上与第一届竞赛内容相同，但依据20XX年湖北省实验教学中心联系会讨论确定，增加一项综合设计性实验考试项目，旨在考查学生综合运用生物学专业所学的理论和实践知识的能力。
具体内容包括：
1．动物生物学（动物学）实验部分
（1）解剖器械的握持与使用方法
（2）各类脊椎动物的抓取方法、安死术、固定方法
（3）各类实验动物的内部解剖方法（实验动物能举一反三）
（4）动物形态结构观察方法，包括器官和个体水平的观察
（5）脊椎动物外形测量方法
2
2．植物生物学（植物学）实验部分
（1）植物形态结构观察方法，包括：
细胞、组织、器官和个体水平的观察与辨识；
常规制片、染色技术；
（2）解剖器械的握持与使用方法
（3）植物分类检索方法
3．遗传学实验部分
（1）果蝇唾液腺染色体制片技术
（2）植物染色体制片技术
4．微生物学实验部分
（1）微生物学实验中的基本操作和技能
无菌操作技术：
接种环灭菌、倒平板、斜面接种等
显微观察技术：
油镜使用、微生物大小测量与计数、各种显微观察样品制备与观察（包括各种微生物形态结构特征的掌握）；
革兰氏染色、芽胞染色等方法
（2）培养、分离技术：
平板分离技术、稀释涂布菌落计数
5．生物化学实验部分
（1）生物化学实验的基本技能：
移液器的正确使用
分光光度计的正确使用
包括可见光和紫外光分光光度计
生物大分子含量测定中标准曲线的制备
（2）生物化学实验：
糖、蛋白质定性和定量测定
酶动力学实验
6．分子生物学实验部分
（1）仪器使用：
微量进样器、离心机、电泳仪、凝胶成像系统、pcR仪的正确使用
（2）琼脂糖凝胶电泳技术：
凝胶的配制、点样、电泳、电泳结果分析
（3）DnA分离纯化、酶切鉴定技术：
核酸的酚抽提，乙醇沉淀
7．细胞生物学实验部分
（1）显微观察技术：
普通光学显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜的工作原理、使用及结果辨识
（2）细胞器制片、染色观察
（3）植物组织培养
（4）动物细胞原代与继代培养
8.综合项目
综合项目包括动物、植物和微生物三个方向项目各1项，学生任选一个综合项目，参加3个综合项目的同学同时评奖，按照每个综合项目百分比设置奖项。
综合项目考核技能内容如下：
I动物生物学综合项目考核要点
（1）动物生物学实验中的基本操作和技能
动物解剖及形态观察：
①解剖器械的握持与使用方法；
②各类脊椎动物的抓取方法、安死术、固定方法；
③各类实验动物的解剖和观察方法；
④动物外形测量方法
①普通光学显微镜的使用方法；
②取血方法及血液涂片的制作和观察；
③肌肉分离装片的制作和观察。
（2）动物个体的鉴定及动物标本的制作
动物形态学方法鉴定的基本步骤；
动物标本制作的基本方法；
动物检索表的使用。
（3）动物组织培养技术
培养基的制备、灭菌及无菌操作技术。
（4）用于生理实验的动物器官的标本制作
心脏标本；
微循环观察；
神经-肌肉标本。
（5）生物分子的分离纯化及鉴定技术：
糖类、脂类、蛋白质、核酸等分离纯化与鉴定技术。
（6）分子生物学和遗传分析技术：
基因克隆表达技术、动物细胞染色体制片技术、染色体组型分析、DnA标记技术与基因定位。
II植物学综合项目考核要点
（1）植物生物学实验中的基本操作和技能
植物制片技术：
临时制片、徒手切片、压片法等。
①普通光学显微镜的使用方法。
②显微镜下植物细胞的基本统计方法。
③植物细胞染色体的观察技术。
（2）植物个体的鉴定及植物标本的制作
植物形态学方法鉴定植物的基本步骤；
植物标本制作的基本方法；
植物检索表的使用。
（3）植物组织培养技术
（4）植物细胞或器官中常见物质的生理生化鉴定技术
植物细胞中的常见物质的细胞学鉴定及植物器官生理生化指标的测定
（5）植物DnA的提取及DnA体外扩增（pcR）技术
从植物中提取总DnA的原理及操作，pcR技术的原理及操作，掌握用琼脂糖凝胶电泳分离检测DnA的技术。
III微生物综合项目考核要点
接种环火焰灭菌、倒平板、斜面接种和平板涂布等。
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①学会普通光学显微镜的使用方法，特别是油镜的使用方法。
②微生物的制片染色技术（革兰氏染色、芽胞染色、鞭毛染色、荚膜染色等）。
③微生物细胞的大小测定及数量测定技术。
（2）微生物培养及分离纯化技术
培养基的制备、灭菌及微生物的分离纯化及平板稀释涂布活菌计数等技术。
（3）微生物的常规生理生化鉴定技术
鉴定细菌的常规生理生化实验方法（包括培养基的配制、接种、菌株培养和结果观察等）。
（4）微生物DnA的提取及DnA体外扩增（pcR）技术
从细菌中提取总DnA的原理及操作，pcR技术的原理及操作，掌握用琼脂糖凝胶电泳分离检测DnA的技术。
四、赛制
1.初赛
形式不限，由各参赛单位根据竞赛要求与内容，分别组织初赛。
每个参赛单位最多推选3名学生参加决赛
2.决赛
（1）竞赛形式：
本届竞赛以实验操作为主。
（2）选手所报项目要求：
每个选手限报1项，省级以上生物学实验中心的学生最少申报1项综合，每个参赛单位的3名学生所报项目不能重复。
（3）报名截止时间：
20XX年7月30日。
（4）命题与成绩评定：
由竞赛专家组组织命题、印制试卷、评定竞赛成绩。
（5）监考：
由专家组确定主考、监考教师名单及其监考的赛场。
（6）赛务工作：
由华中农业大学组织，生物学实验教学中心和水产学院水产养殖实验教学中心负责竞赛期间的相关工作，包括具体组织工作、实验准备工作等。
五、竞赛评奖
初赛评奖由各参赛单位自行评定。
决赛奖项：
本次竞赛设立个人单项奖、个人综合奖和优秀组织奖，由省教育厅颁发获奖证书。
个人单项及个人综合分设一等奖、二等奖和三等奖，设奖比例原则按照鄂教高〔20XX〕4号规定并根据实际竞赛情况予以适当调节。
决赛获奖名单由竞赛组委会确定。
根据各高校组织工作情况和竞赛成绩设优秀组织奖若干名。
六、竞赛时间
本届竞赛时间暂定9月22-23（包括开幕式）。
七、竞赛活动经费
1．竞赛活动经费
包括用于赛务、奖证、实验器具及实验耗材（生物材料、药品）、竞赛用场地费、水电费、专5
篇三：
15-16
（一）年微生物学实验报告
《微生物学实验》报告册
专业
学号
姓名
生命科学学院生物学实验教学中心
二o一五年月
实验目录
实验一霉菌水浸片标本片的制备与观察
实验二微生物的显微直接计数法
实验三培养基的配制与高压蒸汽灭菌
实验四自生固氮菌的分离、纯化及计数
实验五固氮菌（细菌）划线分离技术
实验六细菌的革兰氏染色和荚膜染色
实验七细菌，真菌，放线菌，酵母菌菌落观察
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、注意事项
六、实验结果
手绘出你所观察到的霉菌的个体形态图（或拍照），并注明各部位名称。
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