药理实验Word格式.docx
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生理盐水（normalsaline）；
250mg／m1硫酸镁溶液（mag~msidmsulfatesolution）；
50mg／m1氯化钙溶液（calciumchloridesolution）。
3.器材：
灌胃管（可用导尿管代替）,兔开口器，注射器。
1.取家兔2只，观察其正常情况（呼吸、肌张力及大小便）。
2.甲兔给硫酸镁250mg／kg灌胃，乙兔按同样剂量深部肌内注射硫酸镁，观察两兔
所出现的症状。
·
3.若兔出现四肢瘫痪、呼吸困难时立即自耳缘静脉注射氯化钙25—50mg／kg，观察
上述情况是否缓解。
[结果整理及分析]
记录并比较两兔所出现的反应，分析给药途径不同对药物的作用有何影
响。
分析Ca2＋与Mg2＋的拮抗作用机理。
[注意事项]
1.葡萄糖酸钙也可用于解救硫酸镁中毒。
2.注射钙剂速度要慢，以免引起心室颤动并防止药物渗出血管外。
[思考题]
同一药物相同剂量以不同给药途径为什么会出现不同的药物反应？
实验三戊巴比妥钠半数有效量（ED50）的测定
〔DeterminationOfMedianEffectiveDoes（ED50）OfSodiumPentobarbital〕
[目的和原理]测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠催眠作用的ED50值。
戊巴比妥钠为巴比妥类镇静催眠药，用适当剂量给小鼠腹腔注射后产生的催眠效应，常用翻正反射的消失来判断，该指标仅有阳性（睡眠）和阴性（不睡眠）两种现象，属于质反应。
质反应量效曲线的横坐标为对数剂量，而纵坐标采用阳性反应发生的频数时，一般为常态分布曲线。
如改用累加阳性频数为纵坐标时，可以得到标准的S型曲线。
该曲线的中央部分（50%反应处）接近一条直线，斜度最大，其相应的剂量也就是能使群体中半数个体出现某一效应的剂量，通常称为半数效应量。
如效应为疗效，则称半数有效量（ED50）；
如效应为死亡，则称半数致死量（LD50）。
这些数值是评价药物作用强度和药物安全性的重要参数。
测定ED50和LD50的方法基本一致，只是所观察的指标不同。
前者以药效为指标，后者以动物死亡为指标。
常用的测定方法有Bliss法（正规机率单位法），Litchfield-Wilcoxon机率单位图解法，Kaerber面积法，孙瑞元改进的Kaerber法（点斜法）及Dixon-Mood法（序贯法）等。
其中孙氏改进的Kaerber法因其简捷性和精确性更为常用。
孙氏改进的Kaerber法的设计条件是：
各组实验动物数相等，各组剂量呈等比数列，各组动物的反应率大致符合常态分布。
若以Xm为最大反应率组剂量的对数，i为组间剂量比的对数，p为各组反应率，Pm为最高反应率，Pn为最低反应率，n为实验组数，则：
ED50＝lg-1[Xm－i（∑P－0.5）＋i/4（1－Pm－Pn）]（4－5）
含0%及100%反应率时，
ED50＝lg-1[Xm－i（∑P－0.5）]（4－6）
ED50的95％可信限＝lg-1（lgED50±
1.96·
S）（4－7）
其中S＝i
（4－8）
小鼠60只，体重18～24g；
戊巴比妥钠溶液（sodiumpentobarbitalsolution）2.00mg/ml，2.40mg/ml，2.89mg/ml，3.47mg/ml，4.16mg/ml，5.00mg/ml；
小鼠笼，天平，0.5ml或0.25ml注射器。
1、确定给药剂量：
先以少量动物做预实验，以获得小鼠对戊巴比妥钠催眠反应率为100％的最小剂量（ED100）和反应率为0％的最大剂量（ED0）。
然后在此剂量范围内，按等比数列分成几个剂量组（一般4～8组），各组剂量的公比（r）为r＝n-1√ED100/ED0
求得r后，自第一剂量组（ED0）开始乘以r，可得相邻的下一个组的剂量。
若共分为6个组，各组剂量分别为ED0、r·
ED0、r2·
ED0、r3·
ED0、r4·
ED0、r5·
ED0。
2、给药：
取体重18～22g的健康小鼠50只，查随机数字表，随机分为6个组，每组10只。
按表4－6所列的各组给药浓度分别腹腔注射10ml/kg。
3、记录结果：
以翻正反射消失为入睡指标，观察药物的催眠效应，记录各组腹腔注射后15min内睡眠鼠数，填入表4－6。
[结果整理及分析]
依表4－6所列，分别计算各组P和P2。
再按（4－5）或（4－6）式计算ED50，（4－7）及（4－8）式计算ED50的95％可信限。
表4－6戊巴比妥钠ED50计算用表
组别
小鼠数
药物浓度
（mg/ml）
给药剂量
（mg/kg）
对数剂量
催眠鼠数
P
P2
1
10
2.00
20.0
1.3010
2
2.40
24.0
1.3806
3
2.89
28.9
1.4602
4
3.47
34.7
1.5398
5
4.16
41.6
1.6194
6
5.00
50.0
1.6990
∑
1、若用50只小鼠，随机分为5个剂量组进行实验，各组动物可参照20mg/kg、25mg/kg、31mg/kg，39mg/kg，49mg/kg给药。
（药物浓度为2.45mg/ml、1.96mg/ml、1.57mg/ml、1.25mg/ml、1.00mg/ml、）以20ml/kg腹腔注射。
2、随机分组时，可先称各小鼠体重，将体重相同小鼠放一笼，分别做好标记。
再按确定组数查随机数字表分组，使各组平均体重及体重分布尽可能一致。
3、本实验为定量实验，注射药量必须准确。
给药后要仔细观察药物反应，但不可过多地翻动小鼠，以免影响实验结果。
[思考题]ED50的定义，治疗指数的定义、意义。
（张树平）
实验四戊巴比妥钠半数致死量（LD50）的测定
（DeterminationofMedianLethalDose（LD50）ofSodiumPentobarbital）
测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠的半数致死量（LD50）。
LD50测定的方法和原理与ED50测定基本相同，区别在于测定LD50的观察指标是死亡和生存。
戊巴比妥钠溶液（SodiumPentobarbitalsolution）9.38mg/ml、7.50mg/ml、6.00mg/ml、4.80mg/ml、3.80mg/ml。
用孙氏改进Kaerber氏法。
取小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别腹腔注射不同浓度的戊巴比妥钠20ml/kg（剂量分别为187.5、150.0、120.0、96.0及76.0mg/kg），观察记录给药后24h内各组死亡鼠数。
1.将实验结果列入表5-1
表5-1戊巴比妥钠的LD50计算用表
分组
剂量
实验鼠数
死亡鼠数
死亡百分率（%）
187.5
150.0
120.0
96.0.
76.0
2.计算：
LD50=log-1[Xm-i（ΣP-0.5）]
式中Xm=log187.5=2.273；
i=log
=0.0969
LD50的95%可信限=log-1（logLD50±
S）
S=i
[思考题]LD50的定义，化疗指数的定义、意义。
实验六有机磷酸酯类中毒与解救
（IntoxicationandDetoxificationOfOrganophosphate）
【目的和原理】
了解有机磷酸酯类中毒的症状，观察阿托品和解磷定对中毒的解救效果。
敌敌畏是一种有机磷酸酯类的剧毒农药，可抑制胆碱酯酶，使体内积聚大量的乙酰胆碱，导致N样和M样症状。
阿托品和解磷定可分别解除M样症状和N样症状，恢复胆碱酯酶活性，达到解救目的。
【实验材料】
1．动物：
家免1只（2.5kg左右）。
2．药品：
10mg／m1敌敌畏溶液（DDVsolution）；
lmg／m1硫酸阿托品溶液（atropinesulfatesolution）；
25mg／m1碘解磷定溶液（pyraloximeiodidesolution）。
3．器材：
家兔固定箱，注射器，小鼠灌胃器，婴儿秤。
【实验步骤】
1．取家免1只，称重，观察并记录下列生理指标（活动情况呼吸、瞳孔大小、唾液分泌、
大小便、肌张力及有无肌震颤等）。
2．腹腔注射敌敌畏溶液20mg／kg，密切观察并记录上述各项生理指标的变化。
2．中毒症状明显后，立即耳静脉注射硫酸阿托晶溶液2mg／kg密切观察各项生理指
标的变化。
（哪些症状改善了，哪些症状没有改善）。
然后耳静脉注射碘解磷定溶液50mg／kg，给药后密切观察各项生理指标的变化。
[结果整理]
将实验结果填入表中：
表阿托品和解磷定对敌敌畏中毒的解救作用
给药顺序活动呼吸瞳孔唾液大小便肌张力肌震颤
情况情况大小分泌情况大小程度
敌敌畏前
敌敌畏后
阿托品后
解磷定后
［注意事项］
⒈敌敌畏可通过皮肤吸收，接触后应立即冲洗干净。
⒉给解救药时动作要快,以免动物死亡。
［思考问题］
⒈对中度和重度的有机磷农药中毒的解救，为什么必须阿托品和解磷定和用？
⒉分析用药后出现各种症状的原因？
（徐庆荣）
实验七药物对家兔的导泻作用
（CatharticEffectOfDrugsinRabbits）
[目的和原理]
观察硫酸镁和液体石蜡对肠道的影响，并分析其作用机理。
硫酸镁与液体石蜡都具有导泻作用，但作用机理及作用特点不同。
本实验于
互不相通的3段肠管内分别注入硫酸镁、’液体石蜡和生理盐水，观察它们对肠道的影响，
并分析其作用机理。
[实验材料]
家兔6只，体重1.5～2.5kg；
200mg／ml乌拉坦溶液（urethanesolution）,200mg／1nl硫酸镁溶液（magnesiumsul~atesolution）,液体石蜡（1iquidparaffin）,生理盐水（normalsaline）;
婴儿秤，兔手术台，手术器械，缝针，缝线，20ml注射器，2ml注射器。
[实验步骤]，
1.麻醉：
取家兔1只，称重，耳缘静脉注射200mg／mi乌拉坦5ml／kg，麻醉后仰位固定于兔手术台上。
2.手术及给药：
剪去腹部毛，沿腹正中线切口，打开腹腔，找出部分回肠。
轻轻将
肠内容物挤向非实验段，用线结扎成互不相通的3段，每段3em。
向各段分别注入200mg／ml硫酸镁溶液、液体石蜡和生理盐水各2ml。
注射完毕做好标记，将肠回纳腹内，用大止血钳关闭腹腔，用浸有生理盐水的纱布覆盖刀口。
3.观察结果：
80min后，打开腹腔，找出实验肠段，观察各肠段的膨胀情况与充血
情况。
再用注射锚抽取各肠段内的液体，记录容积。
最后剪开肠壁，观察肠内壁充血情况。
[结果整理及分析]
将观察到的各肠段膨胀情况、充血情况及液体容积数填入表中，分析各肠段变化的机理。
表药物对在体兔肠的影响
给药肠段膨胀情况（+）充血情况（+）肠内液体容积（ml）
硫酸镁
液体石蜡
生理盐水
[注意事项]
1．所分离肠段力求等长，以保证实验结果的准确性。
2.操作时动作要轻柔，切勿损伤肠系膜血管，并尽量减少对肠段的损伤，经常用生
理盐水湿润创面。
3.室内温度较低时，应给家兔采取保温措施。
1.硫酸镁和液体石蜡导泻各有何特点？
（王巧云）
实验八苯巴比妥钠的抗回苏灵惊厥作用
（AntkconvulsiveEffectofSodiumPhenobarbitalontheConvulsionInducedbyDimefline
观察苯巴比妥钠对抗回苏灵引起的惊厥作用。
本实验属于药物致惊厥，回苏灵可直接兴奋延脑呼吸中枢，过量则兴奋脊髓，引起惊厥。
根据用药后能否抑制惊厥的发作，可筛选具有抗惊厥作用的药物。
【实验材料】
⒈动物：
小鼠24只，体重18—22g。
⒉药品与试剂：
5mg／m1苯巴比妥钠溶液（sodiumPhenobarbitalsolution）；
0.5mg／ml回苏灵溶液（dimeflinesolution）；
生理盐水normalsaline；
⒊天平，小鼠笼，注射器。
【实验步骤】
⒈取小鼠24只，称重，分为甲、乙两组，分别腹腔注射下列药物10ml／kg。
甲组：
50mg／m1苯巴比妥钠溶液，乙组：
等容量生理盐水。
⒉药后30min各组小鼠均皮下注射0.5mg／ml回苏灵溶液10ml／kg（或戊四氮100mg／kg），观察20min内出现惊厥的动物数，（后肢伸直为惊厥指标）。
【结果整理】
⒈综合各组实验结果填入自行设计的表内。
⒉用X2检验判定给药组与对照组惊厥发生率有否显著性差异。
【注意事项】
回苏灵用量要准确，否则影响实验结果。
【思考问题】
讨论回苏灵引起惊厥及苯巴比妥抗惊厥的作用原理。
（徐庆荣）
实验九药物抗小鼠电惊厥作用
（AnticonvulsiveEffectsofDrugsonElectricConvulsion）
【目的和原理】
观察苯巴比妥钠及苯妥英钠抗小鼠电惊厥作用。
电惊厥是筛选抗癫痫大发作药物的常用病理模型。
给小鼠适当的电刺激，可诱发类似临床癫痫大发作的惊厥反应，其过程是：
强直屈曲期→后肢伸直期→阵挛期→恢复期。
以后肢强直作为惊厥指标。
通过观察给药前后惊厥反应的变化，判断药物的抗电惊厥作用。
【实验材料】
小鼠50只，体重18～22g。
⒉药物：
10mg／ml苯巴比妥钠溶液（sodiumphenobarbitalsolution）；
l0mg／ml苯妥英钠溶液（sodiumphenytoinsolution）：
30mg／m1苦味酸溶液（picricacidsolution）。
⒊器材：
YSD一4型药理生理多用仪，导线，金属鳄鱼夹，小鼠笼，1mi注射器
生理盐水，棉球。
⒈调节药理生理多用仪：
将多用仪“刺激方式”置“单次”，“A频率’’置“4H；
”，
“时间”置“o.25sec”，后面板开关置“电惊厥”,“电压调节’’右旋由小至最大位。
将连
有2只金属鳄鱼夹的导线插入后面板“输出”插座内，接通电源导线，打开电源开关。
⒉ 筛选动物：
取小鼠1只，称重。
将输出线上的两个鳄鱼夹尖端用生理盐水浸湿，一个夹在小鼠两耳间的皮肤上，另一个夹住小鼠的下唇，将小鼠悬空。
按下“启动”钮，观察小鼠是否出现惊厥（以后肢伸直为指标），有惊厥反应的为初选合格。
不出现惊厥的小鼠，可将“A频率”调至“2Hz”或“1Hz”，如仍不惊厥则弃之。
按此法选出12只小鼠，分别用苦味酸标记编号，并记下刺激参数（“A频率”及“时间’’）。
⒊ 随机分组：
将选出的12只小鼠用抽签法随机分为甲、乙、丙3组，每组4只。
⒋ 给药：
待惊厥小鼠恢复常态后，分别腹腔注射下列药物：
10mg／m1苯巴比妥钠溶液l0ml／kg（100mg／kg）；
乙组：
10mg／ml苯妥英钠溶液10ml／kg（100mg／kg）；
丙组：
生理盐水10ml／kg。
记录给药时间，观察各组小鼠活动情况。
5．观察药后反应：
给药后30min，用药前的同样刺激参数对小鼠逐一进行电刺激，观察惊厥情况。
⒈描述给药后各组小鼠的活动情况有何不同。
⒉将全室给药后惊厥反应的有或无资料合并，填入下表，进行统计处理。
表 药物抗惊厥作用实验结果统计处理表
组别动物反应情况合计
惊厥不惊厥
给药组aba+b
对照组cdc+d
合计a+cb+dn=a+b+c+d
由于本实验属于小样本的计数资料，且有可能出现“o”，宜用直接概率法,算出确切的概率，此法比X2检验灵敏且方便。
公式为：
（a+b）!
（c+d）!
（a+c）!
（b+d）!
a!
b!
c!
d!
n!
（4-3）
或logp＝log（a+b）!
+log（c+d）!
十log（a+c）!
+log（b+d）!
（4-4）
一（1oga!
+logb!
+logc!
+logd!
+logn!
）
该法计算出的p为单侧概率。
因为本实验是观察两种药物是否具有抗电惊厥作用，给药组阳性率可能高于对照组，也可能低于对照组，故属双侧检验。
判断统计学意义的标准是：
如p≤0.025为“组间差别有显著性统计学意义”；
如p≤0.005为“组间差别有极显著性统计学意义”；
如p>
0.025为“组间差别无显著性统计学意义”，可判断该药无效。
1．通电参数由于动物个体差异有所不同，电压以能引起惊厥为宜。
给药前后电刺激
参数要相同。
2．刺激时，两鳄鱼夹切勿相碰，以免烧坏药理生理多用仪。
3．鳄鱼夹要夹住小鼠皮肤，以保证导电。
3．统计学处理时，如表4—3中a、b、c和d皆不为零，则需加算更加极端情况的概
率。
方法参见上海第一医学院卫生统计学教研组编：
《医学统计方法》（上海科学技术出版社1979年第1版，第126页）。
【思考问题】根据实验结果，分析苯巴比妥的抗惊厥作用。
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