药理实验Word格式.docx

1、生理盐水（normalsaline）；250mgm1硫酸镁溶液（magmsidmsulfatesolution）；50mgm1氯化钙溶液（calciumchloridesolution）。3.器材：灌胃管（可用导尿管代替）,兔开口器，注射器。1.取家兔2只，观察其正常情况（呼吸、肌张力及大小便）。2.甲兔给硫酸镁250mgkg灌胃，乙兔按同样剂量深部肌内注射硫酸镁，观察两兔所出现的症状。 3.若兔出现四肢瘫痪、呼吸困难时立即自耳缘静脉注射氯化钙2550mgkg，观察上述情况是否缓解。结果整理及分析 记录并比较两兔所出现的反应，分析给药途径不同对药物的作用有何影响。分析Ca2与Mg2的拮抗作用机

2、理。注意事项1.葡萄糖酸钙也可用于解救硫酸镁中毒。2.注射钙剂速度要慢，以免引起心室颤动并防止药物渗出血管外。思考题同一药物相同剂量以不同给药途径为什么会出现不同的药物反应？实验三 戊巴比妥钠半数有效量（ED50）的测定Determination Of Median Effective Does（ED50）Of Sodium Pentobarbital目的和原理 测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠催眠作用的ED50值。戊巴比妥钠为巴比妥类镇静催眠药，用适当剂量给小鼠腹腔注射后产生的催眠效应，常用翻正反射的消失来判断，该指标仅有阳性（睡眠）和阴性（不睡眠）两种现象，属于质反应。质反应量效曲线的横坐标为

3、对数剂量，而纵坐标采用阳性反应发生的频数时，一般为常态分布曲线。如改用累加阳性频数为纵坐标时，可以得到标准的S型曲线。该曲线的中央部分（50%反应处）接近一条直线，斜度最大，其相应的剂量也就是能使群体中半数个体出现某一效应的剂量，通常称为半数效应量。如效应为疗效，则称半数有效量（ED50）；如效应为死亡，则称半数致死量（LD50）。这些数值是评价药物作用强度和药物安全性的重要参数。测定ED50和LD50的方法基本一致，只是所观察的指标不同。前者以药效为指标，后者以动物死亡为指标。常用的测定方法有Bliss法（正规机率单位法），Litchfield-Wilcoxon机率单位图解法，Kaerber

4、面积法，孙瑞元改进的Kaerber法（点斜法）及Dixon-Mood法（序贯法）等。其中孙氏改进的Kaerber法因其简捷性和精确性更为常用。孙氏改进的Kaerber法的设计条件是：各组实验动物数相等，各组剂量呈等比数列，各组动物的反应率大致符合常态分布。若以Xm为最大反应率组剂量的对数，i为组间剂量比的对数，p为各组反应率，Pm为最高反应率，Pn为最低反应率，n为实验组数，则：ED50lg-1Xmi（P0.5）i/4（1PmPn） （45）含0%及100%反应率时，ED50lg-1Xmi（P0.5） （46）ED50的95可信限lg-1（lgED501.96S） （47） 其中Si （48）

5、 小鼠60只，体重1824g；戊巴比妥钠溶液（sodium pentobarbital solution）2.00mg/ml，2.40mg/ml，2.89mg/ml，3.47mg/ml，4.16mg/ml，5.00mg/ml；小鼠笼，天平，0.5ml或0.25ml注射器。1、确定给药剂量：先以少量动物做预实验，以获得小鼠对戊巴比妥钠催眠反应率为100的最小剂量（ED100）和反应率为0的最大剂量（ED0）。然后在此剂量范围内，按等比数列分成几个剂量组（一般48组），各组剂量的公比（r）为 rn-1ED100/ED0求得r后，自第一剂量组（ED0）开始乘以r，可得相邻的下一个组的剂量。若共分为6

6、个组，各组剂量分别为ED0、rED0、r2ED0、r3ED0、r4ED0、r5ED0。2、给药：取体重1822g的健康小鼠50只，查随机数字表，随机分为6个组，每组10只。按表46所列的各组给药浓度分别腹腔注射10ml/kg。3、记录结果：以翻正反射消失为入睡指标，观察药物的催眠效应，记录各组腹腔注射后15min内睡眠鼠数，填入表46。结果整理及分析依表46所列，分别计算各组P和P2。再按（45）或（46）式计算ED50，（47）及（48）式计算ED50的95可信限。表46 戊巴比妥钠ED50计算用表 组别小鼠数药物浓度（mg/ml）给药剂量（mg/kg）对数剂量催眠鼠数PP21102.002

7、0.01.301022.4024.01.380632.8928.91.460243.4734.71.539854.1641.61.619465.0050.01.69901、若用50只小鼠，随机分为5个剂量组进行实验，各组动物可参照20mg/kg、25mg/kg、31mg/kg，39 mg/kg，49 mg/kg给药。（药物浓度为2.45 mg/ml、1.96 mg/ml、1.57 mg/ml、1.25 mg/ml、1.00 mg/ml、）以20ml/kg腹腔注射。2、随机分组时，可先称各小鼠体重，将体重相同小鼠放一笼，分别做好标记。再按确定组数查随机数字表分组，使各组平均体重及体重分布尽可能一

8、致。3、本实验为定量实验，注射药量必须准确。给药后要仔细观察药物反应，但不可过多地翻动小鼠，以免影响实验结果。思考题ED50的定义，治疗指数的定义、意义。 （张树平）实验四 戊巴比妥钠半数致死量（LD50）的测定（Determination of Median Lethal Dose（LD50） of Sodium Pentobarbital）测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠的半数致死量（LD50）。LD50测定的方法和原理与ED50测定基本相同，区别在于测定LD50的观察指标是死亡和生存。戊巴比妥钠溶液（Sodium Pentobarbital solution）9.38mg/ml、7.50mg

9、/ml、6.00mg/ml、4.80mg/ml、3.80mg/ml。用孙氏改进Kaerber氏法。取小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别腹腔注射不同浓度的戊巴比妥钠20ml/kg（剂量分别为187.5、150.0、 120.0、96.0及76.0mg/kg），观察记录给药后24h内各组死亡鼠数。1. 将实验结果列入表5-1表5-1 戊巴比妥钠的LD50计算用表分组剂量实验鼠数死亡鼠数死亡百分率（%）187.5150.0120.096.0.76.02. 计算：LD50=log-1Xm-i（P-0.5）式中Xm=log187.5=2.273；i=log =0.0969LD50的95%可信限=

10、log-1（logLD50S）S=i思考题LD50的定义，化疗指数的定义、意义。实验六 有机磷酸酯类中毒与解救（Intoxication and Detoxification Of Organophosphate）【目的和原理】 了解有机磷酸酯类中毒的症状，观察阿托品和解磷定对中毒的解救效果。敌敌畏是一种有机磷酸酯类的剧毒农药，可抑制胆碱酯酶，使体内积聚大量的乙酰胆碱，导致N样和M样症状。阿托品和解磷定可分别解除M样症状和N样症状，恢复胆碱酯酶活性，达到解救目的。【实验材料】 1动物：家免1只（2.5kg左右）。2药品：10mgm1敌敌畏溶液（DDV solution）；lmgm1硫酸阿托品溶

11、液（atropine sulfate solution）；25mgm1碘解磷定溶液（pyraloxime iodide solution）。3器材：家兔固定箱，注射器，小鼠灌胃器，婴儿秤。【实验步骤】1 取家免1只，称重，观察并记录下列生理指标（活动情况呼吸、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤等）。2腹腔注射敌敌畏溶液20mgkg，密切观察并记录上述各项生理指标的变化。 2 中毒症状明显后，立即耳静脉注射硫酸阿托晶溶液2mgkg密切观察各项生理指标的变化。（哪些症状改善了，哪些症状没有改善）。然后耳静脉注射碘解磷定溶液50mgkg ，给药后密切观察各项生理指标的变化。结果整理 将实

12、验结果填入表中：表 阿托品和解磷定对敌敌畏中毒的解救作用 给药顺序 活动 呼吸 瞳孔 唾液 大小便 肌张力 肌震颤 情况 情况 大小 分泌 情况 大小 程度敌敌畏前敌敌畏后阿托品后解磷定后注意事项 敌敌畏可通过皮肤吸收，接触后应立即冲洗干净。 给解救药时动作要快,以免动物死亡。思考问题 对中度和重度的有机磷农药中毒的解救，为什么必须阿托品和解磷定和用？ 分析用药后出现各种症状的原因？ （徐庆荣）实验七 药物对家兔的导泻作用（Cathartic Effect Of Drugs in Rabbits） 目的和原理 观察硫酸镁和液体石蜡对肠道的影响，并分析其作用机理。硫酸镁与液体石蜡都具有导泻作用，

13、但作用机理及作用特点不同。本实验于互不相通的3段肠管内分别注入硫酸镁、液体石蜡和生理盐水，观察它们对肠道的影响，并分析其作用机理。实验材料 家兔6只，体重1.52.5kg；200mgml乌拉坦溶液（urethanesolution）,200mg1nl硫酸镁溶液（magnesiumsulatesolution）, 液体石蜡（1iquidparaffin）, 生理盐水（normalsaline）;婴儿秤，兔手术台，手术器械，缝针，缝线，20ml注射器，2ml注射器。 实验步骤 ， 1.麻醉：取家兔1只，称重，耳缘静脉注射200mgmi乌拉坦5mlkg，麻醉后仰位固定于兔手术台上。 2.手术及给药：

14、剪去腹部毛，沿腹正中线切口，打开腹腔，找出部分回肠。轻轻将肠内容物挤向非实验段，用线结扎成互不相通的3段，每段3em。向各段分别注入200mgml硫酸镁溶液、液体石蜡和生理盐水各2ml。注射完毕做好标记，将肠回纳腹内，用大止血钳关闭腹腔，用浸有生理盐水的纱布覆盖刀口。 3.观察结果：80min后，打开腹腔，找出实验肠段，观察各肠段的膨胀情况与充血情况。再用注射锚抽取各肠段内的液体，记录容积。最后剪开肠壁，观察肠内壁充血情况。 结果整理及分析将观察到的各肠段膨胀情况、充血情况及液体容积数填入表中，分析各肠段变化的机理。 表 药物对在体兔肠的影响 给药肠段 膨胀情况（+） 充血情况（+） 肠内液体

15、容积（ml） 硫酸镁 液体石蜡 生理盐水注意事项 1 所分离肠段力求等长，以保证实验结果的准确性。 2.操作时动作要轻柔，切勿损伤肠系膜血管，并尽量减少对肠段的损伤，经常用生理盐水湿润创面。3.室内温度较低时，应给家兔采取保温措施。1. 硫酸镁和液体石蜡导泻各有何特点？ （王巧云）实验八 苯巴比妥钠的抗回苏灵惊厥作用（Antkconvulsive Effect of Sodium Phenobarbital on the Convulsion Induced by Dimefline观察苯巴比妥钠对抗回苏灵引起的惊厥作用。本实验属于药物致惊厥，回苏灵可直接兴奋延脑呼吸中枢，过量则兴奋脊髓，引起

16、惊厥。根据用药后能否抑制惊厥的发作，可筛选具有抗惊厥作用的药物。【 实验材料】 动物：小鼠24只，体重1822g。 药品与试剂：5mgm1苯巴比妥钠溶液（sodium Phenobarbital solution）；0.5mgml回苏灵溶液（dimefline solution）；生理盐水normal saline； 天平，小鼠笼，注射器。【实验步骤】 取小鼠24只，称重，分为甲、乙两组，分别腹腔注射下列药物10mlkg 。甲组：50mgm1苯巴比妥钠溶液，乙组：等容量生理盐水。 药后30min各组小鼠均皮下注射0.5mgml回苏灵溶液10mlkg （或戊四氮100mgkg），观察20min内

17、出现惊厥的动物数，（后肢伸直为惊厥指标）。【结果整理】 综合各组实验结果填入自行设计的表内。 用X2检验判定给药组与对照组惊厥发生率有否显著性差异。【注意事项】回苏灵用量要准确，否则影响实验结果。【思考问题】讨论回苏灵引起惊厥及苯巴比妥抗惊厥的作用原理。（徐庆荣） 实验九 药物抗小鼠电惊厥作用（Anticonvulsive Effects of Drugs on Electric Convulsion） 【目的和原理】 观察苯巴比妥钠及苯妥英钠抗小鼠电惊厥作用。 电惊厥是筛选抗癫痫大发作药物的常用病理模型。给小鼠适当的电刺激，可诱发类似临床癫痫大发作的惊厥反应，其过程是：强直屈曲期后肢伸直期阵

18、挛期恢复期。以后肢强直作为惊厥指标。通过观察给药前后惊厥反应的变化，判断药物的抗电惊厥作用。【实验材料】小鼠50只，体重1822g。 药物：10mgml苯巴比妥钠溶液（sodium phenobarbital solution）；l0mgml苯妥英钠溶液（sodium phenytoin solution）：30mgm1苦味酸溶液（picric acid solution）。 器材：YSD一4型药理生理多用仪，导线，金属鳄鱼夹，小鼠笼，1mi注射器生理盐水，棉球。 调节药理生理多用仪：将多用仪“刺激方式”置“单次”，“A频率置“4H；”，“时间”置“o.25sec”，后面板开关置“电惊厥”,“

19、电压调节右旋由小至最大位。将连有2只金属鳄鱼夹的导线插入后面板“输出”插座内，接通电源导线，打开电源开关。 筛选动物：取小鼠1只，称重。将输出线上的两个鳄鱼夹尖端用生理盐水浸湿，一个夹在小鼠两耳间的皮肤上，另一个夹住小鼠的下唇，将小鼠悬空。按下“启动”钮，观察小鼠是否出现惊厥（以后肢伸直为指标），有惊厥反应的为初选合格。不出现惊厥的小鼠，可将“A频率”调至“2Hz”或“1Hz”，如仍不惊厥则弃之。按此法选出12只小鼠，分别用苦味酸标记编号，并记下刺激参数（“A频率”及“时间）。 随机分组：将选出的12只小鼠用抽签法随机分为甲、乙、丙3组，每组4只。 给药：待惊厥小鼠恢复常态后，分别腹腔注射下列

20、药物：10mgm1苯巴比妥钠溶液l0mlkg（100mgkg）；乙组：10mgml苯妥英钠溶液10mlkg（100mgkg）；丙组：生理盐水10mlkg。记录给药时间，观察各组小鼠活动情况。 5观察药后反应：给药后30min，用药前的同样刺激参数对小鼠逐一进行电刺激，观察惊厥情况。 描述给药后各组小鼠的活动情况有何不同。 将全室给药后惊厥反应的有或无资料合并，填入下表，进行统计处理。 表 药物抗惊厥作用实验结果统计处理表组别 动物反应情况 合计 惊厥 不惊厥 给药组 a b a+b对照组 c d c+d合计 a+c b+d n = a+b+c+d由于本实验属于小样本的计数资料，且有可能出现“o

21、”，宜用直接概率法,算出确切的概率，此法比X2检验灵敏且方便。公式为： （a+b）! （c+d）! （a+c）! （b+d）! a! b! c! d! n! （4-3） 或logplog（a+b）!+log（c+d）!十log（a+c）!+log（b+d）! （4-4） 一 （1oga!+logb!+logc!+logd!+logn!）该法计算出的p为单侧概率。因为本实验是观察两种药物是否具有抗电惊厥作用，给药组阳性率可能高于对照组，也可能低于对照组，故属双侧检验。判断统计学意义的标准是：如p0.025为“组间差别有显著性统计学意义”；如p0.005为“组间差别有极显著性统计学意义”；如p0.025为“组间差别无显著性统计学意义”，可判断该药无效。1通电参数由于动物个体差异有所不同，电压以能引起惊厥为宜。给药前后电刺激参数要相同。2刺激时，两鳄鱼夹切勿相碰，以免烧坏药理生理多用仪。3鳄鱼夹要夹住小鼠皮肤，以保证导电。3 统计学处理时，如表43中a、b、c和d皆不为零，则需加算更加极端情况的概率。方法参见上海第一医学院卫生统计学教研组编：医学统计方法（上海科学技术出版社1979年第1版，第126页）。【思考问题】根据实验结果，分析苯巴比妥的抗惊厥作用。