黄鳝的人工繁殖技术的研究Word文档格式.docx
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2.4.2催产：
2.7滴水孵化法：
8
3过程管理8
3.1饲养环境8
3.2光照时间8
3.3饲料管理8
3.4孵化管理9
3.5后期管理9
4.实验结果与分析10
5.总结11
参考文献12
黄鳝的人工繁殖技术的研究
（指导老师：
董昌金）
（湖北师范学院生命科学学院生物科学0904班湖北黄石435002）
摘要：
黄鳝（Monopterusalbus）属鱼纲，合鳃目，合鳃科，黄鳝属[1]。
近年来，由于受环境的污染及滥捕的加剧，致使黄鳝的自然资源量不断下降。
虽然黄鳝的人工繁殖在我国许多地方均已获得成功，但因黄鳝的性转化现象、怀卵量低及吐泡沫营巢孵卵[2]等特点，使黄鳝人工繁殖首先不同与其它鱼类的人工繁殖。
其次在全人工条件下，黄鳝雌雄性腺发育不能完全同步，受精率、孵化率不高，孵化时间长、出膜时间不整齐等因素，这使黄鳝的人工繁殖更具特殊性，要获得大量的苗种有相当的难度。
目前这已成为制约黄鳝的大规模人工集约化养殖及取得更多发展的主要因素之一。
本实验就是基于以上情况主要针对黄鳝人工繁殖技术而进行的研究.，主要研究了不同的外源性激素对黄鳝的催产效果的影响，并通过与拟自然繁殖对照[3]，观察了解人工繁殖的效应。
关键词：
黄鳝人工繁殖外源性激素
ArtificialreproductiontestofMonopterusalbus
ZhaoShuangshuang（Tutor:
dongchangjin）
（CollegeofLifeSciencesdepartment,HubeiNormalUniversity,Huangshi,435002）
Abstract:
Ricefieldeel（Monopterusalbu）isoneoftheeconomicallyimportantfishspeciesinChina.Itbelongstoclasspisces,ordersynbranchiformes,familysynbranchidae,andgenusmonopterusintaxonomy.Inrecentyears,thenaturalresourceofricefieldeelisdecliningconstantlybecauseoftheexcessiveenvironmentalpollutionandoverfishing.Ontheotherhand,thericefieldeelpossessesspecialcharacteristicsofsexreversal,lowfecundityandspittingfrothnestforhatching.So,theartificialreproductionofricefieldeelisdifferencewithotherfishspecies.Itisquiltdifficulttoproduceseedsinlargescaleoncontrolledconditions.Thesuccessfulartificialbreedingislimitedbysuchfactorsasasynchronizationofthemaleandfemalegonaddevelopment,lowfertilizingrateandhatchingrate,longhatchingperiodandasynchronoushatchingout,etc.
ThispaperstudiesontheartificialreproductionofMonopterusalbus,.Themainresearchisthedifferenteffectofexogenoushormones:
andcontrastwiththenaturalbreeding,observetheeffectofartificialbreeding.
Keywords:
MonopterusalbuArtificialpropagationExogenoushormone
引言
黄鳝属鱼纲，合鳃目，合鳃科，黄鳝属。
。
黄鳝是我国重要的经济鱼类之一，由于黄鳝属洞穴性底栖鱼类，不同于一般鱼类，观察它的繁殖生态的难度大，加之近年来，黄鳝栖息的自然生态环境随着农药、化肥的使用，日益受到污染，而资源减少刺激市场价格上扬又导致人为滥捕加剧，黄鳝资源濒临枯竭。
为满足市场需要，人工繁殖在所必行。
由于黄鳝属吐泡营巢繁殖的鱼类，且怀卵量低，一般黄鳝在繁殖期间，黄鳝先在水表面吐泡沫，做成泡沫巢，然后雌鳝在水中产卵，与此同时，雄鳝即排精，精液将卵子托于泡沫巢中，受精卵在泡沫巢中孵化。
而黄鳝在全人工条件下，雌雄性腺发育不能完全同步，致使黄鳝在人工饲养的条件下，很难得到大量的繁殖，这已经成为至于黄鳝养殖业快速发展的最主要的因素之一，为了解决黄鳝大规模的人工繁殖问题，传统的方法已不可行，因此本实验就是基于以上情况主要针对黄鳝人工繁殖技术而进行的研究.，主要研究了不同的外源性激素对黄鳝的催产效果的影响，并通过与拟自然繁殖对照，观察了解人工繁殖的效应。
1,实验时间
有实验结果表明，雌黄鳝的卵粒直径、卵巢重量和成熟系数为6-7月达到最大值，这是黄鳝卵巢发育的最佳时期；
而精巢系数的变化不大，在0．16—0．44之间，同样为6—7月达到最大值。
因此黄鳝的人工繁殖时间选在6、7两个月份进行。
2,前期准备
2.1鳝种选择：
（体长、体重、种属…）
雌性：
体长35cm以下（最好26-30cm），腹部臌胀、透明，有明显的卵巢轮廓，体质健壮，无明显伤病。
体重在90～150g之间。
雄性：
体长40cm以上，腹部不透明，体质健壮，活动能力强，无明显伤病。
体重在160～280g之间。
从绝对繁殖力、相对繁殖力以及成熟系数来看，黄斑鳝的繁殖力最强，青黄斑鳝次之，青斑鳝最弱。
所以亲鳝采用黄斑鳝。
亲本雌鳝应选择26—30cm体长段的黄鳝，才能在整体上获得较高的怀卵量和仔鳝数。
外观上雌鳝头较小、不隆起，体背青褐色、无斑点，性温和游态稳重，而且，成熟的雌亲鳝下腹部应膨大柔软，卵巢轮廓明显，腹部呈桔红色，稍透明，透过腹壁可见卵粒排列整齐，用手抚摩腹部则感觉柔软而有弹性，生殖孔微红肿。
外观上雄鳝头较大、隆起明显，体背有色斑，活动能力强，腹部不膨大、有网状血丝纹，生殖孔红肿较突出。
雄亲鳝选择个体大些的，这些精巢内精子活动激烈。
（培养器材、观察器材、分析器材、预防器材…）解剖刀，小剪刀，5ml注射器和5号或6号针头，水葫芦若干，烧杯，量筒，玻璃棒，电子天平，研钵，胶头滴管，毛巾或着纱布，羽毛，温度计，pH试纸，恒温培养箱、显微镜。
……
NaCI0.78克\CaCl20.021克\NaHCo30.0021克\蒸馏水100毫升\KCI0.02克。
催熟素:
促黄体生成激素（LRH-A5）……
催产素:
促黄体生成激素（LRH-A5）、促黄体生成素释放激素类似物（LRH-A）、绒毛膜促性腺激素（HCG），鲤、鲫脑垂体（PG），马来地欧酮（DOM）助产剂2#（HWHO-2）。
LRH-A和HCG按产品包装标明的剂量换算，用生理盐水稀释溶解，达所需浓度。
PG按所需剂量称出，放入干燥洁净的研钵中，干研成粉末。
再加人几滴生理盐水研成糊状，充分研碎后加入相应的生理盐水，配成所需浓度的悬浮液。
消毒杀菌：
对亲鳝、培养器皿、实验用具进行杀菌消毒，创造一个良好的环境，一提高实验的成功率。
…….
2.4亲鳝处理
催熟注射最佳时间在5月25日上午9时左右，水温260C。
注射催熟针，旨在提高黄鳝的性成熟度，每尾注射LRH-A512.5ug、药液量0.5mI，注射部位与方法:
将黄鳝用千毛巾或纱布包好，防止其滑动，然后在腹腔注射，注射深度不超过0.5cm，注射后的黄鳝放回培养箱继续暂养。
2.4.2.1催产药物的种类及其剂量
[4]
黄鳝的催产药物可采用促黄体生成素释放激素类似物（LRH-A），绒毛膜促性腺激素（HCG），鲤、鲫脑垂体（PG）。
注射剂量须根据水温、亲鱼的成熟度和亲鱼大小等情况灵活掌握。
但诱导排卵效果以LRH-A5+DOM和LRH-A5+HWHO-2组合为最佳，HCG为最差。
2.4.2.2催产时间
根据卵细胞的形态、大小和卵黄的分布，黄鳝的卵细胞可以分为五期:
第I期为染色质核仁期;
第II期为周边核仁期;
第III期为初级卵黄期;
第4期为次级和三级卵黄期;
第5期为成熟期。
其中第4期又可分为早、中、晚三期，在晚期的催产可达理想的效果。
催产注射最佳时间在5月31日上午9时，水温250C。
注射催产针，进行催产实验。
黄鳝注射催产剂后48小时还没有开始达到效应时间，催产后72小时即己经逐步达到效应时间，而大部分在90小时开始排卵。
2.4.2.3催产方法
将选好的亲鳝用干毛巾或纱布包好，防止其滑动，然后在胸腔进行注射。
针头先刺进胸部皮肤及肌肉，在肌肉内平行前移约0.5厘米，然后插入胸腔注射，注射垂直深度不超过0.5厘米，注射药液量不超过1毫升。
注射后的亲鳝放在培养箱中暂养，水深控制在20一30厘米，每天换水一次，大约换1/2水量。
由于亲鳝的大小和成熟度不一致，同批注射的亲鳝，其效应时间长短差别很大，因此要持续不断检查，在水温25℃左右时，注射40小时后每隔3小时检查一次。
要检查到注射后80小时左右。
检查的方法是：
捉住亲鳝，用手触摸其腹部，并由前向后移动，如感到鳝卵已经游离，则表明开始排卵，应立即进行人工授精。
2.4.2.4最佳催产剂量探索
因催产剂量为80ug/g体重的DOM或0.08ug/g体重+50ug/g体重的LRH-AS+DOM催产效果相对最好[5]。
所以设计实验
（1）将黄鳝平均分成四组，第一组对照，催熟后，第二组注入70ug/g体重的DOM，第三组注入80ug/g体重的DOM，第四组注入90ug/g体重的DOM。
（2）将黄鳝平均分成五组，第一组对照，催熟后，第二组注入0.08ug/g体重+40ug/g体重的LRH-AS+DOM，第三组注入0.08ug/g体重+50ug/g体重的LRH-AS+DOM，第四组注入0.08ug/g体重+60ug/g体重的LRH-AS+DOM，第五组注入0.08ug/g体重+70ug/g体重的LRH-AS+DOM。
（3）将黄鳝平均分成四组，第一组对照，催熟后，第二组注入0.07ug/g体重+50ug/g体重的LRH-AS+DOM，第三组注入0.08ug/g体重+50ug/g体重的LRH-AS+DOM，第四组注入0.09ug/g体重+50ug/g体重的LRH-AS+DOM。
各组分别在48.72,90h的排卵量。
2.5人工受精[6_9]
先选择雄鳝，生殖孔红肿，用手挤压腹部，能挤出少量透明液体；
有条件的为慎重起见，取少量液体放在400倍以上的显微镜下观察，如见有活动精子，即为成熟雄鳝，放在箱中待用。
将开始排卵的雌鳝取出，一手垫干毛巾握住前部，另一手由前向后挤压腹部，部分亲鳝即可顺利挤出卵，但也有部分亲鳝会出现泄殖腔堵塞现象，此时可用小剪刀在泄殖腔处向内前开0.5一1厘米，然后再将卵挤出，连续3一5次，挤空为止。
将卵挤入瓷盆后（内面一定要光滑），立即把雄鳝杀死，取出精巢（精巢一般呈黑灰色），迅速剪碎，放入盛有卵的盆中（人工授精时的雌雄配比视产卵量的多少而定，一般为3一5:
1）,然后用羽毛轻轻搅拌，边搅拌边加入生理盐水，以能盖住卵为度，充分搅匀后，放置5分钟，再加清水洗去及吸出精巢碎片、血污、破卵、浑浊状的卵，即完成人工授精。
2.6人工孵化[10-11]
孵化器可根据产卵数量的多少因地制宜地选用。
数量少的可选用玻璃缸、脸盆、水族箱，数量多的则可在网箱中孵化。
只要管理得当，均能孵出鳝苗。
在孵化过程中应注意以下三个方面：
孵化方法有静水孵化法、滴水孵化法、泡沫孵化法，其孵化效率依次升高。
（基底铺沙）提前一天在洗净的培养皿底部均匀铺上一层细沙，将受精卵移至铺有细沙的培养皿中，进行流水孵化方式，水深为0.2—0.4cm.覆盖湿纱布（白布最佳）、光线暗些。
将一可控制流速的胶管一端伸入装有经阳光照射的自来水的器皿中，另一端伸入培养皿中。
第1天水滴流速度为10滴/min，第2—3天调至10—20滴/min，第4天后调至30滴/min，并根据情况适当增加滴度，直至孵出幼苗。
3过程管理
3.1饲养环境
由于黄鳝体内无鳔，它不能像一般鱼类在不同水层随意漂浮停留：
一旦停止游动即沉下水底。
而生长阶段必须呼吸空气中的氧。
因此养鳝水体不宜过深。
根据黄鳝大小水深应控制在5-20cm不等，放养密度为2尾/平方米，雌雄各一，温度控制在24—28度。
PH中性左右。
3.2光照时间
长光照周期（18L：
6D）明显促进了黄鳝性腺的发育。
同时，长光照周期对黄鳝生长产生明显抑制作用。
因此，在黄鳝自然繁殖季节之前。
进行长光照周期的刺激可能促使了黄鳝性腺发育或性成熟的近年节律提前启动。
3.3饲料管理
雌鳝饲料中添加维生素E，能有效地改善雌鳝的繁殖性能，其最适添加量为200m∥kg。
亲黄鳝在繁殖季节，要投喂蛋白质较高的饲料，如鱼浆、蚯蚓等，同时搭配亲黄鳝全价配合饲料。
性成熟的亲黄鳝经过高蛋白饲料投喂后，一般5天~7天就会产卵，只要有白色泡沫就是亲黄鳝的产卵巢。
3.4孵化管理
每天早、中、晚各检查一次光照、pH值（5.5最佳）、水温（25-31℃），若发现有死黄鳝卵及时吸出，并记录死卵数量，同时避免受精卵堆积。
孵化特点
卵粒从排出受精到孵出仔鳝的时间差异较大，在一般天然条件下，水温为25—31℃时，5--7d可孵出。
水温为18—25℃时，8--lld可孵出;
超过lld仍未孵出者，将不可能再孵出仔鳝。
孵化时间的长短，除了与水温有关外，还与溶氧量有关。
水体溶氧充足（DO值大于2mg/L）,孵化时间，仔鳝发育正常。
黄鳝胚胎发育的最适温度是25—28度。
孵化时要求水温稳定，自然界中黄鳝的受精率和孵化率可达到95%.
黄鳝胚胎发育过程中，具有不同于其他鱼类的特点:
①胚胎发育时间长，一般需要5-lld;
②出膜时间不一，先后相差约48h;
③出膜仔鳝个体大（体长12-13mm），对环境耐受力强;
④胸鳍在胚胎期形成后，不断地扇动，出膜后逐渐退化。
3.5后期管理
仔鱼的发育
黄鳝仔鱼孵出后，仍然靠卵黄囊维持生命。
待全长达28毫米左右，颌长1.2毫米左右时卵黄囊完全消失，胸鳍及背部、尾部的鳍膜也消失，色素细胞布满头部，使鱼体呈黑褐色，仔鱼能在水中快速游动，并开始摄食小型浮游动物和丝蚯蚓，这时开始给幼鳝投喂食物（约10天）。
4.实验结果与分析
表一DOM催产剂量
组号
总数
排卵尾数
排卵率%
48h
72h
96h
1
10
2
3
4
20
40
表二LRH-A5+DOM，DOM催产剂量
5
50
30
表三LRH-A5+DOM，LRH-A5催产剂量
4.1黄鳝注射催产剂后48小时还没有开始达到效应时间，催产后72小时即己经逐步达
到效应时间，而大部分在%小时开始排卵。
同时表明延长效应时间催产效果明显增加。
4.2使用80ug/g体重的DOM或0.08ug/g体重+50ug/g体重的LRH-AS+DOM催产效果相对最好，可有效诱导黄鳝产卵。
5.总结
5.1黄鳝的鳃退化，在水中不能单靠鳃呼吸，需要咽腔和皮肤辅助呼吸，所以暂养负
鳝的水族箱水不能过深，以免黄鳍呼吸时消耗体力，影响催产效果。
因此黄鳝在育苗
生产中也必须注意这点。
5.2黄鳝是一种具有性逆转的鱼类，一般雌黄鳝体长较小，雄黄鳝体长较大，临界点
在30cm左右，然而在不同的条件下临界点也不同。
对于一龄黄鳝的性逆转是在繁殖后
产生的，即只有在产卵后刁‘会性逆转。
所以，对要实施人工繁殖的亲鳝的选择是比较
重要的。
通常我们根据外形选择亲鳝，均达到成功，但这种方法毕竟是表观的、经验
的，不能完全排除主观判断造成的误差，为此有必要在催产前抽样检查并测定性腺成
熟指数（GSI）值，以剔除未成熟的个体。
5.3黄鳝的性腺发育具有不均衡性，即卵子的成熟度不同步，在同一时期的卵巢内，
各个时相的卵细胞同时存在，这给黄鳝的人工催产带来了一定难度。
通常的做法是在
催产前先注射催熟针，促进卵子的成熟，提高催产效果。
5.4本实验采用的先催熟再催产的二次注射法，从实验结果来看催产效应时间较长，
一般都在96小时左右;
采用的剂量与前人的研究相近;
从效果看，使用两种以上
的外源激素较之使用单一外源激素的诱导排卵效果较好，另外单独使用DOM的效果
也较好，这与四大家鱼有所不同，其原因尚待进一步研究。
参考文献
[1]乔德亮,HCG剂量和受精方式对黄鳝繁殖的影响,皖西学院化学与生命科学系，安徽六安
[2]邴旭文,模仿自然繁殖条件下的黄鳝人工繁殖试验中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，江苏无锡214081
[3]杨代勤，陈芳，阮国良,黄鳝性转变与体重、年龄的关系2008年12月第5卷第4期
[4]李明锋黄鳝Monopterusalbus（Zuiew）繁殖生物学的研究进展第22卷第5期
2007年5月
[5]周燕侠黄鳝的人工繁殖技术研究，.南京农业大学
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10012—0615（2003）06—0505—08
[7]尹绍武,周工健刘筠黄鳝孵卵泡的生化成分及其生理作用
[8]方建平，彭勇，罗盛章，高海山黄鳝怀卵量的调查和比较分析2000年第20卷第3期
[9]陈丽莉肖亚梅刘筠黄鳝一种新的生殖腺发育状况报道
[10]周秋白，金善勉，吴小波，张燕萍，杨发群，吴华东水深和光照对黄鳝受精卵孵化率的影响
[11]尹绍武周工健刘筠不同生态因子对黄鳝受精卵孵化率的影响应用生态学报2004年4月第15卷第4期
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