微生物实习报告精选Word格式文档下载.docx
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保护剂的作用可能是在冷冻枯燥的脱水过程中代替结合水而稳定细胞成分（细胞膜）的构型，防止细胞膜因为冻结而破坏。
保护剂还可以起支持作用，使微生物疏松地固定在上面。
3.包2根离心管、4根大枪头、2个西林瓶、1根8ml生理盐水、1根保护剂，121℃灭菌20min。
4.把菌种从平板培养物接种至平板培养基〔菌种的活化〕：
〔1〕把接种环放在酒精灯上消毒，消毒时应使接种环完全烧红；
〔2〕待接种环冷却后，用接种环从平板上沾取少许菌苔；
〔3〕然后用接种环在平板培养基上画线；
〔4〕把平板培养基拿去37℃培养24h
5.把菌种从平板培养物接种至液体培养基〔液体接种法〕：
〔1〕用接种环从平板上沾取少许菌苔；
〔2〕在管内靠近液面试管壁上将菌苔轻轻研磨并轻轻振荡，或将接种环在液体内振摇几次；
〔3〕将液体肉汤培养基150r/min摇床37℃培养24h。
接种液体培养物时应特别注意勿使菌液溅在工作台上或其他器皿上，以免造成污染。
如有溅污，可用酒精棉球灼烧灭菌后，再用消毒液擦净。
凡吸过菌液的吸管或滴管，应立即放入盛有消毒液的容器内。
7.拿出液体培养基：
取出5ml菌液放入无菌离心管4000r/min离心20min，倾去上清液，再用5ml无菌生理盐水将菌泥重新悬浮，再次4000r/min离心20min，倾去上清液，用5ml灭菌保护剂将菌泥重新悬浮，之后就可以分装入西林瓶，每瓶1ml（液面高度3～5mm）。
8.预冻：
分装好的菌种管放－80℃预冻2h，同时开启冻干机的制冷机，也可在冻干机的冷阱中预冻菌种。
9.冻干：
当冻干机冷阱温度到达－40℃时，将预冻好的西林瓶放进压盖枯燥架中，
把假盖板放在冷阱上，再将枯燥架放在冷阱上方，罩上压盖有机玻璃罩，罩下端要与“O〞型密封圈完全接触。
顺时针拧紧真空阀，按“真空计〞键，显示真空度为100～110×
103，再按“真空泵〞键，真空泵工作〔真空泵的盖子要翻开〕，15Pa以下为正常，冻干开始。
10.压盖：
24h后，视感物料已完全枯燥，按顺时针方向转动有机玻璃罩上方手柄，使罩中压盖架丝杠转动下移，将瓶盖压入瓶中，实现在真空中压盖。
11.关机：
按逆时针方向翻开真空阀充气，按“真空泵〞键，真空泵停止运转。
取下有机玻璃罩，拿出西林瓶保存。
五、本卷须知
需灭菌的物品应严格灭菌，防止污染杂菌；
2.接种时应该要等接种环完全冷却后再接种；
3.冻干时，西林瓶的盖子一定要放好，即使西林瓶中的空气可以出来形成真空，又能在压盖的时候可以把盖子盖好。
六、实习结果
上图中盖子已经掉了的和西林瓶中还是液体的都是实验失败的，盖子即没掉瓶子中的菌种又是粉末状的为实验成功的。
盖子掉了的：
是因为抽气时，气流流动使瓶子掉下来。
瓶子中还是液体的：
是因为盖子盖的太紧，瓶中的空气抽不出来，水分也没抽出，导致瓶子中的菌种未变成粉末状。
七、实习总结或体会
通过这个实习，掌握了培养基的配制、分装及灭菌方法；
掌握了微生物的接种技术；
掌握了微生物的冷冻枯燥保藏方法。
通过实习将理性知识与感性认识有机地结合，将书本知识用于实验，在实验中更深地理解根底理论，明白了需灭菌的物品应严格灭菌，防止污染杂。
也让我的综合能力与创新意识得到了提高。
二、实习地点：
食品发酵实验室〔化学楼119、123〕、食品学院实习基地
三、实习目的：
1、学习自制酸奶的方法，熟悉从酸奶中别离和纯化乳酸菌的一般方法。
2、掌握各类酸奶生产的'
根本工艺和要求。
3、学习奶酒的发酵过程、工艺流程，及其本卷须知。
4、对自己所学的科学知识进一步深化，提高实践能力，整体筹划部署能力，动手能力，组织能力，团体协作能力，创新能力等方面也有一些提高。
四、实习内容：
为了获得最正确酵母菌发酵结果，我们通过对Internet资源以及图书资料的搜索和查寻，查的产酯酵母广泛应用于白酒、黄酒、普通酒、醋、酱油中，另外，还应用于果汁中。
所以我们准备了三种菌种来源材料：
果皮、酒曲、保藏的酵母斜面。
第一种方法是利用果皮做来源，将削下的果皮放入带玻璃珠的三角瓶充分振摇，梯度稀释，涂布于YPD琼脂培养基上。
第二种方法是用各种酒曲做为菌种来源，将酒曲粉碎，称量，梯度稀释，而后涂布于YPD琼脂培养基上。
第三种方法是利用保藏的酵母斜面作为菌种来源，用接种环在酵母斜面上取一环菌，而后用划线法接种于YPD琼脂平板上，带用于实验。
经过大家的讨论后，一致决定利用酵母斜面上的菌种，对其进行培养。
因为利用酵母斜面上的菌种在此次实习中可以用到我们实验上所学习的知识，真正将知识用于实践，并在实践中得到稳固。
但是，酵母斜面上的酵母菌制得的菌悬液浓度很大，所以在菌种筛选方面，我们将菌悬液10进制稀释到10-5,10-6,10-7的数量级，各浓度涂布两个平板，另六个平板用于划线别离法进行菌种别离，30度培养24到48h，观察平板上的菌落生长情况。
初选出酵母菌，将菌落照片后就进行显微镜观察，筛选到典型的酵母菌株，进行生化实验。
将平板上的酵母单菌落接种保藏于斜面培养基〔PDA〕,30度培养48h后，4度冷藏。
将PDA斜面培养基上保存的酵母菌接种于培养液中培养，而后接种于豆芽汁发酵液中，进行发酵测产脂能力。
11月25日我们按照讨论决定的方案进行了酵母菌的筛选实验，实验内容如下：
2.1培养基的制备、分装、灭菌〔分述在下文中〕
在实习中共需要准备六种培养基：
YPD培养基、PDA培养基、豆芽汁培养基、葡萄糖产酸产气培养基、硝酸盐生化实验培养基、糖发酵实验培养基。
各培养基配方如下：
1、YPD培养基：
1%酵母膏，2%蛋白胨，2%葡萄糖，2%琼脂。
2、PDA培养基：
2%马铃薯，2%葡萄糖，22%琼脂。
秤取切成小块的马铃薯，加水煮烂〔20-30min〕，八层纱布过滤，滤液中参加葡萄糖，最后参加琼脂。
3、豆芽汁培养基：
10%黄豆芽，2%葡萄糖，2%琼脂
洗净豆芽，加水煮沸30min.用纱布过滤。
滤液参加琼脂，加热溶解后放入糖，搅拌使它溶解，补水至设定值。
4、糖产酸产气培养基：
营养物〔0.5%牛肉膏，1%蛋白胨，0.3%氯化
钠，0.2%磷酸氢钠，0.2%溴麝香草酚蓝〕配方为20g/1000ml，蒸馏水配制，pH7.4。
分装后加葡萄糖0.5%。
5、硝酸盐生化实验培养基：
0.3%牛肉浸膏，0.5%-1%蛋白胨，pH7.0〔100ml培养基参加1g硝酸钾〕
6、糖发酵实验培养基：
营养物〔0.5%牛肉膏，1%蛋白胨，0.3%氯化钠，0.2%磷酸氢钠，0.2%溴麝香草酚蓝〕配方为20g/1000ml，蒸馏水配制，pH7.4。
分装后加乳糖0.5%。
制备：
由于第6种培养基同第4种培养基，那么一组配制即可，再加上无菌水，共需制备六种，那么将全班分成六个组，我们为第4组，故配制过程如下：
〔1〕天平调平。
〔2〕准确秤取7.8g营养物〔配390ml〕，葡萄糖、蔗糖、乳糖各0.65g。
〔3〕将营养物放入搪瓷缸中，参加390ml蒸馏水，玻璃棒搅拌将其溶解。
〔4〕pH试纸测其pH是否为7.4，假设不是，用氢氧化钠溶液调到7.4。
分装：
〔1〕取三个250ml锥形瓶，每个锥形瓶中倒入130ml的上述溶液。
〔2〕将上述称好的葡萄糖、蔗糖、乳糖分别倒入三个锥形瓶中，摇晃锥形瓶使其溶解。
〔3〕将参加糖的营养液分别装入12个试管中，每个试管用移液管放入10ml。
〔4〕将每两个葡萄糖、蔗糖、乳糖用牛皮纸扎成一捆，即每6个试管扎成一捆，写上班级、组别后待灭菌。
灭菌：
将已经包扎好的试管放入灭菌箱中，进行灭菌待用。
以上就是我们组的制备过程，在这个过程中应该注意以下几点：
1、称量前天平要调平。
2、秤取营养物时应准确秤取。
4、量取培养液时要准确，特别是向试管中分装时要用移液管。
2.2酵母菌的别离〔详述别离方法，培养条件及观察到的菌落结果〕
步骤过程：
1、倒平板：
待YPD培养基冷却至50度左右后，按无菌操作法倒12只平板〔每皿约倒15ml〕，平置，待凝。
2、酵母菌稀释：
取1mL菌悬液放入装有99ml的无菌水锥形瓶中，摇匀后再从锥形瓶中取1mL放入1号管，依次进行，那么管里酵母的浓度依次是10-2~10-7。
3、平板别离：
依次从10-7，10-6，10-5的管里取稀释液进行涂布平板，YPD平板每个浓度涂两个。
4、划线法别离：
用接种环从酵母斜面上取一环酵母，在酒精灯前按无菌操作法进行划线，将酵母接种于6个平板中。
5、恒温培养：
将12个培养皿平板置于30℃恒温箱中培养24~48小时。
结果：
观察菌落：
出现了4种不同形态的菌落。
①圆形，菌落大，外表光滑，湿润，突起，乳白色。
②圆形，菌落略小，湿润，突起，质地均匀，呈乳白色。
③椭圆形，菌落略小，湿润，突起，颜色均一，呈乳白色。
④椭圆形，菌落大，湿润，突起，颜色均一，呈乳白色。
结果分析：
通过网上查阅资料显示，正常条件下大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似，但比细菌菌落大而厚，菌落外表光滑、湿润、粘稠，容易挑起，菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，菌落多为乳白色，少数为红色，个别为黑色。
啤酒酵母的菌落红酵母的菌落各种酵母菌的菌落。
将我们观察的结果与资料相比，确实符合大多数酵母菌的菌落形态。
结论：
观察到的是酵母菌落。
2.3酵母菌的初步鉴定〔包括革兰氏染色和糖代谢实验〕
观察结果为：
球菌，各个细胞的形状比拟规整。
结论：
通过菌体个体形态和菌落形态，初步确定出了一株酵母菌。
本卷须知：
1、搬动显微镜时应一手握住镜臂，另一手托住底座，镜身保持直立，并紧靠身体，步态稳健。
切记单手拎提，以免目镜头从镜筒上掉出而砸坏。
2、各个镜面切忌用手涂抹，以免手上的油、汗污染镜面，造成发霉、腐蚀。
2.3.2将初步确定的菌株进行生化实验
用接种环从平板上挑取已别离的同一菌落接种于糖发酵管和硝酸盐生化管中，接种完后30℃培养。
24小时后观察结果。
与此同时，将平板上的酵母单菌落接种保藏于斜面培养基〔PDA〕，30度培养48小时后，4度冷藏，待检其他特性。
结果：
验中并没有观察到，但硝酸盐管中变黄，那么分析结果，可能是酵母菌生长不旺盛，导致即使产气也看不出来。
根据这一现象，能够说明该菌株具有产酸产气性能，确定此菌株确实是酵母菌。
3、发酵产酯实验〔11.23-11.24〕
〔1〕准确吸取25ml发酵液于250ml锥形瓶中，参加25ml蒸馏水，滴2滴酚酞指示剂，用0.1mol/L的氢氧化钠滴至微红色，记下消耗氢氧化钠溶液的体积。
〔2〕将滴定后的发酵液转移至250ml锥形瓶中，准确参加15ml上述氢氧化钠标液，接上冷凝管，加热至沸回流30min。
〔3〕取下冷却至室温，完全转移至250ml碘量瓶中立即用0.1mol/L的盐酸溶液滴定至微红色刚好消失，纪录盐酸溶液的用量，记录总酯的含量。
盐酸消耗体积：
V2>
15ml
分析与结论：
氢氧化钠消耗体积1.9ml用来预估总酯含量，且其越大那么总酯越少。
由此可见，产酯量应该不少。
按公式：
总酯=〔15-V2〕X0.1X10-3mol但是我们滴到18ml仍不见结果，并且没有要到微红的迹象。
可能是由于配制实验试剂时出现问题，导致没有测出总酯量。
五、总结
短短一周的微生物实习在紧张又有效率的节奏下顺利的结束了。
这是我们自己在老师协助下并亲自动手连续完成的一些列实验，在其中感受到了很多平时和课上很少遇到的东西，有自主，有探索，有反思，有合作
短暂的实习转眼而过，回忆实习生活，我在实习的过程中，既有收获的喜悦，也有一些遗憾。
喜悦是我们都在老师的指导下自主设计了方案并分工鲜明，合理掌握每一步实验用时及时、准确测量数据，最终都得到了相应的结果。
而遗憾那就是对实验有些方面的认识仅仅停留在外表，只是在看人做，听人讲如何做，未能够亲身感受、具体处理一些工作，所以未能领会其精髓。
但时通过实习，加深了我对实验和微生物根本知识的理解，丰富了我的微生物实验的知识，使我对实验有了深层次的感性和理性认识。
认识到要做好实验，既要注重理论知识的学习，更重要的是要把实践与理论两者紧密相结合。
更进一步体会到了“实践是最好的老师〞的深刻意义。
岁月如梭，光阴似箭，不知不觉在微生物室实习的时间已经结束了，但收获颇丰。
通过积极协助老师完成细菌学方面检验工程的同时，自己的根底操作能力有了很大程度的提高，操作起来熟练了非常多。
而且通过染色在显微镜下能识别的细菌也更多了，像球菌科的葡萄球菌感染、链球菌、淋球菌以及杆菌科的肠杆菌，真菌孢子在显微镜下也能一眼识别；
全片查找结核杆菌的阳性率也提高了。
对什么类型的标本应做什么平板接种，培养温度等也有了进一步的掌握，比方：
痰标本应接种在血平板，巧克力平板，沙保平板而且还要做涂片染色以监测痰标本的合格程度。
血平板和巧克力平板主要观察病人痰标本里的根底菌群的生长状态，沙保主要观察是否有念珠菌生长。
总之在微生物一个月的实习日子里感觉自己受教颇多，通过亲身实践操作把自己在学校学到的理论知识同实践很好的结合了起来，在带教老师的悉心指导下已熟悉掌握了各类标本的接种、细菌培养以及细菌的初步鉴定、细菌的药敏试验等。
姓名：
初旭
班级：
食品12-3班
学号：
120424301
指导教师：
欧阳杰
实习一牛栏山酒厂
一．实习目的
1.了解牛栏山酒厂的历史和酒文化
2.通过参观了解白酒的制作工艺流程
二．实习地点
北京市顺义区牛栏山酒厂
三．相关企业介绍
牛栏山酒厂，中国历史悠久的酿酒厂之一。
依据现保存在顺义档案馆的顺义县志记载，从有详细酿酒历史记载的康熙五十八年〔1719〕年算起，酿酒古镇牛栏山的“酒龄〞已近300年。
据民国20年顺义县志·
实业志载：
“牛栏山镇造酒工作是工者约百余人〔受雇于治内十一家烧锅〕，所酿之酒甘冽异常为北平特产，销售邻县或平市，颇脍炙人口，而尤以牛栏山之酒为最著〞。
牛栏山酒厂自1952年在“公利号〞、“富顺成〞、“魁胜号〞、“义信号〞四家老烧锅的根底上成立建厂，现已开展成为国有大型企业，总资产达5.1亿元，是北京市年产白酒5万吨以上的生产厂家之一。
企业现有干部职工1500余人，主要生产以“牛栏山〞牌二锅头等共计170余种酒类产品，产品深受消费者青眯。
四．牛栏山二锅头根本概述
牛栏山二锅头，二锅头之宗。
二锅头作为京酒的代表，已有八百多年的历史。
京师酿酒师蒸酒时，去第一锅“酒头〞，弃第三锅“酒尾〞，“掐头去尾取中段〞，唯取第二锅之贵酿。
牛栏山二锅头，宗气一脉相传，于20xx年9月4日荣获“国家二锅头原产地认证〞。
二锅头酒选用高粱为主要原料，还是以麸曲和酵母为糖化发酵剂，采用传统的“老五甑〞工艺，经原料清蒸、辅料清蒸，低温入池，适当发醇，火蒸馏，掐头去尾，贮陈精酿而成。
由于二锅头酒的酒液清亮透明，香气芬芳，酒质醇厚，入口甘润、爽洌，酒力强劲，后劲绵长，回味悠长，因此备受广阔消费者的认可，二锅头品牌家族也日渐丰富。
牛栏山二锅头的发酵，仍沿用古老的“地缸〞发酵法，恪守传统的“清蒸清烧〞酿造工艺。
从润料、糊化到入池发酵，十多道传统工艺，下足精致工夫。
充分保证，地道二锅头之清、香、爽、净。
五．生产原料和设备
主料：
高粱〔东北高粱〕、玉米、大麦、水〔深层地下水〕
辅料：
豌豆、酒曲
设备：
主要有发酵设备、酿造设备、蒸馏设备、灌装设备等。
六．生产工艺和流程
采用续碴清香型曲酒生产工艺。
所谓续碴法是将米碴子（指粉碎后的生原科）蒸料后,取出酒醅（又称母糟,指已发酵的固态醅,将米碴子和酒醅混合后,在甑桶内同时进行蒸酒和蒸料（这种操作称混烧）,然后加曲继续发酵,如此反复进行。
由于生产过程一直在参加新料及曲,故称续碴发酵法。
其具体工艺流程如下：
工艺流程图
采用的是固态发酵法：
其工艺特点是全部酿酒过程的物料流转都在固体状态下进行，发酵容器主要采用地缸、窖池、大木桶等发酵设备，多采用甑桶蒸馏。
固态发酵的酒质较好。
3.过程控制
①对原料的控制:
高粱是二锅头的主要生产原料,酒厂择优于我国高粱主产区的东北地区,专门建立了优质原料供给基地,并对原料采取严格收购、屡次检测、达标入库、出库在检测等控制方法，保证所有原料均达工艺要求标准。
②对水源控制：
酿造二锅头使用的是地下三百米处的优质地下水。
按工艺要求。
酒厂定期对水质进行化验和检测，进行反渗透处理。
使水质到达国家生活饮用水标准，在此根底上，水中的一些无机盐以及电导率等指标也要到达酿酒的要求，才能成为合格的酿酒
用水。
③对勾调工艺的质量控制：
目前酒厂盛原酒的容器是陶坛和不锈钢桶，有效地保证了原酒的长期存放；
其勾调用水需经反渗透处理，以保证牛栏山二锅头酒的封为特点和优良品质。
七．实地参观照片
包装生产线陈年窖藏
发酵车间传统蒸馏工具——“天锅〞
八．实习思考题
1.二锅头主要是什么香型？
答：
清香型
2.酒的起源有哪几种有意思的传说？
仪狄造酒说
○相传夏禹时期的仪狄创造了酿酒。
史籍中有多处提到仪狄“作酒而美〞、“始作酒醪〞的记载，似乎仪狄乃制酒之始祖。
公元前二世纪史书吕氏春秋云：
仪狄作酒。
汉代战国策那么进一步说明：
昔者，帝女令仪狄作酒而美，进之禹，禹饮而甘之，日：
‘后世必有饮酒而之国者。
'
遂疏仪狄而绝旨酒〔禹乃夏朝帝王〕。
[4]2杜康造酒：
关于杜康造酒，历史文献多有记载，如世本云：
“杜康作酒。
少康作○
秫酒。
〞张华博物志云：
〞顾野王玉篇云：
“酒，杜康所作。
〞李瀚蒙求云：
“杜康造酒，仓颉制字。
〞朱肱酒经云：
“酒之作尚矣。
仪狄作酒醪，杜
康作秫酒。
岂以善酿得名，盖抑始于此耶？
〞类书纂要云：
“仪狄作。
杜康造。
〞3猿猴造酒：
○当猿猴采集的花果及谷物，食后剩余而残留或者散落在石岩中，日久由于微生物侵入，遂自然发酵成酒。
3.牛栏山二锅头酒蒸馏时“掐头去尾〞的道理？
蒸酒时，需将蒸馏而得的酒汽，经第一次放入锡锅内的凉水冷却而流出的“酒头〞和经第三次换入锡锅里的凉水冷却而流出的“酒尾〞提出做其它处理，因为第一锅和第三锅冷却的酒含有多种低沸点的物质成分，味道较杂，所以酒厂只摘取味道醇厚的经第二次换入锡锅里的凉水冷却而流出的酒，故起名为“二锅头〞。
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